不同产地及树龄厚朴“发汗”过程中厚朴酚与和厚朴酚的含量变化

目的探讨厚朴“发汗”过程中厚朴酚与和厚朴酚的含量变化趋势。方法采用高效液相色谱(HPLC)法测定彭州20年树龄及雅安20年、40年树龄厚朴“发汗”过程中厚朴酚与和厚朴酚的含量。色谱柱为Wondasil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-水(80∶20,V/V),流速为1.0 mL/min,检测波长为294 nm,柱温为30℃,进样量为10μL。结果厚朴酚与和厚朴酚的质量浓度分别在0.0061~0.1940 mg/mL、0.0018~0.0560 mg/mL范围内与各自峰面积线性关系良好(r≥0.9998,n=6);检测限分别为0.00097,0.00224 mg/mL,定量限分别为0.01210,0.00350 mg/mL;精密度、稳定性、重复性试验结果的RSD均小于2.0%;平均回收率分别为98.79%,99.29%,RSD分别为1.71%,1.20%(n=6)。彭州和雅安20年树龄厚朴中厚朴酚与和厚朴酚含量在“发汗”第7天达峰值,分别为3.48%,3.83%;雅安40年树龄厚朴中厚朴酚与和厚朴酚含量在第5天达峰值,为12.14%。结论所建立的方法快速高效、准确度高、专属性强,可用于厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的含量测定。树龄是厚朴“发汗”过程中厚朴酚与和厚朴酚含量变化的主要影响因素。

抗菌、抗氧化和厚朴酚复合纳米纤维膜的制备及性能研究

目的满足新型天然食品活性包装材料的需求。方法天然植物苯酚和厚朴酚(HK)为活性成分,采用共混静电纺丝工艺制备PLGA-HK复合纳米纤维膜,避免食品氧化及受到微生物的侵袭。结果通过FT-IR、扫描电镜、TG、水接触角等表征手段,证明PLGA-HK复合纳米纤维膜具有均匀的纤维形貌,以及良好的热稳定性和表面疏水性。此外,PLGA-HK复合纳米纤维膜对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌率均大于等于99%,抗氧化活性值达到(61.33±7.71)%,且活性成分在作用过程中不会溶出,其安全性较高。结论在食品保鲜应用中,PLGA-HK复合纳米纤维膜可有效保持食品品质,延长食品保质期,具有作为食品保鲜应用活性包装材料的潜力。

和厚朴酚调节BDNF-TrkB-CREB信号通路对脑出血小鼠神经损伤和认知功能的影响

目的探讨和厚朴酚对脑出血(intracerebral hemorrhage,ICH)小鼠神经损伤和认知功能的影响及其作用机制。方法将C57B L/6J小鼠随机分为假手术组,模型组,和厚朴酚低、中、高剂量组,以及和厚朴酚+抑制剂组。除假手术组外,其余组小鼠均通过自体血注入右侧基底神经节构建ICH模型。于ICH前15 mi n和I CH后1 h,和厚朴酚低、中、高剂量组分别腹腔注射10 mg/kg、20 mg/kg、40 mg/kg和厚朴酚,和厚朴酚+抑制剂组腹腔注射40 mg/kg和厚朴酚与5μg/kg脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)-酪氨酸激酶受体B(tyrosine kinase receptor B,TrkB)-环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(cyclic adenosine monophosphate response element binding protein,CREB)信号通路抑制剂K252a,假手术组、模型组腹腔注射等量的二甲基亚砜和生理盐水。采用改良的神经功能缺损评分(modified neurological severity score,mNSS)评估小鼠神经功能;通过Morris水迷宫实验计算逃避潜伏期、跨越原平台次数、目标象限停留时间百分比3个指标用于评估小鼠空间学习和记忆能力;苏木精-伊红(hematoxyli n-eosin,HE)染色观察海马神经元病理学改变;原位末端转移酶标记(terminal-deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP-biotin nick end labeling,TUNEL)染色检测海马神经元凋亡率;酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清BDNF、TrkB水平;免疫印迹法检测海马组织BDNF、TrkB、CREB、磷酸化CREB(phosphorylated CREB,p-CREB)蛋白表达情况。结果与假手术组小鼠相比,模型组小鼠mNSS、海马神经元凋亡率升高,逃避潜伏期延长,跨越原平台次数减少,目标象限停留时间百分比降低,血清BDNF、Tr kB及海马组织BDNF、Tr kB、p-CREB/CREB水平降低(均P<0.001),海马神经元结构模糊、排列紊乱、数量减少、体积变小,且细胞核固缩;与模型组小鼠相比,和厚朴酚低、中、高剂量组小鼠mNSS(均P<0.01)、海马神经元凋亡率(均P<0.001)依次降低,逃避潜伏期(均P<0.001)依次缩短,跨越原平台次数(P=0.007、P<0.001、P<0.001)依次增多,目标象限停留时间百分比(P=0.004、P<0.001、P<0.001)依次升高,血清BDNF(均P<0.001)、TrkB(P=0.001、P<0.001、P<0.001)及海马组织BDNF(P=0.008、P<0.001、P<0.001)、Tr kB(P=0.001、P<0.001、P<0.001)、p-CREB/CREB(均P<0.001)水平依次升高,海马神经元损伤有所改善;与和厚朴酚高剂量组小鼠相比,和厚朴酚+抑制剂组小鼠mNSS、海马神经元凋亡率升高,逃避潜伏期延长,跨越原平台次数减少,目标象限停留时间百分比降低,血清BDNF、Tr kB及海马组织BDNF、Tr kB、p-CREB/CREB水平降低(均P<0.001),海马神经元损伤加重。结论和厚朴酚可能通过激活BDNF-TrkB-CREB信号通路减轻ICH小鼠海马神经元凋亡和损伤,改善认知功能障碍。

