Mdr2基因敲除小鼠建立原发性肝癌模型观察

目的观察C57BL/6背景的Mdr2基因敲除小鼠自发肝肿瘤形成情况。方法(11.3±4.2)周龄Mdr2基因敲除C57BL/6-Abcb4tm1小鼠9只和野生型C57BL/6小鼠5只,连续饲养65周后处死小鼠,留取血清及肝标本。检测血清ALT、AST、AFP水平,肝组织石蜡切片做HE、天狼猩红染色,免疫组织化学检测肿瘤及肿瘤旁组织CK-7、CK-19表达情况。结果9只Mdr2基因敲除小鼠均自发形成肝肿瘤,血清ALT、AST、AFP水平均显著高于野生型小鼠(P<0.01),Mdr2基因敲除小鼠肝肿瘤CK-7、CK-19染色均为阴性。结论Mdr2基因敲除小鼠连续饲养至(76.3±4.2)周龄时均自发形成肝肿瘤,其病理组织分型为肝细胞癌。

抑制肥大细胞分泌组胺能减少原发性硬化性胆管炎Mdr2-/-小鼠的胆管增生和纤维化

【据《Hepatology》2016年6月报道】题：抑制肥大细胞分泌组胺能减少原发性硬化性胆管炎Mdr2^-/-小鼠的胆管增生和纤维化（作者Jones H等）肝纤维化的特点是肝星状细胞（HSC）的活化。胆汁淤积出现在肝纤维化之前,胆管上皮细胞与肝星状细胞的相互作用促进纤维化。肝损伤后肥大细胞浸润并释放组胺增加胆管增生。Jones等评估抑制肥大细胞来源的组胺能否减少胆管增生和纤维化。

大蒜辣素对高糖环境下肝癌细胞HepG2/mdr耐药性影响及其机制研究

目的:探讨大蒜辣素(allicin)对高糖环境下肝癌细胞HepG2/mdr耐药性影响及其机制。方法:采用细胞计数试剂盒(Cell Counting Kit-8)检测细胞株HepG2/mdr活性;RT-PCR检测allicin作用后HepG2/mdr中晚期糖基化终产物受体(receptor for advanced glycation endproducts,RAGE)、核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)、多药耐药基因-1(multidrug resistance-1,MDR1)的转录水平;蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测allicin作用后HepG2/mdr细胞中相关基因的蛋白表达。结果:HepG2/mdr细胞呈对数生长,可以作为后续实验的靶细胞。RT-PCR和Western blotting检测表明,随着allicin质量浓度的增加,RAGE、NF-κB、MDR1转录水平降低,蛋白表达量减少,呈现剂量依赖性。结论:allicin能通过影响肿瘤细胞NF-κB的核转录因子活性调控下游MDR1基因的表达,从而逆转高糖状态下HepG2/mdr细胞的耐药性。

大黄素对肝内胆汁淤积大鼠P-gp表达的影响

目的:探讨大黄素对α-萘异硫氰酸酯(ANIT)致急性肝内胆汁淤积的保护作用及其机制。方法:采用ANIT灌胃制备大鼠急性肝内胆汁淤积病理模型,将32只大鼠随机分为正常组、正常+大黄素组、模型组和模型+大黄素组,观察各组实验动物肝功能各项生化指标和肝组织病理学改变,并采用实时荧光定量RT-PCR检测肝细胞膜转运蛋白基因多药耐药蛋白1a(mdr1a)、多药耐药蛋白1b(mdr1b)和多药耐药蛋白2(mdr2)mRNA水平的表达,Western blot方法检测肝脏P-糖蛋白(P-gp)的变化。结果:模型+大黄素组与模型组比较,TBiL,DBiL,ALT,AST,ALP,TBA浓度明显降低(P<0.01或P<0.05);肝细胞变性和坏死、中性粒细胞浸润均减轻;在mRNA水平mdr1a,mdr1b,mdr2的表达均上调(P<0.01或P<0.05),P-gp表达同时也增高(P<0.05)。结论:大黄素对胆汁淤积型肝炎有保护作用,上调肝脏中与胆汁酸代谢相关的转运蛋白P-gp的表达以减少胆汁酸及其他有毒化合物在肝脏中的蓄积可能为其退黄、恢复肝脏功能的作用机制之一。