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基于HDAC5/MEF2C通路探讨柴金解郁安神方调节失眠并发抑郁大鼠海马神经元突触可塑性的机制
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作者 任廷婷 王宇红 +8 位作者 唐璎娟 杨松 郭海鹏 王婷婷 何璎 李萍 赵洪庆 周梓洋 邹蔓姝 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期1248-1257,共10页
目的基于组蛋白去乙酰酶5(histone deacetylase 5,HDAC5)/肌细胞增强因子2C(myocyte enhancer factor 2C,MEF2C)通路,探讨柴金解郁安神方调节失眠并发抑郁模型大鼠抑郁样行为及海马神经元突触可塑性的机制。方法通过对氯苯丙氨酸(PCPA)... 目的基于组蛋白去乙酰酶5(histone deacetylase 5,HDAC5)/肌细胞增强因子2C(myocyte enhancer factor 2C,MEF2C)通路,探讨柴金解郁安神方调节失眠并发抑郁模型大鼠抑郁样行为及海马神经元突触可塑性的机制。方法通过对氯苯丙氨酸(PCPA)注射联合慢性温和不可预知应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)建立失眠并发抑郁大鼠模型,实验分为空白组、模型组、柴金解郁安神方高、中、低剂量组、阳性药组。通过糖水偏好实验、旷场实验和水迷宫实验评估大鼠的抑郁情况;酶联免疫吸附检测(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)血清中5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)、多巴胺(dopamine,DA)的水平;HE染色和Nissl染色观察海马神经元病理损伤;高尔基染色(golgi staining)观察海马神经元树突棘损伤情况;免疫印迹法(Western blot)、免疫组化和免疫荧光法检测大鼠海马HDAC5、MEF2C、突触后致密物(postsynaptic density-95,PSD-95)和突触素(synaptophysin 1,SYN1)的表达情况。结果与模型组相比,柴金解郁安神方可以提高模型大鼠的糖水偏好率,减少旷场实验中的不动时间,增加总活动路程,缩短定位航行实验的逃避潜伏期,延长空间探索实验中平台所在象限的停留时间;此外,柴金解郁安神方还能改善海马神经元及树突棘的损伤,增加海马神经元的树突分支长度和树突棘密度;恢复失眠并发抑郁模型大鼠血清中5-HT、DA的水平;下调HDAC5蛋白,上调MEF2C、PSD-95、SYN1蛋白的表达。结论柴金解郁安神方可能通过降低HDAC5蛋白的表达,从而解除对转录因子MEF2C的抑制,促进PSD-95、SNY1蛋白的表达,发挥对海马神经元及突触的保护作用,从而缓解模型大鼠抑郁样行为。 展开更多
关键词 失眠并发抑郁 柴金解郁安神方 组蛋白乙酰化酶5(HDaC5) 肌细胞增强因子2C(mef2C) 神经元突触可塑性
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阿什旦牦牛MEF2A基因拷贝数变异与生长性状关联分析
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作者 李大伟 任稳稳 +4 位作者 喇永富 马晓明 秦玉峰 扎西塔 梁春年 《中国草食动物科学》 CAS 北大核心 2024年第5期84-88,共5页
为探究MEF2A基因拷贝数变异对阿什旦牦牛生长性状的影响,测定了92头阿什旦牦牛6月龄、12月龄、18月龄、30月龄的体重、体高、体长、胸围,采用qPCR检测了MEF2A基因的相对表达量,并利用SPSS软件进行了关联分析。结果表明,MEF2A基因拷贝数... 为探究MEF2A基因拷贝数变异对阿什旦牦牛生长性状的影响,测定了92头阿什旦牦牛6月龄、12月龄、18月龄、30月龄的体重、体高、体长、胸围,采用qPCR检测了MEF2A基因的相对表达量,并利用SPSS软件进行了关联分析。结果表明,MEF2A基因拷贝数变异与阿什旦牦牛的18月龄胸围、6月龄体长呈极显著相关(P<0.01),与18月龄体高呈显著相关(P<0.05);6月龄体长正常型极显著高于其他两个类型(P<0.01),18月龄体高正常型显著低于增加型(P<0.05)、胸围缺失型和正常型极显著高于增加型(P<0.01);MEF2A基因在阿什旦牦牛肌肉组织中的表达量极显著高于其他组织(P<0.01)。综上,MEF2A基因拷贝数变异可影响阿什旦牦牛的生长发育。 展开更多
