mRNA介导表达肿瘤坏死因子相关的凋亡在肾癌细胞抑制中的机制

目的观察mRNA介导表达肿瘤坏死因子相关的凋亡在肾癌细胞抑制中的作用机制。方法选取2014年1月至2016年6月医院诊治的经病理确诊肾癌患者12例,通过实时定量PCR比较肾细胞癌(RCC)细胞系与正常细胞系在miR-138和miR-199表达水平,并且在miR-138和miR-199控制下RCC细胞外基因的表达,根据Western blot和G0/G1细胞分析Ad-TRAIL-3MREs诱导人肾癌细胞(ACHN细胞)和L-02细胞凋亡的机制,利用MTT检测不同种重组腺病毒感染下RCC细胞和正常细胞活性。结果细胞PCR反应结束后标准曲线斜率为0.984,标准曲线线性关系良好。根据样本及标准品的PCR反应循环数计算样本的mRNA含量。利用mastercycler ep realplex sample anylysis软件获得miR-138、miR-199含量。12例肾细胞癌组织miR-138、miR-199含量,显著低于正常肾组织(P<0.05)。在Ad-TRAIL-3MREs诱导ACHN细胞和L-02细胞中处理的ACHN细胞活化的caspase 3和PARP蛋白水平表达相对较高;与此相反,采用Ad-TRAIL-3MREs转染的L-02细胞caspase 3和PARP蛋白水平并没有活化。ATRAIL在降低癌细胞和正常细胞的生存率差异无统计学意义(P>0.05);相反,在RCC细胞中AD-TRAIL-3MREs能诱导细胞毒性。结论在RCC细胞中miR-138和miR-199水平相对较低,且能抑制正常细胞外源基因表达,TRAIL通过选择性表达能诱导RCC凋亡,且mRNA反应元件(MRE)对正常细胞无毒性。