厚壳贻贝mTOR信号通路关键基因在幼虫生长发育中的表达模式分析

在水产养殖领域,对厚壳贻贝(Mytilus coruscus)的生长发育机制进行深入探讨,可为实现生长发育分子调控奠定理论基础。为了探究厚壳贻贝幼虫生长与发育差异基因的表达模式,本研究采用转录组测序和实时荧光定量PCR分析技术,对与生长特征相关的基因和分子途径的表达差异进行了初步研究。研究重点关注哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian Target Of Rapamycin,mTOR)信号通路在厚壳贻贝幼虫生长和发育中的影响及调节作用。通过对不同发育时期(担轮幼虫期、D形幼虫期、壳顶幼虫期、眼点幼虫期和稚贝期)的基因表达模式进行分析,结果表明mTOR信号通路可能在厚壳贻贝幼虫的生长发育中扮演一定角色,并成功鉴定出7个与生长发育相关的关键基因。随着发育过程的推进,mTOR信号通路基因在不同发育时期的表达呈现出动态变化。其中,PI3K、TSC1/2和mTOR基因的整体表达变化趋势为先上升后下降再上升,IGFI变化趋势为先上升后下降,而EIF4B、RPS6KB和AKT基因表达则整体呈现下降趋势。这一差异化的基因表达模式反映了mTOR信号通路可能在厚壳贻贝幼虫不同发育时期中对细胞命运和生物学功能的调控,从而对其生长发育产生影响。因此,我们对mTOR信号通路关键基因在厚壳贻贝幼虫生长发育中的表达模式进行了初步探究。这些基因在调控厚壳贻贝幼虫的分子功能和生长特征方面具有重要作用,为深入理解海洋双壳动物的生理适应、代谢过程和生长变异提供了基础数据。

LncRNA TUG1靶向AKT/mTOR信号通路促进卵巢癌细胞增殖和转移的研究

目的探究长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)通过介导蛋白激酶B/磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(AKT/mTOR)信号通路对卵巢癌细胞增殖和转移的影响及可能机制。方法收集112例行卵巢癌根治术患者的卵巢癌组织及癌旁组织,采用RT-PCR检测两组织、卵巢癌细胞(OC3,SKOV3,A2780,HO-8910)及人正常卵巢上皮细胞IOSE80中TUG1表达。选择SKOV3细胞并分为si-TUG1组(转染TUG1 shRNA)和NC组(转染空载体质粒),采用CCK8、流式细胞术、划痕实验检测2组细胞增殖水平、细胞周期及细胞转移能力,Western blot检测2组蛋白激酶B(AKT)、磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、p-AKT、p-mTOR、细胞周期相关蛋白(Cyclin D1,Cyclin B1,CDK6)、转移相关蛋白(MMP-2,Snail)的相对表达量。结果RT-PCR检测结果显示,卵巢癌组织中TUG1表达高于癌旁组织(P<0.05),卵巢癌细胞OC3,SKOV3,A2780,HO-8910中TUG1表达均高于IOSE80细胞,且SKOV3中TUG1表达最高(P<0.05)。si-TUG1组细胞增殖水平、G_(2)/M期比例、细胞迁移距离均低于NC组,细胞G_(0)/G_(1)期比例高于NC组(P<0.05);si-TUG1组p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR、Cyclin D1、Cyclin B1、CDK6、MMP-2,Snail蛋白表达低于NC组(P<0.05)。结论下调lncRNA TUG1表达能降低卵巢癌细胞增殖、转移能力,这可能与其能抑制AKT/mTOR信号通路有关。

黄颡鱼雌雄性的生理生化和mTOR信号通路基因表达分析

同龄的黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)呈现明显的两性生长差异,即雄性个体的体长、体重皆大于雌性个体。而mTOR信号通路在细胞生长、发育以及蛋白合成过程中起重要作用。为了了解黄颡鱼两性差异的营养生长机制与mTOR信号通路之间的关联性,本试验首先在生理生化特性方面对雌、雄黄颡鱼的肌肉营养成分进行了比较分析。结果表明,在雌、雄黄颡鱼的比较分析中,除了两者的水分、粗蛋白、粗脂肪含量差别不大以外,在矿物元素、氨基酸组成、蛋白的氨基酸组成和脂肪酸组成等方面,雌性黄颡鱼肌肉的营养品质相对雄性更优。针对mTOR信号通路主要基因开展实时荧光定量PCR分析,结果显示,除性腺组织外,AKT1、AKT2、AKT3、mTOR、S6KA、S6KB、4E-BP1基因在雄性黄颡鱼的肌肉、肝、肾和心脏组织中的表达均显著高于雌性,这可能与雌雄黄颡鱼生长差异有关。本研究为进一步探索黄颡鱼两性生长差异的分子机制奠定了试验基础。