关键词 阿什旦牦牛 mef2a基因 拷贝数变异 生长性状 关联分析
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LncRNA MEF2C-AS1对卵巢癌生物学功能的影响及机制研究
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作者 邹丹 邓玥 +1 位作者 董莹 杨丽华 《现代妇产科进展》 2024年第11期801-805,共5页
目的:探索LncRNA MEF2C-AS1在卵巢癌恶性表型中的生物学功能及机制。方法:RT-qPCR法检测LncRNA MEF2C-AS1在人卵巢癌细胞及卵巢上皮细胞株中的表达水平。用LncRNA MEF2C-AS1过表达慢病毒LV-MEF2C-AS1及阴性对照病毒LV-NC转染A2780细胞,... 目的:探索LncRNA MEF2C-AS1在卵巢癌恶性表型中的生物学功能及机制。方法:RT-qPCR法检测LncRNA MEF2C-AS1在人卵巢癌细胞及卵巢上皮细胞株中的表达水平。用LncRNA MEF2C-AS1过表达慢病毒LV-MEF2C-AS1及阴性对照病毒LV-NC转染A2780细胞,将细胞分为LV-MEF2C-AS1、LV-NC组,分别通过CCK-8实验、克隆形成实验、Transwell侵袭实验、划痕实验及流式细胞术检测两组A2780细胞的增殖活力、克隆形成能力、侵袭能力、迁移能力及细胞的周期分布和凋亡情况。Western blot实验检测两组细胞中细胞周期相关蛋白CyclinD1和细胞凋亡相关蛋白Caspase 3、Bcl-2、Bax及GRB7水平。结果:卵巢癌SKOV3、OVCAR3和A2780细胞中LncRNA MEF2C-AS1水平显著低于卵巢上皮IOSE80细胞,在A2780细胞中表达最低(P<0.05);LV-MEF2C-AS1组的细胞增殖活力、克隆形成数、细胞迁移能力及侵袭能力均明显低于LV-NC组(P<0.05),凋亡细胞数、凋亡率显著高于LV-NC组(P<0.05);与LV-NC组相比,LV-MEF2C-AS1组处于S期和G2期的细胞百分比较高,而处于G1期细胞百分比较低(P<0.05);LV-MEF2C-AS1组卵巢癌A2780细胞中Bax和Caspase 3水平显著高于LV-NC组,而Bcl-2、CyclinD1和GRB7水平明显低于LV-NC组(P<0.05)。结论:LncRNA MEF2C-AS1在卵巢癌细胞中表达下调,过表达LncRNA MEF2C-AS1可显著抑制卵巢癌细胞的增殖、侵袭、迁移。过表达LncRNA MEF2C-AS1可降低GRB7表达水平,其可能通过下调GRB7水平抑制卵巢癌细胞的恶性生物学行为。 展开更多
关键词 卵巢癌 LncRNa mef2C-aS1 细胞增殖 细胞侵袭
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关岭牛MEF2A基因干扰载体构建及其转染对成肌细胞的影响 被引量:2
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作者 孙金魁 许厚强 +1 位作者 石鹏飞 阮涌 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期584-595,共12页
旨在构建肌细胞增强因子MEF2A(myocyte enhancer factor 2A)基因的重组干扰载体,探究MEF2A基因对牛成肌细胞的影响。本研究选择3头健康的3日龄雌性关岭牛,体重约为21 kg,采集背最长肌组织成功培养成肌细胞。设计MEF2A基因的4对shRNA干... 旨在构建肌细胞增强因子MEF2A(myocyte enhancer factor 2A)基因的重组干扰载体,探究MEF2A基因对牛成肌细胞的影响。本研究选择3头健康的3日龄雌性关岭牛,体重约为21 kg,采集背最长肌组织成功培养成肌细胞。设计MEF2A基因的4对shRNA干扰序列和1对NC阴性对照序列,将其连接至pGPU6-GFP-Neo载体上,转染重组载体至关岭牛成肌细胞。采用qRT-PCR法筛选干扰效率最佳的载体,并检测干扰MEF2A基因对肌生成因子MEF2B、MEF2C、MEF2D,周期与凋亡因子CDK2、CCNA2、BCL2 mRNA表达水平的影响;随后利用流式细胞仪与酶标仪探究干扰载体对成肌细胞增殖生长的影响,各试验组别设置3个生物学重复。