马度米星铵对成肌细胞转录组和超微结构的影响

探究马度米星铵对成肌细胞基因表达和超微结构的影响。马度米星铵处理C2C12细胞后,于细胞实时分析仪中记录细胞生长情况;利用Illumina HiSeq平台进行转录组测序,筛选差异表达基因并进行基因本体富集分析;显微镜下观察细胞空泡情况并拍照;透射电镜下观察拍照细胞超微结构。结果表明,马度米星铵抑制C2C12细胞生长,呈浓度和时间相关性;1μM马度米星铵处理细胞8 h后,差异表达基因共2450个,其中下调基因为1411个,上调基因1039个;基因本体分析发现,差异表达基因显著富集到空泡、DNA修复、转移酶活性正调控等;细胞内空泡显著增加;1μM马度米星铵处理细胞24 h后,细胞器明显肿胀、线粒体嵴结构髓样变、粗面内质网表面附着核糖体脱颗粒。由此可知,马度米星铵体外可诱导C2C12细胞空泡化,破坏细胞器结构,抑制细胞生长,从而导致其骨骼肌成肌细胞毒性作用,干预细胞空泡化是预防和治疗马度米星铵中毒的重要途径。

10株柔嫩艾美耳球虫对四种药物的抗药性检测

从4省市10个鸡场分离到10株柔嫩艾养耳球虫，使用AA肉鸡按每只鸡接种10万卵囊，对马杜霉素、百球清、盐霉素和拉沙里菌素的敏感性进行了测试。依照最适抗球虫活性百分率、相对卵囊产量和病变记分减少率3项指标，检测结果显示：30％虫株对马杜霉素和百球清有抗药性，40％虫株对拉沙里菌素有抗药性，70％虫株对盐霉素有抗药性，80％虫株对两种或两种以上的药物有抗药性。虫株的抗药谱带有明显的地方性。此外，对抗药虫株的鉴定标准进行了讨论。

马杜霉素在鸡组织中残留消除及临床毒性的研究

:本文报道以 3 0、5 0、7 0和 9 0mg/kg马杜霉素剂量水平添加到饲料中饲喂AA肉鸡 ,研究马杜霉素对肉鸡的毒性作用及其在鸡组织中的残留消除。从临床症状、增重与饲料转化、死亡率、血清生化参数以及组织病理学等方面研究结果表明 ,饲料中添加 3 0～ 5 0mg/kg剂量马杜霉素对肉鸡是安全的 ,未见任何毒副作用 ,而 7 0～ 9 0mg/kg剂量则引起肉鸡中毒 ,中毒表现为 ,增重和饲料转化率明显下降 ,血清AST异常升高 ,心脏和肝脏出现病理变化。残留消除研究表明 ,马杜霉素主要残留于肉鸡的脂肪和肝脏 ,其次是肾脏 ,肌肉中残留最少。马杜霉素以 5 0mg/kg剂量添加于饲料中饲喂肉鸡 ,停药 2～ 3d 。

海南霉素对鸡球虫病的预防和治疗效果评价

为评价海南霉素对鸡球虫病的防治效果 ,作者用海南霉素和马杜拉霉素分别进行了抗鸡球虫病的预防和治疗试验。二个试验各设 7个组 ,每组 12羽 17日龄 AA肉鸡 ;在 18日龄 ,除不感染组外 ,每羽鸡接种柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊 6万 ;药物组分别在感染前 1天和感染后第 4天 ,开始投服含药饲料 ;感染后第 8天结束试验 ,以抗球虫指数、病变记分、卵囊数、粪便记分等作为试验指标。结果在预防试验中 ,海南霉素的平均抗球虫指数为 182 ,病变记分减少 96 % ,粪便和盲肠卵囊数减少 98% ,粪便记分为 0 ;在治疗试验中 ,海南霉素的平均抗球虫指数为 14 6 ,病变记分减少 33% ,粪便和盲肠卵囊数减少 5 3%。海南霉素是一种高效抗鸡球虫病药物 。

马杜霉素在鸡组织中残留检测方法的研究 Ⅰ酶联免疫吸附测定(ELISA)

