初发及复发转移大肠癌患者外周血MDR-1基因表达的研究

目的 :检测初发及复发转移大肠癌患者外周血中多药耐药基因 (MDR 1)的表达 ,探讨其与病理类型及化疗疗效的关系。方法 :应用逆转录多聚酶链反应 (RT -PCR)法对 5 6例初发大肠癌及 4 0例经术后辅助化疗后复发、转移大肠癌患者的外周血进行检测 ,并与其病理类型及化疗疗效作对比研究。结果 :5 6例初发大肠癌患者外周血中MDR 1阳性表达率为2 7 2 % ,与病理类型无显著相关 (P >0 0 5 ) ;但与肠系膜淋巴结转移密切相关 ,有淋巴结转移者阳性表达率显著高于无淋巴结转移者 (P <0 0 5 ) ;4 0例化疗后复发、转移患者外周血MDR 1阳性表达率为 72 5 % ,与初发大肠癌患者的MDR 1阳性表达率相比差异有显著性 (P <0 0 5 ) ,且MDR 1的表达与化疗疗效呈负相关 ,MDR 1阳性表达者化疗疗效明显低于阴性表达者(P <0 0 5 )。结论 :大肠癌存在先天性和获得性多药耐药性 ;检测外周血MDR 1表达情况可以帮助预测化疗疗效 ,对制定临床化疗方案有指导意义。

乳腺癌原发灶和淋巴结转移灶MDR-1基因表达及临床分析

目的:初步探讨原发性乳腺癌原发灶和淋巴结转移灶MDR-1基因表达的情况,及其与临床病理因素的关系。方法:采用逆转录-多聚酶链反应(RT-PCR)技术,检测了30例原发性乳腺癌患者原发灶和淋巴结转移灶新鲜组织MDR-1基因表达水平。结果:原发灶MDR-1基因表达水平明显高于淋巴结转移灶,具有统计学意义。结论:原发灶基因表达高于转移灶,原发灶基因表达与年龄、TNM分期有关,而与肿块大小、淋巴结转移程度无关。

C-erbB-2、Bcl-2、MDR-1在食管癌中的表达及临床意义

目的 研究C -erbB - 2、Bcl- 2、MDR - 1在食管癌中的表达及临床意义。方法 应用免疫组化法 ,检测 5 0例食管癌组织及癌旁粘膜组织中C -erbB - 2、Bcl- 2、MDR - 1的表达水平。结果 在食管癌中C -erbB - 2、Bcl- 2、MDR - 1表达阳性率分别为 5 4 0 %、44 0 %、2 8 0 %,均呈高表达 ,与病理分级、浸润深度、淋巴结转移关系密切 ,P <0 0 5。结论 C -erbB - 2、Bcl- 2、MDR - 1与食管癌的发生发展关系密切 ,C-erbB - 2、Bcl- 2可能是食管癌预后的重要生物学指标。

荧光定量RT-PCR检测mdr-1基因表达

目的 :建立荧光定量RT PCR检测肿瘤细胞mdr 1基因表达的方法 ,了解肺癌组织中mdr 1的表达水平。方法 :建立荧光定量RT PCR方法 ,在PE770 0型检测仪上定量检测K5 6 2 /ADM耐药株和K5 6 2不耐药株细胞mdr 1基因表达水平 ,同时检测 45例初治肺部肿瘤病人组织标本。结果 :荧光定量RT PCR检测K5 6 2 /ADM耐药株和K5 6 2不耐药株细胞mdr 1基因表达 ,重复 10次实验所得结果平均分别为 (6 86± 0 6 5 )× 10 7拷贝 /μgRNA和 (8 49± 0 6 7)× 10 5拷贝 /μgRNA ,两者相差 80 8倍 ,变异系数分别为 9 5 %和 7 9%。 45例肺部肿瘤中 ,有 12例检出有mdr 1基因不同程度的表达。结论 :荧光定量RT PCR检测mdr 1基因表达方法 ,检测结果用绝对拷贝数来表示 ,定量准确可靠 ,并有利于标准的统一。有 1/4未经化疗的肺癌病人有一定水平mdr

