Activation of CFTR-mediated Cl^- Transport by Magnolin

Magnolin is a herbal compound from Magnolia biondii Pamp. It possesses numerous biological activities. Cystic fibrosis transmembrane conductance regulator（CFTR） is an epithelial chloride channel that plays a key role in the fluid secretion of various exocrine organs. In the present study, the activation of CFTR-mediated chloride transport by magnolin is indentified and characterized. In CFTR stably transfected FRT cells, magnolin increases CFTR CI- currents in a concentration-dependent manner. The activation of magnolin on CFTR is rapid, reversible, and cAMP-dependent. Magnolin does not elevate cellular cAMP level, indicating that it activates CFTR by direct binding and interaction with CFTR protein. Magnolin selectively activates wildtype CFTR rather than mutant CFTR. Magnolin may present a novel class of therapeutic lead compound tbr the treatment of diseases associated with reduced CFTR function such as keratoconjunctivitis sicca, idiopathic chronic pancreatiti, and chronic constipation.

利鼻片HPLC指纹图谱及多组分含量测定

目的建立多组分含量测定结合化学计量学分析,评价利鼻片质量。方法采用高效液相色谱法,Waters SunFire C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);乙腈(A)-0.55%磷酸水溶液(B)为流动相;梯度洗脱,流速:1.0 ml·min^(-1);切换检测波长:323、280、248 nm;柱温:35℃,进样量:10μl。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统结合聚类分析与正交偏最小二乘判别分析评价15批利鼻片质量。结果建立的利鼻片HPLC指纹图谱共确定了19个共有峰,并指认出其中7个色谱峰;利鼻片中菊苣酸、绿原酸、咖啡酸、黄芩苷、木兰脂素、欧前胡素、异欧前胡素的平均回收率分别为100.30%、99.87%、99.25%、99.45%、99.08%、98.75%和98.58%,RSD均<1.5%(n=6)。15批利鼻片中上述7个成分的含量测定结果分别为15.05~17.93、10.17~12.51、7.03~9.30、4.42~6.50、1.08~2.76、1.01~1.76、1.00~1.90 mg·g^(-1)。不同批次利鼻片存在差异,区分的特征峰为菊苣酸、绿原酸和木兰脂素。聚类分析结果表明3家企业的样品各自聚为一类,S1~S4(陕西康惠)聚为一类,S5~S10(通化民泰)聚为一类,S11~S15(长春银诺克)聚为一类。正交偏最小二乘法判别分析结果表明这4种化学成分〔10号峰菊苣酸(VIP值为2.216)、6号峰未知(VIP值为1.934)、4号峰绿原酸(VIP值为1.438)、13号峰木兰脂素(VIP值为1.013)〕显著影响利鼻片的分类,是引起该制剂质量差异的潜在标志性成分,可以考虑将这些差异标志性成分作为指标成分监控利鼻片的质量。结论建立的综合质量评价法简便、专属、准确,可客观评价利鼻片质量。

基于化学模式识别技术的苍耳子鼻炎胶囊(滴丸)中3个活性成分含量测定及质量评价研究

本文采用同时测定苍耳子鼻炎胶囊(滴丸)中3个活性成分含量的高效液相色谱法(HPLC)的方法,并用化学模式识别技术综合评价该药物质量。采用HPLC-PDA分析检测,Agilent poroshell 120 EC-C18(4.6 mm×50 mm, 2.7μm)为色谱柱,流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速为1.0 mL/min;柱温为35℃;进样量为10μL;检测波长为327 nm(绿原酸),230 nm(黄芩苷、木兰脂素)。采用统计软件SPSS 22.0及SIMCA14.1对21批苍耳子鼻炎胶囊(滴丸)样品含量测定结果进行聚类分析与主成分分析。结果显示,在一定浓度范围内,苍耳子鼻炎胶囊(滴丸)中绿原酸、黄芩苷、木兰脂素线性关系良好(r≥0.9994);精密度、稳定性(24 h)、重复性试验的RSD<2.0%(n=6);平均加样回收率分别98.66%,99.84%,100.21%(n=9),RSD均<2.0%;21批样品中绿原酸、黄芩苷、木兰脂素含量分别为0.170 2~1.415 5 mg/g, 13.160 5~46.831 4 mg/g, 1.833 8~4.012 4 mg/g;聚类分析与主成分分析均将21批样品分为四类,两种分类结果一致。结合化学模式识别技术,所建立的3个活性成分含量测定方法可为苍耳子鼻炎胶囊(滴丸)的质量控制提供依据。