mTOR基因多态性与儿童急性白血病的相关性分析

目的探讨mTOR基因SNP位点（rs2295080）的多态性与中国中部地区儿童白血病以及白血病危险度的相关性。方法采取病例对照研究方法,分别选取180例白血病患儿,其中急性淋巴细胞白血病（ALL）133例、急性粒细胞白血病（AML）47例,296例健康儿童（对照组）作为研究对象。利用PCR-RFLP方法测定SNP位点多态性分布,并进行统计分析。结果 ALL组、AML组以及对照组之间三种基因型分布差异有统计学意义（χ^2=11.04,P=0.026）;但三组之间等位基因G的频率分布差异无统计学意义（χ^2=5.44,P=0.066）。ALL组中GG基因型患病风险是对照组的3.180倍（OR=3.180,95%CI：1.416-7.143,P=0.004）;G等位基因是患ALL的危险因素（OR=1.456,95%CI：1.052-2.015）。AML组中GG基因型患病风险是对照组的3.204倍（OR=3.204,95%CI：1.109-9.253）;但G等位基因频率在AML组与对照相之间差异无统计学意义（OR=1.294,95%CI：0.792-2.115）。ALL患儿标危、中危和高危三组之间基因型分布差异无统计学意义（χ^2=2.16,P=0.340）。结论 mTOR基因SNP位点（rs2295080）的多态性可能与ALL的易感性相关,G等位基因为风险因子。

赖氨酸对原代奶牛乳腺上皮细胞中酪蛋白及mTOR信号通路相关基因表达的影响

为了在探究单一添加不同浓度的赖氨酸对原代奶牛乳腺上皮细胞的增殖,以及mTOR信号通路介导的酪蛋白合成相关基因的影响.试验用厄尔平衡溶液（EBSS）代替正常培养基来处理原代奶牛乳腺上皮细胞,在此基础上依次添加不同浓度的赖氨酸,采用MTT法检测细胞12h和24h的增殖和利用qRT-PCR技术检测4个编码酪蛋白基因和8个mTOR信号通路中与乳蛋白合成翻译相关基因的相对表达量.结果表明：添加赖氨酸12h,浓度为0.5～24mmol/L时,原代奶牛乳腺上皮细胞增殖数量增加（P=0.05）;添加赖氨酸24h,浓度为0.5～8mmol/L时,细胞增殖数量增加（P〈0.01）.当赖氨酸的添加浓度为0.5～16 mmol/L时,CSN1S1、CSN1S2、CSN2和CSN3基因表达均显著上调（P〈0.01）.当赖氨酸添加量为0.5～16mmol/L时,mTOR和raptor基因的表达量显著上调（P〈0.05）.在添加不同浓度的赖氨酸时,下游通路信号因子S6K1、4EBP1和eEF2基因表达均显著上调（P〈0.01）;rps6基因表达上调,eIF4E基因表达下调,但差异均不显著.以上结果表明,补充赖氨酸能显著促进乳腺上皮细胞中酪蛋白的合成,这一过程与mTOR信号通路介导蛋白质合成相关.

反义mTOR基因局部转染对移植静脉内膜增生的影响

目的:观察反义雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因转染对移植静脉内膜增生的影响。方法:聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)和聚乙烯醇(PVA)包载制备纳米级粒子混合物。建立自体静脉移植模型,随机分成转基因组、空载体组、对照组。转基因组转染纳米粒子包载的反义mTOR基因,空载体组转染纳米粒子包载的空载体,对照组不予特殊处理。分别于术后3、7、14、28d取材,常规HE、弹力纤维VG染色,RT-PCR、免疫组织化学染色、Western blot检测mTOR基因的mRNA及蛋白的变化,TUNEL法观察血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的动态变化。结果:转基因组内膜中mTOR蛋白产物表达较其他组明显减少(P<0.05);转基因组内膜增生程度在术后7、14、28d较其他组明显减少(P<0.01);转基因组凋亡细胞较其他组明显增高(P<0.05)。结论:反义mTOR基因的表达能够有效抑制自体移植静脉内膜的增生,促进VSMC的凋亡。