RT-PCR法检测胃癌组织mdr-1基因的表达及临床意义

应用RT－PCR方法检测30例胃腺癌mdr-1基因的表达。结果发现术前化疗的胃腺癌中mdr－1表达阳性率为91％，明显高于术前非化疗组的阳性率（47％）（P＜0．O1）。在术前非化疗组中，中分化胃癌的阳性率高于低分化胃癌的阳性率（P＜0.05）。mdr－l基因的表达与胃癌转移的发生率无明确关系。临床检测胃癌mdr－l基因的表达，有助于选择术后化疗方案。

RNAi对白血病细胞mdr-1基因和多药耐药表型的影响

目的:探讨RNA干扰技术(RNAi)对慢性粒细胞白血病急变细胞系K562/AO2细胞mdr1基因的抑制和耐药表型的逆转作用。方法:选择合成封闭mdr-1基因的小干扰序列(si-MDR1),以1个碱基突变的si-MDR1-mut为对照序列,在脂质体介导下转染至K562/AO2细胞系。RT-PCR和Western blot检测mdr1 mRNA及P-gp蛋白水平,流式细胞术分析细胞内柔红霉素(daunorubicin,DNR)积累量,并以四甲基唑蓝快速比色法(MTT)反映K562/AO2对阿霉素、长春新碱、足叶乙甙药物敏感性的变化。结果:实验证实该序列能高效封闭K562/AO2细胞内mdr-1基因表达,增加细胞内化疗药物DNR积累量,增强K562/AO2细胞对阿霉素、长春新碱、足叶乙甙的敏感性。结论:RNAi可以通过抑制mdr1基因表达,逆转K562/AO2细胞耐药表型。

膈下逐瘀汤逆转裸鼠移植瘤MDR-1表达的实验

目的探讨膈下逐瘀汤对HCT-8/5-Fu裸鼠移植瘤多药耐药基因MDR-1表达的影响。方法 MTT法确认人结肠腺癌细胞HCT-8/5-Fu的耐药性及对其他化疗药VCR、VP-16、DDP的交叉耐药性后,将耐药细胞HCT-8/5-Fu接种于BABL/c无胸腺裸鼠右腋下,建立耐药性稳定的裸鼠移植瘤模型。移植瘤裸鼠模型随机分为四组:空白对照组(对照组)、5-Fu组、膈下逐瘀汤组(DSED组)、膈下逐瘀汤+5-Fu组(DSED+5-Fu组)。其中对照组予0.9%氯化钠溶液灌胃给药,其余组予腹腔注射5-Fu和(或)中药灌胃。连续给药14天后颈椎脱臼处死裸鼠。观察各组裸鼠移植瘤生长情况;RT-PCR法检测各瘤组织MDR-1 mRNA表达。结果膈下逐瘀汤+5-Fu组、膈下逐瘀汤组、5-Fu组对裸鼠移植瘤的抑瘤率分别为54.9%、32.4%和7.0%(P<0.01)。RT-PCR结果显示膈下逐瘀汤+5-Fu组及膈下逐瘀汤组MDR-1 mRNA的表达量与对照组相比明显下降(P<0.01),5-Fu组与对照组相比MDR-1 mRNA表达量略有升高,但差异无统计学意义。结论膈下逐瘀汤对大肠癌多药耐药裸鼠移植瘤生长具有抑制作用,其机制可能与膈下逐瘀汤通过逆转耐药移植瘤多药耐药基因表达,增强肿瘤细胞对药物的敏感度。

