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利用生物信息学对缺血性脑卒中相关microRNA和mRNA的分析筛选与qRT-PCR验证
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作者 夏明燕 谢鹏 +3 位作者 任真奎 朱晓西 吴昌学 禹文峰 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第10期1417-1427,共11页
目的利用生物信息学分析筛选与缺血性脑卒中(IS)相关的microRNA(miRNA)和mRNA,通过实验鉴定关键基因、利用Cytoscape构建miRNA-mRNA相互作用网络,探讨其在IS中的作用及其主要调控的相关信号通路。方法从基因表达数据库(GEO)中下载微阵... 目的利用生物信息学分析筛选与缺血性脑卒中(IS)相关的microRNA(miRNA)和mRNA,通过实验鉴定关键基因、利用Cytoscape构建miRNA-mRNA相互作用网络,探讨其在IS中的作用及其主要调控的相关信号通路。方法从基因表达数据库(GEO)中下载微阵列数据集GSE58294(mRNA谱)、GSE16561(mRNA谱)和GSE43618(miRNA谱),对GEO2R鉴定差异基因和mRNA、DAVID数据库筛选得到的差异表达基因(DEGs)进行功能及通路富集分析,通过STRING构建差异基因的蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络、MCODE插件从PPI中提取相互作用最密切的网络和关键基因,通过TargetScan预测差异表达miRNA(DEMs)的靶基因;利用氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)细胞模型、实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证筛选得到的关键基因,利用蛋白免疫印迹(WB)检测铁死亡标志蛋白SLC2A3及GPX4的蛋白表达水平。结果共筛选到198个DEGs,基因本体(GO)及京都基因与基因组百科全书(KEGG)结果显示,198个基因主要参与Toll样受体信号通路、肌动蛋白细胞骨架调控及细胞凋亡;从PPI网络中鉴定出12个关键基因(CEACAM1、CKAP4、ITGAM、STOM、SLC2A3、ADAM8、DEGS3、MOSPD2、FPR2、MCEMP1、CLEC4D及ADGRG3)和26个DEMs;根据miRNA和mRNA的靶向关系构建miRNA-mRNA作用网络对12个关键基因进行了验证,除MCEMP1外,其余11个关键基因都随再灌注时间延长而上调;利用生物信息学分析人外周血样本发现,SLC2A3与GPX4呈负相关;WB结果显示,当SLC2A3表达上调时、GPX4表达下调(P<0.05)。结论IS发生后DGEs和DEMs表达上调,本研究共筛选到198个DEGs,确定了12个关键DEGs和26个DEMs,构建了12个miRNA-mRNA调控网络,这些基因可能是IS的发病的潜在调控机制,在炎症过程的发生中起着重要作用。 展开更多
关键词 微小RNA 蛋白质-蛋白质相互作用网络 生物信息学分析 氧糖剥夺/再灌注 缺血性中风
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越冬初期和中期西方蜜蜂四个亚种的miRNA及其靶mRNA的比较分析
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作者 蒋海宾 杜亚丽 +8 位作者 冀全枝 何金明 孙智禹 吴鹰 王志 兰凤明 牛庆生 刘玉玲 徐凯 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期622-633,共12页
【目的】明确西方蜜蜂Apis mellifera微小RNA(microRNA,miRNA)在越冬期间的表达量变化,揭示miRNA及其靶mRNA与抗寒性的潜在关系,在miRNA组学层面进一步揭示西方蜜蜂抗寒性的分子机理。【方法】利用sRNA-seq技术鉴定西方蜜蜂4个亚种意大... 【目的】明确西方蜜蜂Apis mellifera微小RNA(microRNA,miRNA)在越冬期间的表达量变化,揭示miRNA及其靶mRNA与抗寒性的潜在关系,在miRNA组学层面进一步揭示西方蜜蜂抗寒性的分子机理。【方法】利用sRNA-seq技术鉴定西方蜜蜂4个亚种意大利蜜蜂A.m.ligustica、欧洲黑蜂A.m.mellifera、高加索蜂A.m.caucasica和卡尼鄂拉蜂A.m.carnica在越冬期初期和越冬中期的miRNA;根据P≤0.05且|log 2fold change|≥1标准筛选4个亚种在越冬不同时期的差异表达miRNA(differentially expressed miRNAs,DEmiRNAs)。利用相关生物信息学软件对筛选出的miRNA的靶mRNA进行预测,并对靶mRNA进行GO及KEGG数据库注释。根据靶向结合关系构建DEmiRNA和靶mRNA的调控网络,并利用Cytoscape进行可视化。随机选取ame-miR-263a-5p,ame-miR-184-3p,ame-miR-263b-5p,ame-miR-190-5p,ame-miR-6052-5p,ame-miR-9a-5p,ame-miR-100-5p和ame-miR-306-5p等8个DEmiRNA进行RT-qPCR验证。【结果】鉴定获得越冬期西方蜜蜂4个亚种210个miRNA,包括178个保守的miRNA和32个新的miRNA,长度介于18~30 nt,分布数量最多的长度为22和23 nt,首位碱基为U的miRNA数量最多。西方蜜蜂4个亚种在越冬初期和越冬中期表达量最高的DEmiRNAs为ame-miR-1-3p,ame-miR-276-3p和ame-miR-184-3p。意大利蜜蜂越冬初期vs越冬中期共筛选出22个DEmiRNA,可靶向调控394条mRNA,这些mRNA分别注释到161个GO功能条目和16条KEGG通路上;欧洲黑蜂越冬初期vs越冬中期共筛选出28个DEmiRNA,可靶向调控415条mRNA,这些mRNA分别注释到147个GO功能条目和15条KEGG通路上;高加索蜂越冬初期vs越冬中期共筛选67个DEmiRNA,可靶向调控1021条mRNA,这些mRNA分别注释到171个GO功能条目和21条KEGG通路上;卡尼鄂拉蜂越冬初期vs越冬中期共筛选18个DEmiRNA,可靶向调控330条mRNA,这些mRNA分别注释到147个GO功能条目和13条KEGG通路上。西方蜜蜂4个亚种DEmiRNA与靶mRNA之间形成较为复杂的调控网络。RT-qPCR结果显示8个DEmiRNA的表达趋势与测序数据一致,证实了本研究中测序数据的可靠性。【结论】本研究明确西方蜜蜂4个亚种越冬不同时期的miRNA表达量变化,筛选出多个潜在调控西方蜜蜂越冬期抗寒性的分子候选靶标miRNA,其中ame-miR-14-3p和ame-miR-3786-5p在欧洲黑蜂、高加索蜂和卡尼鄂拉蜂中负调控多个mRNA的表达,在意大利蜜蜂中并没有参与;miRNA通过调控靶基因的表达参与甘油磷酸脂代谢、MAPK信号通路和mTOR等关键信号通路参与西方蜜蜂的抗寒性。 展开更多
