牛MED28基因编码区克隆、生物信息学分析及组织表达谱研究

[目的]克隆牛介体复合物亚单位28(mediator complex subunit 28,MED28)基因CDS区,预测MED28蛋白的结构功能,并分析MED 28基因在牛各组织中的表达水平,为后续研究MED 28基因的功能奠定基础。[方法]以牛成肌细胞RNA反转录的cDNA为模板,利用PCR方法扩增并克隆牛MED 28基因CDS区。运用MegAlign、Mega 11.0软件进行MED28蛋白的相似性比对和系统进化树构建,利用ProtParam、ProtScale、SOPMA、SWISS-MODEL、MEME、STRING等在线软件分析MED28蛋白的理化性质及结构功能,并通过实时荧光定量PCR检测MED 28基因在牛心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、小肠、肌肉组织中的表达量。[结果]试验成功克隆MED 28基因CDS区,长度为537 bp,编码178个氨基酸。相似性比对结果表明,牛MED28蛋白与山羊、绵羊的相似性最高;系统进化树显示,牛与山羊、绵羊的遗传距离最近,与鸡的遗传距离最远。MED28蛋白属于不稳定的亲水性蛋白,无跨膜区和信号肽,主要在细胞外发挥作用,含有2个N-糖基化位点和21个磷酸化位点。MED28蛋白二级结构由α-螺旋、β-转角、延伸链和无规则卷曲组成,其中α-螺旋占比最大,蛋白结构稳定,与三级结构预测结果一致。蛋白互作网络分析表明,MED28蛋白与其家族的多种蛋白之间存在互作,且主要在转录途径和甲状腺信号通路中发挥作用。MEME预测结果表明,MED28蛋白的保守基序在牛、人、猪、小鼠、马、兔、山羊、绵羊之间是相同的;MED28蛋白结构域有低复杂度和卷曲螺旋序列。实时荧光定量PCR结果表明,MED 28基因在牛肌肉组织中的表达量显著高于其他组织(P<0.05)。[结论]牛和羊的亲缘关系最近、蛋白相似性高。MED28蛋白亲水且结构稳定,存在N-糖基化位点和磷酸化位点,无跨膜区和信号肽,主要分布在细胞外,并参与转录途径和甲状腺信号通路。MED 28基因在牛肌肉组织中高表达。以上结果可为进一步研究牛MED 28基因的功能提供参考。

MED15-TFE3易位肾细胞癌1例

患者女性,27岁,体检发现右肾囊性占位2周余。泌尿系统CTU示右肾囊实性占位(图1),Bosniak分级Ⅳ级,囊性肾瘤可能,肾癌不排除;左肾囊肿。肾脏彩超示右肾囊性占位,MRI-肾脏平扫+增强示右肾囊实性占位,考虑肾癌可能。临床以右肾囊性占位入院,临床行腹腔镜下肾部分切除术送检。

MED8表达与肝癌临床病理特征及其预后的相关性分析

目的检测中介体复合物亚基8(mediator complex subunit 8,MED8)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达情况,探讨MED8对HCC的诊断、预后价值及其调控HCC的可能机制。方法从TCGA数据库下载HCC RNAseq数据以及临床数据,比较HCC癌旁组织和癌组织中MED8的表达差异;Western blot检测肝癌细胞HepG2及正常肝细胞QSG-7701中MED8的表达情况;通过DESeq2包和clusterProfiler包对含有MED8高、低表达组的数据进行表达差异分析及gene ontology(GO)富集分析;免疫组化检测补体经典途径相关蛋白C1qc的表达情况及其与MED8的关系。生存曲线、ROC曲线分析MED8表达与肝癌临床病理特征的相关性与预后价值。结果MED8在HCC癌组织及肝癌细胞中呈高表达。富集分析显示与MED8相互作用的蛋白主要参与补体的激活和离子反应等生物过程;而补体经典途径相关蛋白C1qc在肝癌组织中上调且与MED8表达呈正相关。临床相关性分析显示:MED8高表达与HCCT分期、病理分期、组织学分级密切相关;生存曲线结果显示:HCC高表达MED8患者总生存率及疾病相关存活率低;ROC曲线结果标明MED8的曲线下面积为0.817,提示MED8可能作为HCC潜在的诊断分子标志物。结论MED8与肝癌患者的临床分期及预后密切相关,其可能通过补体激活途径影响患者预后。

