慢性不完全性睡眠剥夺大鼠对海马TNF-α mRNA、IFN-γ mRNA表达及脾脏NK细胞活性的影响

目的:探讨慢性疲劳大鼠睡眠剥夺后对血清细胞因子,海马TNF-α mRNA、IFN-γ mRNA表达及脾脏NK细胞活性的影响。方法:采用负重力竭游泳法制备CFS大鼠模型,用小平台水环境法剥夺睡眠12 h,将20只SD大鼠随机分为对照组和睡眠剥夺组,连续应激21 d后,Morris水迷宫测量大鼠学习记忆能力;采用ELISA检测血清TNF-α、IFN-γ、TGF-β的含量;Rael time-PCR检测海马TNF-α mRNA、IFN-γ mRNA的表达;LDH释放法检测脾脏NK细胞活性。结果:与对照组相比,睡眠剥夺组体质量在7 d、21 d明显降低(P <0. 01),14 d降低(P <0. 05);力竭时间7 d增长(P <0. 05),14 d减少(P> 0. 05),21 d明显增长趋势(P> 0. 05);Morris水迷空间搜索实验,总路程、平均速度提高(P <0. 05),经过平台次数降低(P <0. 05);血清IFN-γ含量和海马IFN-γ mRNA表达升高(P <0. 05);脾脏NK细胞活性降低(P <0. 05)。结论:CFS出现的认知功能下降、抑郁等神经精神症状很可能是睡眠质量差导致,长期睡眠不足使NK细胞活性降低,是机体对致病微生物的抵抗能力崩溃的主要原因。

羚牛IFN-γ基因克隆、生物信息学分析与原核表达

旨在研究羚牛γ干扰素(IFN-γ)基因结构与功能,为进一步增强羚牛的免疫调节能力提供理论依据。通过RT-PCR方法克隆羚牛IFN-γ基因,并运用多种生物信息学分析工具对其结构与功能进行深入研究。将IFN-γ基因序列连入原核表达载体,并转化大肠杆菌诱导表达。结果显示,羚牛IFN-γcDNA序列全长501 bp,编码166个氨基酸。蛋白高级结构预测结果显示,二级结构以α螺旋为主,存在13个磷酸化修饰位点,并含有1个信号肽、1个低度复杂区、1个跨膜结构域及1个IFN-γ结构域,其中IFN-γ结构域位于胞外区。序列比对分析发现其与绵羊、山羊、家牛、水牛、人、黑猩猩、小鼠、鸡的核苷酸序列同源性分别为99.0%、98.8%、97.2%、96.2%、75.8%、75.4%、64.1%、54.1%,氨基酸序列同源性分别为99.4%、99.4%、95.8%、95.8%、62.7%、62.7%、43.9%、33.5%。系统进化树分析结果显示,羚牛与山羊、绵羊的亲缘关系最近。经SDS-PAGE和Western-blot检测发现,重组IFN-γ蛋白以可溶性形式大量表达,分子质量约为34 ku。通过密码子优化及不同浓度IPTG诱导表达等原核表达优化策略发现,密码子优化能促进重组蛋白的高效表达,且最佳诱导浓度为0.9 mmol·L^(-1)。