高效液相色谱法测定中药辛夷中木兰脂素的含量

目的:建立高效液相色谱法测定中药辛夷中木兰脂素含量。方法:采用Zorbaz SB-C_8(4.6mm×150mm,5μm)柱,保护柱C_8(4.6mm×20mm,10μm),以乙腈-四氢呋喃-水(35:1:64)为流动相,流速1mL·min^(-1),检测波长为278 nm,柱温:室温。结果:木兰脂素的线性范围为0.1～1.5μg,r为0.999 9,平均回收率为97.5％,RSD为0.72％(n=5)。结论:该方法准确、简便、快速,灵敏度高,重现性好。为辛夷建立了新的质量控制方法。

辛夷药理作用和临床应用研究进展

辛夷是木兰科植物望春花、玉兰或武当玉兰的干燥花蕾。辛夷的主要化学成分存在于挥发油中,主要药理活性成分为木脂素和新木脂素等;主要药理作用包括抗炎、抗变态反应、抗病原微生物、抗氧化以及舒张平滑肌等;临床主要用来治疗急慢性鼻炎、过敏性鼻炎和其他的鼻炎症状。目前对辛夷的开发利用仅限于辛夷精油提取和鼻炎用药,许多其他药理作用仍缺乏深入研究。本文综述了辛夷药材的药理作用及在临床应用方面的研究进展,旨在为深入系统研究辛夷药用价值提供参考。

市售不同产地辛夷中挥发油成分分析及木兰脂素的含量测定

目的分析比较市售湖南、广西两个不同产地辛夷中挥发油的化学成分,并对其木兰脂素的含量进行测定。方法采用GC-MS联用技术对湖南、广西两个产地的辛夷挥发油成分进行分析,采用HPLC对两个产地辛夷中木兰脂素含量进行测定。结果湖南、广西产地的辛夷挥发油分别分离鉴定出62和64种化合物,主要成分为桉油精、β-蒎烯、2-茨酮、香叶基芳樟醇、α-松油醇等。采用HPLC测定辛夷中木兰脂素的含量,结果显示,木兰脂素在2～256μg/m L浓度范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0.999 96,n=6）,平均加样回收率为100.32%,RSD为0.04%（n=6）。木兰脂素含量为：湖南产地（0.87±0.05）%、广西产地（0.81±0.02）%。结论 GC-MS法能快速、简便、高效地检测辛夷挥发油的化学成分,HPLC简便可靠、重复性好,可用于辛夷中木兰脂素的含量测定。

木兰脂素对肾缺血再灌注损伤大鼠Toll样受体4表达的影响

目的:观察木兰脂素对大鼠肾缺血再灌注损伤时肾组织Toll样受体4(TLR4)表达的影响。方法:采用大鼠肾缺血再灌注损伤模型,雄性SD大鼠45只随机分为假手术组(n=5)、对照组(n=20)和治疗组(n=20)。于再灌注开始前5min静脉注射木兰脂素2mg/kg或等量生理盐水。再灌注达相应时间点时,从各组大鼠取血备测血肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)以及血清细胞间黏附分子-1水平,肾组织用于观察病理变化以及作免疫组化分析肾组织TLR4表达情况。结果:治疗组BUN、Cr较相应时间点对照组明显降低,肾组织损伤也较对照组明显减轻。治疗组肾组织TLR4阳性表达多于假手术组,但较对照组明显减少。结论:木兰脂素预处理可减轻肾缺血再灌注损伤,其机制可能是通过抑制TLR4的表达而发挥作用的。

