mTR反义寡核苷酸在体外培养的A型精原细胞中的分布特点及稳定性研究

目的 :探讨鼠端粒酶RNA (mousetelomeraseRNA ,mTR)基因的反义寡核苷酸 (antisenseoligodeoxynucleotide,ASODN)在体外培养的A型精原细胞中的分布特点及稳定性。 方法 :以脂质体Lipofec tAMINE 2 0 0 0 (LF 2 0 0 0 )介导或直接将硫代磷酸修饰的端粒酶mTR ASODN转染体外分离纯化的Sprague dawley(SD)鼠A型精原细胞 ,在荧光显微镜下对各实验组进行连续观察、摄片、分析。结果 :在脂质体介导下 ,荧光细胞数目显著增加 ,1h后绝大多数细胞迅速荧光积聚于细胞核 ,1～ 4h后 ,细胞核内荧光强度进一步增强 ,4h后细胞内荧光减弱直至消失。而非修饰型mTR ASODN在直接转染或脂质体介导下均发现荧光在 3h后减弱甚至消失。结论 :LF 2 0 0 0可增加mTR ASODN转染A型精原细胞的数量 ,同时使其在细胞核内分布聚集明显。硫代修饰型mTR ASODN在精原细胞内具有更好的稳定性。