对比mbk-2基因不同增强子对秀丽隐杆线虫胚胎发育的影响

目的:使用mbk-2突变型秀丽隐杆线虫作为模式生物,探究mbk-2及其增强子对线虫胚胎发育的影响。方法:通过RNAi技术定向沉默mbk-2增强子pptr-1、pptr-2、rsa-1和rsa-2,观察mbk-2增强子沉默后线虫虫卵未孵化率和胚胎发育期的变化。结果:mbk-2突变型线虫虫卵未孵化率为1.56±0.25%,显著高于N2野生型组(0)(P<0.05);使用pptr-2、rsa-1和rsa-2 RNAi细菌喂养的N2野生型线虫虫卵未孵化率分别为5.77±0.24%、4.40±0.03%和6.03±1.19%,均显著高于L4440细菌喂养的N2正常组(0)(P<0.05);pptr-1、pptr-2、rsa-1和rsa-2 RNAi细菌喂养的mbk-2突变型线虫虫卵未孵化率分别为3.78±0.14%、75.53±2.29%、41.79±0.76%和51.65±8.23%,均显著高于mbk-2突变型线虫虫卵未孵化率(P<0.05),其中pptr-2(75.53±2.29%)RNAi组未孵化率最高;DIC影像显示,rsa-2 RNAi组相较于mbk-2突变型线虫在胚胎发育的单细胞阶段(纺锤体建立、原核相遇没有接近细胞后部和原核没有转移至胚胎中央)显著异常(P<0.05)。pptr-2 RNAi组相较于mbk-2突变型线虫在胚胎发育的四细胞阶段(细胞大小差异大、多细胞核和细胞间接触异常)显著异常(P<0.05)。结论:mbk-2及其增强子在线虫胚胎发育过程中发挥重要的调节作用。

PP2A调节mbk-2影响秀丽隐杆线虫胚胎发育

目的使用秀丽隐杆线虫作为模式生物,观察PP2A对mbk-2突变型线虫胚胎发育和虫卵孵化的影响,初步探讨pp2A在胚胎发育中的作用及机制。方法以RNAi技术定向干扰mbk-2突变型线虫pprt-1和pprt-2基因的表达,并对pprt-1及pprt-2沉默后线虫的虫卵孵化水平及胚胎发育情况进行分析,检测其在线虫生长发育、生殖能力等方面的变化。结果与L4440喂养的mbk-2基因突变组相比,pprt-1和pprt-2 RNAi细菌处理mbk-2基因突变组虫卵未孵化率升高,且pprt-2处理组虫卵未孵化率显著高于pprt-1处理组,达到76.47%(P<0.05);pprt-1 RNAi细菌处理的N2野生型线虫虫卵未孵化率分别为0,而pprt-2处理的N2线虫,虫卵未孵化为5.83%,显著低于pprt-1和pprt-2RNAi处理的mbk-2突变型线虫(P<0.05)。DIC影像记录显示,pprt-2处理后,mbk-2突变线虫虫卵胚胎发育有明显异常。结论PP2A是调节线虫发育的重要因子,其亚单位pprt-2是调节mbk-2的重要修饰基因,两者相互作用调节线虫的胚胎发育和虫卵孵化。