A new isoquinoline derivative from the leaves of Magnolia sieboldii K.Koch

Magnoline（1）,a new isoquinoline derivative,was isolated from the leaves of Magnolia sieboldii K.Koch（Magnoliaceae）.Its structure was elucidated on the basis of spectral analysis including 1D,2D NMR and HR-TOF-MS.

天女木兰MsPHYA基因的表达及休眠解除功能研究

光敏色素通过感知光信号来参与调控植物种子萌发,其中PHYA是吸收远红光信号的主要光受体。为了探究天女木兰(Magnolia sieboldii K.Koch)种子休眠解除的分子调控机制,对天女木兰光敏色素相关基因PHYA基因(MsPHYA)展开研究。从天女木兰种子中克隆MsPHYA基因(MZ221928)cDNA全长序列,采用qRT-PCR的方法测定MsPHYA基因和MsPIF3基因在不同光质处理下在天女木兰种子中的表达量,MsPHYA基因在天女木兰不同组织中表达量,测定不同光质诱导的种子萌发率,构建pGS-21T-MsPHYA原核表达载体,纯化并复性重组蛋白。研究结果表明:MsPHYA蛋白序列包含PAS结构域、GAF结构域、Phytochrome Region和His kinase结构域。MsPHYA基因在子叶和长枝中高表达,在远红光处理下MsPHYA和MsPIF3基因表达量先升高后下降。不同光质诱导种子萌发率从高到低顺序为红光>黑暗>远红光。天女木兰MsPHYA基因受远红光刺激而上调表达,但远红光处理并没有促进天女木兰种子萌发,推测MsPHYA基因并不直接调控天女木兰种子休眠,其休眠解除同时受MsPIF3调控。成功构建pGS-21T-MsPHYA载体并获得纯化蛋白,制备的MsPHYA抗体具有较好的特异性,可用于蛋白丰度分析。研究结果为揭示光解除种子休眠机制提供理论依据。

天女木兰组织培养的抗褐化研究

从外植体类型、外植体预处理方法、培养基类型、抗褐化剂类型及培养条件等方面研究了天女木兰(Magnolia sieboldii K.Koch)组织培养过程中的褐化问题。结果表明,B5培养基对防止外植体褐化效果好,外植体在MS培养基中褐化严重。外植体的取材部位与天女木兰的褐化程度密切相关,侧芽褐化率相对较低,其次是顶芽,带芽的茎段褐化率最高。在B5+0.5 mg/L 6-BA+0.3 mg/L IBA培养基中添加适宜浓度的抗氧化剂、吸附剂有利于抑制天女木兰的褐化,抗褐化效果是聚乙烯基吡咯烷酮(PVP)>维生素C(VC)>活性炭(AC)。用1 g/L VC浸泡外植体4 h可有效减轻褐化。培养初期一定的低温和暗培养可以减轻天女木兰的褐化。

天女木兰种子休眠原因的初步探讨

从天女木兰种子的形态、种皮透性、种子各部分抑制物质的生物测定等方面研究其休眠的原因,结果表明:天女木兰种子秋季采收后种胚尚未发育完全,是导致天女木兰种子深休眠的主要原因;种皮透气、透水性良好;种子不同部位都存在不同程度的发芽抑制物质,主要存在于假种皮和胚乳中。

天女木兰叶中甾类化合物的分离与鉴定

目的对天女木兰叶的化学成分进行分离和结构鉴定。方法采用硅胶、凝胶柱色谱和重结晶等分离方法对天女木兰叶的体积分数为90%的乙醇溶液提取物进行成分分离;通过谱学分析方法结合化合物理化性质对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果分离得到8个化合物,分别鉴定为豆甾-4-烯-3,6-二酮(stigmast-4-en-3,6-dione,1),豆甾-4-烯-3β,6β-二醇(stigmast-4-en-3β,6β-diol,2),5α,8α-过氧-(22E,24R)-麦角甾-6,22-二烯-3β-醇[5α,8α-epidioxy-(22E,24R)-ergosta-6,22-dien-3β-ol,3],豆甾-4-烯-6β-羟基-3-酮(stigmast-4-en-6β-ol-3-one,4),β-谷甾醇(β-sitosterol,5),(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇[(22E,24R)-ergosta-7,22-dien-3β,5α,6β-triol,6],豆甾-5-烯-3β,7α-二醇(stigmast-5-en-3β,7α-diol,7),胡萝卜苷(daucosterol,8)。结论化合物2-4、6、7为首次从木兰属植物中分离得到,化合物1为首次从该植物中分离得到。