本文用混合酸酐法和活化酯法合成４种马杜霉素结合抗原。用其中一种作免疫原，免疫家兔产生抗体；用其余三种作包被原，探讨不同包被原用于ＥＬＩＳＡ检测马杜霉素残留时，对其灵敏度（Ｉ５０）和方法回收率的影响。试验结果表明，马杜霉素结合抗原免疫家兔制备的抗体对马杜霉素具有很高的特异性、亲合性和选择性。在间接竞争ＥＬＩＳＡ中，使用Ｍ－Ｃ６－ＯＶＡ（ＡＥ）、Ｍ－ＯＶＡ（ＭＡ）和Ｍ－ＯＶＡ（ＡＥ）作包被原时，马杜霉素标准工作曲线的Ｉ５０值分别为３２３、９７５和８８０ｎｇ／ｍｌ，这证明Ｍ－Ｃ６－ＯＶＡ（ＡＥ）作包被原能大大提高ＥＬＩＳＡ检测的灵敏度。添加回收率试验测得鸡各组织样本回收率为７７７％～１０４３％，变异系数为３８％～１８０％，检测极限为３０～８０μｇ／ｋｇ。

五种抗球虫药防治鸡E．tenella的疗效对比试验

挑选体况相近的２１日龄伊莎公鸡２１０羽和罗斯公鸡７０羽，在人工感染Ｅ．ｔｅｎｅｌｌａ下，对氯嗪苯乙腈（ｄｉｃｌａｚｕｒｉｌ）、常山酮（ｈａｌｏｆｕｇｉｎｏｎｅ）、氯羟吡啶（ｃｏｌｐｉｄｏｌ）、马杜拉霉素（ｍａｄｕｒａｍｉｃｉｎ）和盐霉素（ｓａｌｉｎｏｍｙｃｉｎ）５种抗球虫药，进行了３批防治鸡Ｅ．ｔｅｎｅｌｌａ疗效对比试验，以抗球虫指数（ＡＣＩ）作为疗效的综合评判指标。结果显示各种药物的ＡＣ互分别为，氯嗪苯乙腈９５．５２，１９５．２９，１９２．７４，常山酮２００．６０，１９９．０４，１９７．４５；氯羟吡啶１７９．６４，１７４．４２，１６７．９３；马杜拉霉素１９４．２３，１９４．２３，１９８．８９；盐霉素１６７．３２，１７０．９５，１６４．８２；用于对照的感染不用药组的ＡＣＩ为１２６．５０，１３０．７９和９３．３１。氯嗪苯乙腈、常山酮和马杜拉霉素抗该球虫的效果非常好，其ＡＣＩ均超过１９０，氯羟吡啶和盐霉素效果次之，其ＡＣＩ在１６０～１８０之间。

马杜霉素在鸡组织中残留检测方法的研究 Ⅱ 免疫亲合色谱—酶联免疫吸附法(IAC—ELISA)

本文首次报道ＩＡＣ—ＥＬＩＳＡ方法测定鸡组织中马杜霉素的残留。制备针对马杜霉素的特异性抗体ＩｇＧ和高容量ＩＡＣ柱（Ｉ柱动态柱容量为７ １６０ｎｇ·ｍｌ－ １ｇｅｌ，Ⅱ柱为３ ７５０ｎｇ·ｍｌ－ １ｇｅｌ） 。组织样品用甲醇提取，经ＩＡＣ柱分离纯化，ＥＬＩＳＡ检测，即ＩＡＣ—ＥＬＩＳＡ 方法。本试验揭示，以组织样本提取纯化稀释液为介质制备的标准曲线（Ｉ５０ 为３３３ ～３７１ｎｇ·ｍｌ－ １ ，斜率为１９５ ～２２０ ，检测极限为１０ ～２８ｎｇ·ｇ－ １） ，其Ｉ５０ 值和斜率与以ＰＢＳＴ－ １０ ％ 甲醇为介质的标准曲线相符，实际ＩＡＣ—ＥＬＩＳＡ检测时，各组织的标准曲线可用后者代替，使操作大为简化、实用。各组织添加马杜霉素３００ ～１２０ ．０μｇ·ｋｇ － １ 水平下，测得样本回收率为７６４ ％ ～１０９ ．０ ％ ，变异系数为３８ ％ ～１６ ．４ ％ 。结果证明了该方法的可靠性。本文建立的ＩＡＣ—ＥＬＩＳＡ法是目前国内外唯一报道的最简便、灵敏的马杜霉素残留检测方法。

