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EST-Based Identification of Genes Expressed in Skeletal Muscle of the Mandarin Fish (Siniperca chuatsi) 被引量:1
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作者 Feng Ding Wuying Chu +5 位作者 Peng Cui Meng Tao Ruixue Zhou Falan Zhao Songnian Hu Jianshe Zhang 《Genomics, Proteomics & Bioinformatics》 SCIE CAS CSCD 2011年第1期30-36,共7页
To enrich the genomic information of the commercially important fish species, we obtained 5,063 high-quality expressed sequence tags (ESTs) from the muscle cDNA database of the mandarin fish (Siniperca chuatsi). C... To enrich the genomic information of the commercially important fish species, we obtained 5,063 high-quality expressed sequence tags (ESTs) from the muscle cDNA database of the mandarin fish (Siniperca chuatsi). Clustering analysis yielded 1,625 unique sequences including 443 contigs (from 3,881 EST sequences) and 1,182 sin- gletons. BLASTX searches showed that 959 unique sequences shared homology to proteins in the NCBI non-redundant database. A total of 740 unique sequences were functionally annotated using Gene Ontology. The 1,625 unique sequences were assigned to Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes reference pathways, and the results indicated that transcripts participating in nucleotide metabolism and amino acid metabolism are relatively abundant in S. chuatsi. Meanwhile, we identified 15 genes to be abundantly expressed in muscle of the mandarin fish. These genes are involved in muscle structural formation and regulation of muscle differentiation and development. The most remarkable gene in S. chuatsi is nuclease diphosphate kinase B, which is represented by 449 EST sequences accounting for 8.86% of the total EST sequences. Our work provides a transcript profile expressed in the white muscle of the mandarin fish, laying down a foundation in better understanding of fish genomics. 展开更多
关键词 mandarin fish cdna library est muscle
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香猪肌肉组织cDNA文库的构建及其EST测序成功率的分析 被引量:12
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作者 王秀利 李宁 +4 位作者 赵志辉 冯继东 赵兴波 李长绿 吴常信 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期263-266,共4页
以香猪背最长肌为实验材料 ,以LambdaZAPII为载体 ,构建了肌肉组织的cDNA文库。结果表明 ,cDNA文库的滴度在 3.4× 10 7pfu/ml以上 ,重组率在 94%以上 ,插入片段大小平均在 1.5kb以上。同时指出 ,如果从 3′端测序 ,多于 30个碱基T... 以香猪背最长肌为实验材料 ,以LambdaZAPII为载体 ,构建了肌肉组织的cDNA文库。结果表明 ,cDNA文库的滴度在 3.4× 10 7pfu/ml以上 ,重组率在 94%以上 ,插入片段大小平均在 1.5kb以上。同时指出 ,如果从 3′端测序 ,多于 30个碱基T的插入片段是造成ESTs测序成功率低的主要因素。 展开更多
关键词 香猪 肌肉组织 cdna文库 est测序 成功率
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鳜肌肉组织cDNA文库构建及其ESTs分析 被引量:3