关键词 西方蜜蜂 微小RNA 靶基因 越冬 抗寒 调控网络
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红景天苷通过miRNA-mRNA信号轴抑制肿瘤的机制
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作者 吴枭雄 张振东 王小平 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期810-817,共8页
随着中医药的快速发展和红景天苷(salidroside,sal)的多种抗癌效应不断被发现,已经sal可通过诱导细胞凋亡和自噬,调节细胞周期和肿瘤微环境,调控癌症相关信号通路及信号分子等来抑制肿瘤增殖、侵袭和迁移。微RNA(microRNA,miRNA)-mRNA... 随着中医药的快速发展和红景天苷(salidroside,sal)的多种抗癌效应不断被发现,已经sal可通过诱导细胞凋亡和自噬,调节细胞周期和肿瘤微环境,调控癌症相关信号通路及信号分子等来抑制肿瘤增殖、侵袭和迁移。微RNA(microRNA,miRNA)-mRNA信号轴也可通过改变miRNA的表达来调控靶m RNA的表达,从而影响癌细胞的生长周期、增殖、代谢等。研究表明sal可以通过调控miRNA-mRNA信号轴影响多种恶性肿瘤的发生和发展,如抑制肺癌、胃癌和鼻咽癌等的进展,且sal抑癌时具有明显的时间及剂量依赖性。总结近年来sal调控miRNA-mRNA信号轴抑制肿瘤的具体机制,可为肿瘤的防治研究提供新的理论依据、诊断和治疗思路。 展开更多
关键词 肿瘤 红景天苷 微RNA mrna 信号通路
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精神分裂症患者外周血中mRNA/miRNA网络综合分析
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作者 祁冬冬 马世发 +1 位作者 李小龙 王克刚 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第15期1867-1873,共7页
目的探索精神分裂症患者外周血中mRNA/微小核糖核酸(miRNA)网络综合分析。方法纳入2022年12月至2023年2月就诊于该院的精神分裂患者6例作为实验组,志愿者4例作为对照组。收集两组人群血液样本,采用RNA-seq技术检测mRNA及miRNA的表达水... 目的探索精神分裂症患者外周血中mRNA/微小核糖核酸(miRNA)网络综合分析。方法纳入2022年12月至2023年2月就诊于该院的精神分裂患者6例作为实验组,志愿者4例作为对照组。收集两组人群血液样本,采用RNA-seq技术检测mRNA及miRNA的表达水平。最后利用基因表达综合数据库中GSE145554基因集进行生物信息学验证分析。结果与对照组相比,实验组中共分析出差异mRNA 2133个,其中包括上调mRNA 1410个,下调mRNA 723个;差异miRNA 150个,其中包括上调miRNA 72个,下调miRNA 78个。京都基因与基因组百科全书和基因本体论富集的生物学过程和信号途径主要包括哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)-丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路、坏死性凋亡及内质网中的蛋白质加工信号通路等。结论PI3K-AKT、mTOR、坏死性凋亡及内质网中的蛋白质加工信号通路参与精神分裂的发生发展过程,为阐明精神分裂症的预防、诊断及治疗提供新的研究方向。 展开更多
关键词 精神分裂症 mrna/微小核糖核酸网络 生物信息学
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Computational Analysis Reveals MicroRNA-mRNA Regulatory Network in Esophageal Squamous Cell Carcinoma
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作者 Jie ZHAO Bi-cheng ZHANG +3 位作者 Li-fang YU Wei-xing WANG Yong ZHAO Zhi-guo RAO 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2016年第6期834-838,共5页
Micro RNAs(mi RNAs) are known to regulate post-transcriptional gene expression.They are involved in carcinogenesis and tumor progression.The aim of this study was to explore the micro RNA-m RNA regulatory network in... Micro RNAs(mi RNAs) are known to regulate post-transcriptional gene expression.They are involved in carcinogenesis and tumor progression.The aim of this study was to explore the micro RNA-m RNA regulatory network in esophageal squamous cell carcinoma(ESCC) using comprehensive computational approaches.In this study we have selected a total of 11 mi RNAs from one previously reported study in ESCC.The m RNA targets of these mi RNAs were predicted using various algorithms.The expression profiles of these m RNA targets were identified on DNA microarray experiment dataset across ESCC tissue samples.Based on the mi RNA-m RNA regulatory relationships,the network was inferred.A total of 23 mi RNA-m RNA regulatory interactions,with 11 mi RNAs and 13 m RNA targets,were inferred in ESCC.The mi RNA-m RNA regulatory network with increased confidence provides insights into the progression of ESCC and may serve as a biomarker for prognosis or the aggressiveness of ESCC.However,the results should be examined with further experimental validation. 展开更多