同时运用在线软件预测牛MEF2A蛋白理化性质与网络谱图。结果显示,本研究成功筛选出干扰效率最佳的shRNA-MEF2A-3载体(P<0.01)。MEF2A基因被抑制后,成肌细胞中MEF2B、MEF2C与MEF2D基因表达量均极显著上调(P<0.01);CDK2与BCL2表达量皆显著下调(P<0.05),CCNA2表达量极显著下调(P<0.01);与对照组相比,干扰组细胞周期明显延长,干扰组成肌细胞在6 h后的增殖活性均极显著低于对照组(P<0.01)。由此可初步推测,MEF2A干扰载体成功转染至牛成肌细胞后,可有效抑制MEF2A基因表达,改变基因表达模式,影响了关岭牛成肌细胞的分裂增殖,为进一步探究MEF2A基因对关岭牛肉质性状调控机制和挖掘地方种质资源提供数据支撑。 展开更多
关键词 关岭牛 mef2a基因 干扰 成肌细胞 细胞增殖
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优质鸡MEF2A基因的SNPs检测及其与屠体性状的相关研究 被引量:12
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作者 周艳 刘益平 +2 位作者 蒋小松 杜华锐 朱庆 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1164-1170,共7页
为了解优质鸡MEF2A基因SNPs与屠体性状的相关性,以240只大恒优质肉鸡为材料,应用12对引物,采用PCR-SSCP技术对肌细胞特异性增强子因子2A(MEF2A)基因进行多态性检测。结果在该研究群体中检测到MEF2A基因的3个SNPs位点46 023 nt(C→T,SNP1... 为了解优质鸡MEF2A基因SNPs与屠体性状的相关性,以240只大恒优质肉鸡为材料,应用12对引物,采用PCR-SSCP技术对肌细胞特异性增强子因子2A(MEF2A)基因进行多态性检测。结果在该研究群体中检测到MEF2A基因的3个SNPs位点46 023 nt(C→T,SNP1)、72 626 nt(G→A,SNP2)和89 232 nt(G→T,SNP3)。关联分析结果表明,MEF2A基因3个SNPs位点及其双倍型对部分屠体性状有显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)影响。最小二乘分析结果表明,SNP1中,基因型A2A2个体的活体质量、屠体质量、胸肌质量和腹脂质量最小二乘均值显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)大于A1A1个体;SNP2中,基因型B1B1个体的活体质量、屠体质量、胸肌质量、腿肌质量和腹脂质量的最小二乘均值显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)大于B2B2个体;SNP3中的基因型C1C1个体的半净膛率显著高于基因型C2C2个体(P<0.05)。双倍型H1H2组合的活体质量、屠体质量、胸肌质量和腿肌质量的最小二乘均值均高于其他双倍型组合。H5H5双倍型的活体质量、屠体质量和胸肌质量的最小二乘均值均为最低。初步推断MEF2A基因可以作为影响鸡屠体性状的分子标记。 展开更多
关键词 mef2a基因 SNPS 单倍型 屠宰性状
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MyoG和MEF2a基因多态性聚合效应对鸭屠宰性状的影响 被引量:10
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作者 赵忠海 李辉 +3 位作者 易恒洁 杨胜林 彭邦星 卜小雁 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第18期3649-3661,共13页