生物质基厚朴酚和糠醛对酚醛树脂的改性研究

为了减少化石能源的使用,选取生物质基厚朴酚和糠醛取代部分苯酚和甲醛,制备了改性酚醛树脂。通过傅里叶变换红外光谱仪,核磁共振波谱仪对改性酚醛树脂进行表征,考察了改性酚醛树脂的基础性能及固化后的力学性能。结果表明:厚朴酚和糠醛改变了酚醛树脂的分子结构,改性酚醛树脂的黏度和游离酚含量明显降低;经过固化后的改性酚醛树脂拉伸强度、冲击强度、弯曲强度分别提高18.6%、20.4%和24.9%。

厚朴酚环氧树脂涂层的制备及综合防护性能研究

采用联苯结构的生物质原料厚朴酚合成生物基环氧树脂,以柔性聚醚胺固化剂(D230、D400、D2000及T403)进行固化制备生物基环氧抗冲蚀涂层,探究聚醚胺分子量与官能度对厚朴酚环氧树脂力学性能、防腐性能以及抗冲蚀防护性能的影响,阐述厚朴酚环氧涂层抗冲蚀磨损机理。结果表明:D230固化的厚朴酚环氧涂层在3.5%(质量分数)NaCl溶液中浸泡15 d后仍具有较高的阻抗值(1.25×10^(11)Ω·cm^(2));以T403固化可获得高拉伸强度(26.59 MPa)、低摩擦系数(0.373)和磨损率[0.0183 mm^(3)/(N·m)]涂层;D2000固化的厚朴酚环氧涂层在抗冲蚀测试中表现出较低质量损失(244.74 mg)与体积损失(157 mm^(3))。在固/液/气三相流冲蚀作用下,D2000较长的柔性链段,赋予厚朴酚环氧涂层更好的弹性和柔韧性,降低了冲蚀介质的冲击作用,从而表现出优异的抗冲蚀性能。

厚朴酚对动物肠道黏膜屏障功能的影响及其调控机制

肠道黏膜屏障作为机体与外部环境进行互作的重要场所,可防止肠道内病原微生物和有毒有害物质侵入,其完整性对动物肠道健康至关重要。厚朴酚是我国传统中药厚朴中提取的活性成分之一,具有抗癌、抗菌、抗炎和抗氧化等功能。研究发现,厚朴酚可通过调控肠道菌群的组成、促进短链脂肪酸和碱性磷酸酶的生成、抑制肠上皮细胞的凋亡、上调肠上皮细胞紧密连接蛋白的表达、调节细胞因子的分泌和增强抗氧化酶的活性等途径,进而维护肠道黏膜屏障的完整性。本文主要就厚朴酚对动物肠道黏膜屏障功能的影响及其调控机制进行综述,为厚朴酚在畜禽生产中的合理应用提供参考。

