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Research Progress on the Large-scale Culture Technology of Mammalian Cells
1
作者 LI Chunyan XIAO Jing JIANG Yonghou 《Journal of Northeast Agricultural University(English Edition)》 CAS 2009年第2期72-76,共5页
The culture of mammalian cells is closely related to the development of biotechnology, which has been used extensively in the research and application fields of biology and medical science. In this article, various fa... The culture of mammalian cells is closely related to the development of biotechnology, which has been used extensively in the research and application fields of biology and medical science. In this article, various factors affecting cell cultivation and the application of microcarrier and bioreactor on large-scale culture of mammalian ceils were reviewed. 展开更多
关键词 mammalian cell culture microcarrier bioreactor
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Alternatives for large-scale production of cultured beef: A review 被引量:9
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作者 Matilda S M Moritz Sanne E L Verbruggen Mark J Post 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2015年第2期208-216,共9页
Cultured beef is a method where stem cells from skeletal muscle of cows are cultured in vitro to gain edible muscle tissue. For large-scale production of cultured beef, the culture technique needs to become more effic... Cultured beef is a method where stem cells from skeletal muscle of cows are cultured in vitro to gain edible muscle tissue. For large-scale production of cultured beef, the culture technique needs to become more efficient than today's 2-dimensional(2D) standard technique that was used to make the first cultured hamburger. Options for efficient large-scale production of stem cells are to culture cells on microcarriers, either in suspension or in a packed bed bioreactor, or to culture aggregated cells in suspension. We discuss the pros and cons of these systems as well as the possibilities to use the systems for tissue culture. Either of the production systems needs to be optimized to achieve an efficient production of cultured beef. It is anticipated that the optimization of large-scale cell culture as performed for other stem cells can be translated into successful protocols for bovine satellite cells resulting in resource and cost efficient cultured beef. 展开更多