急性白血病患者bcl-2和bax基因表达的临床意义及其与mdr-1基因表达的关系

细胞凋亡受抑作为肿瘤细胞的耐药机制 ,是急性白血病 (AL)预后不良的原因之一。bcl 2家族是目前最受重视的调控细胞凋亡的基因家族 ,本研究为探讨bcl 2和bax基因在急性白血病表达的意义 ,应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)方法测定 70例初治AL患者及 2 0例正常人的bcl 2 ,bax ,mdr 1基因mRNA水平的表达 ,用流式细胞术检测其蛋白表达。结果表明 ,bcl 2和bax基因在AL患者广泛表达 ,bcl 2mRNA平均表达水平明显高于正常对照 (1.4 6vs 0 .71,P <0 .0 5 )。bcl 2和bax基因表达及bax bcl 2比值与AL患者的年龄、性别、血小板计数、血红蛋白水平、骨髓原始细胞百分率、FAB分型和S +G2 M %均未发现相关。Bcl 2蛋白表达 (34.6 %vs 6 9.2 %,P <0 .0 5 ) ,bax bcl 2mRNA比值 (37.1%vs 82 .9%,P <0 .0 1)决定AL对化疗的敏感性 ,与ALCR率密切相关。bax bcl 2mRNA比值还是影响总生存期的因素。bcl 2与bax基因表达和mdr 1表达两者无相关关系。

选择性COX-2抑制剂塞来昔布抑制B细胞淋巴瘤细胞株MDR-1及Bcl-2的mRNA表达并增强表柔比星的抗肿瘤作用

背景与目的:部分非霍奇金淋巴瘤(non-Hodgkin’s lymphoma,NHL)具有高表达环氧合酶-2(cyclooxygenase-2,COX-2)的特征,而后者与P-糖蛋白及Bcl-2表达相关,可能导致NHL对化疗耐药。本研究旨在探讨B细胞淋巴瘤细胞株中COX-2的表达以及选择性COX-2抑制剂塞来昔布增强淋巴瘤细胞对表柔比星抗肿瘤效应的敏感性及其可能机制。方法:用荧光定量PCR(q RT-PCR)及蛋白[质]印迹法(Western blot)分别检测Raji、Jeko-1和Namalwa等淋巴瘤细胞株以及正常人外周血B细胞的COX-2表达;以梯度浓度的塞来昔布作用于淋巴瘤细胞株,CCK-8方法检测细胞增殖的抑制程度,q RT-PCR检测各细胞株MDR-1 mRNA及Bcl-2 mRNA表达的变化;表柔比星单独或联合不同浓度的塞来昔布处理Raji细胞株72 h后,CCK-8方法分析塞来昔布对表柔比星的增敏作用。结果:各淋巴瘤细胞株及正常对照外周血B细胞均不表达COX-2。塞来昔布单药即可对各淋巴瘤细胞株产生程度不同的抗增殖效应;随着塞来昔布作用浓度的增加,除Jeko-1细胞不表达MDR-1外,其余细胞株MDR-1 mRNA及Bcl-2 mRNA表达水平逐渐下降;塞来昔布明显增强表柔比星对Raji细胞的抗肿瘤活性,两者之间具有协同作用。结论:选择性COX-2抑制剂塞来昔布下调B细胞淋巴瘤细胞株的MDR-1 mRNA及Bcl-2 mRNA水平,并且增强表柔比星对淋巴瘤细胞的抗肿瘤效应。

抗肿瘤药物体外诱导新鲜癌组织及其外周血淋巴细胞mdr-1基因表达的相关性研究

目的 :通过对恶性肿瘤患者的癌组织细胞及其外周血淋巴细胞进行抗肿瘤药物的体外诱导 ,用RT PCR法检测其mdr 1基因表达状况 ,从而找出两者之间的相关性 ,从基因水平解决非手术癌患者化疗用药个体化。方法 :在采集手术标本的同时抽取该患者外周血 ,用 8种抗肿瘤药物进行体外诱导 ,RT PCR法检测 32例恶性肿瘤患者癌组织细胞及其外周血淋巴细胞的mdr 1基因表达状况。利用SAS软件计算两者之间的相关关系。结果 :32例恶性肿瘤患者的新鲜癌组织细胞与其外周血淋巴细胞的抗肿瘤药物体外诱导mdr 1基因表达呈正相关关系。结论 :对于失去手术机会或病灶很小不能取材的患者可以用外周血淋巴细胞替代癌细胞做RT PCR体外药敏检测。