天女木兰的组织培养

以天女木兰幼树和一年生的实生苗的幼嫩茎段为外植体,采用不同激素配比的培养基对天女木兰的组培技术进行了研究,培育出了天女木兰的组培苗。适宜天女木兰侧芽分化的培养基为:B5+0.5mg·L-16-BA+0.3mg·L-1IBA;适宜生根的培养基为:1/4MS+1.0mg·L-1IBA+0.5mg·L-1NAA。

激素处理和变温层积对小花木兰种子形态后熟的影响

以小花木兰种子为供试材料，通过多因子交叉重复实验对影响小花木兰种子形态后熟的主要因素及其水平进行了筛选。结果表明，种子在6-BA1．30～1．40mg·L-1和2，4-D2．00—2．20mg·L-1混合溶液浸泡3d，种子与河砂（1：4）混合后进行100—114d的变温处理，白天温度为18±2℃，处理8h，夜间温度为7±2℃，处理16h，心形胚发生率97．8％，子叶胚发生率95．6％，种子发芽率98．0％。本研究完成了小花木兰种子的形态后熟，该技术适合于小花木兰种苗的工厂化生产。

天女木兰的物候及生长过程

对生长于北华大学林学院树木园内的天女木兰进行物候观测,并将物候与气象因子紧密结合,揭示了天女木兰的物候规律。同时通过对天女木兰的树干解析,找出了野生天女木兰树木的生长规律,从而为天女木兰的保育和开发利用提供了科学依据。

天女木兰遗传多样性微卫星标记的研究

以中国7个省份9个天女木兰种群为研究对象,采用微卫星技术(SSR)探讨天女木兰分子遗传多样性。结果显示:(1)9个天女木兰种群间存在较低的遗传多样性,种群平均Nei基因多样性指数(H)0.098 5,平均Shannon信息指数(I)0.146 8;种群间基因流为0.597 9(<1),处于很低的水平。(2)天女木兰不同种群在长期进化过程中发生了一定的遗传分化,9个天女木兰种群的遗传距离为0.068 8~0.214 2,遗传相似度介于0.82~0.93之间。(3)聚类分析结果显示,9个天女木兰种群在进化上形成2个主要分枝,贵州麻江种群为一支,其他地区的种群为另一支,其中贵州麻江的天女木兰生存状况较差。(4)天女木兰的遗传多样性与种群分布的经度呈正相关。研究表明,天女木兰种群间的遗传多样性低,缺乏基因交流,可能是导致其濒危的主要遗传学机制。

天女木兰种子休眠特性的研究

从天女木兰(Magnolia sieboldiiK.Koch)种子的形态、种皮电镜观察、种子各部分抑制物质的生物测定和种子成熟过程中激素含量的变化等方面研究种子的休眠特性。结果表明:天女木兰种子秋季采收后其种胚尚未发育完全,是导致天女木兰种子深休眠的主要原因,但其种皮透性良好;种子不同部位存在不同程度的发芽抑制物质,主要存在于假种皮和胚乳中;种子成熟时胚乳中高浓度的ABA、IAA及低浓度的GA3是导致种子休眠的又一原因。

天女木兰研究现状及保育对策

概述了天女木兰的地理分布、生物学和生态学特性、繁殖技术、经济价值及开发利用等方面的研究现状,指出了天女木兰应用和研究中存在的问题,提出了对天女木兰保育和开发利用的策略.

天女木兰小孢子发生及雄配子体发育的观察

天女木兰是珍稀濒危植物,为给其有效保护措施的制定提供参考,从小孢子发生和雄配子体的发育角度探讨天女木兰濒危原因。研究结果表明,天女木兰花药具有4个小孢子囊,花药壁5～8层。四分体排列方式为平面对称型、四面体型和直线型,其中直线型较少;成熟花粉粒为二细胞型花粉粒;能育花粉率最高达84.9%。通过对天女木兰小孢子发育过程的研究发现,四分体时期有2种不正常类型,说明天女木兰小孢子发育过程中存在异常现象,这是导致天女木兰濒危的原因之一,但不是主要原因。