关键词 microrna DNA microarray esophageal squamous cell carcinoma miRNA-mrna regulation
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基于microRNAs差异分析和网络药理学探讨益母草治疗宫腔粘连相关机制
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作者 接智慧 周岩 +3 位作者 吴建磊 吴慧丽 李萍 高翔 《山东第一医科大学(山东省医学科学院)学报》 CAS 2024年第4期198-203,共6页
目的通过microRNAs差异分析、网络药理学及分子对接技术,探讨益母草治疗宫腔粘连(intrauterine adhesion,IUA)的潜在作用靶点及相关机制。方法基于GEO(gene expression omnibus)数据库筛选IUA与健康者的差异miRNA,经multiMiR进行靶基因... 目的通过microRNAs差异分析、网络药理学及分子对接技术,探讨益母草治疗宫腔粘连(intrauterine adhesion,IUA)的潜在作用靶点及相关机制。方法基于GEO(gene expression omnibus)数据库筛选IUA与健康者的差异miRNA,经multiMiR进行靶基因预测。通过TCMSP(traditional Chinese medicine systems pharmacology)数据库检索益母草有效活性成分及相关靶点,并与miRNA靶基因取交集。利用String平台进行蛋白质互作分析,利用cytoNCA筛选关键靶点。基于R语言进行基因本体(gene ontology,GO)和基因组百科全书(kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)富集分析。利用CB-dock2对关键靶点和活性成分进行分子对接。结果共筛选出与IUA相关的差异miRNA 43个,经靶基因预测后与IUA共有13个交集靶点,GO及KEGG富集分析结果显示,益母草治疗IUA作用机制主要与细胞衰老、丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路、PI3K-Akt信号通路等有关。益母草3个特征性活性成分是花生四烯酸、山奈酚、槲皮素,可与蛋白互作网络中相对应的靶点蛋白细胞周期蛋白依赖性激酶4(cyclin-dependent kinase 4,CDK4)、芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AHR)、原癌基因c-myc编码转录因子、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)进行分子对接,主要活性成分能够与核心靶点结合,并展现出较好的亲和力。结论益母草治疗IUA是多成分、多靶点、多通路相互作用的结果,进一步证实了益母草治疗IUA的科学性及有效性,为后续实验提供了研究思路。 展开更多
关键词 益母草 宫腔粘连 microrna 网络药理学 分子拼接
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携带microRNA-383重组慢病毒的包装及其上调PBMCs中Foxp3mRNA的表达 被引量:4
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作者 周峰 张庆 +3 位作者 张海清 刘晓梅 史震 郑葵阳 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期845-849,共5页
目的包装携带microRNA-383(miR-383)的重组慢病毒,并观察其对正常人外周血单个核细胞(peripheral bloodmononuclear cells,PBMCs)中Foxp3 mRNA转录的影响。方法将4个串联的miRNA-383前体序列亚克隆入慢病毒转移载体pHAGE-CMV-MCS-IZsGre... 目的包装携带microRNA-383(miR-383)的重组慢病毒,并观察其对正常人外周血单个核细胞(peripheral bloodmononuclear cells,PBMCs)中Foxp3 mRNA转录的影响。方法将4个串联的miRNA-383前体序列亚克隆入慢病毒转移载体pHAGE-CMV-MCS-IZsGreen,构建重组载体,命名为pHAGE-miR-383。将pHAGE-383、包装质粒psPAX2与包膜质粒pMD2.G共转染入HEK 293T细胞进行重组慢病毒包装。进而分别采用定量PCR和RT-PCR检测慢病毒miR-383和Mock感染48 h后细胞中的miR-383的表达和转录因子Foxp3 mRNA的转录水平。结果定量PCR证实携带miR-383的重组慢病毒包装成功,滴度为1×107 TU/ml。以MOI为5的慢病毒感染HEK 293T细胞后miR-383表达明显增多。RT-PCR结果显示,miR-383能够上调PBMCs中Foxp3 mRNA的表达。结论成功包装出含有miR-383前体序列的重组慢病毒,而且慢病毒miR-383能够上调PBMCs中Foxp3 mRNA的转录水平,为进一步研究其对调节性T细胞的调控作用奠定基础。 展开更多
关键词 慢病毒 microrna-383 PBMCS Foxp3mrna
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基于microRNA-mRNA配对表达谱进行联合分析的方法学进展 被引量:1
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作者 赵路阳 张康 +4 位作者 顾成磊 叶明侠 范文生 韩为东 孟元光 《生物技术通讯》 CAS 2017年第4期545-550,共6页
microRNA(miRNA)是一类内源性非编码小RNA,主要通过降解靶基因或抑制靶基因的翻译而调控表达。由于其作用机制复杂,目前尚未发现高效而低成本的靶标定位方法。近年来,基于碱基互补配对原理的计算机预测法被广为应用,但此方法假阳性高,... microRNA(miRNA)是一类内源性非编码小RNA,主要通过降解靶基因或抑制靶基因的翻译而调控表达。由于其作用机制复杂,目前尚未发现高效而低成本的靶标定位方法。近年来,基于碱基互补配对原理的计算机预测法被广为应用,但此方法假阳性高,不同算法所得结果差异大,会误导和干扰下游的功能学实验。因此,有研究者提出结合样本配对mRNA表达量来进一步定位靶基因,明确miRNA-mRNA相互作用方式,这种联合分析的方法受到了普遍认可。本文回顾了近年来基于miRNA-mRNA配对表达谱进行联合分析的方法学进展,并简要分析各类方法的应用范围和优缺点,为后续研究者选择方法提供参考。 展开更多
关键词 microrna microrna靶标预测 micrornamrna相互作用 联合分析
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BRCA1mRNA与MicroRNA-146a在非小细胞肺癌中的表达及临床意义 被引量:3
