志贺菌主动外排泵调控基因marOR突变与耐药的关系

目的 探讨临床分离志贺菌调控基因marOR的突变对细菌耐药性的影响.方法 利用重叠延伸PCR扩增4个碱基缺失的marOR基因,与T载体连接后转入DH5α,得到4个碱基缺失的marOR基因克隆株 4个碱基缺失联合3个点突变的marOR基因克隆株是扩增具有该突变菌株的marOR基因,然后与T载体连接后转入DH5α所得 通过凝胶电泳图谱和核酸序列分析证实克隆成功与否 检测DH5α、转入T载体后的DH5α[DH5α（T）]、完整marOR基因克隆株[DH5α（marOR）]、4个碱基缺失的marOR基因克隆株[DH5α（marOR-ACTT）]及4个碱基缺失联合3个点突变的marOR基因克隆株[DH5α（marOR-CATT＋3m）]对多种抗生素的耐药性,并进行比较.结果 按抑菌环直径相差5 mm以上为抗生素耐药性有差别：与DH5α（T）比较,DH5α（marOR-ACTT）对链霉素、妥布霉素、先锋V、头孢氨苄的耐药性增加,DH5α（marOR-ACTT＋3m）对链霉素和四环素的耐药性增加 与DH5α（marOR）比较,DH5α（marOR-ACTT）和DH5α（marOR-ACTT＋3m）对链霉素、四环素、氯霉素、先锋V、左氟沙星、环丙沙星和氟哌酸的耐药性增加 DH5o（marOR-CATT）与DH5α（marOR-CATT＋3m）相比对除甲氧苄啶外的试验所用抗生素的抑菌环直径无明显差异.结论 marOR基因第1376～1379处的4个碱基缺失,使志贺菌对部分抗生素的耐药性增加 marOR基因第1411、1417、1435处的点突变对志贺菌的耐药性的影响较小.