关键词 cultured beef microcarrierS aggregated cells packed bed bioreactor cell culture
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应用Cephodex微载体规模化生产伪狂犬病疫苗的研究 被引量:7
3
作者 梅建国 庄金秋 +6 位作者 管宇 姚春阳 魏凤 马力 李峰 莫玲 吴信明 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期240-244,共5页
为实现伪狂犬病病毒(PRV)的大规模生产,本研究应用Cephodex微载体悬浮培养BHK-21细胞,通过对培养工艺的研究,初步实现了病毒抗原的高效生产。整个过程采用流加方式和动物细胞微载体培养技术,在细胞反应器中进行BHK-21高密度培养和PRV的... 为实现伪狂犬病病毒(PRV)的大规模生产,本研究应用Cephodex微载体悬浮培养BHK-21细胞,通过对培养工艺的研究,初步实现了病毒抗原的高效生产。整个过程采用流加方式和动物细胞微载体培养技术,在细胞反应器中进行BHK-21高密度培养和PRV的高滴度增殖。结果表明,微载体工艺比转瓶培养法获得的病毒液滴度高约100.525TCID50/0.1 m L。因此,应用Cephodex微载体悬浮培养BHK-21细胞在伪狂犬病疫苗规模化生产中具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 生物反应器 细胞培养 微载体 伪狂犬病毒 疫苗
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小牛皮提取的胶原-微载体用于贴壁细胞大规模培养 被引量:5
4
作者 陈因良 李雨田 +5 位作者 张书元 宋瑶君 叶南章 华平 袁滔 丁健椿 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第2期157-163,共7页
由于胶原蛋白具有与含牛血清培养基中纤粘素(Fibronectin)一类物质相结合的特点,因而胶原是一类来源广泛的可用作制备细胞培养介质的优良基质。经过各种形式的细胞培养试验,以变性胶原为材料合成得到的GT-2微载体可成功地用于Vero、CHO... 由于胶原蛋白具有与含牛血清培养基中纤粘素(Fibronectin)一类物质相结合的特点,因而胶原是一类来源广泛的可用作制备细胞培养介质的优良基质。经过各种形式的细胞培养试验,以变性胶原为材料合成得到的GT-2微载体可成功地用于Vero、CHO、Bowes以及鱼类细胞的贴壁培养。培养规模包括不同容积的静置培养、滚瓶培养以及1.5L和20L进口和国产生物反应器的大规模细胞培养。 展开更多
关键词 生物反应器 胶原 微载体 细胞培养
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动物细胞悬浮培养技术研究进展 被引量:11
5
作者 周欣 程海卫 +2 位作者 王永生 王川庆 杨霞 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第11期129-134,共6页
细胞悬浮培养是利用生物反应器大规模培养动物细胞生产生物制品的核心技术,是当前国际上生物制品生产的主流模式。作者就微载体的发展、各种生物反应器的基本原理及应用状况、悬浮培养技术存在问题、中国悬浮培养技术产业化存在的挑战... 细胞悬浮培养是利用生物反应器大规模培养动物细胞生产生物制品的核心技术,是当前国际上生物制品生产的主流模式。作者就微载体的发展、各种生物反应器的基本原理及应用状况、悬浮培养技术存在问题、中国悬浮培养技术产业化存在的挑战和展望等作一综述。 展开更多
关键词 悬浮培养 微载体 生物反应器
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微载体技术体外扩增人骨髓间充质干细胞 被引量:6
6
作者 单建林 许建中 +3 位作者 周强 王序全 朱灏 赵敏 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2004年第15期1158-1160,共3页