KRT18与mRNA及长链非编码RNA互作调控椎间盘髓核细胞损伤的机制

背景:椎间盘中差异表达的RNA结合蛋白在椎间盘退变中发挥着关键作用,其中RNA结合蛋白KRT18水平的降低与椎间盘退行性病变相关,但其在椎间盘髓核细胞中的具体作用尚未完全确定。目的:探讨KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合互作对椎间盘髓核细胞的影响及机制。方法:对因腰部骨折或椎间盘退行性病变而接受椎间融合术的患者进行人体髓核组织取样获得正常髓核细胞和退变髓核细胞,并进行iRIP-seq、功能富集分析以及DNA微阵列分析,随后根据分析结果在髓核细胞中敲低KRT18,通过蛋白免疫印迹及qRt-PCR在蛋白和RNA水平检测相关基因水平的表达。结果与结论:通过iRIP-seq分析发现GUAAUC和AGCCUC序列中存在大量的KRT18结合位点,表明KRT18可参与调控RNA的转录、翻译、稳定性或在细胞信号传导途径中发挥作用。其能够与成熟的mRNA稳定结合,其中表达较高的基因包括CRLF1及IGFBP4等,同时与其结合的长链非编码RNA的峰值基因包括SNHG25、SNHG12、NEAT1、USP32、EIF4A2和CDH4,这些基因多涉及细胞凋亡、炎症等多种生物过程,并且能介导细胞外基质代谢的相关通路,KRT18能够调控它们的稳定性、转运、翻译、剪接等多个方面的功能,进而影响基因的表达和细胞功能。实验结果验证了在髓核细胞中敲低KRT18,细胞外基质代谢水平被抑制出现失衡,导致体外椎间盘退变。该研究首次从KRT18与mRNA及长链非编码RNA结合的角度探讨其调控机制,并推测了KRT18在椎间盘退变发病机制中的潜在功能,为今后KRT18关键功能的研究奠定了基础。

IgA血管炎儿童外周血ATP5B mRNA,UBA52 mRNA表达与肾损伤及疾病复发的关系研究

目的 探究IgA血管炎(IgAV)儿童外周血ATP合成酶β5亚基(ATP5B)mRNA,泛素蛋白A52残基核糖体蛋白融合产物(UBA52)mRNA表达与肾损伤及疾病复发的关系。方法 选取2022年1月~2023年10月上海市奉贤区中心医院收治的143例IgAV患儿作为研究对象,根据是否并发累及肾脏进一步分为IgAV肾损伤组(n=82)和IgAV肾非损伤组(n=61);根据术后随访情况将病例分为复发组(n=44)和未复发组(n=99);另选取同期60例健康体检者为对照组。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测ATP5B mRNA,UBA52 mRNA表达水平,对比两者在各组中表达情况。多因素Logistic回归分析IgAV患儿发生肾损伤的影响因素;通过受试者工作特征(ROC)曲线分析ATP5B mRNA,UBA52 mRNA表达对IgAV患儿发生肾损伤及疾病复发的预测价值。结果 对照组、IgAV肾非损伤组和IgAV肾损伤组外周血中ATP5B mRNA(1.01±0.21,1.24±0.26,1.46±0.35),UBA52mRNA(1.03±0.19,1.19±0.22,1.42±0.28),Scr(55.69±12.78μmol/L,62.85±13.92μmol/L,76.49±15.34μmol/L),BUN(11.85±2.91mmol/L,13.46±2.78mmol/L,17.54±3.45mmol/L)水平依次升高,组间比较差异具有统计学意义(F=39.666~64.417,均P<0.05)。与未复发组比较,复发组外周血中ATP5B mRNA(1.52±0.34 vs 1.19±0.20),UBA52 mRNA(1.49±0.31 vs1.08±0.21)表达升高,差异具有统计学意义(t=7.253,9.241,均P<0.001)。Logistic回归分析显示,Scr,BUN,ATP5B mRNA,UBA52 mRNA是IgAV发生肾损伤的独立危险因素(均P<0.05)。外周血中ATP5B mRNA联合UBA52 mRNA预测IgAV患儿发生肾损伤的AUC(95%CI)为0.823(0.607~0.914),明显高于两者单独预测(Z=1.952,2.021,均P<0.05);外周血中ATP5B mRNA联合UBA52 mRNA预测IgAV疾病复发的AUC(95%CI)为0.851(0.617~0.958),亦明显优于两者单独预测(Z=2.035,2.098,均P<0.05)。结论 IgAV患儿外周血中ATP5B mRNA,UBA52 mRNA表达水平与IgAV肾损伤和复发相关,两者可作为疾病诊断和预后评估的有效生物标志物。