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作者 卞光亮 张茜 蒋华 《贵州医药》 CAS 2018年第8期930-933,共4页
目的比较miRNA-146a、BRCA1mRNA在非小细胞肺癌组织及癌旁组织中的表达水平差异及二者相关性。方法采用实时RT-PCR方法检测30例非小细胞肺癌的癌组织及癌旁组织标本中miRNA-146a、BRCA1mRNA的表达水平,并分析它们之间的相关性。结果 miR... 目的比较miRNA-146a、BRCA1mRNA在非小细胞肺癌组织及癌旁组织中的表达水平差异及二者相关性。方法采用实时RT-PCR方法检测30例非小细胞肺癌的癌组织及癌旁组织标本中miRNA-146a、BRCA1mRNA的表达水平,并分析它们之间的相关性。结果 miRNA-146a和BRCA1mRNA在癌组织和癌旁组织相对表达量分别为:(42.67±34.29 vs14.67±9.54,P<0.05)、(7.79±5.11 vs 10.13±6.53,P<0.05);miRNA-146a和BRCA1mRNA呈负相关(P<0.05);二者与患者性别、年龄、分期、病理类型、复发情况之间差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 BRCA1mRNA与MicroRNA146a有望成为NSCLC诊疗及预后判断个体化指标,二者之间可能存在相互调控关系。 展开更多
关键词 microrna BRCA1mrna 非小细胞肺癌
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双相躁狂患者治疗前后血浆microRNA-134及LIMK-1 mRNA的表达研究 被引量:3
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作者 徐丹 荣晗 +2 位作者 刘铁榜 赵杰 赖文涛 《中国实用医药》 2018年第20期34-36,共3页
目的观察双相躁狂患者血浆中微小RNA-134(micro RNA-134)及LIM激酶-1(LIMK-1)m RNA的表达水平与双相躁狂之间的关系。方法 105例双相躁狂患者作为患者组,100例与患者组在年龄和性别上匹配的健康志愿者作为对照组,患者组常规应用情绪稳... 目的观察双相躁狂患者血浆中微小RNA-134(micro RNA-134)及LIM激酶-1(LIMK-1)m RNA的表达水平与双相躁狂之间的关系。方法 105例双相躁狂患者作为患者组,100例与患者组在年龄和性别上匹配的健康志愿者作为对照组,患者组常规应用情绪稳定剂治疗1个月。患者组于入组时和治疗1个月时、对照组于入组时分别评定Bech-Rafaelsen躁狂量表(BRMS)评分表并收集血浆,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术检测血浆micro RNA-134及LIMK-1 m RNA的表达水平,最后对检测结果及BRMS评分进行统计分析。结果治疗前,患者组血浆micro RNA-134及LIMK-1 m RNA表达水平分别为(1.17±0.02)、(0.37±0.02)显著低于对照组的(1.46±0.04)、(0.46±0.01),差异有统计学意义(P<0.05);治疗1个月后,患者组血浆micro RNA-134、LIMK-1 m RNA表达水平分别为(1.36±0.07)、(0.52±0.01)较治疗前显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。患者组治疗前及治疗后血浆micro RNA-134表达水平与BRMS评分之间均存在负相关(r=-0.48、-0.39,P<0.05)。结论血浆micro RNA-134、LIMK-1 m RNA的表达水平和双相障碍躁狂发作有关,有可能作为双相躁狂的生物标记物。 展开更多
关键词 双相躁狂 微小RNA-134 LIM激酶-1 mrna 表达
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联合microRNA和mRNA组学对雄性小鼠随增龄生育力变化的生物信息学研究
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作者 赵铭佳 宁艳春 +6 位作者 程宇 彭阳 朱研峰 韩宝生 刘美玲 卢文红 谷翊群 《中国计划生育学杂志》 2022年第9期1944-1949,共6页
目的:通过生物信息学方法筛选出小鼠睾丸组织随增龄变化的差异表达的关键miRNA和mRNA,为精子发生的研究提供新的方向.方法:检索美国国家生物技术信息中心(NCBI)的基因表达集合(GEO)数据库中关于精子发生的miRNAs和mRNA的芯片数据,确定... 目的:通过生物信息学方法筛选出小鼠睾丸组织随增龄变化的差异表达的关键miRNA和mRNA,为精子发生的研究提供新的方向.方法:检索美国国家生物技术信息中心(NCBI)的基因表达集合(GEO)数据库中关于精子发生的miRNAs和mRNA的芯片数据,确定数据集为GSE41857和GSE41858.对数据集GSE41857进行GEO2R在线分析,获得精子发生相关的差异表达miRNAs,并利用联川生物云平台预测其靶基因.对数据集GSE41858进行GEO2R在线分析,获得精子发生相关的差异表达mRNAs.将上述获得的靶基因与miRNA的靶基因取交集获得最终的差异表达基因.运用DAVID数据库对差异表达基因进行基因本体数据库(GO)富集和京都基因与基因组百科全书数据库(KEGG)通路分析,应用STRING数据库构建差异表达基因相关的蛋白质互作网络.结果:对数据集GSE41857分析共获得差异表达miRNAs52条,其靶基因17224个.对数据集GSE41858分析共得出差异表达基因619个,最终获得交集差异表达基因485个.GO富集分析生物过程(BP),主要包括精子发生、细胞分化、纤毛组装等;细胞组成(CC)主要包括细胞质、细胞核、细胞骨架等;分子功能(MF)主要包括蛋白质结合、RNA聚合酶II序列特异性DNA结合转录因子结合、整合素结合等.差异表达基因KEGG分析获得的通路主要包括轴突引导、乙型肝炎、Hippo信号传导途径等.利用cytoscape分析前20位的hub基因分别为Tgfb1/1、Tns3、Tln1、Csk、Zyx、Capn5、Capn1、Crebbp、Plxna1、Plxna3、Plxna4、Plxnb1、Itga9、Lama5、Fras1、Pdlim3、Ccnb2、E2f1、Ncor2、Inppl1.结论:本研究构建了小鼠精子发生过程中的miRNA􀆼mRNA调控网络,并挖掘出一些可能参与精子发生的miRNAs和新基因,为进一步阐明精子发生提供新的方向. 展开更多
关键词 生物信息学 microrna mrna 雄性小鼠 生育力 睾丸
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BRCA1 mRNA与MicroRNA-155在非小细胞肺癌中的表达及临床意义
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作者 陆颖芝 马兆明 +2 位作者 房新建 吴艳 刘桂荣 《齐齐哈尔医学院学报》 2018年第20期2370-2373,共4页