TVC-MED海水淡化系统运行优化试验研究

文章针对低温多效海水淡化(MED)与蒸汽抽射压缩器(TVC)耦合系统的工作特征,建立TVC-MED影响方式模型,分析TVC不同抽气运行模式对于MED造水比(GOR)的影响,通过优化设置TVC位置及调节蒸发器二次蒸汽量,对TVC-MED系统进行了优化改造,并通过现场运行试验,综合评价了改造后TVC-MED系统性能的提升效果。结果显示,TVC-MED系统优化改造后,海淡造水比平均提升1.06,产品水产量增加147 t/h,可累计增产淡水产值1545.24万元/a。

通过Internet免费检索Medline数据库

介绍两种在Internet上免费检索美国国家医学图书馆Medline数据库的检索方法。

“Med-Lab策略”在临床科研能力教学培育中的应用

科技创新是推动临床医学发展的关键,鉴于临床科研能力培养内容的抽象性与复杂性,拟建立严肃游戏“Med-Lab策略”作为培养新途径。该游戏涵盖“临床科研要素魔方”“临床科研方法搭配”“临床研究类型攻防”“临床科研与基础科研学科交叉逃脱类游戏”“临床科研与转化科研学科交叉探险类游戏”等模块,旨在通过寓教于乐、主动学习及交互反馈等方式,系统提升医学临床科研能力。同时,探索“Med-Lab策略”线上App的开发,以拓宽其应用深度与广度。严肃游戏“Med-Lab策略”的建立为医学科研能力培养提供新视角,为构建成熟的医学科研能力培养体系提供重要启示。

Club Med北戴河黄金海岸度假村设计思考

Club Med北戴河黄金海岸度假村项目的设计理念源于基地本身,将Club Med简单、快乐、阳光的品牌文化和多元文化的特别度假理念融入设计中,倡导人与自然和谐共处的生活方式,体现京津冀独特的人文情怀,同时采用与环境相协调的建筑材料,融入环境的色彩,打造有特色、高品质、全新的度假产品,酒店的开业将引领秦皇岛黄金海岸进入全球高端度假人群之视野。

基于GoPubMed有关高原病研究文献的信息分析

依托Pub Med数据库,采用Go Pub Med进行检索,从研究内容、发文作者、地区分布、发文时间等方面分析有关高原病的研究文献,获得高原病研究的主题内容、年代、地区分布、期刊、核心作者等信息,并利用结构方程模型对高原病研究文献量的影响因素进行分析,探索与高原病研究的相关趋势,最后提出了借鉴印度德里的经验,将我国相对分散的高原病研究资源进行适当集中,加强国内外科研人员的相互协作,加大高原医学研究的支持力度,在进行大规模非战争军事行动(如救灾)时应结合我国高原、高山地貌比例高、高原人口较多、地质灾害多发等特点,将我国的高原病救治机构适当向高原腹地前移等建议。