肺癌患者外周血中 MDR －1及 MRP 基因在化疗前后的表达及意义

目的：探讨肺癌患者化疗前后外周血淋巴细胞中多药耐药基因（ MDR－1）和多药耐药相关蛋白（ MRP）的表达及意义。方法分别于化疗开始前及化疗周期结束后第3周收集肺癌患者外周血标本。采用逆转录聚合酶链反应（RT－PCR）法检测39例肺癌患者外周血中MDR－1mRNA和MRP mR-NA的表达情况，并与20例健康体检者进行对比。结果病例组化疗前MDR－1 mRNA和MRP mRNA的阳性表达率与健康对照组相比差异没有统计学意义（P＞0．05）；各种病理类型的肺癌患者外周血MDR－1mRNA和MRP mRNA的阳性表达水平随着化疗次数的增多而增强，其中小细胞肺癌患者化疗后MDR－1 mRNA和MRP mRNA的表达水平均高于化疗前，差异具有统计学意义。结论化疗可诱导肺癌患者外周血淋巴细胞MDR－1mRNA和MRP mRNA的表达水平增强；应用外周血评估MDR－1mRNA和MRP mRNA的方法简单可靠，创伤性小，可能成为预估肺癌患者化疗疗效的有效指标。

耐药基因MDR_1和GST-π在宫颈癌组织中的表达

目的 探讨宫颈癌组织MDR1 和GST -π基因的表达和临床意义。方法 应用RT -PCR方法检测了 2 0例宫颈癌组织耐药基因MDR1 和GST -π。结果 宫颈癌组织MDR1 、GST-π阳性表达率分别为 65% (1 3/2 0 )、75% (1 5/2 0 ) ,MDR1 和GST -π共表达率为 50 % (1 0 /2 0 ) ,二者均表达阴性 2例 (1 0 % )。两种耐药基因表达与肿瘤分化、临床分期均无关。结论 宫颈癌组织中亦存在较高的MDR1 和GST -π基因表达 ,而二者在其先天性耐药机制中均占有重要的作用 。

蝎毒多肽对白血病干细胞MDR1mRNA和P-gp表达的影响

目的:探讨蝎毒多肽(PESV)对多药耐药白血病干细胞MDR1 mRNA和P-gp表达的影响。方法:以K562/A02细胞株为例,免疫磁珠法分选对数生长期细胞后经CCK-8法确认其耐药性,将耐药的K562/A02干细胞接种于BABL/c裸鼠右腋下形成瘤块,再将瘤块皮下包埋建立耐药性稳定的白血病模型。成模裸鼠随机分为6组:模型对照组、ADM组、PESV组、ADM+高剂量PESV组(高剂量组)、ADM+中剂量PESV组(中剂量组)和ADM+低剂量PESV组(低剂量组)。模型对照组给予等体积0.9%氯化钠溶液腹腔注射,其余组予相应剂量ADM和(或)PESV腹腔注射,连续给药14天。第21天观察各组裸鼠移植瘤生长情况,流式细胞术检测各组瘤组织P-gp表达,RT-PCR法检测各组瘤组织MDR-1 mRNA表达水平。结果:K562/A02细胞经免疫磁珠分选前后的CD34+CD38-细胞比率和耐药率分别为31.5%、(60.33±10.68)μg/m L,92.8%、(58.33±9.72)μg/m L,分选后细胞干性显著提高,而耐药性无差异性损失。各组造模小鼠成瘤率100%,P-gp表达结果显示模型对照组89.8%、ADM组91.9%、PESV组88.4%、高剂量组53.9%、中剂量组78.0%、低剂量组78.7%,PESV+ADM下调P-gp表达,并与PESV呈现浓度依赖关系。MDR1mRNA的表达量PESV组>低剂量组>高剂量组>中剂量组>ADM组,其中PESV组、中剂量组、低剂量组高表达,P-gp表达与MDR1 mRNA水平具有一定的一致性。结论:PESV降低ADM作用K562/A02干细胞耐药性的强度,并与PESV剂量呈现正相关,其机制可能为PESV通过调控P-gp和MDR-1 mRNA的表达,增强了K562/A02干细胞对ADM的敏感度。