目的研究microRNA-155(miRNA-155)与BRCA1 mRNA在非小细胞肺癌肿瘤组织及瘤旁组织中的相对水平及二者关联。方法收集30例非小细胞肺癌的组织标本,采用RT-PCR方法检测miRNA-155、BRCA1 mRNA在肿瘤组织及瘤旁组织中的表达,并分析其相关性... 目的研究microRNA-155(miRNA-155)与BRCA1 mRNA在非小细胞肺癌肿瘤组织及瘤旁组织中的相对水平及二者关联。方法收集30例非小细胞肺癌的组织标本,采用RT-PCR方法检测miRNA-155、BRCA1 mRNA在肿瘤组织及瘤旁组织中的表达,并分析其相关性。结果 miRNA-155在肿瘤组织及瘤旁组织中的相对表达为[(35.24±24.49) vs (14.67±9.54),P<0.05],BRCA1 mRNA相对表达为[(7.79±5.11) vs (10.13±6.53),P<0.05]。而且在肿瘤组织中miRNA-155和BRCA1 mRNA相对表达呈负相关(P<0.05)。另外,其表达与患者性别、年龄、分期、病理类型、复发情况不相关(P>0.05)。结论miRNA-155有望成为非小细胞肺癌诊疗及预后判断个体化指标,且与BRCA1 mRNA之间可能存在相互调控关系。 展开更多
关键词 微小RNA BRCA1 mrna 非小细胞肺癌
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基于miRNA-mRNA调控网络探讨miR-34a-5p靶向Hh通路对LX2细胞增殖的影响
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作者 任真 马燕花 +2 位作者 王莉 王爱娣 赵秀萍 《中国医科大学学报》 CAS 北大核心 2023年第7期582-589,共8页
目的探讨miR-34a-5p靶向刺猬(Hh)信号通路对肝星状细胞(HSC)增殖和凋亡的调控作用。方法采用生物信息学分析筛选出LX2细胞中靶向Hh信号通路的差异miRNA,通过Cytoscape构建miRNA-m RNA网络。体外培养LX2细胞,通过转化生长因子-β1(TGF-... 目的探讨miR-34a-5p靶向刺猬(Hh)信号通路对肝星状细胞(HSC)增殖和凋亡的调控作用。方法采用生物信息学分析筛选出LX2细胞中靶向Hh信号通路的差异miRNA,通过Cytoscape构建miRNA-m RNA网络。体外培养LX2细胞,通过转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导建立LX2细胞活化模型。细胞活力检测试剂盒(CCK-8)检测miR-34a-5p过表达对LX2细胞增值活力的影响;流式细胞分析法(Annexin-V-FITC/PI)检测miR-34a-5p过表达对LX2细胞凋亡的影响;实时荧光定量PCR和Western blotting分析miR-34a-5p过表达对声波刺猬(Shh)、脑胶质瘤相关癌基因1(Gli1)、脑胶质瘤相关癌基因2(Gli2)、Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)及α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA和蛋白表达水平的影响。结果LX2细胞经TGF-β1诱导活化后,细胞活力显著升高,Shh、Gli1、Gli2、Col-Ⅰ及α-SMA表达均增高(P<0.01)。Hh信号通路特异性阻断剂环靶明脂可降低LX2细胞活力,下调Shh、Gli1、Gli2、Col-Ⅰ及α-SMA蛋白表达(P<0.01)。miR-34a-5p过表达可显著提高LX2细胞活力,上调Gli1、Gli2、Col-Ⅰ及α-SMA蛋白表达(P<0.05)。结论miR-34a-5p靶向调控LX2细胞的Hh信号通路,过表达miR-34a-5p可以上调Hh信号通路相关蛋白表达,促进LX2细胞活化。 展开更多
关键词 miRNA-mrna调控网络 微RNA-34a-5p 刺猬信号通路 肝星状细胞 肝纤维化
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非洲猪瘟病毒对猪肺泡巨噬细胞mRNAs和microRNAs表达模式的影响
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作者 张廷焕 柴捷 +2 位作者 陈力 龙熙 郭宗义 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2022年第S01期348-357,共10页
旨在探究非洲猪瘟(ASFV)病毒感染猪肺泡巨噬细胞后在体内的作用方式。以感染ASFV的猪肺泡巨噬细胞(PAMs)的mRNAs和microRNAs测序数据为基础,利用生物信息学软件对数据进行处理,得到了一批差异表达基因;利用基因功能富集和对应蛋白互作... 旨在探究非洲猪瘟(ASFV)病毒感染猪肺泡巨噬细胞后在体内的作用方式。以感染ASFV的猪肺泡巨噬细胞(PAMs)的mRNAs和microRNAs测序数据为基础,利用生物信息学软件对数据进行处理,得到了一批差异表达基因;利用基因功能富集和对应蛋白互作解析生物学通路;再利用mRNAs和microRNAs的互作方式确认重要的靶标关系。结果表明:ASFV改变了PAMs中1181个基因的表达量;主要调控宿主在能量代谢过程(如脂质分解、有机羟基化合物代谢、碳水化合物分解代谢、一元羧酸代谢),以及细胞周期过程(如有丝分裂细胞周期过程、细胞周期相变、细胞周期的正向调控);ASFV还引起了PAMs中25个microRNAs的差异表达,包括病毒相关的miR-27b-3p、miR-193a-3p、miR-132等;而miR-27b-3p作为表达丰度最高的差异microRNA,它与一些重要的差异基因(如PLK2、HSP90AA1等)存在着靶标关系,进而调控机体免疫和细胞周期相关通路。综上所述,ASFV感染PAMs后的作用方式包括破坏宿主在能量代谢和细胞周期方面的稳态,以及打破了机体microRNAs调节平衡;其中miR-27b-3p等小RNAs可以作为ASFV研究的靶向分子。 展开更多
关键词 ASFV 猪肺泡巨噬细胞 mrnaS micrornaS
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Construction of an oesophageal cancer-specific ceRNA network based on miRNA, lncRNA, and mRNA expression data 被引量:3
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作者 Wen-Hua Xue Zhi-Rui Fan +4 位作者 Li-Feng Li Jing-Li Lu Bing-Jun Ma Quan-Cheng Kan Jie Zhao 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2018年第1期23-34,共12页
