mRNA技术的发展对提升我国高水平研究型大学科技创新能力的启示

当前,高等学校作为国家基础研究的主力军,特别是高水平研究型大学作为国家战略科技力量的重要组成部分,在推动国家科技创新和经济发展中具有不可替代的作用,在助力高水平科技自立自强的使命担当中肩负着越来越重要的责任。文章以mRNA的技术突破为案例,通过简述mRNA技术的发展过程,分析mRNA技术背后基础研究的成功经验,总结了高等学校在该重大科技突破中所发挥的作用,为我国高水平研究型大学提升科技创新能力、建设国家战略科技力量、服务高水平科技自立自强,尝试提出符合高校发展的一些建议。

mRNA技术及其在动物疫病研究中的应用进展

mRNA技术是一种将人工合成的mRNA分子引入细胞内,并利用细胞自身的翻译机制将其翻译成蛋白质的技术。作为一种新兴的生物技术,mRNA技术已经在疫苗研究、基因治疗等多个领域取得了重要进展,并在新冠预防和传染病防治方面进行了临床应用,展现出了广阔的应用前景。通过对mRNA技术的发展历程,mRNA疫苗的设计、递送及特点,以及其在动物疫病研究的进展予以综述,分析其存在的问题,展望今后的发展方向,为相关研究提供参考。

mRNA技术荣获2023年诺贝尔生理学或医学奖

mRNA要成为药物或疫苗,科学家需要解决其会被免疫细胞识别并降解的问题。卡塔琳•卡里科和德鲁•魏斯曼荣获2023年诺贝尔生理学或医学奖,因为他们对核苷碱基修饰的发现,使研发出有效的新冠病毒mRNA疫苗成为可能。核苷碱基修饰是针对mRNA的“易容术”,以避免免疫细胞对人工合成的mRNA的监视和降解。当然,只有“易容术”是不够的,mRNA疫苗的成功,也离不开递送系统和对病毒基因序列的了解。mRNA技术有着更广阔的未来,不仅可用于预防病原体感染的疫苗,也可以用于癌症疫苗、基因编辑和细胞治疗。

利用mRNA技术制备人CD5蛋白多克隆抗体

[目的]体外合成人CD5(human CD5,hCD5)mRNA,以包封后的hCD5 mRNA作为免疫原,制备并鉴定兔抗hCD5多克隆抗体。[方法]用RT-PCR从Jurkat细胞中扩增出hCD5基因胞外域序列,构建重组质粒pT7kan hCD5,经体外转录和脂质体包封获得LNP-hCD5 mRNA,免疫日本大耳白兔制备多克隆抗体,用间接ELISA、Western Blot、流式细胞术等方法检测抗体的生物学活性。[结果]成功构建重组质粒pT7kan hCD5,动物免疫LNP-hCD5 mRNA后产生的多克隆抗体具有良好的生物学活性。血清抗体效价可达到1∶625000,Western Blot结果显示纯化后的抗体能特异性识别hCD5蛋白,流式鉴定显示纯化后的抗体能特异性识别天然形式的hCD5蛋白。[结论]用mRNA技术所制备的羊抗hCD5多克隆抗体具有高效价和特异性,为检测天然形式的hCD5蛋白奠定了基础。

用于养猪业的mRNA疫苗

世界瞬息万变,新技术令人兴奋,可能造就更好的事物,也可能会带来一些弊端,而且这些弊端可能只在后期才会显现出来。在新型冠状病毒肺炎期间,mRNA疫苗受到了欢迎,但人们也对其发展速度提出了许多疑问。这对养猪业意味着什么?是时候深入研究mRNA疫苗背后的技术了。

mRNA差异显示技术中特异条带回收方法的比较

目的:建立简化的mRNA差异显示技术中特异条带的回收方法。方法:用单个小鼠早期发育的胚胎构建mRNA差异显示技术,用一步法和煮沸法分别从银染的聚丙烯酰胺凝胶中回收差异显示的特异条带,并进行再扩增、回收、克隆及酶切鉴定。结果:两种不同的回收方法经过mRNA差异显示技术程序环节,证明其具有相同的实验效果。结论:应用简化的一步法和煮沸法对单胚构建的mRNA差异显示技术中的特异条带进行回收,具有有效性和可靠性。

