麦芽生物碱物质提取工艺优化及不同产地含量比较

目的优选麦芽中总生物碱提取工艺,建立大麦芽碱质量分数测定方法,为其生物碱部位进一步研究奠定基础。方法采用超声法提取麦芽总生物碱,用高效液相色谱法测定大麦芽碱质量分数;并以麦芽总生物碱和大麦芽碱质量分数为指标进行正交试验,优选出麦芽生物碱物质的最佳提取工艺。结果总生物碱的最佳提取方法为:用5倍量的体积分数80%甲醇,超声提取3次,每次45 min。不同产地的麦芽中生物碱质量分数差异很大,其中安徽亳州产的生麦芽中生物碱质量分数相对较高。结论建立的质量分数测定方法准确稳定、重复性好,优选的提取工艺合理。不同产地麦芽生物碱质量分数差异较大,需要制定规范的质量控制标准。

生麦芽生物碱对高泌乳素血症模型大鼠激素水平的影响

目的研究生麦芽生物碱对高泌乳素血症(HPRL)模型大鼠泌乳素(PRL)、雌二醇(E2)、孕酮(P)等激素水平的影响,初步明确生麦芽回乳作用的有效部位。方法选用雌性未孕Wistar大鼠,背部皮下注射盐酸甲氧氯普胺注射液制备HPRL模型。造模成功后,各组均胃饲给予相应的药物治疗,连续20d。末次给药后取血,应用ELISA法检测血清中PRL、E2、P、促卵泡激素(FSH)、促黄体生成素(LH)的含量,观察生麦芽生物碱对HPRL大鼠各激素水平的影响。结果与模型组比较,生麦芽生物碱高、低剂量组大鼠血清PRL水平明显下降(P<0.01),高剂量组还可升高E2、P水平(P<0.05或P<0.01)。结论生麦芽生物碱对HPRL模型大鼠有保护作用,其作用机制可能与其对PRL、E2、P水平的调节作用有关。

酸性染料比色法测定麦芽中总生物碱的含量

目的建立麦芽总生物碱质量分数测定的方法,考察不同炮制品、不同产地麦芽中总生物碱的质量分数差异。方法利用液质联用技术鉴别麦芽总生物碱中成分,确定定量测定指标成分;再采用酸性染料比色法测定麦芽中总生物碱质量分数。结果确证了麦芽总生物碱中含有大麦芽碱,以大麦芽碱为对照品,测得同一产地的不同炮制品中,生麦芽总生物碱的质量分数最高,炒麦芽的次之,生大麦的最低。不同产地的生麦芽样品中,总生物碱的质量分数差异较大,以安徽亳州市产最高。结论建立的方法稳定、准确,可用于测定麦芽中总生物碱质量分数以控制麦芽质量。测定结果也科学地解释了临床大剂量使用麦芽用于回乳作用的量效关系。

正交试验法优选麦芽最佳炮制工艺

目的:优选中药麦芽发芽炮制工艺。方法:以麦芽中总生物碱含量、大麦芽碱含量及淀粉酶活力为指标,在单因素试验基础上,通过正交试验考察浸泡时间、发芽温度、发芽湿度及每日洒水量对大麦发芽的影响。依次采用酸性染料比色法和高效液相色谱法测定总生物碱与大麦芽碱含量,DNS比色法测定淀粉酶活力。结果:优选出的麦芽最佳发芽工艺为:用水浸泡5h,发芽温度25℃,湿度70%,每日洒水量与大麦重量比为1∶1。结论:优选得到的炮制工艺稳定可行。

麦芽总生物碱上调多巴胺D2受体抑制垂体瘤细胞泌乳素表达和分泌

目的研究多巴胺D2受体(D2R)在麦芽总生物碱调控泌乳素(PRL)分泌过程中的作用。方法大鼠垂体瘤MMQ、GH3细胞分为对照组、溴隐亭(5μg/mL)组、麦芽总生物碱(4.4、8.8、35.2、70.4μg/mL)组、氟哌啶醇(10、20、40μg/mL)组、麦芽总生物碱与氟哌啶醇联合给药组。采用CCK-8法检测细胞活力;Western blotting检测PRL、D2R蛋白表达;ELISA法检测细胞上清PRL水平;qRT-PCR法检测PRL、D2R mRNA表达。结果与对照组相比,麦芽总生物碱(35.2、70.4μg/mL)可显著下调MMQ细胞PRL蛋白及mRNA表达、上清PRL水平(P<0.05),显著上调MMQ细胞D2R蛋白及mRNA水平(P<0.05);氟哌啶醇可显著减弱麦芽总生物碱对MMQ细胞PRL蛋白及mRNA表达、上清PRL水平的下调(P<0.05),并显著减弱麦芽总生物碱对MMQ细胞D2R蛋白及mRNA表达的上调(P<0.05);麦芽总生物碱对GH3细胞PRL表达、上清PRL水平无显著影响。结论麦芽总生物碱通过上调D2R表达,从而抑制MMQ细胞PRL的表达和分泌。