AIM To explore the expression profiles of microRNAs(miRNAs), long non-coding RNAs(lncRNAs), and mRNAs in oesophageal squamous cell carcinoma(ESCC) in order to construct an oesophageal cancer-specific competing endogen... AIM To explore the expression profiles of microRNAs(miRNAs), long non-coding RNAs(lncRNAs), and mRNAs in oesophageal squamous cell carcinoma(ESCC) in order to construct an oesophageal cancer-specific competing endogenous RNA(ceRNA) network.METHODS In this work, the expression data of miRNAs, lncRNAs, and mRNAs in ESCC were obtained. An oesophageal cancer-specific ceRNA network was then constructed and investigated.RESULTS CeRNAs have the ability to reduce the targeting activityof miRNAs, leading to the de-repression of specific mRNAs with common miRNA response elements. CeRNA interactions have a critical effect in gene regulation and cancer development.CONCLUSION This study suggests a novel perspective on potential oesophageal cancer mechanisms as well as novel pathways for modulating ceRNA networks for treating cancers. 展开更多
关键词 Competing ENDOGENOUS RNA microrna Long NON-CODING RNA mrna OESOPHAGEAL SQUAMOUS cell carcinoma
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刺参响应灿烂弧菌侵染差异microRNAs鉴定及靶基因分析 被引量:1
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作者 畅孟阳 李彬 +7 位作者 荣小军 王锦锦 于永翔 王印庚 廖梅杰 张正 范瑞用 刘清兵 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2023年第2期107-117,共11页
microRNA参与基因的转录后调控,在真核生物的生长发育、细胞分化和免疫防御等过程中发挥重要作用。刺参(Apostichopusjaponicus)病害问题已成为产业发展的主要限制因素之一,而其病害发生的分子机制尚待进一步完善。本研究以刺参重大疾... microRNA参与基因的转录后调控,在真核生物的生长发育、细胞分化和免疫防御等过程中发挥重要作用。刺参(Apostichopusjaponicus)病害问题已成为产业发展的主要限制因素之一,而其病害发生的分子机制尚待进一步完善。本研究以刺参重大疾病“腐皮综合征”的重要致病原灿烂弧菌(Vibriossplendidus)为侵染菌株,通过人工侵染实验制备患病刺参样本,采用miRNA-seq技术对侵染组(PT16S)和对照组(PT10H)各3头刺参的体壁组织进行miRNA测序,通过相关生物信息学软件对miRNAs进行鉴定和分析,筛选差异表达miRNAs (DEmiRNAs)并预测其靶基因,构建关键调控途径的miRNA-mRNA调控网络。结果显示,PT10H组平均得到5 902 588条有效序列,194个已知miRNA和19个新的miRNA;PT16S组平均得到5 053 529条有效序列,182个已知miRNA和42个新的miRNA。对2组鉴定到的miRNA进行差异表达分析,共筛选到2个上调和11个下调的具有显著差异的DEmiRNAs(P≤0.05),上调的DEmiRNAs靶基因预测结合到3010个靶基因,注释到585个GO terms及24条信号通路(P≤0.05),下调的DEmiRNAs靶基因预测到19 072个靶基因,注释到514个GOterms以及22条信号通路(P≤0.05)。对筛选到的DEmiRNAs进行实时荧光定量PCR (qRT-PCR)验证,显示miRNA-seq与qRT-PCR的一致率达到70%。根据KEGG分析结果构建泛素介导的蛋白水解途径和Notch信号通路的miRNA-mRNA调控网络,结果显示,13个DEmiRNAs分别靶向结合134个与泛素介导的蛋白水解相关的m RNAs和109个与Notch信号通路相关的m RNAs,Aja-miR-184、Aja-miR-2478和Aja-miR-9277p等DEmiRNAs可能参与对Notch信号通路和对泛素介导的蛋白水解的调控。相关研究结果将为刺参疾病发生调控网络建立和机制解析提供依据。 展开更多
关键词 刺参 microrna 灿烂弧菌 胁迫应答 靶基因 miRNA-mrna调控网络
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先天性小耳畸形microRNA及mRNA表达谱的变化及关键靶基因的筛选 被引量:4
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作者 宋宇鹏 杨庆华 +5 位作者 林琳 蒋海越 张玲 潘博 何乐人 赵延勇 《医学研究杂志》 2017年第6期109-113,共5页
目的筛查先天性小耳畸形患者整个基因组存在表达水平异常的microRNAs(miRNAs)和mRNAs,从中找出关键靶基因,进而探讨关键靶基因表达水平的异常及其调控网络与先天性小耳畸形发病之间的关系。方法收集先天性小耳畸形患者的残耳软骨组织为... 目的筛查先天性小耳畸形患者整个基因组存在表达水平异常的microRNAs(miRNAs)和mRNAs,从中找出关键靶基因,进而探讨关键靶基因表达水平的异常及其调控网络与先天性小耳畸形发病之间的关系。方法收集先天性小耳畸形患者的残耳软骨组织为研究对象,以同一患者的健侧正常耳软骨组织作为自身对照。选用Exiqon miRCURY LNATMmicroRNA Array芯片及Arraystar Human mRNA/LncRNA Microarray芯片,对实验组3例及对照组3例样本的基因组miRNAs和mRNAs表达水平进行扫描,利用差异表达的倍数变化筛选存在表达水平差异的差异miRNAs和mRNAs。通过miRanda、miRDB、miRWalk、RNA22、Targetscan这5个数据库进行检索,预测差异miRNAs调节的靶基因。将预测靶基因与差异mRNAs对应的基因进行交叉对比,寻找同时存在miRNA和mRNA表达水平差异的关键靶基因及其对应的关键miRNAs。结果本研究筛选出24个具有表达水平差异的miRNAs,同时筛选出515个表达水平差异的mRNAs;将预测到的miRNAs调节的靶基因与mRNA表达谱中的差异基因进行交叉对比,得到对应的miRNA和mRNA表达水平均存在显著性差异的关键靶基因6个(CAST、MLL、MMP13、OTUD4、PDE5A、TGOLN2)。结论初步建立了先天性小耳畸形的miRNA表达谱和mRNA表达谱,找到了先天性小耳畸形表达异常的关键靶基因;初步建立了1个与miRNA以及mRNA表达水平相关的调控网络,有利于进一步探讨关键靶基因及其调控网络与先天性小耳畸形发病的关系。 展开更多