以重组P-gp为抗原建立检测MDR 1抗体间接ELISA方法的研究

目的:构建MDR1基因原核表达质粒,表达P-gp重组蛋白,建立检测MDR1抗体的间接ELISA方法。方法:利用重组PCR技术扩增MDR1基因的1kb片段,克隆至pET-28b(+)中,构建原核表达质粒pETP-gp,转染感受态菌BL21(DE3)和BL21(DE3)plyss;以E.coli高效表达的P-gp基因主要抗原编码区重组蛋白为抗原,以HRP标记的兔抗人IgG为二抗,建立间接ELISA检测方法。结果:正确构建了pETP-gp原核表达质粒,并可在E.coli中高效表达,表达蛋白可用作检测MDR1抗体ELISA抗原。结论:成功表达出重组蛋白P-gp,建立了检测MDR1抗体的间接ELISA方法。

多药耐药基因mdr-1在肝门部胆管癌组织中的表达及其意义

目的 :检测肝门部胆管癌新鲜组织中多药耐药基因 (mdr - 1)mRNA表达 ,探讨其与肝门部胆管癌临床病理间的关系。方法 :应用逆转录多聚酶链反应 (RT PCR)对 2 6例术前未作治疗的肝门部胆管癌 ,12例正常胆管组织的mdr 1mRNA表达进行了检测 ,并与癌组织的分化程度、病理类型、部位、浸润转移作对比研究。结果 :2 6例肝门部胆管癌组织中mdr 1mRNA阳性表达率为 6 5 4% (17/ 2 6 ) ,正常胆管组织表达率为 8 3% (1/ 12 ) ,二者差异有显著性 (P <0 0 1)。mdr 1mRNA阳性表达与肝门部胆管癌的分化程度、发生部位、病理类型、浸润转移无关 (P >0 0 5 )。结论 :肝门部胆管癌组织中mdr 1mRNA的高表达可作为肝门部胆管癌化疗耐药的指标。

初发及复发转移大肠癌组织与外周血MDR-1基因表达相关性研究

目的 探讨初发及复发转移大肠癌组织与外周血MDR 1基因表达的相关性。方法 采用RT PCR方法分别检测了 5 6例初发大肠癌组织及外周血和 4 0例术后化疗的复发转移大肠癌病灶组织及外周血的MDR 1表达情况。结果 无论是组织中 ,还是外周血中经过化疗的大肠癌患者MDR 1的阳性表达率均明显高于初发大肠癌患者 ,统计学上有显著性差异 (P <0 .0 5 )。结论 可以用外周血代替癌组织来检测MDR

Fas和mdr-1在急性白血病的表达及其相关性研究

本研究应用流式细胞仪 (FCM)直接免疫荧光法和半定量RT PCR方法分别测定 5 9例初发急性白血病(AL)患者治疗前及完全缓解 (completeremission ,CR)后骨髓Fas和mdr 1mRNA表达情况 ,旨在探讨Fas和mdr 1在AL的表达及二者在多药耐药 (multidrugresistance ,MDR)中的相关性。结果显示 :Fas在初发AML阳性表达率比ALL高 ,两表达率间有差异 (P <0 .0 5 ) ,mdr 1在AML和ALL阳性表达率间无差异 (P >0 .0 5 ) ,Fas+ 与mdr 1+ 有负相关性 (r =- 0 .2 82 ,P <0 .0 5 ) ;经单因素及多因素COX分析 ,Fas和mdr 1独立于其他参数 ,更具判断预后价值 ;在Fas+ 与Fas-的AML和AL ,CR率均有显著性差异 (P <0 .0 1) ,在mdr 1+ 、mdr 1-的AML和AL中的CR率有显著性差异 (P <0 .0 1) ;经Logrank检验 ,Fas+ 与Fas-组CR率及中数缓解时间有显著性差异 (χ2 =7.35 ,P =0 .0 0 6 7) ,mdr 1+ 与mdr 1-组CR率及中数缓解时间有显著性差异 (χ2 =10 .71,P =0 .0 0 11)。结论 :Fas、mdr 1与疗效高度相关 ;Fas阳性表达可能是AL预后良好因素 ;mdr 1为疗效差、预后不良的重要因素。