和厚朴酚保护LPS所致急性肺损伤中肺微血管内皮屏障的机制研究

目的 研究和厚朴酚(HKL)对脂多糖(LPS)引发的急性呼吸窘迫综合征(ARDS)中肺微血管内皮细胞的作用及其潜在机制。方法 小鼠肺微血管内皮细胞(PMVECs),于六孔板中以DMEM+10%FBS培养,分为对照(Con)组1、和厚朴酚(HKL)组1、脂多糖处理(LPS)组1、脂多糖+和厚朴酚治疗(LPS+HKL)组1,分别采用Lipid Peroxidation检测试剂盒与H2DCF-DA测定细胞裂解物中丙二醛(MDA)水平与活性氧水平;采用TUNEL/DAPI双染检测细胞凋亡;采用VE-cadherin/DAPI、Claudin-5/DAPI双染检测细胞连接;采用Western blot检测细胞中caspase-3、cleaved caspase-3、Sirt3、SOD2、乙酰化SOD2(Ac-SOD2);32只小鼠随机分为对照(Con)组2、和厚朴酚(HKL)组2、脂多糖处理(LPS)组2、脂多糖+和厚朴酚治疗(LPS+HKL)组2,采用HE染色观察肺组织病理改变。结果 HKL预处理能明显减轻LPS诱导的ROS与MDA水平升高(P<0.05),同时降低LPS引起的SOD2乙酰化升高与Sirt3下调(P<0.05);TUNEL与caspase分析显示HKL能够保护LPS诱导的PMVECs细胞凋亡;VE-cadherin荧光染色显示HKL的预处理能够阻止LPS对细胞粘附连接的破坏;Claudin-5荧光染色显示HKL的预处理能够阻止LPS对细胞紧密连接的破坏;动物实验中,HE染色显示HKL显著抑制LPS组小鼠肺组织中典型的ARDS病理改变。结论 HKL能够显著抑制LPS所致的肺微血管内皮细胞氧化应激与细胞凋亡以及细胞间隙破坏,从而减轻ARDS症状。

和厚朴酚对红托竹荪腐烂病菌抑菌活性的影响

以红托竹荪腐烂病菌(Trichoderma koningii)为试材,采用不同浓度的和厚朴酚对红托竹荪腐烂病菌进行处理,研究和厚朴酚对红托竹荪腐烂病菌菌丝生长、形态结构和抗氧化酶活性的影响,以期为红托竹荪腐烂病的绿色防控提供参考依据。结果表明:和厚朴酚对红托竹荪腐烂病菌具有显著的抑菌活性,其EC_(50)值为6.252μg·mL^(-1),经过和厚朴酚处理后的红托竹荪腐烂病菌菌丝形态发生明显变化,其菌丝表面呈现出不规则的皱缩与扭曲,出现明显的质壁分离现象,细胞器损伤,细胞内出现大面积空白。且生理系统紊乱,超氧化物歧化酶(SOD)活性升高,过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)活性降低,导致活性氧在体内过量积累,引起细胞损伤,导致菌丝生长受到抑制。综上,和厚朴酚可显著抑制红托竹荪腐烂病菌的生长,未来可作为红托竹荪腐烂病绿色防控的药物。