MED13L综合征2例临床及基因变异分析

目的探讨MED13L基因变异导致的MED13L综合征的临床及遗传学特征。方法回顾分析2例MED13L综合征患儿的临床资料;采集患儿及其父母的外周血进行基因芯片及高通量测序分析,其中染色体微缺失/微重复以RTPCR验证,基因变异以Sanger测序方法验证。结果2例患儿均为男性,分别为2岁6月龄和4岁3月龄。均有特殊面容,包括斜头畸形、眼睑下垂、眼距宽、鼻梁扁平以及两侧嘴角下沉等;均有语言发育迟缓,运动发育落后,肌张力低下,智力中轻度障碍等;例1还存在室间隔缺损,例2存在多指、孤独症、胼胝体发育异常等。基因芯片分析显示,例1在12q24.2区域有1.42 Mb缺失,RT-PCR显示其父母该区域未见异常;高通量测序显示,例2的MED13L基因存在杂合变异c.580G>T(p.E 194X),尚未见报道,Sanger验证其父母均未见异常。结论MED13L综合征表现为特殊面容、语言运动及智力发育落后,部分合并先天性心脏病、骨骼异常以及行为异常等;存在MED13 L基因异常。该研究发现一个尚未见报道的新变异。

MED与传统手术治疗腰椎间盘突出症的比较分析

目的:比较分析内窥镜与开窗手术治疗腰椎间盘突出症的疗效及优缺点。方法:46例腰椎间盘突出症采用显微内窥镜腰椎间盘切除系统（microendoscony discectomv,MED Ⅱ）手术治疗;常规开窗法手术治疗的50例作对照组,根据Macnab标准评价疗效,并比较两组出血量、手术时间、住院时间、恢复正常生活/工作时间。结果:观察组优良率为93.5％,对照组优良率为90％,差别无统计学意义（P>0.05）。两组出血量、手术时间、住院时间、恢复正常生活、工作时间差别有统计学意义。结论:两种方法疗效相近,但后路经椎板间隙途径显微椎间盘镜手术创伤小、恢复快,是治疗腰椎间盘突出症的较好方法。

siRNA-Med19对人肺癌A549细胞Med19转录、表达的影响

目的研究siRNA-Med19对人肺癌A549细胞Med19的影响。方法利用前期已合成的siRNA-Med19慢病毒载体,感染A549细胞,并以无病毒感染组作为空白对照组,以慢病毒载体感染组作为阴性对照组。采用荧光图片和白光图片对比方法判断细胞的感染率;RT-PCR法检测细胞Med19mRNA的转录水平;Western印迹法检测细胞Med19蛋白表达水平。结果慢病毒载体对人肺癌A549细胞的感染率在80%以上,siR-NA-Med19慢病毒感染组Med19mRNA转录水平明显降低,敲减效率大于70%,Med19蛋白表达量也明显降低。结论siRNA-Med19慢病毒载体可以高效感染人肺癌A549细胞,siRNA-Med19对A549细胞Med19的转录和表达具有明显的抑制和消减作用。

MED治疗腰椎间盘突出症术后复发的翻修手术方法

目的探讨微创腰椎间盘镜下髓核摘除术(MED)后复发的原因和治疗方法。方法采用MED治疗的单节段腰椎间盘突出症患者术后症状复发73例。统计其症状复发的时间、原因及再次手术方式。结果MED治疗腰椎间盘突出症(LDH)术后复发平均时间为(5.6±2.3)个月。术后症状复发的原因:侧隐窝狭窄未解除33例(45.2%),原位突出14例(19.2%),游离型椎间盘突出未发现8例(11.0%),椎间盘炎8例(11.0%),相邻椎间盘突出5例(6.8%),术后腰椎不稳3例(4.1%),神经根粘连2例(2.7%)。再次手术方式:MED 8例,椎板开窗髓核摘除术29例,半椎板切除神经根减压术21例,半椎板切除、横突间融合单侧椎弓根螺丝钉固定术4例,全椎板切除、椎间植骨融合内固定术3例,前路椎间盘摘除植骨融合术7例,前路椎间盘摘除术1例。前3种术式占再次手术总数的79.5%。结论MED治疗LDH术后复发时间一般在术后6个月左右。复发的主要原因是合并侧隐窝狭窄未解除和摘除椎间盘不彻底致原位突出。MED治疗LDH术后复发多数可采用MED、椎板开窗或半椎板切除髓核摘除术等方法治疗。

