Bouin氏固定液在Masson三色染色法中的应用

Masson染色是病理学中常用的特殊染色方法之一,其在穿刺组织评估纤维化中具备不可替代的优点。目前,Masson染色常用方法有Masson三色染色法及Pollak三色染色法,其中Masson三色染色法最为常用,但其染色方法偶有出现胶原纤维显色欠清、着色混乱等问题。

Mallory染色法在椎间盘退变组织染色中的应用

背景:椎间盘退变的同时伴随有组织结构和成分的改变。采用多种染色剂连续复染形成多元色的组织学图形,可观察到各组织成分的不同颜色以及椎间盘退变时的颜色变化,在分辨力的显现上,比单纯形态学的改变更明显且易于分辨。目的:从组织形态和颜色变化两方面观察Mallory三色染色对椎间盘的染色效果。方法:取1,1.5,2,2.5和3月龄Hartley豚鼠L4～5椎体,制备中央冠状面椎间盘组织切片。用Mallory染液染色,光学显微镜下观察髓核、软骨终板和纤维环各区域形态和颜色的变化。SPOT-Ⅱ数码成像系统拍摄图像。结果与结论:Hartley豚鼠椎间盘退变程度随鼠龄增长自然加重。1月龄豚鼠的髓核形态正常,无色透明。在1.5～3月龄豚鼠中,髓核逐渐退变,由局部发展至全部基质呈现浅蓝着色,表明有胶原沉积,其形态上可见脊索细胞呈现软骨样细胞变性,髓核面积逐渐缩小并逐渐被纤维软骨样组织替代,直至在3月龄时呈现"蛇纹石"样外观。其终板上紫红色软骨细胞带随鼠龄增长呈现出不规则形态直至消失,其形态上可见软骨细胞逐渐减少。外纤维环红色和橘黄色的面积随着鼠龄增长而增加,表明有纤维素样变性,其形态上可见明显的板层状结构。内纤维环蓝色的面积随着鼠龄增长逐渐缩小。结果显示Mallory三色法用于Hartley豚鼠椎间盘染色时,在髓核、软骨终板和纤维环上,可从色彩、形态两方面显示出对基质和细胞具有良好的组织分辨力,能从形态和成分变化的角度反映自然增龄过程中椎间盘组织的退变情况。

三色染色法和免疫细胞化学法显示培养的神经轴索及雪旺细胞

本研究目的在于用三色染色法和免疫细胞化学反应显示培养的周围神经中的轴索及雪旺细胞。将大鼠背根神经节体外培养于聚吡咯膜上 2周 ;用苏木精、固绿 FCF、变色素 2 R及磷钨酸等配制的染色液染色 ;或用抗 S-10 0蛋白和抗神经微丝蛋白抗体进行免疫细胞化学法反应。结果证明 ,在三色染色法中神经节神经元发出的长突起呈蓝绿色 ,细胞核呈红色或紫红色 ,胞质呈浅灰色。免疫细胞化学反应证明神经节发出的长突起为轴索 ,紫红色核和浅灰色胞质的细胞为雪旺细胞。本文结果提示 ,三色染色法能区别显示培养的周围神经组织中的轴索及雪旺细胞。

介绍一种Masson三色的微波改良染色法

目前,Masson三色染色法仍是胶原纤维、肌纤维染色的主要方法之一,能同时显示胶原纤维和肌纤维,组织形态通过着染蓝褐色的细胞核有很好的辨认性。Masson三色法在许多疾病的病理诊断、鉴别诊断和研究工作中均具有非常重要的使用价值。在实际工作中．

Masson三色染色与HE染色在豚鼠牙齿组织石蜡切片中的比较研究及应用

针对牙齿组织形态学研究的难点,选择适宜固定液,用EDTA-2Na进行脱钙,完成了牙齿组织石蜡切片的制作。通过确定染色程序及各种染料的最佳作用时间,分别利用Masson三色染色法、传统的苏木精和伊红(HE)染色法对牙齿组织切片进行了染色观察。染色结果表明,与HE染色法相比,Masson三色染色更能使牙齿的各主要成分以不同颜色显现出来,色彩对比鲜明,亮丽润眼,为牙齿组织生理及病理组织形态学研究奠定了基础。针对机体中硬组织的相似特性,该试验方法可以在骨骼、软骨等硬组织的形态学研究中参考、改进并推广使用。

