鳜(Siniperca chuatsi)后部侧线系统胚后发育

利用神经丘荧光染色、组织切片、扫描电镜对鳜(Siniperca chuatsi)后部侧线系统的胚后发育过程与结构特点进行了研究。结果显示,在6-10 dpf期间躯干已出现前体管道神经丘(L1-L7),至58 dpf后部侧线系统主要结构发育完成,23-58 dpf后部侧线系统神经丘结构变化、数量增长均较为明显,同时侧线管道也在这一时期建立完成;躯干上由水平、垂直方向敏感的表面神经丘交替排列,躯干侧线管道系统属于完整弓形结构,管道侧线与表面神经丘均集中排列于躯干背侧。研究结果表明,鳜侧线管道结构、神经丘结构发育与排布方式增强了其后部侧线系统对上层水体的感知能力,上述结构特征与鳜底栖生活习性相适应。本研究为解读鳜侧线系统结构提供了重要研究资料,也为鲈形目其他鱼类的比较研究提供了具体参考。

鳜嗜水气单胞菌GYK1株胞外产物提取、纯化及生物学活性分析

以鳜分离的嗜水气单胞菌GYK1株为代表，采用玻璃纸覆盖技术提取了8株嗜水气单胞菌和1株温和气单胞菌的胞外产物，SDS-PAGE电泳分析显示，8株嗜水气单胞菌的胞外产物均有35kDa的共同蛋白带。酶活性和溶血性分析表明，GYK1株胞外产物具有酪蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、明胶酶活性，但不具备脲酶活性；溶血性较强，蛋白浓度为365 μg·mL^-1的胞外产物对鳜血细胞的溶血价为2^13，对加州鲈、银鲫、小白鼠、兔、绵羊、人O型血的红细胞的溶血价在2^11～2^14之间。应用聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶柱层析，对GYK1株的胞外产物进行了初步纯化，得到分子量为35 kDa的蛋白带，该纯化产物具溶血性，但溶血性比粗胞外产物降低，对鳜和小鼠血细胞的溶血价均为2^5。

通过显微介导将鳜总DNA片段导入镜鲤基因组的分子验证

利用外源基因导入技术,将1nL左右未经遗传修饰的鳜Siniperca chuatsi基因组DNA导入2500余粒镜鲤Cyprinus carpio受精卵核区附近,孵出仔鱼1500余尾,放入池塘300尾正常饲养。利用引物(E-AGG,M-CTA)对显微介导鳜基因镜鲤进行扩增片段长度多态性(AFLP)检测,研究显微介导外源总DNA转化当代的分子生物学结果。结果表明:在AFLP的15对引物中,显微介导鳜基因镜鲤中有3对引物扩增出了供体鳜基因片段,从DNA水平上验证了在受体鱼的基因组中整合了供体基因片段。将6尾阳性显微介导鳜基因镜鲤与供体鳜相同的AFLP条带进行切下、回收、克隆、测序,发现供体鳜片段序列与阳性显微介导鳜基因镜鲤片段序列完全一致,找到了精确的遗传证据。本研究结果为构建转全鳜基因镜鲤AFLP检测体系,从基因角度研究供体大片段在受体鱼中的导入情况提供了理论依据。

翘嘴鳜肝肾坏死症病原菌的分离及初步鉴定

从主要呈现肝肾坏死症的翘嘴鳜病灶部位分离到 9个菌株 ,其中 3个菌株能通过人工感染在正常翘嘴鳜上复制出与自然发病相同的症状。用直接荧光抗体法对致病菌株的鉴定结果表明 ,本研究中分离的 3个菌株均不同于过去从患病翘嘴鳜上已经分离到的柱状嗜纤维菌 (Cytophagacolumnaris)和嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila)。

鳜鱼的胚胎、仔稚鱼发育观察

以千岛湖中生长的性成熟鳜鱼Siniperca chuatsi(Basil.)进行人工催产,所获受精卵放入孵化缸中孵化,连续观察胚胎、及胚后(仔稚鱼)发育变化,直至16日龄止。在形态观察的同时,注意其营养方式的转化和食料的选择。在水温26℃(±2)条件下,仔鱼在4～6日龄卵黄囊消失,开始吞食其他活鱼苗,如缺乏适口的饵料鱼,鳜苗会相互吞食,这是鳜鱼人工繁殖过程中出苗率不高的主要原因。寻找鳜苗的开口饵料鱼是一个新的课题。