红细胞增多症SOCS3 mRNA的表达情况及其与JAK2 V617F点突变的相关性研究

目的研究真性红细胞增多症(PV)细胞因子信号传导抑制蛋白(SOCS3)mRNA的表达情况及其与JAK2 V617F点突变的相关性。方法选取2017年3月至2019年2月间衡水市人民医院收治的PV患者192例作为观察组,根据JAK2 V617F点突变情况将其分为突变阳性组(130例)和突变阴性组(62例),选择同期健康体检者90名作为对照组。比较三组血清SOCS3 mRNA表达水平,并计算SOCS3 mRNA诊断PV患者JAK2 V617F点突变的敏感度、特异度、阳性预测值、阴性预测值及准确度,同时采用单因素和多因素Logistic回归分析PV患者JAK2 V617F点突变的影响因素。结果三组SOCS3 mRNA表达水平:突变阳性组>突变阴性组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05);SOCS3 mRNA诊断PV患者JAK2 V617F点突变的敏感度为91.76%,特异度为92.00%,准确度为92.86%,阳性预测值为90.22%,阴性预测值为93.15%;单因素分析结果显示,JAK2 V617F突变阳性组与突变阴性组的性别、年龄、WBC、Hb、红细胞压积、PLT、SOCS3mRNA比较差异均有统计学意义(P<0.05);Logistic多因素回归分析结果显示,SOCS3 mRNA>0.25 nmol/L、Hb>170 g/L、红细胞压积>55%、PLT>420×109/L均为影响PV患者JAK2 V617F点突变的独立危险因素(P<0.05)。结论PV患者JAK2 V617F点突变受多种因素影响,SOCS3 mRNA表达水平增高为其独立危险因素,SOCS3 mRNA表达水平可为临床早期诊断PV患者JAK2 V617F点突变提供指导方向。

中药降脂颗粒对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏瘦素受体mRNA及P-JAK2/P-STAT3的影响

目的:观察降脂颗粒对非酒精性脂肪肝大鼠的治疗作用及其对血清瘦素、肝组织瘦素受体mRNA、P-JAK2/P-STAT3蛋白含量表达的影响.方法:将60只SD♂大鼠,随机分为空白组(正常饮食)和造模组(高脂饮食).待造模成功后将造模组大鼠随机分为模型对照组、降脂颗粒低、中、高剂量组和东宝甘泰组.治疗4 wk后行肝组织生化和病理学检测,并同时应用ELISA试剂盒检测血清瘦素,RT-PCR法检测肝组织瘦素受体mRNA表达,应用Western blot检测肝组织P-JAK2和P-STAT3蛋白的表达.结果:低、中、高剂量组降脂颗粒能明显降低非酒精性脂肪肝大鼠模型肝脂(TG和TC)水平,改善脂肪变性,降低肝脏炎症反应,并能明显降低血清瘦素高水平状态(193.02±23.8ng/ L,163.97±31.38ng/L,147.83±17.59ng/L vs 317.22±39.26ng/L,P<0.01),改善瘦素抵抗,同时增加瘦素受体mRNA的表达(1.87±0.06,2.20±0.04,2.78±0.04 vs 1.50±0.05,P<0.01),增加肝组织P-JAK2和P-STAT3蛋白的含量(119.88±2.98,123.45±0.68,124.34±3.42 vs 113.15±1.27,P<0.01;94.15±0.78,100.18±3.33,101.94±2.20 vs 89.06±0.69,P<0.01).结论:降脂颗粒对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏脂质和炎症有较好的治疗作用,其可能机制是改善瘦素抵抗,增加肝脏瘦素受体mRNA表达及P-JAK2,P-STAT3蛋白含量.

EGCG抑制Nicotine诱导肺腺癌H1299细胞JAK2/STAT3 mRNA的表达研究

为探索EGCG对Nicotine诱导肺癌细胞增殖的抑制作用,本研究通过MTT实验筛选出EGCG、Nicotine对肺腺癌细胞H1299的最佳作用浓度,利用实时荧光定量PCR技术检测EGCG、Nicotine对H1299细胞中Bax、Bcl-2、Jak2和Stat3基因mRNA相对表达量的变化。实验结果表明,EGCG对H1299细胞的半抑制浓度IC50值约为32μmol·L-1(24 h)、15μmol·L-1(48 h);1μmol·L-1的Nicotine对H1299细胞促增殖作用明显;以15μmol·L-1的EGCG预处理H1299细胞24 h可显著下调1μmol·L-1 Nicotine的促增殖作用(P<0.05)。1μmol·L-1的Nicotine处理H1299细胞可明显降低JAK2/STAT3信号通路中Bax基因mRNA的表达,增加Bcl-2、Jak2、Stat3基因的mRNA表达;15μmol·L-1 EGCG预处理H1299细胞可反向调控Nicotine诱导所致JAK2/STAT3信号通路中Jak2、Stat3和Bax、Bcl-2基因表达量的变化,结果具有显著性差异(P<0.05)。由此可知,EGCG对Nicotine诱导的肺腺癌H1299细胞增殖及JAK2/STAT3信号通路中促增殖基因mRNA的表达起抑制作用。

祛风活血丸对实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠JAK2 mRNA和STAT3 mRNA表达的影响