沈阳地区天女木兰生物学特性研究

以沈阳地区栽培的天女木兰为研究对象,详细观察测定了该树种的物候期、芽萌发形态变化、开花习性以及枝、叶、果的生长动态等生物学特性。结果表明:天女木兰芽在4月上旬开始萌动,生长期约为150d,旺盛生长期从5月上旬到6月中旬,大约50d;5～6月枝、叶、果生长量最大,此期间新梢生长量占当年新梢总生长量(18.3cm)的81%;天女木兰具有"二次开花"现象,第1次开花(主花期)在5月下旬至6月中旬,持续约20～30d,第2次开花在7月末至8月初,花数量少,持续时间短;果实从生长到发育成熟约需90d,成熟期在9～10月。

长白山区三种观赏树木物候与生长节律研究

对通化县石湖保护区内主要观赏树种天女木兰、花楸树、灯台树物侯特点和2a生苗木的生长节律进行观测，结果表明：灯台树4月25日开始萌芽，萌芽最早，天女木兰和花楸树分别于5月3日和5月5日芽开始萌动。花楸树生长期最短，为137d；灯台树生长期最长，为154d；天女木兰生长期为146d。在1个生长季节中，6月初至8月中旬是花楸树苗高生长的高峰期；7—8月份是天女木兰苗高生长的高峰期；灯台树的苗高生长高峰期为6月末到8月中旬。

不同生境天女木兰叶片解剖结构比较

应用石蜡切片技术,对不同生境下天女木兰叶片解剖结构的演化进行了研究。结果揭示:天女木兰叶片的原始特征表明其在系统演化上处于原始地位。较干旱生境中的天女木兰与较湿润生境中相比,其叶片单位长度下表皮气孔数减少而栅海比和单位叶宽叶肉组织中油细胞数目增加。在其他环境因子相同的情况下,光照强度增大可使天女木兰叶片栅栏组织厚度、栅海比、主脉维管束枚数和单位叶宽叶肉组织中油细胞的数目增加;土壤含水量较低、树龄较大的天女木兰与土壤含水量较高、树龄较小的天女木兰相比,其叶片厚、栅栏组织厚、海绵组织厚、栅海比以及单位叶宽叶肉组织中油细胞的数目值均较大。

高效液相色谱法测定天女木兰叶中游离酚和结合酚

[目的]进一步了解天女木兰中酚类物质种类及含量。[方法]利用高效液相色谱仪对天女木兰叶片中游离酚、结合酚和酯化酚进行定性定量测定。[结果]在10种检测酚中,天女木兰叶片中含有香豆酸和绿原酸2种游离酚,含有咖啡酸、香豆酸、香豆素和表儿茶素4种结合酚及香豆素和香豆酸2种酯化酚;各种形式的香豆酸广泛存在于叶片中。[结论]该研究建立的高效液相色谱法测定天女木兰叶中游离酚和结合酚的方法准确、可靠。

三清山天女花种子的活力及温度对其萌发的影响

对天女花种子的贮藏条件及其种子萌发所需要的温度进行了研究,结果表明:低温沙藏是天女花种子贮藏的最佳条件,种子活力最高,而原生境中种子活力最低。天女花种子萌发的温度范围为12-34℃,其最适萌发温度为30℃,发芽率、发芽势、发芽指数在30℃时,分别可达31.7%、30.6%和15.4%。

天女木兰多酚类物质的季节变化规律

通过对不同月份天女木兰叶中多酚类物质含量的测定,推测天女木兰多酚类物质的季节变化规律;使用高效液相色谱仪定性、定量测定不同月份天女木兰不同高度叶片游离酚、结合酚和酯化酚;采用紫外分光光度法测定多酚的抗氧化性.结果表明:天女木兰叶片含有绿原酸和对香豆酸2种游离态酚;含有咖啡酸、对香豆酸2种结合酚;含有对香豆酸1种酯化酚.5月上旬开始,随着叶的发育天女木兰游离酚的含量逐渐增加,进入7月上旬,达到最高,随后含量逐渐下降;从5月上旬长叶开始至10月下旬落叶为止,总体呈现随着叶的发育酯化酚含量逐渐增加的规律,叶内结合酚呈现出非规律性的变化;5月叶片抗氧化性最弱,5月至8月抗氧化性逐渐上升,8月抗氧化性最高,8月至10月抗氧化性逐渐下降.天女木兰抗氧化性与多酚类物质含量具有相关性,确定天女木兰叶的最佳采集时期为10月上旬,即落叶前期.