补肾强督方对强直性脊柱炎患者外周血IL-18、IFN-γ、IL-4 mRNA表达水平的影响

目的探讨补肾强督方治疗强直性脊柱炎(AS)的可能作用机制。方法30例AS患者予补肾强督方进行治疗,疗程为6个月。研究AS患者及健康志愿者外周血中白细胞介素18(IL-18)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素4 mRNA(IL-4 mRNA)表达水平及经补肾强督方治疗前后AS患者外周血中IL-18、IFN-γ、IL-4 mRNA表达水平的变化。结果AS患者外周血单个核细胞IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA表达水平及IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA较正常对照组显著增高(P<0.001)。经用补肾强督方治疗后,IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA表达水平及IFN-γ mRNA/IL-4 mRNA明显下降(P<0.001)。AS患者红细胞沉降率水平与IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA、IL-4 mRNA表达水平呈极显著相关(P<0.001);C反应蛋白水平与IL-18 mRNA表达水平呈显著相关(P<0.05),与IFN-γ mRNA表达水平呈非常显著相关(P<0.01)。结论AS患者外周血中IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA水平比正常组明显升高;用补肾强督方治疗后,患者IL-18 mRNA、IFN-γ mRNA水平均有明显下降。

针灸预处理对摔跤运动员大负荷训练阶段IFN-γmRNA和IL-4mRNA表达的调节

目的:通过观察大负荷训练期间男子摔跤运动员IFN-γmRNA和IL-4mRNA表达水平的变化,探讨针灸预处理方法防治运动性免疫失衡的可能作用机制。方法:20例摔跤运动员,随机分为对照组(10例)和实验组(10例),在8周大负荷训练期间进行实验,分别在大负荷运动训练前,大负荷运动训练后、调整训练后采取外周静脉血共5次,采用实时荧光定量PCR检测外周血γ-干扰素(IFN-γ)和白介素-4(IL-4)细胞因子mRNA的表达量。结果:摔跤运动员IFN-γmRNA表达变化,对照组W8与同组W2和W5相比明显降低(P<0.05),调整后W9明显高于W8(P<0.01);实验组W9高于同组W2和W5(P<0.05),实验组W8与同期对照组相比明显升高(P<0.05)。IL-4 mRNA表达对照组W4、W5、W8、W9均高于同组W2(P<0.05,P<0.01);实验组W5与同组W2、W4相比明显升高(P<0.01),W8、W9与同组W5相比明显恢复(P<0.05),实验组W4、W8与同期对照组相比有统计学意义(P<0.01、P<0.05)。IFN-γmRNA/IL-4mRNA比值变化,对照组W4、W5、W8均低于同组W2(P<0.05,P<0.01);实验组W5明显低于同组W2(P<0.05),W8、W9与W5相比明显恢复(P<0.05),实验组W8和W9与同期对照组相比有统计学意义(P<0.01)。结论:大负荷训练期间运动员通过针灸预处理方法调节IFN-γ和IL-4细胞因子mRNA的表达水平,进而维持运动员Th1/Th2细胞因子的动态平衡,这可能是针灸延缓或防止运动员免疫机能下降或失衡的机制之一。

芪蓝四君子汤对雏鸡小肠IL-2和IFN-γ mRNA表达的影响

为了研究芪蓝四君子汤对雏鸡小肠IL-2和IFN-γ mRNA表达的影响,选用90只1日龄雏鸡,随机分成5组:Ⅰ-Ⅳ组用新城疫LaSota系冻干苗进行口腔免疫,Ⅰ-Ⅲ组在免疫的同时,分别按0.125 g/mL、0.25 g/mL、0.5 g/mL 3个浓度灌服芪蓝四君子汤1 mL,连续灌服10 d。Ⅳ组和Ⅴ组灌服等量生理盐水。各组分别于20、40、60日龄时各宰杀6只,取小肠(空肠段),用半定量RT-PCR方法检测空肠中IL-2和IFN-γ的mRNA表达变化。结果表明,芪蓝四君子汤能显著促进雏鸡空肠中IL-2和IFN-γ mRNA的表达,诱导机体产生Th1免疫反应,进而增强机体局部的细胞免疫水平。