厚朴酚、和厚朴酚对脂多糖诱导小鼠肠道损伤的抗炎作用及机制研究

试验旨在研究厚朴酚、和厚朴酚对脂多糖诱导小鼠的肠道损伤的抗炎作用。选用体重为18~22 g的ICR健康雄性小鼠135只,随机分为9组,每组3个重复,每个重复5只小鼠。各组分别为对照组、模型组、阳性药物组(灌胃100 mg/kg盐酸小檗碱)以及厚朴酚、和厚朴酚的低、中、高剂量组(25、50、100 mg/kg)。造模前小鼠按照试验分组连续灌胃7 d,对照组和模型组灌胃生理盐水。第7 d除对照组外,其余组小鼠均腹腔注射6 mg/kg脂多糖诱导炎症。结果显示,厚朴酚、和厚朴酚能够降低腹泻指数和促炎细胞因子白细胞介素-6的水平,减轻肠炎症状,改善肠道形态,恢复肠道微生物群平衡;并且发现蛋白激酶B(AKT)、B细胞淋巴瘤细胞凋亡抑制因子(BCL-XL)和白细胞介素-18受体1(IL-18R1)是炎症的潜在治疗靶点,厚朴酚通过上调AKT、BCL-XL等基因,激活磷脂酰肌醇3激酶-蛋白激酶(BPI3K-Akt)信号通路发挥抗炎作用。相反,和厚朴酚的抗炎机制涉及下调炎症相关基因,包括IL-18R1和环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB),从而抑制肿瘤坏死因子(TNF)信号通路。研究表明,在缓解治疗肠道损伤方面,推荐厚朴酚、和厚朴酚的适宜添加量为100 mg/kg。

和厚朴酚通过PI3K/AKT信号通路调节线粒体凋亡对小鼠心肌缺血/再灌注损伤的影响及机制研究

目的探讨和厚朴酚(HK)对心肌缺血/再灌注损伤(MIRI)小鼠心脏的保护作用及其机制。方法2022年6月—2023年7月于陕西中医药大学基础医学院中医诊断实验中心进行实验。78只雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术(Sham)组、MIRI组和MIRI+HK组,每组26只。术前对MIRI+HK组小鼠给予HK(0.2 mg·kg-1·d-1)腹腔注射,Sham组和MIRI组给予等量溶剂,连续14 d。造模术中Sham组仅穿线不结扎,其余2组均结扎左前降支30 min后,解开缝线再灌注2 h,构建MIRI模型,再灌注结束后立即取血,剥离心脏。比较各组血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)和心肌肌钙蛋白T(cTnT)水平;超声心动图检测心功能;2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色法计算心肌梗死面积;原位末端标记技术检测细胞凋亡水平;电镜观察线粒体结构损伤情况;Western-blot检测线粒体凋亡和磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)通路相关蛋白表达。结果与Sham组比较,MIRI组小鼠血清CK-MB、cTnT和左心室收缩末期内径(LVESD)水平及心肌梗死面积、细胞凋亡率升高,左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS)降低(P<0.001),心肌细胞线粒体大多肿胀,内外双层膜模糊,嵴畸形且减少或缺失,线粒体凋亡相关蛋白细胞色素(Cyto)-C、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和活化半胱氨酸蛋白酶(Cleaved Caspase-9)表达升高,B淋巴细胞瘤2基因(Bcl-2)、p-AKT/AKT和p-PI3K/PI3K表达降低(P<0.001);与MIRI组比较,MIRI+HK组小鼠血清CK-MB、cTnT和LVESD水平及心肌梗死面积、细胞凋亡率降低,LVEF和LVFS增加(P<0.001),心肌细胞线粒体超微结构有所好转,结构较为完整,Cyto-C、Bax和Cleaved Caspase-9蛋白表达降低,Bcl-2、p-AKT/AKT和p-PI3K/PI3K表达升高(P<0.001)。结论HK可通过激活PI3K/AKT信号通路抑制MIRI诱导的心肌细胞线粒体凋亡,从而发挥心肌保护作用。

和厚朴酚的生物学功能及其饲用化前景的研究

和厚朴酚是一种天然的中药提取物,具有抗菌、抗肿瘤、抗应激和抗炎等生物学功能,是中药厚朴发挥药理作用的主要成分。在动物生产中的应用表明其具有改善生产性能、增强免疫力和抗镉中毒等作用。因此,和厚朴酚作为一种新型的饲粮添加剂,具有广泛的应用前景。本文综述了和厚朴酚在机体内的吸收与代谢、生物学功能及其在畜禽生产中的应用,旨在为和厚朴酚在畜禽生产中的高效应用提供参考。

