TK基因联合mIL-2基因治疗胃癌的实验研究

目的通过转基因方法观察自杀基因 TK 对小鼠胃癌的杀伤作用,并联合 mIL-2基因,观察免疫反应在增强 TK 杀伤性中的作用.方法应用逆转录病毒方法转导自杀基因 TK,应用脂质体方法转导细胞因子基因 mIL-2.通过体外实验观察 TK 基因对小鼠胃癌 MFC 细胞的杀伤性和旁观者效应;体内实验中首先在615小鼠建立胃癌模型,然后分组将病毒上清注入瘤体内,并结合应用前药和 mIL-2基因,分别观察它们对肿瘤的杀伤作用.通过病理切片观察组织病理变化;应用免疫组化方法观察 T 淋巴细胞亚群在局部的聚集情况.结果 TK 基因在体外即显出明显的杀伤作用,20%的转基因细胞可以杀伤70%～80%以上的肿瘤细胞.体内实验表明 TK基因结合前药 GCV 可显著杀伤肿瘤,而 TK 基因本身并无杀伤作用(P=0.046).联合 mIL-2后抗肿瘤作用进一步加强,部分肿瘤完全消退(P=0.005).免疫组化显示 CD_4^+,CD_8^+细胞在局部聚集.结论自杀基因 TK 联合前药 GCV 对小鼠胃癌产生显著杀伤作用,不仅转基因细胞被杀死,而且通过旁观者效应杀伤大量周围细胞.细胞因子基因 mIL-2可增强 TK 的抗肿瘤作用.

CD基因联合mIL-2/mGM-CSF基因治疗胃癌的研究

目的 :观察CD基因联合mIL 2 /mGM CSF基因对小鼠胃癌的治疗作用。方法 :CD基因构建于逆转录病毒载体pLxSN ,mIL 2和mGM CSF基因构建于pIRES。先用CD/ 5 FC治疗胃癌细胞株 ,然后联合mIL 2 /mGM CSF两种细胞因子基因治疗小鼠模型胃癌 ,以期产生显著的抗肿瘤作用。RT PCR检测基因表达。结果 :体外结果显示 2 0 %的转基因细胞即可杀灭70 %～ 80 %的肿瘤细胞。动物实验结果表明 ,应用CD/ 5 Fc ,即可产生很强的抗肿瘤作用。结合mIL 2 /mGM CSF两种细胞因子基因 ,抗肿瘤作用会得到进一步强化 ,肿瘤消退速度明显加快 ,大部分肿瘤完全消退。RT PCR结果显示 ,CD基因和mIL 2 ,mGM CSF基因均能在组织中表达。结论 :CD/ 5 Fc能够杀灭肿瘤细胞 ,具有显著抗肿瘤作用。联合IL 2 /GM CSF后 ,抗肿瘤作用会得到进一步强化 ,产生明显的抗肿瘤效应。应用病毒和脂质体方法转染自杀基因和细胞因子基因 。

微囊化转mIL-12基因CHO细胞皮下移植及联合5-FU对荷瘤小鼠的治疗作用

目的 观察微囊化CHO/pcDNA3.1/mIL 12细胞皮下移植及联合 5 FU对荷瘤小鼠的治疗作用。方法 将微囊化的CHO/pcDNA3 1/mIL 12细胞移植到荷瘤小鼠的皮下 ,观察肿瘤的生长速度、荷瘤小鼠的生存期 ,2 0d后 ,检测小鼠血清Th1和Th2类细胞因子IFN γ、IL 2、IL 12和IL 4、IL 10的水平及NK细胞和CTL细胞的活性。结果 经微囊化CHO/pcDNA3 1/mIL 12细胞皮下移植干预治疗后 ,小鼠血清Th1细胞因子水平明显升高 ,NK细胞和CTL细胞的活性明显增强 ,而Th2类细胞因子则明显降低 ;小鼠肿瘤的生长速度明显减慢 ,生存期明显延长 ;同时可部分改善化疗引起的免疫抑制作用。结论 微囊化的CHO/pcDNA3 1/mIL 12细胞皮下移植可以明显改善荷瘤小鼠的细胞免疫功能 ,部分减轻化疗引起的免疫抑制作用 ,对减慢肿瘤的生长速度和延长荷瘤小鼠的生存期均有明显的效果。