超高效液相色谱-三重串联四级杆质谱法测定乌梅中19种深色染色色素

目的采用超高效液相色谱-三重串联四级杆质谱法建立乌梅中蓝色、绿色、黑色等多种色素检测方法。方法药材经甲醇-0.1%甲酸水（V：V=3：2）超声提取3次,提取液合并,分别经弱阴离子WAX固相萃取柱和弱阳离子WCX固相萃取柱净化得到水溶性酸性色素待测溶液和水溶性碱性色素待测溶液,最后采用超高效液相色谱-三重串联四级杆质谱仪分析测定。结果 19种色素的加标回收率62.3%-128.2%,方法检测限为0.5-345.5μg/kg。将本方法用于实际样品分析,检出部分乌梅有非法染色。结论此方法灵敏、快速,可用于测定乌梅非法染色。

组织工程材料大鼠颅骨缺损修复过程中的磨片三色染色观察

目的:用自体细胞复合含孔磷酸钙陶瓷修复颅骨极量骨缺损的SD大鼠骨组织工程模型标本,制作不脱钙磨片并通过改良Masson氏三色染色以观察新骨形成及其与支架材料的关系。方法:成年雄性SD大鼠 14只,随机分成实验组和对照组,每组 7只。全麻及无菌条件下取其左侧胫、股骨骨髓,体外诱导培养大鼠自体骨髓基质细胞。实验组将已分化的自体成骨细胞与含孔磷酸钙陶瓷复合用于修复同体大鼠颅骨极量骨缺损;对照组颅骨缺损处仅置入无细胞的单纯陶瓷。分别于术后 4、8、12、16、20、24及 28周每组各处死1只动物并取材,制成不脱钙磨片并进行改良Masson氏三色染色,光学显微镜下观察比较颅骨修复情况及其矿化程度。结果:实验组 4周时不脱钙磨片,即可见骨缺损修复中央区陶瓷孔隙内蓝色的新骨形成;随着时间的推移,形成新骨逐渐矿化成为红色的成熟骨组织, 28周时骨缺损修复区可见大片新骨呈岛状或条索状排列,其间的陶瓷支架部分已降解,同时加以墨汁灌注的磨片显示骨组织中已形成大量新生血管网。结论:以含孔磷酸钙陶瓷为支架的组织工程骨缺损修复明显优于单纯生物陶瓷修复法,磨片三色染色方法既可了解新骨形成及其矿化程度,又可观察新骨形成与陶瓷支架之间的关系。

介绍一种细胞凋亡TUNEL检测与Ki-67 DAPI三色荧光染色操作流程

肿瘤生物治疗基础研究中,对不同小分子靶向治疗药物进行疗效评估时,除可以测量肿瘤大小外,还需利用TUNEL技术检测肿瘤细胞凋亡程度及行免疫荧光染色检测Ki-67蛋白肿瘤细胞增殖程度。凋亡细胞增多,增殖的肿瘤细胞减少,可以初步推测肿瘤治疗有一定疗效。本文首次采用细胞凋亡TUNEL技术检测Ki-67 DAPI三色荧光染色在同一张肿瘤石蜡切片上同时检测凋亡的肿瘤细胞及增殖的肿瘤细胞,结果较稳定,现介绍如下。

六胺银加马松三色双重染色在肾穿刺活检组织中的应用

肾小球病是发病率较高的疾病，肾穿刺检查是确诊肾脏疾病的重要手段，光镜观察肾组织病变在进行肾小疾球疾病诊断和分类工作中起重要作用。常规HE染色不能清晰地显示肾小球基膜，在实际工作中除免疫荧光抗体检测外，PAS、PASM、Masson特殊染色才能将基膜清晰地显示出来。尤其是六胺银加马松三色双重染色在光镜下观察基膜增厚和钉突、双轨，对诊断膜性。肾小球肾炎及其它各种肾小球疾病有重要价值，是观察肾小球基膜改变的重要方法之一。

