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大豆成熟种子萌发叶片体细胞胚的高频诱导和遗传转化
1
作者
孙明杰
侯恒
+1 位作者
赵春梅
薛仁镐
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2023年第8期1937-1945,共9页
目的虽然大豆遗传转化取得了较大进展,但其转化效率仍然偏低。因此,有必要建立一个更加简单和高效的大豆转化系统。本研究的目的是以大豆成熟种子萌发产生的叶片(MSDL)为靶外植体,高频诱导和转化大豆体细胞胚(somatic embryos,SEs)。方...
目的虽然大豆遗传转化取得了较大进展,但其转化效率仍然偏低。因此,有必要建立一个更加简单和高效的大豆转化系统。本研究的目的是以大豆成熟种子萌发产生的叶片(MSDL)为靶外植体,高频诱导和转化大豆体细胞胚(somatic embryos,SEs)。方法萌发7 d的大豆幼苗上摘取叶片,并将其切成1.2 cm×1.2 cm的外植体。将叶片外植体置于胚胎诱导培养基(EIM)上诱导体细胞胚发生。将叶片外植体浸入携带p CAMBIA1301植物表达载体的农杆菌EHA105菌液进行遗传转化。结果MSDL(包括初生叶和次生叶)均能被诱导产生SEs。大多数SE发生在叶片切口处。所试的不同基因型均能诱导SEs。SEs的最高诱导率为95.0%。β葡糖醛酸糖苷酶(GUS)染色结果表明,平均转化效率达到75.4%。DNA印迹(Southern blot)结果表明,目的基因稳定整合在大豆基因组中,拷贝数为1~3个。结论本研究建立了以大豆MSDL为靶组织的体细胞胚高频诱导和遗传转化。该系统有望在大豆基因组编辑技术的开发上得到应用。
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关键词
胚胎发生
成熟叶片
体细胞胚
大豆
转化
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职称材料
题名
大豆成熟种子萌发叶片体细胞胚的高频诱导和遗传转化
1
作者
孙明杰
侯恒
赵春梅
薛仁镐
机构
青岛农业大学生命科学学院
山东宝来利来生物工程股份有限公司
出处
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2023年第8期1937-1945,共9页
基金
山东省自然科学基金(ZR2019MC033)资助项目。
文摘
目的虽然大豆遗传转化取得了较大进展,但其转化效率仍然偏低。因此,有必要建立一个更加简单和高效的大豆转化系统。本研究的目的是以大豆成熟种子萌发产生的叶片(MSDL)为靶外植体,高频诱导和转化大豆体细胞胚(somatic embryos,SEs)。方法萌发7 d的大豆幼苗上摘取叶片,并将其切成1.2 cm×1.2 cm的外植体。将叶片外植体置于胚胎诱导培养基(EIM)上诱导体细胞胚发生。将叶片外植体浸入携带p CAMBIA1301植物表达载体的农杆菌EHA105菌液进行遗传转化。结果MSDL(包括初生叶和次生叶)均能被诱导产生SEs。大多数SE发生在叶片切口处。所试的不同基因型均能诱导SEs。SEs的最高诱导率为95.0%。β葡糖醛酸糖苷酶(GUS)染色结果表明,平均转化效率达到75.4%。DNA印迹(Southern blot)结果表明,目的基因稳定整合在大豆基因组中,拷贝数为1~3个。结论本研究建立了以大豆MSDL为靶组织的体细胞胚高频诱导和遗传转化。该系统有望在大豆基因组编辑技术的开发上得到应用。
关键词
胚胎发生
成熟叶片
体细胞胚
大豆
转化
Keywords
embryogenesis
mature
seed-derived
leaf
(
msdl
)
somatic embryos(SEs)
soybean
transformation
分类号
Q7 [生物学—分子生物学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
大豆成熟种子萌发叶片体细胞胚的高频诱导和遗传转化
孙明杰
侯恒
赵春梅
薛仁镐
《生物化学与生物物理进展》
SCIE
CAS
CSCD
北大核心
2023
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