SIRT3激动剂厚朴酚通过抑制海马神经元铁死亡缓解小鼠术后认知功能障碍

目的:探究沉默信息调节因子3(SIRT3)激动剂厚朴酚(HKL)在小鼠术后认知功能障碍(POCD)中的作用及其可能机制。方法:将10月龄雄性C57/BL6小鼠随机分成对照(Con)组、手术(Sur)组和Sur+HKL组(n=10)。Sur+HKL组小鼠给予HKL腹腔注射预处理7 d,Sur和Sur+HKL组小鼠均采用胫骨骨折切开复位内固定术的方法建立POCD模型。使用旷场实验、新物体识别实验、Morris水迷宫实验和Y迷宫实验来检测小鼠的认知功能;尼氏染色评价小鼠海马和皮层神经元形态、结构和活力;Western blot检测小鼠海马谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLA7A11)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)、SIRT3和核因子E2相关因子2(NRF2)蛋白的表达;免疫荧光染色测定GPX4表达水平。结果:与Con组比较,Sur组和Sur+HKL组小鼠在旷场实验中移动的总距离和中央区域探索时间差异无统计学意义(P>0.05);新物体识别实验和Y迷宫实验结果显示,Sur组小鼠识别指数和轮替次数较Con组显著降低(P<0.01),侧臂封锁再通后,小鼠进入新臂的距离百分比和次数百分比显著下降(P<0.01);水迷宫训练时Sur组小鼠潜伏期较Con组下降缓慢,测试时Sur组小鼠潜伏期、目的象限穿越次数及穿越时间百分比均显著低于Con组(P<0.01);与Sur组比较,Sur+HKL组上述指标均显著升高(P<0.01)。尼氏染色结果显示,Sur组小鼠海马CA1区和内侧前额叶皮层的神经元染色较浅,尼氏染色阳性神经元数量显著下降(P<0.01);HKL治疗后神经元活力明显增强。Western blot结果显示,与Con组比较,Sur组SIRT3、GPX4、SLC7A11和NRF2蛋白表达水平显著降低(P<0.05),ACLS4蛋白表达水平显著升高(P<0.05);与Sur组比较,Sur+HKL组上述结果被逆转,差异有统计学意义(P<0.05)。海马神经元的免疫荧光染色与Western blot结果一致,Sur组海马区神经元中GPX4的表达水平显著下降,HKL显著升高神经元GPX4的表达水平(P<0.01)。结论:SIRT3激动剂HKL缓解小鼠POCD,其作用机制可能是抑制了海马神经元铁死亡。

和厚朴酚调控SIRT3抑制慢性缺氧诱导的小胶质细胞极化

目的:探讨和厚朴酚对慢性缺氧条件下小胶质细胞极化的影响及机制。方法:使用ELISA法检测炎症因子,探索氯化钴诱导小胶质细胞系BV2细胞慢性缺氧(48 h)以及和厚朴酚处理的最佳浓度。BV2细胞分为对照、慢性缺氧、慢性缺氧+和厚朴酚、慢性缺氧+和厚朴酚+3-TYP(沉默调节蛋白3,SIRT3抑制剂)4组,ELISA检测上清TNFα及IL-1β蛋白浓度,qPCR检测细胞M1和M2极化标志物表达,生化法检测各组细胞活性氧水平,Western Blot法检测SIRT3和炎症上游分子NLRP3和caspase1蛋白水平。结果:慢性氯化钴刺激BV2细胞最佳浓度为100μmol/L,刺激后其炎症因子TNFα及IL-1β释放较对照组明显增加(P<0.05);与对照组相比,慢性缺氧组细胞SIRT3蛋白表达下调,ROS水平、NLRP3和caspase1蛋白水平,M1极化标志物CD86、iNOS的mRNA水平和CD16/32比值上调。和厚朴酚(10μmol/L)能显著上调慢性缺氧细胞SIRT3蛋白和M2标志物Arg-1及CD206的mRNA水平(P<0.05),下调其ROS、NLRP3/caspase1蛋白和M1标志物转录水平(P<0.05),且这种抗氧化应激和抗炎作用能够被SIRT3抑制剂所逆转。结论:和厚朴酚可抑制慢性缺氧诱导的小胶质细胞M1极化和炎症通路激活,其抗炎作用为SIRT3依赖性。