卡介菌多糖核酸和地塞米松对哮喘大鼠IFN-γ/IL-4mRNA表达的对比研究

从分子水平探讨卡介菌多糖核酸(BCG-PSN)对哮喘大鼠Th1、Th2型细胞因子IFN-γmRNA和IL-4mRNA表达的影响以探讨BCG-PSN治疗哮喘的可能机制,并与地塞米松的作用相对比。SD雄性大鼠32只,随机分成盐水对照组、BCG-PSN组、地塞米松和哮喘组四组,每组8只。BCG-PSN组、地塞米松和哮喘组第1、7、14天均用10%鸡卵清蛋白(OVA)1ml联合10%氢氧化铝[AL(OH)3]1ml腹腔注射,第15天起分别以BCG-PSN、地塞米松、生理盐水腹腔注射治疗哮喘,每次治疗后30min以10%OVA雾化吸入激发哮喘,持续30min,持续7d,盐水对照组则以生理盐水腹腔注射和雾化,四组最后一次雾化吸入后24h,以1%戊巴比妥钠麻醉大鼠,收集右上肺组织100mg,采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)半定量测定卡介菌多糖核酸和地塞米松对哮喘大鼠肺组织中IFN-γmRNA、IL-4mRNA表达的影响。结果:BCG-PSN组哮喘大鼠肺组织中IFN-γmRNA表达明显增加,高于正常组、地塞米松组和哮喘组(P<0.05、0.05、0.01,IL-4mRNA表达低于哮喘组和正常组。地塞米松组IL-4mRNA表达低于正常组和哮喘组,IFN-γmRNA表达低于BCG-PSN组而高于哮喘组。哮喘组IL-4mRNA明显高于正常组、BCG-PSN组、地塞米松组。IFN-γmRNA明显低于其余三组(P<0.05)。卡介菌多糖核酸能明显增强哮喘大鼠肺组织中Th1类细胞因子IFN-γmRNA的表达,同时抑制Th2类细胞因子IL-4mRNA的表达,通过双向调节作用提高IFN-γ/IL-4的比值从而逆转Th1/Th2失衡。地塞米松能明显抑制Th2类细胞因子IL-4mRNA的表达,而对Th1类细胞因子IFN-γmRNA的表达无明显改变。

中药成分复方对兔外周血淋巴细胞增殖、IFN-γ和IL-10的mRNA表达以及兔出血症疫苗免疫效果的影响

【目的】研究两个中药成分复方(cCHMIs)的免疫增强作用和机理。【方法】选择黄芪多糖、淫羊藿多糖、蜂胶黄酮和人参皂苷4种中药成分组成两个复方,用MTT法和荧光定量RT-PCR法测定它们对兔外周血淋巴细胞增殖和IFN-γ、IL-10mRNA的表达影响;并将两个复方作为佐剂,配合兔出血症疫苗免疫幼兔,以铝胶苗和无佐剂苗为对照,分别于免疫后7、14、21、35、49d用MTT法和血凝抑制法测定外周血淋巴细胞增殖和血清抗体的动态变化,于免疫后63d测定免疫器官指数和攻毒保护率。【结果】两个复方在体外均可以显著促进淋巴细胞增殖,提高淋巴细胞IFN-γ、IL-10mRNA的表达;作为佐剂,两个复方可以显著提高免疫兔的血清抗体效价,促进体内淋巴细胞增殖,显著促进圆小囊、肠淋巴结等免疫器官的发育,有较高的攻毒保护效果。【结论】两个复方中药成分具有较强的免疫增强作用,可被开发成新型的免疫增强剂。