目的 :建立一种快速、大量扩增人骨髓间充质干细胞 (hMSCs)的方法 ,以满足组织工程技术治疗大段骨缺损对细胞数量的需要。方法 :普通培养的第 3代人MSCs1× 10 7个及 0 5gCytodex3微载体 ,加入有 10 0ml培养基的搅拌生物反应器中培... 目的 :建立一种快速、大量扩增人骨髓间充质干细胞 (hMSCs)的方法 ,以满足组织工程技术治疗大段骨缺损对细胞数量的需要。方法 :普通培养的第 3代人MSCs1× 10 7个及 0 5gCytodex3微载体 ,加入有 10 0ml培养基的搅拌生物反应器中培养 ,在前 6h ,每隔半小时以 40r/min的速度搅拌 2min ,以后连续搅拌。于培养的第 1、 3、 5、7、 9、 11d取样在相差显微镜下动态观察细胞生长情况 ,最后进行细胞表面生长因子的检测。结果 :接种 2 4h后 87%的MSCs细胞贴附于微载体并铺展 ,3d后生长加速 ,约 8~ 9d后细胞生长达最大值。最终细胞收获密度为接种时的约 15~ 2 0倍。流式细胞仪检测显示 ,所培养的MSCs均一的表达CD2 9和CD44 ,而CD3 4、CD45和HLA DR阴性。结论 :应用微载体技术可以大量、快速的培养扩增人骨髓间充质干细胞 ,细胞表面抗原特性不变 。 展开更多
关键词 微载体 生物反应器 人间充质干细胞 细胞培养
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细胞生物反应器大规模培养草鱼细胞和病毒 被引量:6
7
作者 叶雪平 杨广智 +2 位作者 罗毅志 陈因良 陈志宏 《水产学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第1期1-6,共6页
应用细胞生物反应器微载体悬浮培养法,对草鱼胚胎细胞 CP-80 进行大规模培养,同时增殖草鱼出血病病毒。细胞经培养6天后,细胞量可达到8.4×10~6cells/ml,较始接量(2×10~5cells/ml)提高了41倍。接入草鱼出血病病毒后,经5天培养... 应用细胞生物反应器微载体悬浮培养法,对草鱼胚胎细胞 CP-80 进行大规模培养,同时增殖草鱼出血病病毒。细胞经培养6天后,细胞量可达到8.4×10~6cells/ml,较始接量(2×10~5cells/ml)提高了41倍。接入草鱼出血病病毒后,经5天培养增殖,毒力达到8.0LgTCID_(50)/0.1ml,较始接毒力(3.75LgTCID_(50)/0.1ml)增加了4.25个对数值。 展开更多
关键词 草鱼 细胞 悬浮培养 病毒
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快速扩增羊软骨细胞的生物学特性观察 被引量:1
8
作者 张莉 许文静 +4 位作者 郭全义 眭翔 袁玫 黄靖香 卢世璧 《军医进修学院学报》 CAS 北大核心 2006年第6期443-444,共2页
目的:观察在旋转生物反应器内微载体技术快速扩增的羊软骨细胞生物学特性。方法:将培养的羊软骨细胞应用Cytodex-3微载体在旋转生物反应器(RCSS)内,进行动态培养,应用倒置显微镜和扫描电子显微镜对微载体表面的软骨细胞进行动态... 目的:观察在旋转生物反应器内微载体技术快速扩增的羊软骨细胞生物学特性。方法:将培养的羊软骨细胞应用Cytodex-3微载体在旋转生物反应器(RCSS)内,进行动态培养,应用倒置显微镜和扫描电子显微镜对微载体表面的软骨细胞进行动态观察,对收获的软骨细胞进:行细胞计数、蕃红花“0”染色、Ⅱ型胶原的细胞免疫组化分析。结果:关节软骨细胞于1d内贴附于Cytodex-3微载体表面,到12d,细胞密度可达最初接种的15—17倍,经蕃红花“0”染色为阳性、Ⅱ型胶原染色则呈强阳性。结论:利用微载体细胞培养技术可简便快速地在体外扩增羊软骨细胞。 展开更多
关键词 生物反应器 微载体 软骨细胞 细胞 培养的
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MDCK细胞悬浮培养技术在流感疫苗中的应用 被引量:6
9
作者 杨思思 汪一名 李媛媛 《科技创新与生产力》 2017年第10期44-48,共5页
介绍了国内外MDCK细胞悬浮培养技术的工业化发展现状,通过对比,总结了MDCK细胞生产流感疫苗的优点,详细阐述了流感疫苗MDCK细胞悬浮培养的关键技术,分析了流感疫苗生产用MDCK细胞的致瘤性;随着现代生物技术的发展,利用细胞悬浮培养技术... 介绍了国内外MDCK细胞悬浮培养技术的工业化发展现状,通过对比,总结了MDCK细胞生产流感疫苗的优点,详细阐述了流感疫苗MDCK细胞悬浮培养的关键技术,分析了流感疫苗生产用MDCK细胞的致瘤性;随着现代生物技术的发展,利用细胞悬浮培养技术进行疫苗生产是生物制药行业发展的必然趋势,流感疫苗MDCK细胞无血清悬浮培养技术的研究具有跨时代的意义。 展开更多