PTEN对K562细胞mTOR调控的研究

目的:探讨肿瘤抑制基因PTEN在人慢性粒细胞白血病细胞株K562中对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)的调控作用,以及雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对K562细胞增殖抑制的影响。方法:通过实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantification PCR,RFQ-PCR)法检测甲磺酸伊马替尼(imatinib mexylate)干预K562细胞后BCR/ABL、PTEN、mTOR mRNA的表达水平及相互关系;Western印迹法检测甲磺酸伊马替尼干预和以腺病毒为载体感染野生型PTEN(Ad-PTEN-GFP)后K562细胞PTEN、Akt和p-Akt的蛋白表达水平;用MTT和FCM方法检测RAPA对不同腺病毒感染组K562细胞增殖及凋亡的影响。结果:格列卫干预K562细胞后,BCR/ABL和mTOR mRNA表达下调,PTEN mRNA表达上调;与感染Ad-GFP组相比,感染Ad-PTEN-GFP组的mTOR mRNA表达下调;Ad-PTEN-GFP感染与10nmol/L RAPA联合作用于K562细胞能够发挥协同作用,对K562细胞的增殖抑制率明显高于单独作用组。结论:PTEN是mTOR的上游调控基因,能够抑制mTOR的表达。RAPA与野生型PTEN一起可以协同抑制K562细胞的增殖。

纳米粒子介导反义mTOR基因转染抑制移植静脉内膜增生

目的观察以纳米粒子为载体的外源性反义雷帕霉素靶蛋白(mTOR)基因局部转染对移植静脉内膜增生的影响。方法应用聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)和聚乙烯醇(PVA)包载mTOR基因,制备纳米级粒子混合物。建立自体静脉移植模型72只,随机分成转基因组(转染以纳米粒子为载体的反义mTOR基因),空载体组(单纯转染纳米粒子包载的空载体)和对照组(不予特殊处理)。分别于术后3,7,14,28d取材。检测mTOR基因的mRNA及蛋白产物表达,以及血管平滑肌细胞(VSMC)凋亡的动态变化。结果转基因组内膜中mTOR基因的mRNA及蛋白产物表达较其他两组明显减少(P<0.05);转基因组内膜增生厚度于7,14,28d较其他组明显减少(P<0.01);转基因组凋亡细胞较其他组明显增高(P<0.05)。结论纳米粒子可以作为转基因载体。反义mTOR基因的表达能有效抑制自体移植静脉内膜的增生及促进VSMC凋亡。

miR-26a抑制ST3GAL6基因介导mTOR信号通路对小鼠Lewis肺癌细胞增殖凋亡的作用机制

目的:探究miR-26a靶向调控ST3GAL6基因介导mT OR信号通路对小鼠Lewis肺癌细胞增殖凋亡的作用机制。方法:构建肺癌小鼠模型,将小鼠分为正常组和模型组;免疫组化检测ST3GAL6在肺组织中的表达情况,qRT-PCR法检测miR-26a在组织中的表达;细胞分为空白组、阴性对照组、miR-26a mimic组、miR-26a inhibitor组、si-ST3GAL6组、miR-26a inhibitor+si-ST3GAL6组和miR-26a mimic+RAD001(mT OR抑制剂)组;qRT-PCR法检测细胞中miR-26a和ST3GAL6 mRNA的表达情况;MTT法和流式细胞术分别检测各组细胞的增殖和凋亡情况;Western blot法测定各组细胞ST3GAL6、p-mT OR、Akt蛋白相对表达量。结果:miR-26a和ST3GAL6在肺癌小鼠肺癌组织中均高表达(均P <0. 05)。与空白组相比,miR-26a mimic组ST3GAL6 mRNA及蛋白表达上升,Akt、p-mT OR蛋白表达上升,细胞增殖率上升、凋亡率下降(均P <0. 05);而miR-26a inhibitor组、si-ST3GAL6组和miR-26a inhibitor+si-ST3GAL6组ST3GAL6mRNA及蛋白表达下调,Akt、p-mT OR蛋白表达下降,细胞增殖率下降、凋亡率上升(均P <0. 05)。同时,miR-26a表达在miR-26a mimic组和miR-26a mimic+RAD001组中上升,miR-26a inhibitor组和miR-26a inhibitor+si-ST3GAL6组中下降(均P <0. 05)。结论:miR-26a下调ST3GAL6基因,抑制mT OR信号通路活化,抑制肺癌细胞增殖及促进细胞的凋亡。