厚朴酚对牙周炎大鼠牙周组织中IL-6、VEGF表达的影响

目的观察厚朴酚对牙周炎大鼠牙周病变及牙周组织中白细胞介素-6(IL-6)、血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨厚朴酚治疗牙周炎的价值。方法取3月龄雄性SD大鼠65只,随机选取其中10只作为对照组,其余大鼠采用正畸结扎丝结扎双侧上颌第一磨牙方法建立牙周炎模型。结扎4周后,将造模成功的40只大鼠随机分为4组,每组10只。局部治疗组去除局部刺激因素即结扎丝;厚朴酚治疗组在不去除结扎丝的情况下给予厚朴酚50 mg/(kg·d)灌胃,局部+厚朴酚治疗组在去除结扎丝的同时给予厚朴酚50 mg/(kg·d)灌胃,对照组给予等剂量生理盐水灌胃,各组均干预8周。观察各组大鼠牙体牙周组织一般情况,HE染色观察牙周组织病理形态,免疫组化染色检测牙周组织中IL-6、VEGF阳性表达情况。结果牙周炎组大鼠双侧上颌第一磨牙龈缘红肿;结合上皮离开釉牙骨质界向根方移位形成深牙周袋,周围有大量炎细胞浸润,牙槽嵴顶及固有牙槽骨吸收破坏。局部治疗组双侧上颌第一磨牙龈红肿,探诊出血;牙周袋深,周围有少量炎细胞浸润,牙槽嵴顶及固有牙槽骨破坏严重,牙槽嵴顶可见新生骨形成。厚朴酚治疗组和局部+厚朴酚治疗组双侧上颌第一磨牙龈红肿较轻或无红肿;牙周袋浅,周围有少量炎性细胞浸润,牙槽嵴顶均可见新生骨形成,其中局部+厚朴酚治疗组牙周组织破坏更轻。牙周炎组大鼠牙周组织中IL-6及VEGF阳性表达平均光密度值均明显高于对照组(P均<0.05),厚朴酚治疗组和局部+厚朴酚治疗组大鼠牙周组织中IL-6及VEGF阳性表达平均光密度值均明显低于牙周炎组(P均<0.05),且局部+厚朴酚治疗组均明显低于局部治疗组(P均<0.05)。结论厚朴酚能够显著降低牙周炎大鼠牙周组织中的致炎细胞因子水平,减轻牙周病变,改善牙槽骨的新生状态。

和厚朴酚抑制人脂肪间充质干细胞增殖

目的 研究厚朴酚对人脂肪间充质干细胞(hADSCs)增殖和凋亡的影响,以此细胞模型初探该药物对肿瘤微环境的影响。方法 用不同浓度的和厚朴酚处理hADSCs,分别采用MTS法和台盼蓝染色法检测细胞的增殖能力,annexin V/PI双染法检测细胞凋亡的改变,qPCR和Western blot检测细胞增殖、凋亡相关基因的mRNA和蛋白质表达,Western blot检测MEK-ERK1/2信号通路中总MEK、磷酸化MEK、总ERK和磷酸化ERK蛋白的表达水平。结果 随着浓度增加,和厚朴酚抑制hADSCs增殖、促进其凋亡的作用显著增强。增殖相关基因CCND1、MKI67和PCNA表达下调,促凋亡相关基因BAX和TP53表达上调,抗凋亡基因BCL2表达下调。和厚朴酚呈浓度依赖性抑制MEK和ERK1/2的磷酸化。结论 和厚朴酚抑制hADSCs增殖,促进其凋亡,作用机制可能与抑制MEK-ERK1/2通路活性有关。

和厚朴酚促进肺癌细胞凋亡的分子机制研究

目的:研究和厚朴酚(HNK)对H1299、H460细胞凋亡的影响,并初步探讨其相关分子机制。方法:体外培养非小细胞肺癌(NSCLC)H1299、H460细胞,用不同浓度的HNK处理48 h。采用MTT法检测细胞活力;采用流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期抑制情况;采用Western blot检测PDZ结合基序的转录共激活因子(TAZ)、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)、Bcl-2、caspase-3等蛋白的表达量。结果:H1299和H460细胞经HNK处理后,与对照组相比,各浓度组细胞活力均下降且在各处理时间下细胞活力均下降(P<0.05);Western blot结果显示TAZ、Bcl-2蛋白表达量随着HNK浓度的增加而降低;cleaved-caspase3、cleaved-PARP蛋白表达量随着HNK浓度的增加而增加;caspase-3和PARP蛋白表达量随HNK浓度的增加而无明显变化;不同浓度HNK处理后,与阴性对照组相比,细胞凋亡率增加(P<0.05);HNK处理后过表达TAZ,与阴性对照组相比,细胞凋亡率降低(P<0.05)。结论:HNK可以促进NSCLC H1299和H460细胞的凋亡,其机制可能是通过抑制TAZ发挥作用。