关键词 先天性小耳畸形 microrna mrna关键靶基因调控网络
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Construction of miRNA-mRNA network reveals crucial miRNAs and genes in acute myocardial infarction 被引量:4
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作者 Kai Wang Zhongming Li +7 位作者 Wenjie Ma Yan Sun Xianling Liu Lijun Qian Jian Hong Dasheng Lu Jing Zhang Di Xu 《The Journal of Biomedical Research》 CAS CSCD 2021年第6期425-435,共11页
Acute myocardial infarction(AMI)is a severe cardiovascular disease.This study aimed to identify crucial microRNAs(miRNAs)and mRNAs in AMI by establishing a miRNA-mRNA network.The microarray datasets GSE31568,GSE148153... Acute myocardial infarction(AMI)is a severe cardiovascular disease.This study aimed to identify crucial microRNAs(miRNAs)and mRNAs in AMI by establishing a miRNA-mRNA network.The microarray datasets GSE31568,GSE148153,and GSE66360 were downloaded from the Gene Expression Omnibus(GEO)database.We identified differentially expressed miRNAs(DE-miRNAs)and mRNAs(DE-mRNAs)in AMI samples compared with normal control samples.The consistently changing miRNAs in both GSE31568 and GSE148153 datasets were selected as candidate DE-miRNAs.The interactions between the candidate DE-miRNAs and DE-mRNAs were analyzed,and a miRNA-mRNA network and a protein-protein interaction network were constructed,along with functional enrichment and pathway analyses.A total of 209 DE-miRNAs in the GSE31568 dataset,857 DE-miRNAs in the GSE148153 dataset,and 351 DE-mRNAs in the GSE66360 dataset were identified.Eighteen candidate DE-miRNAs were selected from both the GSE31568 and GSE148153 datasets.Furthermore,miR-646,miR-127-5p,miR-509-5p,miR-509-3-5p,and miR-767-5p were shown to have a higher degree in the miRNA-mRNA network.THBS-1 as well as FOS was a hub gene in the miRNA-mRNA network and the protein-protein interaction(PPI)network,respectively.CDKN1A was important in both miRNA-mRNA network and PPI network.We established a miRNA-mRNA network in AMI and identified five miRNAs and three genes,which might be used as biomarkers and potential therapeutic targets for patients with AMI. 展开更多
关键词 acute myocardial infarction MIRNAS mrnaS miRNA-mrna regulatory network
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酒精性肝炎microRNA-mRNA差异表达网络的生物信息学分析 被引量:1
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作者 张秀芝 李宁宁 +2 位作者 刘晓丽 亢春彦 张进忠 《临床肝胆病杂志》 CAS 北大核心 2019年第3期585-591,共7页
