IL-2和绵羊梅迪-维斯纳病病毒核心蛋白Gag核酸疫苗联合免疫小鼠的免疫应答

构建绵羊梅迪-维斯纳病病毒(MVV)核心蛋白Gag核酸疫苗并与IL-2联合免疫小鼠,为评价其诱导的体液和细胞免疫应答。将MVV gag基因与羊IL-2基因分别插入到核酸疫苗载体质粒pcDNA5.0中,构建真核表达质粒pcDNA5.0-Gag和pcDNA5.0-IL-2,并经酶切以及测序鉴定。分别用阳性质粒pcDNA5.0-Gag、空载体pcDNA5.0及pcDNA5.0-Gag和pcDNA5.0-IL-2共免疫BALB/C小鼠,采用ELISA检测免疫小鼠的特异性抗体以及IFN-γ和IL-4水平,用MTT比色法检测免疫小鼠脾淋巴细胞的增殖。结果表明pcDNA5.0-IL-2联合免疫组小鼠血清抗体效价和IFN-γ、IL-4水平高于pcDNA5.0-Gag免疫组,与空载体pcDNA5.0对照组相比有显著差异(P<0.01)。且pcDNA5.0-Gag单独免疫组及与IL-2联合免疫组小鼠脾淋巴细胞增殖的刺激指数均高于空载体pcDNA5.0对照组。因此,构建真核表达质粒pcDNA5.0-Gag和pcDNA5.0-IL-2,用其联合免疫BALB/C小鼠所诱导的免疫反应以特异性细胞免疫应答为主,同时可产生体液免疫,且IL-2发挥了免疫佐剂的作用,为进一步将其用于MVV的防治奠定了基础。

新疆卡拉库尔羊梅迪/维斯那病毒感染的病理学观察

对来自3个自然感染梅迪/维斯那病毒羊场的7只新疆卡拉库尔羊进行病理学研究。在临床观察期间,试验羊仅出现轻微的与梅迪/维斯那病毒有关的临床症状。病理组织学观察表明,5例血清学阳性羊发生了不同程度的乳腺病理学变化,与其他器官的组织切片观察比较,未见到淋巴组织样间质性肺炎(LIP)、脉管炎、关节炎及滑膜炎病变,表明乳腺是最敏感的靶器官。根据邓普辉等对乳腺炎严重度和分型的描述,新疆卡拉库尔羊乳腺炎病变的严重度均低于其他毒株感染的乳腺炎,从病理学上证实新疆卡拉库尔羊为梅迪/维斯那病毒的低敏感品种。

新疆部分地区梅迪维斯纳病毒感染的血清学调查

旨在了解新疆地区梅迪维斯纳病的流行现状和特点,本研究于2017—2019年从新疆阿克苏、阿勒泰、巴州、昌吉、哈密、石河子和伊宁收集2647份羊血清样品,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行梅迪维斯纳病抗体检测,对不同地区、品种、性别来源绵羊的梅迪维斯纳病抗体阳性率进行统计分析。结果显示,阿克苏、阿勒泰、巴州、昌吉、哈密、石河子和伊宁梅迪维斯纳病抗体阳性率分别为28.95%(121/418)、0.67%(5/751)、2.50%(2/80)、4.91%(8/163)、1.14%(3/264)、1.22%(1/82)和17.10%(152/889);其中,阿勒泰羊、和田羊、哈萨克羊、美利奴羊、萨福克羊、小尾寒羊的梅迪维斯纳病抗体阳性率分别为0.35%(1/288)、1.14%(3/264)、22.87%(231/1010)、13.86%(42/303)、1.85%(13/702)和2.50%(2/80);新疆本土品种羊与引进品种羊血清梅迪维斯纳病抗体阳性率分别为0.79%(8/1015)、1.58%(15/947);公羊与母羊梅迪维斯纳病抗体阳性率分别为3.59%(34/946)、15.17%(258/1701)。本研究结果分析表明,需要对梅迪维斯纳病进行早期检疫,及时发现并淘汰病羊,改善饲养管理条件,这对促进羊产业健康发展具有重要意义。