穴贴定喘膏体外透皮试验用皮肤的比较研究

目的对穴贴定喘膏体外透皮试验用皮肤做比较研究,选择适宜亲脂性成分的实验皮肤。方法应用TP-5型智能透皮扩散仪,以穴贴定喘膏中木兰脂素为考察指标,采用HPLC法测定,比较了不同种皮肤对穴贴定喘膏经皮渗透参数的影响。结果累积渗透量:硝酸纤维素>裸鼠>小鼠>壳聚糖>大鼠>兔>乳猪>蛇蜕;时滞:蛇蜕>壳聚糖>硝酸纤维素>乳猪>兔>大鼠>小鼠>裸鼠。结论硝酸纤维素膜可作为适宜亲脂性成分木兰脂素体外经皮渗透实验的理想皮肤模型。

穴贴定喘膏的透皮吸收研究

目的:筛选贴膏的处方、透皮吸收促进剂的种类、透皮吸收促进剂的用量等。方法:通过对穴贴定喘膏的体外透皮吸收研究,采用HPLC法,以木兰脂素为指标性成分,在取样中有效成分相等的情况下,以时间为横坐标,峰面积为纵坐标作图,对曲线进行比较。结果:接收液采用40%乙醇溶液,选用以PEG6000为基质的处方,以氮酮为透皮吸收促进剂,氮酮用量为1.8%。结论:以1.8%氮酮为透皮吸收促进剂,以PEG6000为基质的穴贴定喘膏处方是可行的。

HPLC法测定鼻通宁滴剂中木兰脂素的含量

目的：测定鼻通宁滴剂中木兰脂素的含量。方法：采用HPLC法，以十八烷基硅烷键合硅胶为色谱柱：DiamonsilC18（250mm×4.6mm，5μm）；流动相：乙腈一水（49：51）；流速：1．0mL／min；检测波长：278nm。结果：木兰脂素在36．00～84．00μg／mL范围内，浓度与峰面积线性关系良好（r=0．9994）。平均回收率为100.84％，RSD为1．32％（n=9），方法的精密度、稳定性及重现性良好。结论：分析方法简便，快速准确，可作为鼻通宁滴剂的质控标准。

HPLC法测定穴贴定喘膏中木兰脂素的含量

目的建立穴贴定喘膏中有效成分木兰脂素的含量测定方法。方法采用HPLC法,色谱柱为LichrospherC8柱(4.6m m×250mm,5μm),柱温30℃,检测波长为278nm,流速1mL m/in,流动相为乙腈-1.55%四氢呋喃水溶液(34∶66)。结果木兰脂素在0.42～5.25μg范围内与峰面积呈良好线性关系,相关系数r=0.9999,贴膏中木兰脂素的平均回收率为100.50%,RSD=2.22%(n=9)。结论该方法准确、简便、稳定,能有效地控制该制剂的质量。

用微波萃取-HPLC法测定不同产地辛夷药材中木兰脂素的含量

目的：采用微波萃取-HPLC法测定木兰脂素的含量,并考察4个不同产地辛夷药材中木兰脂素的含量差异。方法：采用微波萃取法,以75%乙醇为溶剂,在76℃恒温800 s萃取辛夷药材中的木兰脂素。Shim-Pack VP-ODS柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相：乙腈-水（40∶60）,流速：0.8 ml/min;柱温：室温,检测波长：238 nm,采用HPLC法测定木兰脂素的含量。结果：以峰面积（A）对浓度（c）作线性回归,回归方程为A=2.922 7×104c-3 617.4（r=0.999 9）,在5.6~240.8μg/ml浓度范围内,木兰脂素的峰面积与浓度呈良好线性关系。该法的精密度、重现性和稳定性良好,低、中、高浓度（104.87、127.42和172.51μg/ml）的加样回收率分别为（100.39±1.58）%（、103.82±4.04）%和（103.74±0.13）%（n=3）。采用该法测得河南、河北、湖南、湖北4地所产的辛夷药材中木兰脂素含量分别为（6.59±0.39）%（、3.44±0.48）%、（2.73±0.28）%和（4.18±0.25）%（n=3）。其中河南产辛夷药材中木兰脂素含量最高。结论：本方法简便、准确、稳定、重复性好,可作为辛夷药材及相关制剂质量控制的定量方法。