厚朴酚对实验性牙周炎大鼠治疗作用的研究

目的观察厚朴酚对实验性牙周炎大鼠模型的治疗作用。方法将50只3月龄雄性SD大鼠随机分为空白组、模型组、局部治疗组、厚朴酚组、局部治疗+厚朴酚组,每组10只。除空白组外,其余组予钢丝结扎上颌第一磨牙建立实验性牙周炎模型,模型建立4周后,按照分组分别进行相应的治疗8周,进行口腔检查,股动脉放血处死大鼠,制作牙周组织切片,苏木精-伊红(HE)染色观察牙周组织变化,免疫组化法检测牙周组织中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、基质金属蛋白酶8(MMP-8)表达情况。结果厚朴酚配合牙周局部治疗能够显著改善牙周组织的破坏情况,降低牙周组织中的TNF-α、MMP-8表达,对大鼠实验性牙周炎起到了很好的治疗作用。结论厚朴酚对实验性牙周炎治疗效果明显,并且能够显著降低牙周组织中的炎症细胞因子,促进牙周病变愈合,促进牙槽骨的新生。

和厚朴酚逆转非小细胞肺癌紫杉醇耐药的作用及机制

目的探讨中药厚朴的有效单体成分和厚朴酚对非小细胞肺癌紫杉醇(paclitaxel,PTX)耐药性的逆转作用及可能机制。方法以非小细胞肺癌细胞株A549和PTX耐药细胞株A549T作为研究对象,分为空白对照组、和厚朴酚组、紫杉醇组、和厚朴酚+紫杉醇组,和厚朴酚组、紫杉醇组分别使用一定浓度的药物干预细胞,和厚朴酚+紫杉醇组使用两种药物联合干预细胞,空白对照组不干预。通过MTT实验、流式细胞术、细胞免疫荧光实验及Western Blot免疫印迹实验,观察和厚朴酚对A549T细胞株紫杉醇耐药性的影响。结果和厚朴酚联合紫杉醇干预体外培养的A549T细胞时,细胞存活率较对照组显著降低;和厚朴酚干预体外培养的A549T后,与对照组相比,G2/M期细胞数量增加,细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达水平降低。结论和厚朴酚能逆转体外培养的A549T细胞的紫杉醇耐药性,其机制与抑制P-gp蛋白的表达,减少药物外排有关。

厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的超临界CO_(2)提取工艺优化

目的优化厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的超临界CO_(2)提取工艺。方法在单因素试验基础上,设计四因素三水平L_(9)(3^(4))正交试验,根据极差比较分析,得到最优提取实验条件。结果最佳实验条件为萃取温度50℃,萃取压力35 MPa,萃取时间3 h,料液比10∶14。厚朴酚、厚朴酚平均萃取率分别为1.47%、2.63%,RSD分别为1.42%、1.74%。结论该方法可用于厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的大量提取。

和厚朴酚对水霉孢子抑制效果的研究

本研究旨在探究和厚朴酚(honokiol,HNK)对水霉孢子的抑制效果并分析其可能的作用机制。试验采用二倍比稀释法制备不同HNK浓度的药物培养基(512、256、128、64、32、16、8、4、2、1 mg/L),利用油菜籽培养法将复壮后的水霉接种至培养基上,24 h后观察水霉孢子的萌发情况从而确定HNK对水霉孢子的抑制浓度。同时,选取其中抑制效果明显的浓度,分别利用扫描电镜和透射电镜观察、分析HNK对水酶孢子超微结构的影响。结果显示,48 mg/L浓度下,形态观察显示HNK处理后的水霉孢子细胞损伤相对严重,呈现重度水肿现象;细胞内基质稀疏、溶解,细胞器肿胀;细胞膜大面积崩解并质壁分离。本研究结果表明,在适宜浓度条件下,HNK对水霉孢子胞内结构造成了明显损伤,从而对其生长萌发具有显著的抑制效果。