mTOR基因转染对NIH3T3成纤维细胞增生的影响

目的探讨mTOR基因转染对NIH3T3成纤维细胞增生的影响。方法运用电穿孔法将pcDNA3-mTOR质粒转染NIH3T3成纤维细胞,经G418筛选抗性克隆,RT-PCR和Western印迹分析检测转染组和对照组细胞mTOR mRNA与蛋白的表达,MTT方法检测细胞增生。结果转染组细胞mTOR mRNA和蛋白质的表达显著增强(P<0.01);MTT法检测转染组光吸收值显著大于对照组(P<0.01);结论mTOR基因转染成纤维细胞可获稳定表达,并明显促进成纤维细胞增生。

mTOR反义RNA真核表达载体的构建及其在血管平滑肌细胞中的表达

目的:构建哺乳类动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的反义RNA真核表达载体,观察其对血管平滑肌细胞(VSMC)功能的影响。方法:提取人VSMC总RNA,反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)扩增mTOR基因cDNA序列,经pGEM-T载体克隆后双酶切,将cDNA序列反向插入绿色荧光蛋白表达载体pEGP-C1,构建mTOR基因反义RNA真核表达载体。转染VSMC,采用W estern b lot法检验反义表达载体对mTOR蛋白表达的影响,流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果:经RT-PCR获得664 bp产物,T载体克隆后,经DNA测序,确定该片段为mTOR基因cDNA,进而构建反义RNA真核表达载体pEGFP-C1-mTOR,测序证明序列正确后转染VSMC,证实其能够显著抑制mTOR蛋白产物表达,VSMC的分裂、增殖过程受阻。结论:已经成功构建mTOR基因的反义RNA真核表达载体。

PTEN基因通过Akt-mTOR对乳腺癌细胞增殖与凋亡的影响

目的:探讨PTEN基因通过Akt-mTOR对乳腺癌细胞增殖与凋亡的影响。方法:人乳腺癌MDA-MB-231细胞随机分为两组:pcDNA3.0组与pcDNA3.0-PTEN组,分别转染pcDNA3.0质粒、pcDNA3.0-PTEN质粒2μg,转染48 h收集细胞。采用CCK-8法检测细胞存活率,双染法检测细胞凋亡,Western-blot检测细胞蛋白表达。结果:pcDNA3.0-PTEN组的细胞存活率低于pcDNA3.0组,对比差异有统计学意义(P<0.05)。与pcDNA3.0组对比,pcDNA3.0-PTEN组的细胞凋亡率显著上升,对比差异有统计学意义(P<0.05)。pcDNA3.0-PTEN组的PTEN蛋白表达量高于pcDNA3.0组,Akt、mTOR蛋白表达量低于pcDNA3.0组,对比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PTEN基因过表达可通过抑制Akt-mTOR信号通路,提高乳腺癌细胞凋亡指数,降低细胞增殖活性,从而发挥抑癌作用。

RNA干扰T细胞mTOR表达后诱导T细胞分化对小肠移植耐受的影响

目的:探讨RNA干扰T细胞mTOR表达后诱导T细胞分化对小肠移植免疫耐受的影响。方法:通过shRNA干扰T细胞mTOR表达后,诱导T细胞向Foxp3+Tregs细胞分化。对60只雄性SD大鼠施行30次异位节段小肠移植,随机分为A组(mTOR-shRNA转染组)、B组(mTOR抑制剂RAD001干预)和C组(移植对照组、注射生理盐水)。观察小肠移植后受体大鼠的体重变化、生存时间及移植小肠病理切片评估排斥反应程度。结果:构建的mTOR-shRNA质粒表达载体在体外能有效地抑制大鼠骨髓细胞mTOR基因mRNA和蛋白的表达。RNA干扰大鼠T细胞mTOR基因可调节T细胞的定向分化,Tregs细胞增多,而Th17细胞分化减少。抑制mTOR基因可诱导大鼠异位小肠移植的免疫耐受,减轻受体抗移植物的排斥反应,显著延长移植物的存活时间。结论:RNA干扰T细胞mTOR表达后诱导T细胞分化对小肠移植耐受的研究为mTOR抑制剂(RAD001)在移植后的临床应用提供理论和实验依据。