目的构建酒精性肝炎(AH)的microRNA-mRNA差异表达网络,寻找AH新的诊疗靶标。方法筛选AH差异表达的microRNA和mRNA;基于TargetScan、DIANA、MIRDB、PICTAR、miRWalk2. 0等软件寻找差异microRNA靶基因,选取差异mRNA中与microRNA变化方向... 目的构建酒精性肝炎(AH)的microRNA-mRNA差异表达网络,寻找AH新的诊疗靶标。方法筛选AH差异表达的microRNA和mRNA;基于TargetScan、DIANA、MIRDB、PICTAR、miRWalk2. 0等软件寻找差异microRNA靶基因,选取差异mRNA中与microRNA变化方向相反的靶基因,构建关键microRNA-mRNA网络;通过注释、可视化和集成发现数据库(DAVID)对相关靶基因进行基因本体论(GO)分析、京都基因与基因组百科全书数据库(KEGG)通路分析;通过GCBI (www. gcbi. com. cn)在线软件对靶基因进行疾病富集分析和核心网络构建;通过Cytoscape软件中GeneMANIA数据库(genemania. org)对关键靶基因进行蛋白相互作用分析,对比3种方法通路分析寻找AH发生过程中的关键通路。结果构建以hsa-mir-21-5p、hsa-mir-148a-3p和hsa-mir-30e-5p等5个差异microRNA及Ⅳ胶原α1链(COL4A1)、血栓反应素2(THBS2)和整合素亚单位α6(ITGA6)等51个靶基因为主体的AH关键microRNA-mRNA网络;构建关键靶基因相关的蛋白相互作用网络; GO分析和各种通路分析分析显示,磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-Akt)通路和局部黏附等过程与AH密切相关。结论 AH发病过程中,多种关键靶基因相关蛋白存在复杂的相互作用,COL4A1和THBS2可能通过激活ITGA6调节PI3K-Akt通路和局部黏附等过程,促进AH的发展; microRNA-mRNA网络的构建揭示了AH发生过程中的关键环节,凸显了研究重点,尤其是PI3K-Akt相关基因在AH中的发现,有望为AH的诊疗提供新的靶标。 展开更多
关键词 肝炎 酒精性 微RNA RNA 信使 基因调控网络 信号传导 基因疗法
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Roles of microRNAs in immunopathogenesis of non-alcoholic fatty liver disease revealed by integrated analysis of microRNA and mRNA expression profiles 被引量:6
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作者 Yu-Jun Zhang Ying Hu +4 位作者 Jing Li Yu-Jing Chi Wei-Wei Jiang Feng Zhang Yu-Lan Liu 《Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International》 SCIE CAS CSCD 2017年第1期65-79,共15页
BACKGROUND: The integrative analysis of microRNA and mRNA expression profiles can elucidate microRNA-targeted gene function. We used this technique to elucidate insights into the immunological pathology of non-alcoho... BACKGROUND: The integrative analysis of microRNA and mRNA expression profiles can elucidate microRNA-targeted gene function. We used this technique to elucidate insights into the immunological pathology of non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD). METHODS: We analyzed differentially expressed microRNA and mRNA expression profiles of CD4+ T lymphocytes from the liver and mesenteric lymph nodes (MLNs) of mice with NAFLD using microarrays and RNA sequencing. Normal mice were used as controls. The target genes of microRNAs were predicted by TargetScan. Integrative analysis showed that the mRNAs were overlapped with microRNAs. Furthermore, the Gene Ontology (GO) and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) analyses were performed to predict the key genes and pathways. Then, 16 microRNAs and 10 mRNAs were validated by qRT-PCR. RESULTS: Microarray analysis suggested that 170 microRNAs were significantly de-regulated in CD4+ T lymphocytes from the liver between the two groups. Eighty mRNAs corresponded with microRNA targeted genes. KEGG analysis indicated that the MAPK pathway was consistently augmented in the liver of NAFLD mice. miR-23b, let-7e, miR-128 and miR-130b possibly played significant parts in the MAPK pathways. Furthermore, between the two groups, 237 microRNAs were significantly deregulated in CD4+ T lymphocytes from MLNs. 38 mRNAs coincided with microRNA target genes. The metabolic pathway was consistently enriched in the MLNs of NAFLD mice. miR- 206-3p, miR-181a-Sp, miR-29c-3p and miR-30d-5p likely play important roles in the regulation of metabolic pathways. CONCLUSION: The results of this study presented a new perspective on the application of integrative analysis to identify complex regulation means involved in the immunological pathogenesis of NAFLD. 展开更多
关键词 microrna-mrna GUT non-alcoholic fatty liver disease CD4+ T lymphocytes IMMUNOPATHOGENESIS
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