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施氏假单胞菌75 mRNA差异显示PCR方法的建立
1
作者
颜穗
冉雪琴
+1 位作者
王嘉福
齐芬芳
《贵州农业科学》
CAS
北大核心
2013年第7期129-131,共3页
为丰富原核生物基因表达差异的研究方法,将应用于真核生物中的差异显示PCR方法应用于原核生物基因差异表达的研究,以1株有机磷农药乐果的降解菌施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzer)75为研究材料,以5′末端依赖性的RNA外切酶(Terminator E...
为丰富原核生物基因表达差异的研究方法,将应用于真核生物中的差异显示PCR方法应用于原核生物基因差异表达的研究,以1株有机磷农药乐果的降解菌施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzer)75为研究材料,以5′末端依赖性的RNA外切酶(Terminator Exonuclease)降解其中的16S rRNA和tRNA,并用随机引物替代锚定引物,改良真核生物差异显示PCR,建立原核生物mRNA差异显示PCR的试验体系。以LB培养基培养的菌株为对照组,以无机盐培养基(乐果为唯一碳源)为试验组。结果表明:提取总RNA,通过5′-磷酸基团依赖的核酸外切酶降解法获得mRNA,经逆转录,用双随机引物扩增获得253个差异基因,16S rRNA、tRNA的污染较少,其中之一为硫酸盐运输蛋白基因。
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关键词
施氏假单胞菌
mrna
差异显示PCR技术
mrna纯化
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题名
施氏假单胞菌75 mRNA差异显示PCR方法的建立
1
作者
颜穗
冉雪琴
王嘉福
齐芬芳
机构
贵州大学生命科学学院
贵州大学动物科学学院
出处
《贵州农业科学》
CAS
北大核心
2013年第7期129-131,共3页
基金
贵州省培育项目"动物及微生物有机磷降解酶基因的分离
鉴定及基因工程研究"(黔教科2007-001)
+1 种基金
贵州省创新人才团队专项"贵州省动物遗传育种与生物技术科技创新人才团队"(黔科合人才团队2009-4006)
贵州省自然科学基金"猪对氧磷脂酶调节脂肪代谢的分子机制"(黔科合J字2008-2129)
文摘
为丰富原核生物基因表达差异的研究方法,将应用于真核生物中的差异显示PCR方法应用于原核生物基因差异表达的研究,以1株有机磷农药乐果的降解菌施氏假单胞菌(Pseudomonas stutzer)75为研究材料,以5′末端依赖性的RNA外切酶(Terminator Exonuclease)降解其中的16S rRNA和tRNA,并用随机引物替代锚定引物,改良真核生物差异显示PCR,建立原核生物mRNA差异显示PCR的试验体系。以LB培养基培养的菌株为对照组,以无机盐培养基(乐果为唯一碳源)为试验组。结果表明:提取总RNA,通过5′-磷酸基团依赖的核酸外切酶降解法获得mRNA,经逆转录,用双随机引物扩增获得253个差异基因,16S rRNA、tRNA的污染较少,其中之一为硫酸盐运输蛋白基因。
关键词
施氏假单胞菌
mrna
差异显示PCR技术
mrna纯化
Keywords
Pseudomonas stutzeri
DDRT-PCR for prokaryote
mrna
purification
分类号
Q785 [生物学—分子生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
施氏假单胞菌75 mRNA差异显示PCR方法的建立
颜穗
冉雪琴
王嘉福
齐芬芳
《贵州农业科学》
CAS
北大核心
2013
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