灵芝多糖拮抗前列腺素E2对小鼠脾细胞IFN-γ和TNF-α mRNA表达的抑制作用

目的观察灵芝多糖拮抗前列腺素E2(PGE2)对小鼠脾细胞干扰素γ(IFN-γ)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达的抑制作用。方法混合淋巴细胞培养反应作为实验模型,半定量RT-PCR方法检测IFN-γ和TNF-αmRNA的表达水平。结果PGE2连续作用4h后,脾细胞IFN-γmRNA的表达与对照组比较受到不同程度的抑制,当PGE2浓度在10μmol/L以上时具有统计学意义(P<0.01)。固定PGE2浓度为20μmol/L,合用不同浓度的灵芝多糖,当灵芝多糖为100mg/L以上时可部分对抗PGE2的抑制作用。培养8h后,PGE2明显抑制TNF-αmRNA的表达,灵芝多糖为100mg/L以上时可部分对抗。结论灵芝多糖可部分拮抗PGE2对小鼠脾细胞IFN-γ和TNF-αmRNA表达的抑制作用。

银屑病患者皮损中类浆细胞树突状细胞和IRF-7,IFN-α mRNA表达研究

目的探讨银屑病患者皮损中类浆细胞树突状细胞(plasmacytoid dendritic cells,PDCs)和干扰素调节因子7(IRF-7)、干扰素α(IFN-α)mRNA的表达及其意义。方法采用免疫组织化学和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测了22例银屑病患者皮损中PDCs和IRF-7,IFN-α mRNA的表达。15例整形外科患者的皮肤作为正常人对照。结果免疫组化结果显示银屑病组皮损中CD123阳性的PDCs表达明显增多,而在正常对照组没有表达;RT-PCR检测显示,与正常人皮肤相比,寻常性银屑病患者皮损中IFN-α mRNA的表达无实质性上调,差异无显著性,但是IRF-7 mRNA的表达水平明显增高,差异有显著性(P<0.001)。结论银屑病患者皮损中PDCs浸润,IRF-7 mRNA的表达水平上调可能是银屑病发生和发展的原因之一。

补肾泻肝方治疗再生障碍性贫血临床疗效与IFN-γmRNA基因表达关系的研究

目的 :观察补肾泻肝方治疗再生障碍性贫血临床疗效与 IF N-γm RNA基因表达关系。方法 :2 1例患者均以补肾泻肝方为主治疗 ,用 RT-PCR技术分析 IFN-γ基因表达。结果 :2 1例患者中有效 12例 ,皆为肾阴虚、肝火伏热型 ;无效9例 ,皆为肾阳虚、阴亏瘀热型。用 RT-PCR技术分析 IF N-γ基因表达 ,12例中有 9例阳性 ,治疗后阳性者 2例 ,阴性者 7例 ;而无效的 9例中无一例阳性。结论 :补肾泻肝方治疗再障疗效较好 ,IFN -γm RNA基因表达在中医辨证分型和预测补肾泻肝方的疗效与治疗机理方面有重要的作用。

IFN-γ作用于沙眼衣原体感染细胞后Fas mRNA的检测

探讨了IFN γ能否通过上调Ct(Chlamydiatrachomatis ,简称Ct)感染细胞FasmRNA的表达而调节机体对Ct感染细胞的免疫应答。应用IFN γ作用于感染Ct (K血清型 )的McCoy细胞 ,通过观察细胞形态改变及MTT法检测细胞毒作用 ,选出IFN γ的最佳作用浓度和检测时间 ,用RT PCR方法检测McCoy细胞FasmRNA的表达。结果显示 :(1)形态学观察结果显示IFN γ作用于Ct感染细胞 2 8h后细胞膜下出现大量空泡 ,整个细胞内充满颗粒 ,且随着IFN γ作用时间延长 ,细胞体积变小 ,细胞变稀疏。 (2 )MTT法检测结果显示 2 0U/mLIFN γ对Ct感染的McCoy细胞已产生显著的细胞毒作用 ,IFN γ浓度继续增大 ,细胞毒作用的增大不明显。 (3)RT PCR法检测FasmRNA的表达 ,结果显示IFN -γ上调了McCoy细胞FasmRNA的表达 ,Ct感染McCoy细胞没有影响FasmR NA表达的上调。IFN