mTOR基因rs2295079和rs2295080位点多态性与川崎病的关联性

目的:检测哺乳动物雷帕霉素蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)基因rs2295079(G>C),rs2295080(C>A)位点多态性与川崎病(Kawasaki disease,KD)易感性及冠状动脉损伤(coronary artery lesion,CAL)的关系。方法:采取病例对照研究方法,选取100例KD患儿(KD组),其中出现CAL者20例(KD-CAL组),未出现CAL者80例(KD-WO组);100例健康儿童作为对照组。检测2个位点的多态性分布。结果:在KD组与对照组及KD-CAL组与KD-WO组中,rs2295079(G>C),rs2295080(C>A)位点的等位基因频率与基因型频率分布差异无统计学意义(P>0.05)。结论:未发现mTOR基因rs2295079(G>C),rs2295080(C>A)位点的多态性与KD易感性及CAL存在关联性。

乳腺癌mTOR基因和蛋白表达与侵袭转移的关系

目的探讨mTORmRNA及编码蛋白在人乳腺浸润性导管癌组中的表达水平及其与侵袭、转移的关系。方法采用原位杂交法和免疫组化(PV-9000)法分别检测65例乳腺浸润性导管癌及32例癌旁正常乳腺组织中mTORmRNA及蛋白水平的表达情况。结果 mTORmR NA在乳腺浸润性导管癌中的阳性表达率(69%,45/65)高于癌旁正常乳腺组织中的阳性表达率(31%,10/32),差异有统计学意义(P<0.01);mTOR蛋白在乳腺浸润性导管癌中的阳性表达率(68%,44/65)高于癌旁正常乳腺组织中的阳性表达率(25%,8/32),差异有统计学意义(P<0.01)。同时,mTORmRNA和蛋白表达水平与乳腺浸润性导管癌的淋巴结转移呈显著正相关(P<0.05),且原位杂交和免疫组化两种检测方法的结果呈显著关联(P<0.05)。结论 mTOR信号通路的激活和异常表达,可能与乳腺癌的侵袭和转移有关,且检测mTORmRNA及蛋白表达水平可作为评价乳腺癌预后的重要指标。

基因c06orf223通过PI3K/AKT/mTOR信号转导促进大肠癌进展的分子机制研究

目的探究基因c06orf223通过PI3K/AKT/mTOR信号转导促进大肠癌进展的机制。方法选择手术切除的24例新鲜的大肠癌组织及其癌旁组织,正常人肠上皮细胞系作为空白对照组确定PI3K/AKT/mTOR信号通路在组织和细胞中激活情况;通过基因转染的方法下调或上调c06orf223表达,分析c06orf223在大肠癌细胞PI3K/AKT/mTOR表达的作用,同时抑制PI3K/AKT/mTOR信号,判断大肠癌细胞增殖和侵袭能力。结果3组PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达情况比较,正常肠细胞系最高,大肠癌组织最低(P<0.05)。过表达大肠癌细胞中的PI3K、AKT和mTOR的磷酸化水平较大肠癌细胞升高(P<0.05)。下调基因大气癌细胞中的PI3K、AKT和mTOR的磷酸化水平较大肠癌细胞降低(P<0.05)。大肠癌细胞经过1μm的AKT信号抑制剂处理以后,经Transwell小室检测抑制组细胞增殖能力较空白对照组下降(P<0.05)。大肠癌细胞经过1μm的AKT信号抑制剂处理以后,经Transwell小室检测抑制组细胞侵袭数目较空白对照组降低(P<0.05)。结论基因c06orf223可以通过调控PI3K/AKT/mTOR信号通路降低大肠癌细胞的增殖和侵袭能力。

基于PI3K/AKT/mTOR信号通路的胶质母细胞瘤复发标记物的筛选

目的:基于TCGA大数据分析,筛选能够有效预测胶质母细胞瘤(GBM)复发的生物标志物。方法:下载TCGA数据库中GBM患者的mRNA表达谱和临床病理参数数据集,采用基因集富集分析(GSEA)和基因集变异分析(GSVA)两种分析方法分析复发和未复发患者之间的差异信号通路,利用Cox回归分析从差异信号通路中筛选出与总体生存相关的基因,基于筛选出的基因表达水平的线性组合并经Cox回归系数加权处理建立风险评分模型。采用Cox回归分析评估风险评分模型能否预测GBM复发。结果:GSEA和GSVA分析结果显示,PI3K/AKT/mTOR信号通路为目标通路。以总生存为终点事件,经Cox回归分析,从该通路中筛选出5个基因用于风险评分模型的构建。风险评分=0.3771×MAP2K3基因表达水平+(-0.2690)×MAP2K6基因表达水平+(-0.4887)×MAPK1基因表达水平+(-0.3256)×PTEN基因表达水平+0.7945×RAC1基因表达水平。Cox回归分析结果表明,该风险评分模型可以预测GBM复发,HR(95%CI)为1.593(1.153~2.200)。结论:成功构建了基于PI3K/AKT/mTOR信号通路的GBM复发风险评分模型。