关键词 生物反应器 细胞悬浮培养 微载体培养 MDCK细胞 流感疫苗
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动物细胞培养反应器的流体循环和氧传递规律 被引量:3
10
作者 张元兴 陈因良 《华东化工学院学报》 CSCD 1989年第4期504-509,共6页
本文研究了Celligen细胞培养反应器的循环性能和氧传递规律,发现按几何比例放大,循环性能仅与转速有关。氧的传递速率受转速影响很小,是搅拌器丝网面积和通气量的函数。根据实验数据,建立了提升筒中的流动、氧的传递的关联式。
关键词 细胞培养 反应器 流体循环
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动物细胞大规模培养技术研究进展 被引量:4
11
作者 吴方丽 金伟波 +1 位作者 王保莉 张涌 《仲恺农业技术学院学报》 2005年第3期64-70,共7页
利用动物细胞大规模培养技术可生产多种生物制品,为提高细胞活力和细胞生长密度,采用有多种添加成分的无血清培养基培养细胞,选择既有利于细胞生长又可提高培养细胞密度的微载体和条件温和、易操作、气体交换速度快的生物反应器,在线监... 利用动物细胞大规模培养技术可生产多种生物制品,为提高细胞活力和细胞生长密度,采用有多种添加成分的无血清培养基培养细胞,选择既有利于细胞生长又可提高培养细胞密度的微载体和条件温和、易操作、气体交换速度快的生物反应器,在线监控细胞生存环境和生理活动,减少培养过程中培养基的抑制因素,从而给细胞提供更好的生存环境;另外通过向细胞中导入抗凋亡基因,可减缓细胞凋亡的发生,提高细胞活性和蛋白产量;此外,在动物细胞大规模培养过程中,利用多孔微载体能高效、大量地增殖细胞,具有良好的应用前景. 展开更多
关键词 动物细胞 培养环境 生物反应器 微载体
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空间微载体细胞培养技术的地面研究
12
作者 汪恭质 张光明 +3 位作者 俞雪冰 李向高 杨唐斌 张晓铀 《航天医学与医学工程》 CAS CSCD 1996年第1期37-41,共5页
为建立适合空间应用的细胞培养技术,利用自行研制的细胞培养反应器,采用微载体悬浮培养系统,对L929细胞和CHO细胞进行了培养。结果表明:在面积相同条件下,微载体悬浮培养的细胞产量是不加微载体单层培养的26倍;微载体浓... 为建立适合空间应用的细胞培养技术,利用自行研制的细胞培养反应器,采用微载体悬浮培养系统,对L929细胞和CHO细胞进行了培养。结果表明:在面积相同条件下,微载体悬浮培养的细胞产量是不加微载体单层培养的26倍;微载体浓度为2m/ml,相对高一些细胞接种密度;10%左右的血清含量培养基为较优的细胞培养条件。为适合空间条件的需要,采用倍增补液法与微载体球间细胞转移法,探索了细胞扩增培养的途径。同时,对适合空间细胞培养的反应器进行了探索研究。 展开更多
关键词 细胞培养 微载体 生物反应器
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用国产生物反应器大规模高密度培养Vero细胞 被引量:5
13
作者 董树沛 陈因良 +4 位作者 顾小华 严春 宋家骊 陈列胜 陈文兰 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1992年第4期389-393,共5页
本文考察了在2.5LCelliGen细胞培养器和国产20LCellCul-20细胞培养生物反应器中采用微载体技术培养细胞的情况。分析了用CellCul-20细胞培养生物反应器进行大规模培养时细胞的生长、代谢规律,研究了从2.5L扩大到20L规模的细胞转移条件... 本文考察了在2.5LCelliGen细胞培养器和国产20LCellCul-20细胞培养生物反应器中采用微载体技术培养细胞的情况。分析了用CellCul-20细胞培养生物反应器进行大规模培养时细胞的生长、代谢规律,研究了从2.5L扩大到20L规模的细胞转移条件。采用微载体球间直接转移技术,提高了接种效率,减少了接种步骤和污染机会。当国产GT-25微载体用尾为5g/L,采用连续灌注工艺培养Vero细胞,在国产20L CellCul-20细胞培养生物反应器中,连续培养5天,细胞数增加7倍,细胞密度超过1.0×10~7cells/ml。本文开发的细胞培养工艺,对于中试及工业规模的动物细胞大量培养具有一定的指导意义。 展开更多
关键词 VERO细胞 细胞培养 生物反应器
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VERO细胞生物反应器放大培养初探 被引量:6