复方中药对断奶獭兔盲肠内环境及脾脏IFN-γ、IL-10 mRNA表达的影响

【目的】研究复方中药(cCHM)添加剂对断奶獭兔盲肠内环境及脾脏IFN-γ、IL-10mRNA表达的影响,探讨其对机体抗病能力的调控作用及适宜用量。【方法】选用(35±2)日龄断奶、体质量相近的獭兔144只,随机分为对照组和3个试验组,每组6个重复,每重复6只幼兔。对照组饲喂添加0.1g/kg杆菌肽锌的日粮(不含抗生素等其他药物),试验组分别饲喂添加复方中药5g/kg(cCHM1组)、10g/kg(cCHM2组)、20g/kg(cCHM3组)的日粮,60d后,取脾脏和盲肠样品,测定盲肠微生物活力和数量,检测IFN-γ、IL-10的相对表达量。【结果】与对照组相比,cCHM2组獭兔盲肠内容物氨氮(NH3-N)浓度降低21.62%,菌体蛋白(MCP)含量提高16.81%,差异显著(P<0.05)。复方中药抑制大肠杆菌的效果不及抗生素,但cCHM2组、cCHM3组乳酸杆菌数量较对照组分别提高18.31%和16.50%,差异显著(P<0.05)。复方中药提高了脾脏IFN-γ、IL-10mRNA的相对表达量,cCHM2组和cCHM3组均极显著高于对照组(P<0.01)。【结论】复方中药添加剂可改善断奶獭兔盲肠内环境,增强机体的免疫功能,有利于断奶獭兔的肠道健康;该试验条件下复方中药添加剂的适宜用量为10g/kg。

鸭瘟病毒疫苗株与强毒株诱导雏鸭IFN-α mRNA在肝脏中表达的动态定量研究

本研究旨在探讨不同毒力的鸭瘟病毒(DPV)感染对机体IFN-αmRNA表达水平的影响,为DPV的感染与免疫机制提供理论依据。采用Real-time PCR对DPV弱毒株及强毒株接种雏鸭肝脏中的IFN-α mRNA表达水平及病毒荷载量进行动态定量检测,结果显示,弱毒株能引起IFN-αmRNA在肝脏中快速、持续高水平表达;与空白对照相比,在接种后3h上升4倍,9h达到峰值(18.5倍),12h～144h保持在7.8～12.6倍之间,显著抑制了弱毒株的增殖,病毒荷载量较低,表现出感染的自限性;而强毒株只能引起IFN-α mRNA在肝脏中短时间、低水平表达,在感染后72h才达到峰值,为空白对照的4.1倍,持续至132h,以后迅速下降,至144h(濒死时)仅为2.0倍,致使强毒株在肝脏中快速增殖,病毒荷载量与鸭瘟的发病过程密切相关。这些结果提示鸭瘟弱毒株能诱导肝细胞高水平表达IFN-αmRNA,有助于机体建立有效的免疫保护,而强毒株可能通过某种机制抑制IFN-α的表达,利于其建立感染。本研究结果为进一步阐明鸭瘟病毒感染与免疫的分子机制提供了有价值的实验数据。

IL-1β、IFN-γ对灌流大鼠卵巢中基质金属蛋白酶-2,-9mRNA基因表达的影响

目的 探讨IL 1β、IFN γ对基质金属蛋白酶 - 2 ,- 9(MMP - 2 ,- 9)mRNA基因表达的影响。 方法 采用体外灌流卵巢系统、原位杂交 (insituhybridization)等方法检测IL 1β、IFN γ对大鼠卵泡发育过程中MMP - 2 ,- 9mRNA基因表达变化 ,并通过密度扫描方法对原位杂交结果进行半定量分析。结果 IL 1β对MMP - 2mRNA的表达无明显的刺激或抑制作用 ,但可显著增加卵泡膜细胞的MMP - 9mRNA的表达 ;IFN -γ可显著降低MMP - 2 ,- 9mRNA的表达。结论 IL 1β、IFN γ可通过调节卵泡发育过程中MMP - 2 ,-