木兰脂素对肾缺血再灌注损伤大鼠P-选择素表达的影响

目的:探讨木兰脂素对大鼠肾缺血再灌注损伤是否具有保护作用及其可能机制。方法:雄性SD大鼠45只,随机分为假手术组、对照组和治疗组。除假手术组外,各组按再灌注时间又分为4个亚组,每组5只。治疗组和对照组分别在再灌注开始前5min静脉注射木兰脂素2mg/kg和等量生理盐水。再灌注达相应时间点时,从各亚组大鼠取血备测血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN),肾组织用于观察病理变化以及作免疫组化分析肾组织P-选择素表达情况。结果:对照组BUN、Scr较假手术组明显升高,治疗组BUN、Scr较相应时间点对照组明显降低(P<0.05);对照组的肾组织损伤较假手术组明显加重,而治疗组的肾组织损伤较对照组明显减轻;随着时间延长,对照组肾组织P-选择素阳性表达较假手术组显著增多,治疗组肾组织P-选择素阳性表达较对照组明显减少(P<0.05)。结论:木兰脂素对大鼠肾缺血再灌注损伤具有一定的保护作用。

RP-HPLC法测定鼻炎口服液中木兰脂素的含量

目的建立鼻炎口服液中木兰脂素含量的RP-HPLC测定方法。方法采用ShimpackVP-ODS色谱柱:(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-四氢呋喃-水(35∶2∶63);流速:1.0ml/min;检测波长:278nm;柱温:室温;峰面积外标法定量。结果木兰脂素在0.64～6.40μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为100.39%,RSD为0.73%(n=6)。结论该方法测定样品分离度佳,灵敏度高,重现性好,结果准确可靠。

苍耳合剂质量标准研究

目的完善苍耳合剂现有质量标准,使之更加规范。方法采用薄层色谱法,以三氯甲烷-乙醚（5∶1）为展开剂,木兰脂素对照品为对照,鉴别苍耳合剂的主要成分辛夷花;采用高效液相色谱法测定木兰脂素的含量。色谱柱：CAPCELL PAK MG C18MG S-5（4.6 mm×250 mm,5μm）;流动相：乙腈-水（45∶55）;流速1.0 m L/min;检测波长278 nm;柱温30℃。结果薄层色谱中供试品和对照品斑点清晰/分离度好,且阴性无干扰;含量测定中,木兰脂素在41.25～660.00μg/m L浓度范围内呈现良好线性关系（r=0.9999）,平均回收率为100.80%,RSD为1.55%（n=6）。3批样品中木兰脂素平均含量分别为6.96、6.90、6.93 mg/瓶。结论新增加的定性、定量检测方法操作简单、专属性强、重现性好,可用于苍耳合剂的质量控制。

鼻炎口服液检测方法的研究

建立鼻炎口服液的质量标准。采用TLC法鉴别辛夷、苍耳子、金银花,采用HPLC法测定辛夷中木兰脂素的含量。薄层色谱鉴别的3种供试品色谱中,在与对照品或对照药村色谱相应的位置上均能显示相同颜色的斑点;木兰脂素含量测定平均回收率为100.39%,RSD为0.73%。该方法可准确地进行定性、定量检测,有效控制制剂的质量。