【目的】探讨Myo G和MEF2a基因聚合效应对鸭屠宰性状的影响,为进一步确定与鸭屠宰性状相关的分子遗传标记提供研究基础,为鸭屠宰性状的多基因聚合育种提供依据。【方法】试验以240只三穗鸭为研究素材,扩增Myo G和MEF2a基因并进行PCR产... 【目的】探讨Myo G和MEF2a基因聚合效应对鸭屠宰性状的影响,为进一步确定与鸭屠宰性状相关的分子遗传标记提供研究基础,为鸭屠宰性状的多基因聚合育种提供依据。【方法】试验以240只三穗鸭为研究素材,扩增Myo G和MEF2a基因并进行PCR产物直接测序以检测两基因所有外显子的单核苷酸突变(SNPs)位点。运用SPSS 18.0软件中的GLM统计模型对Myo G和MEF2a基因的SNPs所对应的不同基因型与三穗鸭屠宰性状进行关联分析,根据单基因关联分析结果,将对屠宰性状存在显著影响的Myo G和MEF2a基因的多态位点利用软件PHASE2.0构建聚合基因型,再进行聚合基因型与屠宰性状的关联分析。【结果】在试验群体中一共发现8个SNPs,其中在Myo G基因中有6个SNPs被找到,MEF2a基因中找到2个SNPs位点,在所有突变位点中,其中Myo G基因的g.2977G>C位点发生的G/C突变使密码子由GAG变为GAC,所编码的氨基酸由谷氨酸变成天冬氨酸;而MEF2a基因中的两个多态位点,g.47915G>A位点发生的G/A突变使密码子由GAA变为AAA,编码的氨基酸由谷氨酸变成赖氨酸,g.47918G>A位点的G/A突变引起的密码子由GAT变成AAT,所编码的氨基酸由天冬氨酸变成天冬酰胺。剩下的5个突变位点均属于同义突变,并未引起编码氨基酸的改变。此外,进行χ2适合性检验,除了Myo G基因的g.1131C>T位点和MEF2a基因的g.47915G>A、g.47918G>A位点未处于Hardy-Weinberg平衡状态(P<0.05)外,其他的突变位点均处于平衡状态。单基因关联分析结果表明,Myo G基因g.1131C>T和g.2204G>A突变分别对胸肌率、体重和全净膛重有着显著影响,其所对应的纯合子基因型CC、GG型为优势基因型。MEF2a基因g.47915G>A/g.47918G>A位点影响全净膛率,GA基因型个体属于优势基因型个体。通过挑选出与屠宰性状(胸肌率、体重、全净膛重和全净膛率)有关联的Myo G基因g.1131C>T/g.2204G>A位点与MEF2a基因g.47915G>A/g.47918G>A进行聚合效应分析,结果显示,聚合后的8种聚合基因型个体的全净膛率,在各基因型间无显著差异(P>0.05),TTGAGA基因型的平均值最高,其次为CCGGGA基因型;其他3个指标各基因型间差异达到了显著,其中体重和全净膛重存在正相关,都是CCGAGA基因型的平均值最高,CTGGGA基因型的平均值次之;CCGGGG基因型的胸肌率平均值最高,其次是CCGGGA基因型。结果显示,单个基因的平均值最高的基因型分别为CC、GG和GA,在两基因聚合后在4个指标中CCGGGA基因型都不是最优的组合,说明两个基因间存在互作效应。【结论】两个基因间存在互作效应,所以用单个基因分子标记进行选育可能会顾此失彼,不能收到良好的效果,但是本研究的聚合优势基因型个体偏少,有待于进一步扩大样本进行验证分析,进行更多基因的聚合效应分析。 展开更多
关键词 MYOG基因 mef2a基因 屠宰性状 聚合效应
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不同强度运动对AMPKα2三种不同基因状态鼠MEF2/GLUT4 DNA结合活性的影响 被引量:12
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作者 龚豪杰 谢谨 +2 位作者 张楠 姚璐 张缨 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2011年第2期55-63,共9页
目的:研究不同强度跑台运动对AMPKα2三种不同基因状态鼠MEF2/GLUT4DNA结合活性及GLUT4基因表达的影响,以探讨运动提高骨骼肌MEF2/GLUT4DNA结合活性及GLUT4基因表达可能机制。方法:野生小鼠和AMPKα2高表达转基因小鼠,AMPKα2基因敲除... 目的:研究不同强度跑台运动对AMPKα2三种不同基因状态鼠MEF2/GLUT4DNA结合活性及GLUT4基因表达的影响,以探讨运动提高骨骼肌MEF2/GLUT4DNA结合活性及GLUT4基因表达可能机制。方法:野生小鼠和AMPKα2高表达转基因小鼠,AMPKα2基因敲除小鼠各30只,分别随机分为安静对照组、低强度(12m/min)跑台运动组和高强度(20/min)跑台运动组。运动时间均为1h。运动后3h取材。Westernblot法测定AMPK(THr72)磷酸化水平。CHIP法测定MEF2/GLUT4DNA结合活性。Real-TimePCR法测定GLUT4mRNA含量。结果:1)野生鼠1h不同强度跑台运动后,GLUT4基因表达量显著增加的同时,伴随着骨骼肌核内MEF2/GLUT4DNA结合活性的显著增加;2)AMPKα2高表达转基因鼠1h不同强度跑台运动后,其骨骼肌细胞核内MEF2/GLUT4DNA结合活性及GLUT4基因表达量,均比野生鼠增加更为显著;3)AMPKα2敲除鼠1h不同强度跑台运动后,骨骼肌核内MEF2/GLUT4DNA结合活性显著低于野生鼠,但GLUT4基因表达量与野生鼠相比没有显著差异。结论:1)运动通过提高MEF2/GLUT4DNA结合活性而提高GLUT4表达;2)AMPKα2参与调解了运动诱导的MEF2/GLUT4DNA结合活性及GLUT4基因表达量的升高;3)虽然AMPKα2参与调节了运动诱导的MEF2/GLUT4DNA结合活性的提高,但机体还可以募集其他的信号通路代偿AMPKα2对GLUT4表达的调节作用。 展开更多