麂属(Muntiacus)动物MDR-1基因序列分析及其分子进化关系

对麂属（Muntiacus）中的3种动物:赤麂（M.muntjak）（2n=6 ,7 ）小麂（M.reevesi）（2n=46）,黑麂（M.crinifrons）（2n=8 ,9 ）MDR-1基因（multidrug resistance,多药耐药基因）726bP左右的片段进行了序列分析,并根据序列信息建立分子系统树,同时探讨了这3种动物的起源、分类地位及进化关系。

儿童急性白血病Bcl-2基因MDR1基因表达及意义(英文)

目的 研究Bcl 2 ,MDR1基因与儿童急性白血病耐药的关系及其临床意义。方法 采用逆转录多聚酶链式反应 (RT PCR)技术 ,对 36例急性白血病患儿及 10例血小板减少性紫癜患儿 (对照 )骨髓单个核细胞中Bcl 2和MDR1基因的表达进行检测。结果 ①初治组、复发组Bcl 2基因表达明显高于对照组 ,差异均有显著性(P <0 .0 5 )。初治组、完全缓解组Bcl 2基因表达明显低于复发组 ,差异均有显著性 (P <0 .0 1)。复发组MDR1基因的表达明显高于对照组、初治组、完全缓解组 (P <0 .0 1或 0 .0 5 )。初治组与对照组间及完全缓解组与对照组间的MDR1表达差异无显著性 (P >0 .0 5 )。②Bcl 2和MDR1基因的表达与白血病临床特征如性别、年龄、初诊时白细胞数、骨髓中幼稚细胞百分数及肝、脾、淋巴结肿大程度均无显著相关性 (P >0 .0 5 )。③Bcl 2与MDR1基因之间无显著相关性 (rs=0 .30 8,P>0 .0 5 )。结论 Bcl 2和MDR1基因可能通过不同的机制导致白血病的耐药。

化疗对食管癌组织中mdr-1基因表达的影响及其意义

目的研究ｍｄｒ１基因过度表达与肿瘤化疗疗效的相关性，进一步研究食管癌组织ｍｄｒ１基因的表达与食管癌多药耐药及相关因素的关系。方法３０例未作治疗的食管癌患者，均行术前计划化疗，化疗前食管镜下取癌及癌旁活组织。术前化疗方案：丝裂霉素（ＭＭＣ）４～６ｍｇ／ｍ２静脉注射，第１、８、１５天；顺铂（ＤＤＰ）２０～３０ｍｇ／ｍ２静脉点滴，第２、３、４天；平阳霉素（ＰＹＭ）６ｍｇ／ｍ２肌肉注射，第１、３、８、１１、１６、１８天。２１天为一周期，２周期为一疗程，休息２周后手术。将切除标本及化疗前食管镜活检取材组织作匀浆，抽提总ＲＮＡ后用反转录多聚酶链反应技术（ＲＴＰＣＲ）检测ｍｄｒ１的表达，与化疗疗效及癌旁组织ｍｄｒ１之表达作对比。结果癌组织ｍｄｒ１的表达高于癌旁组织中ｍｄｒ１的表达（３３％与１０％，Ｐ＜００５）；化疗后癌组织中ｍｄｒ１的表达高于化疗前（３３％与８３％，Ｐ＜００５），而癌旁组织中ｍｄｒ１的表达则无差异（１０％与１０％，Ｐ＞００５）；化疗前癌组织ｍｄｒ１阳性表达者化疗疗效差于化疗前癌组织ｍｄｒ１阴性表达者（１０％与４５％，Ｐ＜００５）。结论食管癌存在先天性ＭＤＲ，癌组织ｍｄｒ１阳?