Med19基因沉默对胃癌细胞增殖和细胞周期的影响

目的研究Med19基因在胃癌MGC-803细胞中沉默后对细胞增殖和周期的影响。方法应用shRNA慢病毒载体感染胃癌MGC-803细胞沉默Med19基因,通过MTT和克隆形成实验观察Med19基因在胃癌细胞增殖中的作用,并用流式细胞术验证抑制Med19基因对细胞周期的影响。结果构建的shRNA慢病毒载体感染MGC-803细胞后细胞增殖能力显著降低、细胞克隆形成能力明显减弱,同时,细胞周期阻滞于G1期。结论Med19基因沉默后胃癌细胞的增殖能力和细胞周期均受到显著影响,提示Med19在肿瘤形成过程中具有重要作用。

MED治疗腰椎间盘突出症术后近期MRI的改变

目的:观察显微内窥镜椎间盘手术（microendoscopic discectomy,MED）治疗腰椎间盘突出症术后早期 MRI改变,探讨其与临床效果的关系。方法:对15例单节段或多节段腰椎间盘突出症患者行MED治疗后3个月复查腰椎MRI,并记录手术后症状改善情况。结果:MED术后患者的症状都有明显的缓解,复查MRI显示原来突出的椎间盘消失或突出减小,椎管内未见明显疤痕形成,原手术通道仍清晰可辨,通过椎旁肌的部分有纤维化和轻度组织水肿。结论:MED治疗腰椎间盘突出症近期疗效肯定,手术创伤小,能减少硬膜外粘连疤痕形成。但也有髓核摘除不彻底时从破裂纤维环处脱出的危险。

改良TESSYS技术与MED治疗单节段腰椎侧隐窝狭窄症的疗效比较

腰椎侧隐窝狭窄症(lumbar spinal lateral recess stenosis,LSLRS)是临床上的常见病、多发病,大多因椎间盘突出、椎体后缘增生钙化、黄韧带肥厚或关节突内聚增生导致以侧隐窝狭窄为主的腰腿痛综合征,且常合并基础疾病,手术耐受性差,保守治疗常常无效。如何通过简单安全有效的治疗手段缓解症状,提高生活质量,是临床值得探讨的问题。随着经皮内镜技术的进步,微创手术的适应证逐渐由腰椎间盘突出症扩展到腰椎管狭窄症,目前常用的微创方法有显微内镜椎间盘切除术(micro endoscopic discectomy,MED)和脊柱内镜TESSYS(transforaminal endoscopic spine system,TESSYS)技术[1,2]。近年来,TESSYS技术治疗LSLRS的相关报道逐年增加且临床治疗效果良好[3~6],但与MED治疗单节段LSLRS比较的研究,目前鲜有报道。我们采用前瞻性随机对照研究的方法,分别采用改良TESSYS技术与MED治疗单节段单节段LSLRS,比较其临床疗效,从而为其微创治疗选择提供依据,现分析报告如下。

Med19在人胃癌中的表达及其临床意义

目的研究Med19基因在人胃癌组织中的表达情况及临床意义。方法应用免疫组化和RT-PCR方法检测Med19基因在胃癌组织、癌旁胃组织及正常胃组织中的表达。结果胃癌组织中Med19表达阳性率为71.7%(43/60),显著高于癌旁胃组织和正常胃组织(P<0.01)。癌旁胃组织和正常胃组织中Med19多为阴性表达,少数为弱阳性表达,二者间差异无显著性(P>0.05)。Med19的表达与胃癌的细胞分化程度、淋巴结转移情况、TNM分期相关(P<0.05),而在不同年龄、性别、肿瘤大小、浸润深度的胃癌样本中表达差异无显著性(P>0.05)。结论Med19参与了胃癌的发生、发展过程,有望成为一个新的肿瘤治疗靶向因子。