关键词 aMPKα2高表达转基因小鼠 aMPKα2基因敲除小鼠 mef2 GLUT4 动物实验
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MEF2a基因在肌肉组织中的表达研究 被引量:6
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作者 高智晟 杨龙 +2 位作者 张冬杰 刘娣 刘玉芬 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2009年第4期21-23,共3页
分别取90日龄、180日龄和270日龄大白猪心肌、背肌和腿肌,提取总RNA,设计并合成猪MEF2a引物,以β肌动蛋白作为内参,利用Real-time PCR方法检测不同日龄大白猪肌肉组织中MEF2a基因mRNA的表达。结果表明,不同日龄大白猪的心肌和背肌中,ME... 分别取90日龄、180日龄和270日龄大白猪心肌、背肌和腿肌,提取总RNA,设计并合成猪MEF2a引物,以β肌动蛋白作为内参,利用Real-time PCR方法检测不同日龄大白猪肌肉组织中MEF2a基因mRNA的表达。结果表明,不同日龄大白猪的心肌和背肌中,MEF2a基因mRNA的表达水平无显著差异,在腿肌中有显著差异(P<0.05)。从90日龄到270日龄,MEF2a基因在心肌、背肌和腿肌的表达水平均差异显著(P<0.05),腿肌最高,其次是背肌,心肌最低。据此推测,MEF2a基因在猪成体后的肌肉组织中,主要是促进Ⅰ型肌纤维的生成,而不再是介导细胞分化。 展开更多
关键词 mef2a基因 肌肉发生 REaL-TIME PCR
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猪MEF2a基因的克隆与表达 被引量:4
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作者 高智晟 杨龙 +1 位作者 张冬杰 刘娣 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1157-1163,共7页
为了进一步了解猪MEF2a基因的结构与功能,本研究采用生物信息学结合RT-PCR的方法,克隆了猪的MEF2a基因,获得了它的2个变异体序列。结果表明,猪MEF2a variant 1基因cDNA长1 524 bp(EF576923),编码508个氨基酸,分子量为54.481 ku;variant ... 为了进一步了解猪MEF2a基因的结构与功能,本研究采用生物信息学结合RT-PCR的方法,克隆了猪的MEF2a基因,获得了它的2个变异体序列。结果表明,猪MEF2a variant 1基因cDNA长1 524 bp(EF576923),编码508个氨基酸,分子量为54.481 ku;variant 2基因cDNA长1 416 bp(EF576922),编码471个氨基酸,分子量为50.846 ku。MEF2a两个变异体的氨基酸序列同源性为86.79%,第1aa^77aa和第132aa^470aa完全一致,第78aa^131aa是高变区,variant2与variant1相比,在第224aa^258aa处存在34个氨基酸(102 bp)的缺失。利用Real-ti me PCR方法检测了MEF2a的表达。结果表明,MEF2a mRNA是一个广谱表达基因,在心、肝、胃、脾、肾、肺、大肠、小肠、背肌和腿肌中都能检测到,在腿肌中优势表达。MEF2a variant1与马和家鼠构成一个小类群,而variant 2与牛和人构成了另外一个小类群,推测MEF2a基因在进化过程中发生了较为明显的变异。 展开更多
关键词 mef2a 克隆 REaL-TIME PCR
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中国人群MEF2A基因突变与冠心病易感性的关系 被引量:3