运用三色FISH技术确定自然流产夫妇染色体微小区域倒位

【目的】对2例婚后妻子连续2次流产伴21号染色体结构改变病例进行多探针荧光原位杂交(FISH),探讨FISH技术在临床诊断微小区域染色体结构异常的应用价值。【方法】通过染色体常规G显带技术初步确定染色体结构异常类型及染色体断裂的区带位置,然后挑选位于21号染色体长臂位点特异性BAC克隆,缺口平移法将其标记为探针,与21号染色体长臂末端的商品化探针混合,进行三色FISH。【结果】FISH结果排除了涉及其它染色体结构异常的可能,确定这2例均为21号染色体长臂微小区段的臂内倒位,这是首次关于21号染色体臂内倒位导致自发流产病例的报道。【结论】21号染色体臂内倒位与自然流产相关;多色FISH技术在诊断和确定微小区域染色体结构异常中有非常重要的作用和应用价值。

微波加热三氯化钕助染羊毛酸性染料染色研究

The colouring of fleece in acid dyes with neodymium chloride under microwave radiation is studied. The effects of microwave power, reaction time, bath ratio and other factors on dye uptake are discussed with acid red GR and acid red 3R. Several kinds of colour fastness are measured and discussed.

Gordon-Sweets银氨染色和Masson三色套染技术在肝穿刺病理诊断中的应用

肝穿刺活体组织检查(简称肝穿刺活检)是一种在B超、CT的定位和引导下经皮肤穿刺获取少量肝脏标本,经过处理后行病理组织学、免疫组化、特殊染色等,在镜下观察肝脏组织和细胞形态的一门技术 [1] 。在肝穿刺病理诊断工作时,为了解肝脏的炎症和纤维化程度,常用的特殊染色方法是Gordon-Sweets银氨染色和Masson三色染色,染色后两者分别显示肝组织内的网状纤维、胶原纤维等结构。但是,在日常工作中,以上两种特殊染色是分别染在2张切片上,不能观察同一视野下的网状纤维支架分布和胶原纤维增生的变化。作者根据本实验室染色经验,对以上两种染色的方法进行合并改良,效果良好,现介绍如下。

六胺银套染马松三色染色在肾小球肾炎和肾小球病诊断中的应用

目的更好显示免疫复合物在肾小球肾炎和肾小球病中的形态和定位。方法采用六胺银套染马松三色染色。结果能更精确显示肾小球肾炎和肾小球病中各种免疫复合物的形态与定位,并可对肾小球内增生胶原成分区分为Ⅲ型和Ⅳ型。结论有利于病理医师观察,对提高肾小球病理诊断及科研工作具一定实用价值。

三氯化钕助染羊毛酸性染料染色研究

以三氯化钕为助剂 ,研究了酸性大红GR、酸性大红 3R、酸性橙Ⅱ染羊毛的染色行为 ,三氯化钕的存在使酸性橙Ⅱ染色色牢度有所提高 ,在NdCl3 浓度 0 .3%～ 0 .4 % (wt% )时达到最大值。但酸性大红GR、酸性大红 3R的染色色牢度则无改善。三种染料染样鲜艳度都得到改善。NdCl3 浓度浴温对上染率、色牢度的影响也进行了讨论。

大动脉三色染色法探讨

目的:摸索新的血管染色方法。方法:取兔升主动脉(弹性动脉)10%formalin固定,石蜡包埋,用醛复红、亮绿、橘黄G三色染色。结果:用这种方法制成的大动脉标本,在镜下可清楚区分血管壁的各层结构及各种细胞。结论:此种染色方法经反复操作证明具有特异性强、对比清晰、结果稳定等特点,适于大批教学标本的制作。