基于Med Model的门诊输液中心流程仿真与优化

目的为了优化门诊输液中心的工作流程,提高服务质量。方法对某医院门诊输液中心的工作流程进行调查,运用Med Model专业软件建立该院门诊输液中心流程的仿真模型,分别模拟现行的工作流程和改进方案。结果行的工作流程模式下,病人的平均候诊时间较长。通过优化输液流程,患者的平均候诊时间和最大候诊时间可分别从9.97 min和17.34 min缩短为6.01 min和12.32 min。结论仿真结果显示优化后的输液流程在病人候诊时间和服务质量方面比较合理,是目前门诊输液中心较好的运行方案。

烟粉虱MED隐种保幼激素酯酶cDNA片段克隆、序列分析及在不同发育阶段的表达

昆虫卵黄发生及其内分泌调控机理一直是昆虫生殖生理学的研究热点。由保幼激素代谢通路关键分子介导的调控系统是影响昆虫卵黄发生的关键途径。研究激素代谢通路关键调控因子的功能将为明确生殖调控机理提供理论依据。保幼激素酯酶(juvenile hormone esterase,JHE)是降解昆虫体内保幼激素的关键酶之一,具有调控昆虫发育、变态和生殖等功能。本实验以烟粉虱Bemisia tabaci MED隐种为研究对象,采用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)和cDNA末端快速扩增PCR(rapid amplification of cDNA ends PCR,RACE-PCR)技术克隆获得编码552个氨基酸的烟粉虱MED隐种保幼激素酯酶基因的部分cDNA序列,将其命名为Btjhe(GenBank登录号为KC422259)。同源序列比对发现,该基因与菜叶蜂Athalia rosae、西方蜜蜂Apis mellifera的保幼激素酯酶基因推导的氨基酸一致性较高,且具有昆虫保幼激素酯酶共有的5个氨基酸保守模块,其中包括对保幼激素酯酶活性起关键作用的长疏水结合域GxSxG。由此推测,Btjhe为烟粉虱MED隐种的保幼激素酯酶基因,其编码蛋白参与烟粉虱体内保幼激素的特异性降解。实时荧光定量PCR检测结果表明,Btjhe在烟粉虱若虫、成虫阶段都有表达,在成虫阶段表达量较高,且在羽化后11d达到峰值,其表达模式与卵黄原蛋白基因(vg)类似。本研究结果为明确烟粉虱的生殖调控机理奠定基础。

烟粉虱MED隐种对不同烟草品种的适合度比较

烟粉虱MED隐种是近年来烟草上的重要害虫,为明确不同烟草品种对烟粉虱的抗性水平,应用微虫笼研究了烟粉虱在6个烟草品种上的寿命、产卵量、卵-成虫存活率、发育历期等重要生物学参数,比较了烟粉虱对不同烟草品种的适合度差异。结果表明:除卵孵化率外,烟粉虱MED隐种在供试烟草品种上的寿命、产卵量、卵-成虫存活率、发育历期均存在显著差异。雌成虫寿命和产卵量均以在翠碧1号上最高(35.9 d,236.5粒),在NC89上最低(9.6 d,27.8粒);雄成虫寿命在K326上最长(7.2 d),在云烟87上最短(1.8 d);卵-成虫存活率在红花大金元上最高(91.6%),在云烟87上最低(81.4%);发育历期在红花大金元上最短(19.5 d),在云烟99上最长(21.1 d)。烟粉虱MED隐种对不同烟草品种的适合度高低顺序为翠碧1号、K326>红花大金元>云烟99、云烟87>NC89。

后路椎间盘镜(MED)治疗破裂型腰椎间盘突出症

[目的]探讨后路椎间盘镜(MED)微创治疗破裂型腰椎间盘突出症的疗效。[方法]2003年4月至2007年9月收治破裂型腰椎间盘突出症患者96例,均行MED微创治疗。应用JOA评分及改善率评价治疗效果。[结果]术后随访6～56个月,平均18个月。96例患者术前JOA评分平均4.45分,末次随访时14.6分,优85例,良4例,可5例,差2例,优良率92.7%。[结论]MED治疗破裂型腰椎间盘突出症具有创伤小,疗效显著,是治疗破裂型腰椎间盘有效方法之一。