14
作者 许刚 周景明 +2 位作者 付欣 马兰 王文乐 《生物技术》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期53-56,共4页
目的:研究用生物反应器放大进行Vero细胞微载体培养,实现生物反应器之间Vero细胞放大培养。方法:5L微载体生物反应器以10g/L微载体浓度培养Vero细胞,96h时经漂洗、消化、接种于30L微载体生物反应器,实现放大后的30L微载体生物反应器细... 目的:研究用生物反应器放大进行Vero细胞微载体培养,实现生物反应器之间Vero细胞放大培养。方法:5L微载体生物反应器以10g/L微载体浓度培养Vero细胞,96h时经漂洗、消化、接种于30L微载体生物反应器,实现放大后的30L微载体生物反应器细胞快速增殖,期间对不同时期的微载体细胞进行细胞计数、细胞代谢分析和形态观察。结果:5L生物反应器细胞经过96h灌注培养,平均细胞密度达到7.81×106cells/mL。5L微载体细胞放大到30L微载体生物反应器,平均细胞收获率为32.3%;放大到30L生物反应器后经过144h培养,细胞密度达到9.19×106cells/mL;放大后的细胞代谢途径依然以葡萄糖氧化代谢乳酸为主。结论:生物反应器由5L到30L进行Vero细胞放大培养是可行的。 展开更多
关键词 Vero细胞培养 微载体 生物反应器 接种
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三维培养人多能干细胞的研究与进展 被引量:2
15
作者 秦丽颖 张瑞 +3 位作者 任晓琳 韩雨 陈浩斐 周平 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第17期2753-2761,共9页
背景:人多能干细胞具有体外长期自我更新和分化为几乎所有体细胞类型的独特潜能,在细胞治疗、再生医学、药物筛选、毒理学测定、疾病建模和立体器官发生等领域有广泛的应用前景。传统体外二维培养方法难以获得大量的细胞,而三维培养技... 背景:人多能干细胞具有体外长期自我更新和分化为几乎所有体细胞类型的独特潜能,在细胞治疗、再生医学、药物筛选、毒理学测定、疾病建模和立体器官发生等领域有广泛的应用前景。传统体外二维培养方法难以获得大量的细胞,而三维培养技术为人多能干细胞的大规模生产开辟了一条新的途径。目的:对目前人多能干细胞三维培养的研究进展作一综述。方法:应用计算机检索PubMed和CNKI数据库2005年1月至今有关人多能干细胞三维培养的文章,英文检索词为"human pluripotent stem cells,three dimension culture,microcarrier,suspension culture,aggregates,hydrogel,microencapsulation,bioreactor system,pluripotency",中文检索词为"多能干细胞,三维培养",保留77篇文献进行分析。结果与结论:细胞聚集体、微载体和水凝胶是目前实验室三维培养多能干细胞的主要形式。与二维培养相比,三维培养可更高效地扩增细胞,提高细胞产量,为人多能干细胞临床应用奠定了良好的基础。 展开更多
关键词 人多能干细胞 三维培养 细胞聚集体 微载体 水凝胶 生物反应器 细胞扩增 国家自然科学基金
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大规模动物细胞培养技术研究进展 被引量:4
16
作者 邹寿长 李干祥 +1 位作者 杨葆生 徐秀英 《生命科学研究》 CAS CSCD 2001年第2期102-108,共7页
利用动物细胞大规模培养技术可生产多种生物制品 .为提高细胞活力和表达水平及有利于表达产物的纯化 ,采用有多种添加成分的无血清培养基培养细胞 ,选择更有利于细胞生长又可提高培养细胞密度的微载体和条件温和、易操作、气体交换速度... 利用动物细胞大规模培养技术可生产多种生物制品 .为提高细胞活力和表达水平及有利于表达产物的纯化 ,采用有多种添加成分的无血清培养基培养细胞 ,选择更有利于细胞生长又可提高培养细胞密度的微载体和条件温和、易操作、气体交换速度快的生物反应器 .在线监控细胞生存环境和生理活动 ,减少培养过程培养基中的抑制因素 ,可创造更适合细胞生存的环境 ,提高表达水平 .向细胞中导入抗凋亡基因 ,可提高细胞活性和蛋白产量 .利用多孔微载体以球转球方式大规模培养动物细胞有很好的发展前景 . 展开更多
关键词 细胞培养 生物反应器 动物细胞 微载体
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悬浮培养技术在生物制药中的应用和展望 被引量:21
17
作者 张韧 秦玉明 +3 位作者 陈文庆 刘华杰 王建超 高飞 《中国兽药杂志》 2011年第3期56-60,共5页