目的观察祛风活血丸对实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠视网膜JAK2及STAT3 mRNA表达的影响。方法将80只(160眼)雄性Lewis大鼠根据随机数字表法随机抽取16只作为空白组(A),对其余64只大鼠进行实验性自身免疫性葡萄膜炎模型制作。造模成功后,根据随机数字表法将其随机分为模型组(B)、祛风活血丸常规剂量组(C)、祛风活血丸两倍剂量组(D)、熊胆开明片组(E)。干预14 d后用q PCR法检测大鼠视网膜组织中JAK2 mRNA和STAT3 mRNA的相对表达量。结果JAK2 mRNA:与B组比较,C组、E组表达降低,差异具有统计学意义(P<0.05),D组表达显著降低,差异具有统计学意义(P<0.01);STAT3 mRNA:与B组比较,C、D、E组表达均降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论祛风活血丸能降低实验性自身免疫性葡萄膜炎大鼠JAK2、STAT3 mRNA的表达,抑制JAK2/STAT3信号通路,达到抗炎作用。

绞股蓝皂苷对慢性高眼压SD大鼠模型中视网膜STAT3和JAK2 mRNA表达的影响

目的:观察绞股蓝皂苷对慢性SD大鼠高眼压模型中视网膜STAT3和JAK2mRNA表达的影响。方法:在60只大鼠中随机抽取10只作为空白组,余下50只大鼠建立为慢性高眼压模型。造模成功后的50只大鼠均给与噻马洛尔滴眼液降眼压治疗,并随机分为5组,分别为阴性对照组:予以生理盐水灌胃;低剂量组:绞股蓝皂苷25mg/(kg·d)灌胃;中剂量组:绞股蓝皂苷50mg/(kg·d)灌胃;高剂量组:绞股蓝皂苷100mg/(kg·d)灌胃;阳性对照组:维生素B1和维生素B12灌胃治疗,每组各10只大鼠。造模后的第1天至第14天(D1-D14),对大鼠术眼进行跟踪观察。灌胃至第14天并将大鼠处死,进行实时PCR含量测定。结果:qPCR结果显示,空白组、绞股蓝各治疗组和阳性对照组STAT3mRNA和JAK2mRNA的相对表达量明显低于阴性对照组(P<0.05),高剂量组低于中剂量组(P<0.05)。结论:绞股蓝皂甙可以抑制STAT3mRNA和JAK2mRNA的表达,对慢性高眼压大鼠视网膜神经节细胞有一定保护作用。

少突胶质细胞对PC12细胞JAK2基因表达的影响及其意义

目的 探讨少突胶质细胞对PC1 2细胞JAK2基因表达的影响及其意义。方法 用分离培养的少突胶质细胞及其细胞碎片分别作用于培养的PC1 2细胞 ,于不同作用时相点在观察PC1 2细胞突起变化的同时检测PC1 2细胞内JAK2mRNA的表达及JAK2蛋白的磷酸化。结果 在给予少突胶质细胞及其细胞碎片处理后 1 0min ,JAK2mRNA表达较对照组有显著增高 (P <0 .0 5) ,但处理 1 2h后 ,其表达虽较处理 1 0min及 4h有显著下降 ,但仍显著高于对照组 (P <0 .0 5)。对照组JAK2蛋白的活性较低 ,但少突胶质细胞及其细胞碎片加入后 ,JAK2蛋白很快便被磷酸化而激活 ,到处理后 1 2h ,激活的蛋白虽较处理 1 0min有显著下降 ,但仍显著高于正常对照组 (P <0 .0 5)。少突胶质细胞及其细胞碎片对其影响差别不显著 (P >0 .0 5)。结论 少突胶质细胞作用于PC1 2细胞时可调节PC1 2细胞JAK2的表达与激活 ,这种表达与激活在一定程度上可能介导少突胶质细胞对PC1 2细胞突起生长的影响。

电针对慢性脑低灌注大鼠认知功能及海马JAK2、STAT3 mRNA表达的影响

目的 探讨电针对慢性脑低灌注（CCH）大鼠认知功能及海马JAK2、STAT3 mRNA表达水平的影响。 方法 选取清洁级健康雄性SD大鼠40只，分为假手术组10只、手术组30只，手术组采用双侧颈总动脉结扎法制作CCH模型，再随机分为模型组、电针1周组、电针4周组3个亚组，各亚组均为10只。电针4周组采用2/100 Hz疏密波电针连续干预4周，电针1周组仅在评定前最后1周采用电针干预。采用Morris水迷宫系统评定各组大鼠的认知功能，采用逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）检测JAK2 mRNA、STAT3 mRNA的表达水平。 结果 与假手术组比较，手术组BCCAO术后局灶性脑血流水平显著下降，且低于组内手术前（P〈0.05）。与模型组比较，电针4周组第3天开始，逃避潜伏期改善，差异有统计学意义（P〈0.05），电针1周组第5天逃避潜伏期显著改善，差异有统计学意义（P〈0.05），电针4周组目标象限停留时间明显延长，差异有统计学意义（P〈0.05），电针1周组、电针4周组JAK2/STAT3 mRNA表达水平均下降，电针4周组明显下降，差异有统计学意义（P〈0.05）。与电针1周组比较，电针4周组第5天逃避潜伏期改善（P〈0.05），目标象限停留时间延长（P〈0.05），JAK2 mRNA下降更明显（P〈0.05）。 结论 电针能改善CCH大鼠的认知功能，早期干预作用更显著，其机制可能是通过抑制脑低灌注后JAK2/STAT3通路的过度活化，进而减轻脑损伤。