用单胚mRNA差显技术克隆山羊早期胚胎发育相关基因

用单胚构建的mRNA差异显示技术,对体外培养的山羊早期2、4、8-16细胞期胚胎的基因表达进行了研究,并选择了一条在4细胞期胚胎特异表达的条带进行分析。结果表明:该片段与牛胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP3)基因具有88%的同源性。该基因通过调控IGFs的生物学活性而影响早期胚胎的生长发育,并具有促进细胞分裂和影响内分泌的作用,是羊早期胚胎发育过程中的重要调控因素。

mRNA差异显示技术在分离水稻基因中的应用

mRNA差异显示技术是分子生物学中分离g隆基因的有效技术。笔者叙述了mRNA差异显示技术的基本原理、存在的问题以及技术改进, 并主要阐述了该技术在分离水稻基因中的应用情况。

利用mRNA差异显示技术分离甜菜M_(14)品系特异表达基因的cDNA片段

二倍体栽培甜菜与白花甜菜杂交、进一步回交而获得的单体附加系M14,其染色体组成中除了含有18条栽培甜菜染色体外,还附加有一条野生白花甜菜第9号染色体,该附加染色体通过母本的传递率为96.5%;单体附加系传递率如此高的原因是因为M14中有无融合生殖基因的存在。本实验采用mRNA差异展示技术对甜菜无融合生殖品系M14和正常有性生殖的二倍体栽培甜菜A2Y花蕾减数分裂时期的基因表达进行了差异分析。采用GT15A,GT15G,GT15C3种锚定引物,共筛选了20个随机引物,通过RT-PCR检测,获得了6个阳性差异表达的cDNA片段,应用NCBI的BLASTx软件对测序结果进行同源序列、相似序列检索,为进一步克隆无融合生殖基因提供侯选cDNA片段。

大豆花芽mRNA差异显示技术体系反应条件的优化

为建立适用于大豆花芽的mRNA差异显示体系,以"吉农18"花芽突变体为材料,采用RNAiso Plus试剂盒提取了大豆花芽的总RNA,并对DDRT-PCR体系中的Mg2+、dNTP及Taq酶的用量进行了优化。试验结果表明:适合大豆花芽mRNA差异显示的PCR体系(25μL)为反转录产物用量2.0μL,锚定引物50 pmol/L,随机引物50 pmol/L,Mg2+1.5 mmol/L,dNTP 0.2 mmol/L,Taq酶1.5U。

mRNA差别显示技术及其在植物基因研究中的应用

mRNA差别显示技术是近年发展起来的一种用于分离和克隆正常与异常细胞之间差异表达基因的PCR方法 ,是目前筛选差异表达基因的有效方法之一 .自问世以来在动物遗传育种方面取得了很大的成绩 ,广泛用于人类及其他动物生长发育基因调控、基因克隆的研究 .在植物基因研究方面应用起步较晚 ,现已开始用于植物基因分析、杂种优势机理等方面的研究 .在此 ,该文介绍了mRNA差别显示技术的原理、步骤、优缺点及其发展 ,并对其在植物特异基因分离方面的研究及其应用前景做了探讨 .

利用mRNA差异显示技术(DDRT-PCR)研究大豆抗疫霉根腐病的分子机制

文章以中国优良大豆品种东农46及大豆疫霉优势生理小种1号菌株为材料,利用mRNA差异显示技术研究东农46与大豆疫霉根腐病菌非亲和互作中前后基因表达的差异,寻找并分离出与大豆疫霉根腐病抗病性相关的9条cDNA片段,通过这些差异片段的序列分析进一步阐述大豆对疫霉根腐病菌的分子抗病机制。

mRNA技术及其在传染病疫苗研发中的应用

mRNA疫苗技术是近年逐渐发展起来的疫苗新技术之一,其在稳定性、高效投递等方面的技术日趋成熟。mRNA疫苗在细胞内表达抗原,通过刺激免疫系统产生B、T细胞免疫应答等多种效应机制,可达到预防传染病的作用。同时由于其是全合成制备,生产工艺简单,具有快速应对诸如新型冠状病毒感染等突发传染病疫情的潜力。为了解传染病mRNA疫苗的开发与研究现状,本文重点对mRNA疫苗的结构特点、优势和挑战以及应用于传染病疫苗研究的现状进行了综述,为新型冠状病毒等传染病mRNA疫苗的研发提供一定借鉴。

