mRNA展示技术

mRNA展示技术是一种新兴的体外筛选多肽和蛋白质的有力工具.在筛选过程中,mRNA与其编码的多肽或蛋白质共价结合,形成mRNA-蛋白质融合体,能在大容量的多肽文库(1013～1015)中筛选具有特定生物学功能的多肽和蛋白质.目前,mRNA展示技术主要应用于各种靶分子的多肽和蛋白质适体的发现以及蛋白质相互作用机制的阐明和分析.由于其自身的巨大发展潜力,mRNA展示技术具有更为广阔的应用前景.

展示技术在细胞膜穿透肽筛选、鉴定中的应用

以展示技术筛选不同功能的细胞膜穿透肽(CPP)是近年的研究热点。目前使用最广泛的展示技术是噬菌体展示和mRNA展示技术。本文将对噬菌体展示和mRNA展示技术的原理、方法和应用研究作一综述,并对近年来展示技术在筛选、鉴定CPP所取得的进展进行回顾和总结。

体外展示技术的研究进展

随着数十种模式生物基因组全序列测定的完成,生命科学的研究已经进入后基因组时代.在这个时代,由于全基因组的序列信息并不足以解释及推测细胞的各种生命现象,蛋白质才是细胞活性及功能的最终执行者,所以对核酸、蛋白质等生物大分子功能和相互作用的研究将会成为学术界的主流.体外展示技术作为一种新兴的多肽和蛋白质配体发现的重要工具,在基因和蛋白质的结构和功能研究方面有着不可或缺的作用.本文在对目前常用的几种体外展示技术的基本原理和应用进行综述的基础上,对其技术特点进行了比较,以期望能够帮助研究者根据不同的要求和目的选择适宜的方法.

利用mRNA差异显示技术分离甜菜M_(14)品系特异表达基因的cDNA片段

二倍体栽培甜菜与白花甜菜杂交、进一步回交而获得的单体附加系M14,其染色体组成中除了含有18条栽培甜菜染色体外,还附加有一条野生白花甜菜第9号染色体,该附加染色体通过母本的传递率为96.5%;单体附加系传递率如此高的原因是因为M14中有无融合生殖基因的存在。本实验采用mRNA差异展示技术对甜菜无融合生殖品系M14和正常有性生殖的二倍体栽培甜菜A2Y花蕾减数分裂时期的基因表达进行了差异分析。采用GT15A,GT15G,GT15C3种锚定引物,共筛选了20个随机引物,通过RT-PCR检测,获得了6个阳性差异表达的cDNA片段,应用NCBI的BLASTx软件对测序结果进行同源序列、相似序列检索,为进一步克隆无融合生殖基因提供侯选cDNA片段。