柔嫩艾美耳球虫2个抗药株的抗药性评估

为检测实验室长期保存的柔嫩艾美耳球虫马杜拉霉素抗药株和地克珠利抗药株的遗传稳定性,采用鸡体试验法,以抗球虫指数、最适抗球虫活性百分率、病变记分减少率和相对卵囊产量4项指标,评价2个抗药株对地克珠利、癸氧喹酯、马杜拉霉素等3种抗球虫药物的抗药性,并以柔嫩艾美耳球虫敏感株为对照。结果显示,柔嫩艾美耳球虫敏感株对3种抗球虫药物均无抗药性,4项指标全部阴性。柔嫩艾美耳球虫马杜拉霉素抗药株对马杜拉霉素为完全耐药,4项指标全部阳性;对地克珠利、癸氧喹酯则表现为无抗药性,4项指标全部阴性。柔嫩艾美耳球虫地克珠利抗药株对地克珠利表现为完全耐药,4项指标全部阳性;对马杜拉霉素表现为中度耐药,2项指标阳性;对癸氧喹酯则表现为无抗药性,4项指标全部阴性。结果表明,在实验室已繁殖保存10余年的柔嫩艾美耳球虫2个抗药虫株对其诱导药物具有明显抗药性,实验室保种繁殖方法可行,虫株遗传稳定性良好,为利用该虫株进行球虫抗药性机制等相关研究奠定了基础。

柔嫩艾美耳球虫田间分离株药物耐药性调查

作者采集了5个不同地区发生球虫病鸡场的粪便,分离柔嫩艾美耳球虫不同地理株,为了检测它们对药物敏感性,选择常用的预防球虫病药物马杜拉霉素、莫能菌素、地克珠利,以ACI作为指标,进行了的药物敏感试验。结果表明,北京-1、潍坊和上海株对饲料中添加5 mg/kg马杜拉霉素产生了部分耐药性,而北京-2和北京-3两个虫株对其则敏感;北京-1、北京-2和潍坊株对100 mg/kg莫能菌素部分耐药,上海株完全耐药,而北京-3株对其敏感;北京-1、北京-2、潍坊株和上海株对1.0 mg/L地克珠利产生了部分耐药性,而北京-3株对它敏感。

硫酸铜和马度米星铵联合暴露对鲫鱼的毒性和效应标记物研究

为探究硫酸铜和马度米星铵对水产动物的生态毒性,本研究以鲫鱼为模型,从急性毒性、亚急性毒性和遗传毒性3个方面研究硫酸铜和马度米星铵单一与联合暴露对鲫鱼的毒性效应。结果表明,硫酸铜对鲫鱼96 h的半数致死浓度(50%lethal concentration,LC_(50))为3.6 mg·L^(-1),硫酸铜和马度米星铵联合暴露时,硫酸铜对鲫鱼的96 h-LC_(50)为1.4 mg·L^(-1),马度米星铵对鲫鱼的96 h-LC_(50)为4.2 mg·L^(-1),硫酸铜对鲫鱼为高等毒性;硫酸铜和马度米星铵对鲫鱼的联合毒性表现为协同作用。染毒第7天,硫酸铜和马度米星铵均可影响过氧化氢酶(catalase,CAT)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GPx)的活性,随着剂量和染毒时间的增加,CAT和GPx的活性逐渐下降。硫酸铜和马度米星铵单一或联合暴露7 d或21 d显著下调cat基因表达,对sod和gpx基因表达无显著影响。染毒后期,染毒组谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量均高于对照组。硫酸铜和马度米星铵单一及联合染毒均能诱导鲫鱼红细胞产生微核,微核数与硫酸铜和马度米星铵的浓度呈正相关;随着硫酸铜和马度米星铵浓度的增加,肝细胞的脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)出现断裂,彗星尾部所占比例逐渐升高;高浓度联合染毒组红细胞微核率和肝细胞尾部DNA百分比显著高于单一染毒组。硫酸铜和马度米星铵联合暴露可导致鲫鱼血液毒性、肝细胞氧化损伤及遗传毒性的加和性,为评估Cu^(2+)与马度米星铵复合污染对鲫鱼的生态毒性提供基础数据和理论依据。

鸡马杜霉素急性中毒及其脂质过氧化关系的研究

本文在实验条件下人工诱发鸡马杜霉素急性中毒 ,观察中毒症状及病理变化 ,测定受损靶器官的脂质过氧化物的含量及相关酶的活性 ,以及肝细胞色素P 450的含量。实验结果表明 :鸡马杜霉素急性中毒的主要临床症状是腹泻、腿无力或麻痹 ;肉眼病变是全身性充血、淤血及少数组织出血 ;显微镜检病变是肝脏、心肌及腿肌出血与变性 ;肝脏的脂质过氧化物的含量及过氧化氢酶的活性显著增加 ;肝P 450的含量显著增加 ;