麦芽4个化学部位通过多巴胺D2受体对产后缺乳模型大鼠催乳作用研究

目的基于多巴胺D2受体(DRD2),考察小剂量麦芽4个化学部位的催乳作用,初步探讨小剂量麦芽生物碱对产后缺乳模型大鼠泌乳素(PRL)分泌的调节机制。方法采用ig甲磺酸溴隐亭方法制备缺乳大鼠模型,造模成功后,各给药组均ig给予相应的药物,应用ELISA法检测各组大鼠血清PRL、雌二醇(E2)、孕酮(P)水平;HE染色观察各组大鼠乳腺组织病理改变;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测各组大鼠脑垂体中泌乳素受体及DRD2 mRNA表达。结果与对照组比较,模型组大鼠血清中PRL、P及E2水平、脑垂体PRL mRNA表达水平显著降低;脑垂体DRD2 mRNA表达水平显著升高。与模型组比较,麦芽总生物碱组大鼠乳腺小叶体积明显增加,导管明显扩张,且导管及腺泡内含有大量乳汁。麦芽总生物碱明显增加模型大鼠血清中PRL、P、E2水平及脑垂体PRL mRNA表达水平,降低脑垂体DRD2 mRNA表达水平。结论麦芽催乳的主要药效物质为总生物碱,其作用机制可能与促进PRL分泌,增加脑垂体PRL受体、降低DRD2 mRNA表达水平有关。

麦芽总生物碱颗粒剂的制备

目的:在前期药效实验的基础上,提取麦芽总生物碱,优选麦芽总生物碱颗粒剂成型制备工艺,得到稳定均一,质量合格的颗粒制剂。方法:利用超声提取法,提取麦芽总生物碱;采用酸性染料比色法测定麦芽中总生物碱的含量;拟选6个处方完成颗粒剂的制备,并以休止角、成型率、堆密度和吸湿性等为指标,应用综合评分法对各处方进行打分,筛选出最优的辅料处方,完成辅料用量比例的优化,并筛选出最佳润湿剂;对制备所得到的麦芽总生物碱颗粒的溶化性,粒度及干燥失重等进行测定。结果:以糊精和乳糖比例为1∶1的混合物作为辅料,并按1∶1的比例混合麦芽总生物碱浸膏粉与辅料,选取80%的乙醇作为润湿剂,制备所得颗粒剂大小均一,成型率最高。结论:本文成功优选出了麦芽总生物碱颗粒剂的制备工艺,制成的颗粒溶化性好,成型率佳,制备方法稳定可靠。

麦芽发芽过程中HPLC指纹图谱及生物碱含量变化规律

目的:研究发芽过程中不同芽长麦芽HPLC指纹图谱及生物碱动态变化规律,从化学成分角度优选麦芽适宜发芽芽长。方法:用Wonda SilC18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-0.1 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液为流动相梯度洗脱,柱温25℃,流速1.0 m L·min-1,检测波长270 nm。测定10批麦芽药材HPLC指纹图谱,采用"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2004版)对其进行相似度评价,同条件下比较麦芽发芽过程HPLC指纹图谱差异;采用HPLC及酸性染料比色法研究麦芽发芽过程生物碱物质动态变化。结果:10批不同芽长麦芽样品HPLC指纹图谱中有19个共有峰,7号峰为大麦芽碱。大麦在发芽炮制后,新增加了5,7,8,10,12,15,16,17号峰;在发芽过程中,1,6,9,13号峰的峰面积逐渐增大后减小,在芽长为0.75 cm时达到最大;3,5,8,17,18,19号峰的峰面积逐渐增大后趋平。麦芽芽长为0.75 cm时,总生物碱含量最大。结论:建立的麦芽药材HPLC指纹图谱可为麦芽药材的质量控制提供参考。麦芽含有的化学成分在发芽炮制过程中产生明显变化,以麦芽生物碱成分含量为指标,则麦芽最佳芽长应为0.75~1.00 cm。