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作者 蒙涛 丁峰 +4 位作者 褚武英 周瑞雪 宾石玉 胡松年 张建社 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2009年第4期29-33,共5页
以鳜(Siniperca chutasi)肌肉为实验材料,采用非均一化引物定向克隆技术构建了鳜肌肉组织cDNA文库,并进行大规模EST测序和序列分析。结果显示,cDNA文库的库容量为2.3×105,重组率达96.5%,平均插入片段长度为1.2 kb。随机挑选5456个... 以鳜(Siniperca chutasi)肌肉为实验材料,采用非均一化引物定向克隆技术构建了鳜肌肉组织cDNA文库,并进行大规模EST测序和序列分析。结果显示,cDNA文库的库容量为2.3×105,重组率达96.5%,平均插入片段长度为1.2 kb。随机挑选5456个克隆,成功测序5191个,其中高质量序列5063个,达97.5%。利用PHRAP程序聚类拼接后,得到1625条非冗余序列,包括443个重叠群(Contigs),1182个单拷贝(Singlets)。使用BLAST软件将这些序列同GenBank等数据库进行比对、注释,发现1625个非冗余序列与鳜肌肉结构和发生相关,而其中991条序列与NCBI数据库中的其它物种已知序列存在显著的相似性,剩余的634条非冗余序列(占所有非冗余序列的39%)为在鳜中新发现的未找到同源序列的序列。740个基因为能够注释到Gene ontology(Go)中的序列数目。 展开更多
关键词 鳜(Siniperca chutasi) 肌肉 cdna文库 est
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大黄鱼肌肉组织cDNA全长文库的构建及EST分析 被引量:4
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作者 黄伟 薛良义 +1 位作者 李婷 杨斌 《台湾海峡》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期189-195,共7页
以大黄鱼肌肉组织为材料,利用Creator Smart cDNA Library Construction Kit构建了大黄鱼肌肉组织的全长cDNA文库.文库质量分析表明:cDNA文库容量不低于1.68×106cfu/mm3,重组率达96%,插入片断的平均长度大于1 000bp.随机挑取512个c... 以大黄鱼肌肉组织为材料,利用Creator Smart cDNA Library Construction Kit构建了大黄鱼肌肉组织的全长cDNA文库.文库质量分析表明:cDNA文库容量不低于1.68×106cfu/mm3,重组率达96%,插入片断的平均长度大于1 000bp.随机挑取512个cDNA克隆进行5’端测序,其中430条ESTs的长度大于100bp;并初步拼接得到了230个单基因簇(unigene),其中包括58个重叠群(contigs),172个单拷贝ESTs(singletons),冗余度为46.51%.经检索,35个ESTs在BLASTx上无明显的同源性(E值≤1.00×10-10),为新基因.195个ESTs与已报道的基因有较高的同源性;其中与能量相关基因的ESTs丰度最高,占总数的20.00%.蛋白质合成、细胞骨架和信号传导次之,比例分别为13.48%、12.17%、10.00%,其中包括高迁移率族蛋白B1、瘦素受体、β1-热激蛋白等.这些EST数据为进一步筛选和克隆大黄鱼肌肉特异性表达基因提供了平台. 展开更多
关键词 海洋生物学 大黄鱼 肌肉组织 cdna全长文库 表达序列标签(ests)
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曼氏无针乌贼肌肉cDNA文库的构建和表达序列标签分析 被引量:2
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作者 蒋霞敏 王佳 +1 位作者 薛良义 曾建刚 《台湾海峡》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期357-362,共6页
以曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)肌肉组织为研究材料,利用Clontech公司的cDNA文库构建试剂盒构建了曼氏无针乌贼肌肉cDNA文库.对文库质量的分析结果表明:cDNA文库的库容量约为1.2×106克隆(cfu/dm3),重组率达96%,插入片段平均... 以曼氏无针乌贼(Sepiella maindroni)肌肉组织为研究材料,利用Clontech公司的cDNA文库构建试剂盒构建了曼氏无针乌贼肌肉cDNA文库.对文库质量的分析结果表明:cDNA文库的库容量约为1.2×106克隆(cfu/dm3),重组率达96%,插入片段平均长度大于1 000 bp.挑取568个阳性克隆进行5’末端测序,其中475条ESTs长度大于100 bp,初步拼接后得到200个单基因簇,包括41个重叠群和159个单拷贝EST,冗余度为57.89%.经检索,53条ESTs(占比为26.5%)在BLASTx上无明显的同源性(E值≥1.00×10-10),为新基因.147条ESTs(占比为73.5%)与已报道的基因有较高的同源性;其中与能量相关基因的ESTs丰度最高,占总数的23.0%.细胞信号传导、细胞骨架和蛋白质代谢的次之,比例分别为17.5%、12.5%、9.5%,其中包括热激蛋白70、转铁蛋白等.这些EST数据有助于进一步筛选和克隆曼氏无针乌贼和其他头足动物的肌肉特异性表达基因. 展开更多
关键词 海洋生物学 曼氏无针乌贼 肌肉组织 cdna文库 表达序列标签(ests)
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