综述了国内外细胞悬浮培养产业化发展现状及其关键技术。细胞悬浮培养是利用生物反应器大规模培养动物细胞生产生物制品的核心技术,结合筛选驯化的高表达细胞株和个性化细胞培养基,控制细胞培养过程,实现提高生产效率及产品质量、降低... 综述了国内外细胞悬浮培养产业化发展现状及其关键技术。细胞悬浮培养是利用生物反应器大规模培养动物细胞生产生物制品的核心技术,结合筛选驯化的高表达细胞株和个性化细胞培养基,控制细胞培养过程,实现提高生产效率及产品质量、降低生产成本的目的,是当前国际上生物制品生产的主流模式。但该技术目前在国内尚未得到广泛应用,生物制品生产仍主要采用病毒产率低、生产成本高、劳动强度大的转瓶细胞培养方式。随着现代生物技术发展,利用细胞悬浮培养技术进行生物制品生产是生物制药行业发展的必然趋势。 展开更多
关键词 悬浮培养 微载体培养 个性化细胞培养基 生物反应器
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悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的比较分析 被引量:21
18
作者 陈文庆 王建超 +2 位作者 刘华杰 高飞 张韧 《中国兽药杂志》 2010年第10期37-41,共5页
采用反应器全悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒与微载体悬浮培养Vero细胞生产狂犬病毒分别与相应的转瓶培养工艺生产案例对比分析,比较悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的生产效益。分析显示,与转瓶培养工艺相比,反应器悬浮培养工艺获得的细... 采用反应器全悬浮培养BHK21细胞生产口蹄疫病毒与微载体悬浮培养Vero细胞生产狂犬病毒分别与相应的转瓶培养工艺生产案例对比分析,比较悬浮培养工艺与转瓶培养工艺的生产效益。分析显示,与转瓶培养工艺相比,反应器悬浮培养工艺获得的细胞密度、病毒效价、产品的产量和质量明显提高,生产时的能耗和劳动力需求明显降低。结果表明悬浮培养工艺的生产效益明显高于转瓶培养工艺,适宜于国内生物制品工业化生产的升级换代。 展开更多
关键词 细胞培养 生物反应器 悬浮培养 微载体
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反应器细胞悬浮培养和微载体培养技术在动物疫苗生产中的应用 被引量:14
19
作者 张韧 王建超 +4 位作者 陈文庆 刘华杰 高飞 徐舸辰 林龙飞 《中国兽药杂志》 2012年第11期39-43,共5页
介绍了反应器悬浮培养技术在国内外疫苗生产中的研发和应用现状。目前该技术已经在国内口蹄疫疫苗生产中获得成功应用,利用MDCK、Vero等细胞培养生产禽流感疫苗的技术也正在积极研发中。积极推广和应用这一技术将是我国兽用生物制品生... 介绍了反应器悬浮培养技术在国内外疫苗生产中的研发和应用现状。目前该技术已经在国内口蹄疫疫苗生产中获得成功应用,利用MDCK、Vero等细胞培养生产禽流感疫苗的技术也正在积极研发中。积极推广和应用这一技术将是我国兽用生物制品生产工艺升级换代的必然趋势。 展开更多
关键词 生物反应器 悬浮培养 微载体培养 口蹄疫 禽流感
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哺乳动物细胞悬浮培养技术及其应用
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作者 陈铭杰 毕海洋 +8 位作者 马懿昭 章圣华 张艳艳 张燕茹 杨松柏 周晓龙 乔自林 李向臣 武永淑 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2024年第9期1711-1718,共8页
悬浮培养技术是将细胞悬浮于培养液中,用于病毒增殖或蛋白表达的技术。该技术具有细胞培养规模大、目的产物表达量高、表达产物质量好和利于产业化等优点。当前,多种细胞已通过选择合适的生物反应器、使用微载体和无血清培养基等方法被... 悬浮培养技术是将细胞悬浮于培养液中,用于病毒增殖或蛋白表达的技术。该技术具有细胞培养规模大、目的产物表达量高、表达产物质量好和利于产业化等优点。当前,多种细胞已通过选择合适的生物反应器、使用微载体和无血清培养基等方法被成功悬浮培养,用于病毒灭活疫苗、重组蛋白和细胞治疗等领域。该文阐述了哺乳动物细胞悬浮培养技术以及其在病毒灭活疫苗、重组蛋白和细胞治疗等方面的应用,以期为悬浮培养技术的发展和应用提供一定参考。 展开更多
关键词 哺乳动物细胞 生物反应器 微载体 无血清培养基 生物制品
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