鼻窦炎颗粒中木兰脂素的薄层鉴别与含量测定

目的:建立鼻窦炎颗粒中木兰脂素的鉴别与含量测定的方法。方法:采用TLC法对鼻窦炎颗粒中木兰脂素进行定性鉴别;HPLC法进行含量测定,色谱柱Symmetry C18(150 mm×6 mm,5μm),流动相:乙腈-水(45∶55),流速:1.0 mL/min,进样量:10μL,检测波长:203 nm。结果:TLC定性鉴别:阴性对照无干扰,斑点清晰;HPLC法含量测定:木兰脂素在1～50μg/mL范围内与峰面积呈现良好线性关系(R2=0.9996),平均回收率为99.50%。结论:TLC、HPLC方法简单、准确,灵敏度高,重复性好,可用于鼻窦炎中木兰脂素的鉴别和含量测定。

HPLC-QAMS法同时测定醒脑降压丸中6种成分的含量

目的建立高效液相色谱联合一测多评法(HPLC-QAMS)同时测定醒脑降压丸中羟异栀子苷、栀子苷、木兰脂素、辛夷脂素、黄芩苷和汉黄芩苷的含量。方法以木兰脂素为内参物,建立其与羟异栀子苷、栀子苷、辛夷脂素、黄芩苷和汉黄芩苷的相对校正因子(RCFs),计算其待测成分含量,并与外标法实测值进行比对,验证一测多评法的准确性和可靠性。结果 6种成分的线性范围分别为3.59~71.80,10.77~215.40,2.06~41.20,0.69~13.80,28.83~576.60和4.96~99.20μg·mL^(-1),r值范围为0.999 5~0.999 9;平均回收率分别为98.88%,99.65%,97.74%,96.94%,100.19%和99.01%,RSD值分别为0.75%,0.92%,1.35%,1.11%,0.85%和1.06%(n=3);6种成分含量的计算值与实测值之间无明显差异。结论 HPLC-QAMS法可同时测定醒脑降压丸中6种成分的含量,该方法操作简便、结果准确,可用于醒脑降压丸的质量评价。

复方鼻炎宁滴鼻剂的质量控制

目的建立复方鼻炎宁滴鼻剂的质量控制标准。方法采用高效液相色谱法测定制剂中甘草酸、木兰脂素含量。结果甘草酸质量浓度在83．136～415．68μg／mL范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0．9991），平均回收率为99．44％，RSD为0．61％（n=9）；木兰脂素质量浓度在1．68—33．6μg／mL范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9997），平均回收率为100．95％，RSD为0．83％（n=9）。结论该分析方法简便、准确，可作为复方鼻炎宁滴鼻剂的质量控制方法。

辛鹅温敏原位凝胶经鼻给药后木兰脂素血浆含量的测定及药动学研究

目的建立辛鹅温敏原位凝胶经鼻给药后大鼠血浆中木兰脂素的液相色谱-串联质谱(liquid chromatography mass spectrometry/mass spectrometry,LC-MS/MS)检测方法,并探讨其在大鼠体内的药动学特性。方法大鼠滴鼻给予辛鹅鼻用温敏原位凝胶(1.5 mL/kg)后于不同时间点腹主动脉取血,应用梯度洗脱程序进行色谱分离,用LC-MS/MS技术检测,以采样时间对血药浓度建立药-时曲线,采用DPS 15.10软件计算药动学参数。结果在2~500 ng/mL范围内,木兰脂素与内标的峰面积比值与浓度的线性关系良好。大鼠滴鼻给予辛鹅鼻用温敏原位凝胶,其主要药动学参数分别为达峰时间T_(max)为(0.46±0.03)h,达峰浓度C_(max)为(230.83±55.17)ng/mL,半衰期T_(1/2)为(2.98±0.43)h,体内平均驻留时间MRT为(4.30±0.62)h,药-时曲线下面积值AUC_(0-24)为(1035.34±200.65)ng·h/mL、AUC_(0-∞)为(1089.22±201.00)ng·h/mL,总清除率CL为(1278.30±226.46)L/(kg·h)。结论建立的LC-MS/MS检测方法灵敏度高、专属性强,适用于大鼠体内的木兰脂素药动学研究。辛鹅温敏原位凝胶经鼻给药后,木兰脂素在大鼠体内的过程符合一室模型。