尖锐湿疣组织中IFN-γ mRNA、IL-4 mRNA的表达

目的:通过检测尖锐湿疣(CA)组织中干扰素γ(IFN-γ)mRNA和白介素4(IL-4)mRNA的表达情况来研究其与尖锐湿疣复发的关系。方法:以正常包皮组织作为对照,采用原位逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测22例治疗后复发CA患者和14例未复发患者皮损中IFN-γ mRNA和IL-4 mRNA的原位表达情况。结果:CA患者皮损局部IFN-γ mRNA和IL-4 mRNA的表达均高于正常对照组(P<0·01);复发组IL-4 mRNA的表达均高于未复发组,未复发组IFN-γ mRNA的表达均高于复发组(P<0·01)。结论:IFN-γ mRNA表达增高有利于CA的消退。

狼疮性肾炎血清MMP9、IFN-γ与HMGB1、TLR4mRNA的临床意义

目的探讨狼疮性肾炎(LN)外周血中基质金属蛋白酶9(MMP9)、干扰素-γ(IFN-γ)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、Toll样受体4(TLR4)的表达意义及与心脏损害相关性。方法选取2017年8月至2019年7月本院收治的63例LN患者(LN组)及34例LN合并心脏损害患者(合并心脏损害组),比较两组不同2003年国际肾脏病学会和肾脏病理学会(ISN/RPS.2003)LN病理分型患者外周血中MMP9、IFN-γ、HMGB1 mRNA、TLR4 m RNA的表达,采用Logistic多元回归方程行多因素分析,采用Pearson进行相关性分析,采用接收者操作特征(ROC)曲线及ROC下面积(AUC)分析各指标诊断LN合并心脏损害的价值。结果合并心脏损害组MMP9、IFN-γ、HMGB1 mRNA、TLR4 mRNA水平均较LN组高(P<0.05);Ⅲ+Ⅳ型患者MMP9、IFN-γ、HMGB1 mRNA、TLR4 mRNA水平均较Ⅰ+Ⅱ型高(P<0.05);MMP9、IFN-γ、HMGB1、TLR4是LN合并心脏损害发生的相关危险因素(P<0.05);MMP9、IFN-g、HMGB1 mRNA、TLR4 mRNA与心脏损害呈正相关(P<0.05);诊断LN合并心脏损害的AUC HMGB1mRNA>TLR4 mRNA>IFN-γ>MMP9(P<0.05)。结论 LN患者外周血中MMP9、IFN-γ、HMGB1、TLR4高表达,与病理分型有关,并可作为心脏损害的参考指标。

多发性硬化患者外周血单个核细胞IL-2、IFN-γ和TNF-α mRNA表达水平

应用逆转录／聚合酶链反应（RT／PCR）和狭缝印迹分子杂交技术，研究17例多发性硬化（MS）患者外周血单个核细胞IL-2、IFN-γ和TNF-α的mRNA表达。结果发现3种细胞因子的mRNA表达均高于健康对照组;治疗后病程处于稳定期的MS患者IFN-γ和TNF-α的mRNA表达恢复到正常水平，但IL-2mRNA仍保持高水平。此结果表明炎性细胞因子（IFN-γ和TNF-α）参与MS发病过程，并可作为MS病情缓解、复发的临床指标。

对小白鼠经不同途径注射抗原后脾单个核细胞的细胞因子IL-1βIL-2和IFN-γ的mRNA表达

应用ＲＴＰＣＲ结合激光密度扫描定量分析方法，观察了不同途径免疫小白鼠的脾单个核细胞的细胞因子ＩＬ１β，ＩＬ２和ＩＦＮγ的ｍＲＮＡ动态表达水平。结果显示，穴位免疫组细胞因子ＩＬ１β和ＩＬ２的ｍＲＮＡ表达峰值和持续时间均大于非穴位免疫对照组。穴位免疫组与对照组比较，ＩＦＮγ的ｍＲＮＡ表达水平无统计学差异。这一结果在ｍＲＮＡ水平上证明经后海穴途径免疫可增强机体的免疫功能。提示在穴位免疫激活机体免疫应答的过程中，除了免疫系统自身调节外，尚有其他因素参与免疫调节。