硒与维生素E对鸡马杜霉素急性中毒的保护作用

在实验条件下用 7mg/kgbw .剂量的马杜霉素诱发鸡急性中毒 ,处理组鸡在给马杜霉素前给予硒 ( 0 2mg/kgbw .剂量 ,内服 ) 维生素E(每kg饲料含 2 0 0mg) 7d ,在给马杜霉素后给予硒( 0 2mg/kgbw .剂量 ,内服 ) 维生素E( 2 0 0mg/kgbw .剂量 ,肌注 ) 4d ,中毒组在给马杜霉素前后不给任何硒和维生素E ,对照组既不给马杜霉素 ,也不给硒与维生素E。结果是 :处理组鸡的死亡率显著低于中毒组 (P <0 0 5) ,且病鸡恢复比中毒组快 ;处理组的肝脏、心肌、骨骼肌的出血与变性比中毒组轻 ,但处理组与中毒组的肾脏的出血与变性的程度相似 ;处理组的血清GOT值、肝脏的脂质过氧化物的含量、肝脏过氧化氢酶的活性均显著低于中毒组 ;但处理组的血清CK值与中毒组相比无显著性差异。

马杜拉霉素联合尼卡巴嗪的抗球虫效果与毒性试验

选用２１日龄雏鸡，人工感染柔嫩艾美尔球虫（Ｅｉｍｅｒｉａｔｅｎｅｌａ），用马杜拉霉素尼卡巴嗪按一定比例混合，按６５ｍｇ／ｋｇ比例混入饲料中饲喂。结果表明其推荐剂量的抗球虫指数在两批试验中分别为１９２６８与１９３４２，属高效。急性毒性试验，该混合剂约ＬＤ５０，对小白鼠和鸡分别为７３６ｍｇ／ｋｇ与５１５２８ｍｇ／ｋｇ，均属低毒。

药物对球虫感染鸡血液及生化指标的影响

1日龄艾维因肉鸡分为 4个组 ,即中药组、马杜霉素组、感染不给药组和不感染不给药组 ,每组 2 0只。中药组从 1日龄开始即投喂含 0 .1%中草药复方制剂 (由绞股蓝皂甙、去油鸦胆子仁等组成 )的饲料 ;马杜霉素组从 12日龄起投喂含马杜霉素 5 mg/ kg的饲料。前 3组于 14日龄感染鸡柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊。卵囊攻击前及攻击后 4、7d分别采血 ,测定血液红细胞数、血钾、血钠、血磷、血清白蛋白和血清总蛋白含量。结果表明 ,卵囊攻击后 4、7d,感染不给药组的红细胞数显著低于其他各组 (P<0 .0 5 ) ,卵囊攻击后 7d,血钾浓度显著高于其他各组 (P<0 .0 5 ) ,血清白蛋白和血清总蛋白显著低于其他各组 (P<0 .0 5 ) ;卵囊攻击后 7d,中药组血液红细胞数显著低于不感染不给药组 (P<0 .0 5 ) ,但显著高于感染不给药组 (P<0 .0 5 ) ;马杜霉素组的各项测定指标与不感染不给药组相比无显著差异 (P>0 .0 5 ) ;卵囊攻击后 ,各组间的血磷和血糖值无显著差异 (P>0 .0 5 )。结果提示 ,药物能抵抗球虫感染 ,血液各项指标得以保持相对恒定。

柔嫩艾美耳球虫田间分离株对马杜霉素耐药性检测

以对马杜霉素完全敏感和柔嫩艾美耳球虫豪顿株为参照 ,检测柔嫩艾美耳球虫 2个河北分离株(HBZ、HBH)、 2个山东分离株 (SDZ、SDT)对马杜霉素的耐药程度。按每羽 5× 1 0 4个孢子化卵囊的剂量接种 7日龄试验鸡只 ,接种后第 7天剖杀所有试验鸡 ,观察盲肠病变 ,计算平均增重、盲肠内容物卵囊数、粪便中卵囊排出量和抗球虫指数 (ACI)。以ACI值作为判定耐药程度的标准 ,ACI≥ 1 80判为敏感 ,1 6 0≤ACI<1 80判为部分耐药 ,ACI<1 6 0判为耐药。结果是柔嫩艾美耳球虫豪顿株的ACI为 1 98 3,柔嫩艾美耳球虫河北分离株HBZ、HBH组的ACI分别是 1 4 7 5、 1 5 3 7,山东分离株SDZ、SDT组的ACI分别是1 2 7 2、 1 30 0。试验证明柔嫩艾美耳球虫 2个河北分离株 (HBZ、HBH)、 2个山东分离株 (SDZ、SDT)

