左乙拉西坦对难治性癫痫患者外周血淋巴细胞主穹窿蛋白表达的影响

目的:研究左乙拉西坦对难治性癫痫患者外周血主穹窿蛋白(MVP)表达的影响,探讨其在难治性癫痫中的作用。方法:收集2012年09月至2013年02月无锡市儿童医院难治性癫痫患者30例,男18例,女12例,年龄(5.2±1.8)岁。这些患者均口服左乙拉西坦超过12个月,分为用药前(B组)、用药6个月(C组)和12个月(D组)3组。选取同期来院体检的健康儿童30例为对照组(A组),男16例,女14例,年龄(5.5±2.9)岁。应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测外周血中MVP基因,免疫蛋白印记(Western Blot)方法检测MVP蛋白的表达,结果经统计学处理。结果:空白对照组外周血中有少量MVP表达(mRNA:1.133±0.152、蛋白:0.020±0.008);难治性癫痫患者用药前MVP大量表达(mRNA:1.788±0.097、蛋白:0.209±0.012),与空白对照组比较有显著性差异(P<0.05)。左乙拉西坦治疗组在用药后6个月(mRNA:1.657±0.126,蛋白:0.196±0.012)、12个月(mRNA:1.466±0.199,蛋白:0.180±0.008)均较对照组减低(P<0.05);用药6个月、12个月两组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:MVP可能参与癫痫耐药的发生,LEV可以控制癫痫发作,并可能下调MVP的表达。

左乙拉西坦对红藻氨酸致发育期癫痫幼鼠海马主穹窿蛋白表达的影响

目的:建立发育期慢性癫痫大鼠模型,观察海马主穹窿蛋白(MVP)的表达及左乙拉西坦(LEV)对其表达的影响。方法:腹腔注射红藻氨酸(KA)1 mg/kg(浓度0.5 mg/ml),建立大鼠慢性癫痫模型,注射后连续观察8 h,癫痫发作达5级以上并出现癫痫持续状态的大鼠,且两周后出现自发性反复惊厥发作者视为模型成功。将造模成功后的40只大鼠随机分为未治疗组(KA组)20只,左乙拉西坦治疗组(KA+LEV组)20只,另取40只大鼠腹腔注射生理盐水,并分为NS组20只、NS+LEV组20只。用药组均于癫痫自发性反复发作后开始用药,疗程为6周,然后将所有大鼠断头取脑,用免疫组化及RT-PCR法测定大鼠海马内MVP及其mRNA的表达。结果:(1)大鼠海马MVP的阳性细胞计数与MVP的mRNA表达趋势相一致。(2)NS组、NS+LEV组大鼠海马有少量MVP阳性细胞及mRNA表达,NS+LEV组MVP阳性细胞数及mRNA的含量与NS组相比差异无统计学意义(P>0.05);KA组MVP阳性细胞计数及mRNA的含量与NS组相比显著增高(P<0.05);KA+LEV组与KA组相比,MVP的阳性细胞及mRNA含量减少(P<0.05)。结论:MVP可能参与慢性癫痫耐药的发生,LEV可以控制大鼠痫性发作,并下调MVP的表达。

山茱萸多糖对难治性癫痫幼鼠行为学和海马组织中多药耐药基因1b及主穹隆蛋白表达的影响

目的:探讨山茱萸多糖对难治性癫痫(RE)幼鼠行为学和海马组织中多药耐药基因1b(MDR1b)及主穹隆蛋白(MVP)的影响,并阐明其作用机制。方法:40只幼鼠建立RE模型,随机分为模型组(n=8)、低剂量山茱萸多糖组(n=9)、高剂量山茱萸多糖组(n=10)和阳性对照组(n=10),同时另设假手术组(n=10)。低和高剂量山茱萸多糖组幼鼠分别给予0.14和0.56 g·kg^(-1)山茱萸多糖灌胃,阳性对照组幼鼠给予154 mg·kg^(-1)拉莫三嗪灌胃,对照组和模型组幼鼠给予等量生理盐水灌胃。观察各组幼鼠癫痫行为学变化,HE染色观察各组幼鼠海马组织病理形态表现,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组幼鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素1β(IL-1β)水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法分别检测各组幼鼠海马组织中核因子κB(NF-κB)、MDR1b及MVP mRNA和蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组幼鼠癫痫发作总次数增加(P<0.05),总持续时间延长(P<0.05),血清中TNF-α和IL-1β水平、海马组织中NF-κB、MDR1b和MVP mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05)。与模型组比较,低和高剂量山茱萸多糖组及阳性对照组幼鼠癫痫发作总次数减少(P<0.05),总持续时间缩短(P<0.05),血清中TNF-α和IL-1β水平、海马组织中MDR1b、MVP mRNA和蛋白表达水平降低(P<0.05)。HE染色,假手术组幼鼠海马区细胞形态结构正常;模型组幼鼠海马区细胞排列紊乱,大量细胞呈空泡样变,可见大量核破裂和核固缩;低和高剂量山茱萸多糖组及阳性对照组幼鼠海马区细胞排列较为整齐,细胞轮廓较清晰,可见少量空泡变性、核破裂和核固缩。结论:山茱萸多糖可改善RE幼鼠癫痫发作情况,其机制可能与抑制MDR1b和MVP mRNA和蛋白表达有关。

托吡酯联合丙戊酸治疗对婴儿痉挛症患儿外周血淋巴细胞主穹隆蛋白表达的影响

目的通过观察抗癫痫药物对婴儿痉挛症患儿外周血淋巴细胞主穹窿蛋白（MVP）表达的影响，探讨婴儿痉挛症耐药的部分机制。方法以2014年1月-2016年2月无锡市儿童医院门诊及住院收治的婴儿痉挛症患儿30例为治疗组，选取同期来院体检的健康儿童30例为正常对照组。婴儿痉挛症患儿确诊后立即口服丙戊酸、托吡酯，治疗时间均超过6个月；用药前、用药后6个月应用免疫蛋白印记（Western blot）方法检测外周血淋巴细胞MVP蛋白的表达。结果治疗组用药6个月后总效率66．7％。正常对照组儿童外周血中有少量MVP表达。婴儿痉挛症患儿用药前MVP大量表达，与正常对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）。治疗组在用药后6个月MVP较用药前降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论MVP可能参与婴儿痉挛症耐药的发生，丙戊酸联合托吡酯可以控制婴儿痉挛发作，并可能下调MVP的表达。

多药耐药蛋白及其在难治性癫中作用的研究进展

难治性癫的耐药性研究已取得了许多突破性进展。近年发现,难治性癫与多药物耐药蛋白存在着密切联系。文中介绍3种主要多药耐药蛋白(P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白1、主穹窿蛋白)的结构和功能,并对其近年在难治性癫耐药中作用的研究进展作一综述。