猪miR-199a-3p对mTOR基因表达的调控

通过生物信息学预测miR-199a-3p与mTOR-3′UTR的结合位点,人工合成猪mTOR-3′UTR及突变型片段克隆至双荧光素酶载体上,构建野生型(psiCHECK-2-W-mTOR-3′-UTR)和突变型(psiCHECK-2-M-mTOR-3′-UTR)双荧光素酶报告质粒。给PK-15细胞分别转染miR-199a-3p mimics、negative control和mTOR-3′-UTR野生型/突变型双荧光素酶报告载体,用双荧光素酶试剂盒检测荧光素酶活性,分别采用RT-qPCR和Western blot检测mTOR基因的mRNA和蛋白表达水平。结果表明,将含mTOR-3′-UTR的野生型和突变型双荧光素酶报告质粒与miR-199a-3p mimic共转染PK-15细胞,野生型报告质粒表达的荧光素酶活性显著低于其阴性对照组(P<0.05);转染miR-199a-3p mimics能显著下调mTOR基因mRNA和蛋白的表达(P<0.05),而转染miR-199a-3p Inhibitor组和Inhibitor-NC组相比,mTOR基因蛋白表达差异不显著(P>0.05)。成功构建了猪野生型及突变型mTOR-3′-UTR双荧光素酶报告质粒,通过双荧光素酶试验、RT-qPCR及Western blot证实miR-199a-3p与猪mTOR-3′-UTR存在靶向调控关系。

PI3K/Akt/mTOR信号通路及其相关基因突变与子宫内膜癌靶向性药物治疗的研究进展

子宫内膜癌(EC)是最常见的女性生殖道恶性肿瘤之一,其发生发展的分子生物学机制十分复杂。近年来研究发现,磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/mTOR)信号通路调节异常与子宫内膜癌密切相关。PI3K/Akt/mTOR信号通路中的多种受体及激酶的突变和异常激活,可能成为子宫内膜癌治疗的靶点。

自噬相关基因mTOR信号通路在系统性红斑狼疮发病机制中的作用

目的自噬相关基因mTOR信号通路在系统性红斑狼疮(SLE)发病中的机制研究较少。文中旨在探讨自噬相关基因mTOR信号通路在SLE发病机制中的作用。方法选择2018年2月至2019年3月海南医学院第二附属医院风湿免疫科72例SLE患者(SLE组),另选取67例同期健康体检者为对照组。采用免疫印迹技术测定ENA抗体谱,包括:抗SSA、抗SSB、抗Sm、抗nRNP抗体、ds-DNA抗体等。采用IMMAGE蛋白分析仪测定IgG、IgA、IgM及补体C3、C4。采用实时荧光PCR技术测定自噬相关基因mTOR信号通路,分析2组自噬相关基因mTOR信号通路(PI3K mRNA、Akt mRNA、mTOR mRNA)与体液免疫水平的相关性。结果SLE组IgG、IgA、IgM水平明显高于对照组(P<0.05);补体C3、C4水平明显低于对照组(P<0.05)。SLE组患者PI3K mRNA、Akt mRNA、mTOR mRNA表达水平(0.52±0.06、0.61±0.08、0.48±0.05)明显低于对照组(1.00±0.09、0.89±0.07、0.95±0.08),差异有统计学意义(P<0.05)。SLE组PI3K、Akt、mTOR信号与IgG、IgA、IgM水平,及抗ds-DNA、SSA、SSB、Sm、nRNP抗体呈负相关(P<0.05);与补体C3、C4水平呈正相关(P<0.05)。结论SLE患者自噬相关基因mTOR信号通路呈抑制状态,其与免疫球蛋白和补体水平紧密相关。因此,检测自噬相关基因mTOR信号通路将有助于评估SLE患者病情状态。