利用mRNA差别显示技术分离盐胁迫下红树植物白骨壤耐盐相关cDNA

从福建龙海红树林自然保护区采集白骨壤的隐胎生果实 ,在实验室分别置于 0‰盐度海水和 5 0‰盐度海水进行沙培。分别取叶片 ,提取纯化RNA。通过锚定引物OligodT1 2 GC反转录和 8个 10核苷酸随机引物进行PCR扩增 ,经 8%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳后发现了 3个差异DNA片段只在高盐培养条件的白骨壤基因组中表达 ,而在无盐培养条件中没有出现。这 3个差异cDNA片段分别命名为csrg1(6 0 0bp)、csrg2 (5 5 0bp)、csrg3(4 80bp)。 3个差异cDNA片段的RNA杂交结果显示 ,只有csrg1片段存在明显差异 高盐中有杂交斑点 ,无盐中无杂交斑点 ;而其余 2个片段在高盐和无盐条件下都没有杂交斑点出现。从而表明csrg1就是耐盐相关cDNA。进一步将csrg1片段克隆 ,并进行DNA序列分析。全序列在GenBank中查询后 ,未发现相关同源片段。耐盐相关cDNA片段的获得 ,将为分离全长耐盐基因 。

mRNA差别显示技术研究进展及其在水稻中的应用

随着基因组计划的顺利实施,大量的生物信息被解析,分离和鉴定差异表达基因已成为分子生物学研究的热点。mRNA差别显示技术(DDRT-PCR)是目前有效筛选、分离差异表达基因的方法之一。就DDRT-PCR的基本原理、存在的问题及相应的改进方法作了简要概述。阐明了该技术在水稻生长发育、杂种优势、抗逆性基因研究中的应用、取得的成绩,最后对该技术在水稻突变体及抗药性上的应用前景做了有益探讨。

mRNA差异显示技术评述

真核生物mRNA差异显示技术自1992年建立以来,经过不断的改进与完善已经成为分子生物学领域的重要技术平台之一,为基因的差异表达及表达基因的克隆研究提供了强有力的工具。本文主要对mRNA差异显示技术的原理、优缺点及其近年来的改进与发展进行了介绍和评述。

mRNA差异显示技术及其在猪基因组研究中的应用

差异显示是一种快速分离、鉴定不同细胞类型基因表达差异的有效方法。此技术自建立以来便广泛应用于比较研究中 ;

mRNA技术应对病毒传染病的研究进展

信使核糖核酸(messenger RNA,mRNA)疫苗和抗体是近年来兴起的一种新型疫苗和抗体技术。与传统疫苗相比,mRNA疫苗具有安全性高、均衡免疫性好、研发周期短、生产成本低等优势,mRNA抗体比其他形式递送的抗体在体内发挥生物学效应的时间更早也更持久。随着mRNA修饰与递送技术的快速发展,mRNA技术迅速走向成熟,在肿瘤治疗、病毒传染疾病的预防和治疗等方面展现出广阔的应用前景,特别是新型冠状病毒mRNA疫苗以创纪录的速度完成研发并成功应用,为未来mRNA技术的推广铺平了道路。本文综述了mRNA技术领域的重要突破,重点关注mRNA疫苗和抗体在应对病毒传染病中的重大进展,并展望了未来该技术在抗病毒感染领域的研究趋势。

荧光标记mRNA差异显示技术在分离食管癌相关基因片段中的应用

目的 :以荧光标记的mRNA差异显示技术分离食管癌及其正常食管粘膜组织相关的差异基因片段。方法 :结合GenomyxLRTM DNA测序 /差异显示系统及GenomyxSCTM 荧光图象扫描系统 ,以及配套的FluoroDD和HI EROGLYPHmRNAProfileKit,采用荧光标记的mRNA差异显示技术进行检测。结果 :从人食管癌及正常食管粘膜组织间 ,同时直接分离出了相关的癌基因或抑癌基因片段 74条。结论 :该技术方便、快捷 。