家兔马杜拉霉素中毒的调查及诊治报告

本文介绍了２３ 起家兔马杜拉霉素中毒事件的发病情况、临床症状、诊断过程及处理措施，总结其发病的一般规律和特点，指出马杜拉霉素对于家兔的敏感度高，不适于作为家兔的抗球虫药物。

鸡组织中马杜霉素残留的高效液相色谱法测定

建立了鸡组织（肌肉、肝脏、皮肤/脂肪）中马杜霉素残留的高效液相色谱荧光检测法。肌肉、肝脏样品经异辛烷提取,皮肤/脂肪样品经乙腈提取,Florisil固相萃取柱净化,丹磺酰肼衍生后上机测定。采用Supelco C18色谱柱分离,以乙腈-7 mmol/L硫酸氢化四丁胺溶液（85∶15,V/V）为流动相,荧光检测器检测,激发波长为260 nm,发射波长为510 nm。结果显示,在0.15~7.2μg/mL浓度范围内,线性关系良好;组织添加回收率均大于70%,定量限为0.03 mg/kg。

分批发酵及补料分批发酵工艺生产马杜霉素的研究

以马杜霉拉放线菌(Actinomadura yumanense ZU-M3)为生产菌株,在3.7L发酵罐中对分批发酵和补料分批发酵工艺进行了研究。结果表明,良好的溶氧度是提高马杜霉素发酵水平的重要因素,在分批发酵工艺中,适宜的通气量和搅拌速度分别为0.15m3·h-1和500r·min-1,192h后马杜霉素发酵单位达7984μg·mL-1。采用分段控制搅拌速度的发酵工艺(0～60h为300r·min-1,60～120h为500r·min-1,120～192h为600r·min-1),更有利于菌体生长和产物生成,马杜霉素发酵单位比固定转速时提高了7.9%。在间歇补料分批发酵工艺中,分10次补加培养基,使碳、氮源的总浓度与分批发酵相同,马杜霉素发酵单位提高到9645μg·mL-1,比分批发酵提高了15.7%;在连续补料分批发酵工艺中,马杜霉素发酵单位可达10328μg·mL-1,比间歇补料分批发酵提高了6.0%,比分批发酵提高了29.4%。该研究结果对于抗球虫药物大规模工业化生产具有一定的指导意义。

马杜霉素对肉用仔鸡肝、肾功能的影响

对艾维茵肉用仔鸡分别加入含马杜霉素４、８、１２和１６ｍｇ／Ｌ作饮水，定期测定血清肌酐（Ｇｒ）值和谷草转氨酶（ＧＯＴ）值，以观察马杜霉素对肝、肾功能的影响。试验结果：饮用８、１２、１６ｍｇ／Ｌ马杜霉素水使肉用仔鸡Ｇｒ值和ＧＯＴ值均显著升高。表明大剂量马杜霉素具有毒性，能引起肝、肾损伤；而饮用４ｍｇ／Ｌ马杜霉素水未引起明显的肝、肾损伤。为此马杜霉素临床应用浓度应低于８ｍｇ／Ｌ。

牛磺酸对马杜霉素中毒大鼠的保护作用

观察牛磺酸对大鼠马杜霉素中毒时的保护作用。将试验大鼠每天灌服马杜霉素进行染毒,且染毒前1 h腹腔注射牛磺酸保护,染毒5 d,继续注射牛磺酸2 d后处死,测定血清、肝脏、腿肌和心肌的丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力和总抗氧化能力(T-AOC)。结果表明牛磺酸组的大鼠血清、肝脏、腿肌和心肌中SOD活性、GSH-Px活力、T-AOC均有所提高,MDA有所降低,与对照组、马杜霉素组比较,差异显著(P<0.01,P<0.05)。牛磺酸可以提高大鼠机体的抗氧化能力,对马杜霉素引起的脂质过氧化具有保护作用。