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作者 李婧 杨钧国 +2 位作者 李伟 杜容 田莉 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期470-473,共4页
目的研究冠心病相关基因MEF2A在中国人群的突变和多态性位点。方法利用聚合酶链反应-单链构象多态性(polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)和DNA测序技术检测210例冠心病(CAD)患者及190名... 目的研究冠心病相关基因MEF2A在中国人群的突变和多态性位点。方法利用聚合酶链反应-单链构象多态性(polymerase chain reaction-single strand conformation polymorphism,PCR-SSCP)和DNA测序技术检测210例冠心病(CAD)患者及190名健康人MEF2A基因第11外显子。结果冠心病患者SSCP电泳条带异常样本测序分析发现突变:①密码子451G/T(147191位点G→T)杂合或纯合同义突变;②147108~147131位点之间分别发生1个氨基酸(Q)、2个氨基酸(QQ)、3个氨基酸(QQP)、6个氨基酸(425QQQQQQ430)、7个氨基酸(424QQQQQQQ430)缺失;③密码子435G/A(147143位点)杂合突变。密码子451G/T杂合或纯合同义突变以及氨基酸的缺失是基因多态性,密码子435G/A考虑为新的突变。结论中国人群在MEF2A基因第11外显子也存在多种基因多态性,其中6或7个氨基酸的缺失和1个147143位点突变可能与冠心病易感性有关。 展开更多
关键词 冠心病 mef2a基因 基因突变 多态性
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MEF2C介导microRNA-214发挥抑制心肌细胞肥大的作用 被引量:4
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作者 唐春梅 朱杰宁 +8 位作者 朱文思 林秋雄 胡志琴 符永恒 张梦珍 邓春玉 谭虹虹 吴书林 单志新 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1345-1350,共6页
目的:研究微小RNA-214(mi R-214)对心肌细胞肥大的调控作用及其可能的作用靶基因。方法:建立血管紧张素Ⅱ(angiotensin-Ⅱ,Ang-Ⅱ)诱导的C57BL/6乳小鼠心室肌细胞肥大模型;双萤光素酶报告基因实验检测mi R-214与潜在靶基因MEF2C 3’端... 目的:研究微小RNA-214(mi R-214)对心肌细胞肥大的调控作用及其可能的作用靶基因。方法:建立血管紧张素Ⅱ(angiotensin-Ⅱ,Ang-Ⅱ)诱导的C57BL/6乳小鼠心室肌细胞肥大模型;双萤光素酶报告基因实验检测mi R-214与潜在靶基因MEF2C 3’端非翻译区(3’UTR)的结合作用;实时荧光定量PCR(RT-q PCR)和Western blot法分别检测MEF2C及肥厚标志物的m RNA和蛋白表达水平。结果:心肌肥厚标志物ANP、ACTA1和β-MHC,以及mi R-214的表达在Ang-II诱导肥大的小鼠心肌细胞中显著增强;双萤光素酶报告基因实验提示mi R-214与MEF2C 3’UTR相互作用,证实mi R-214可在转录水平抑制MEF2C的表达,MEF2C蛋白水平在肥大的心肌细胞中显著上调;过表达mi R-214及沉默MEF2C均能一致性地抑制Ang-Ⅱ诱导的心肌细胞中肥大标志物的表达。结论:MEF2C是mi R-214的靶基因,并介导了mi R-214发挥抑制心肌细胞肥大的作用。 展开更多
关键词 心肌肥厚 微小RNa-214 mef2C 心肌细胞
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黄牛MEF2A基因克隆及真核表达载体构建 被引量:3
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作者 陈付英 李锋 +4 位作者 安森亚 牛晖 楚秋霞 王治方 徐照学 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期140-144,共5页
旨在克隆MEF2A基因和构建其真核表达载体,为黄牛种质资源保存利用以及肉牛转基因育种和产业化提供基因资源和育种素材。本研究通过RT-PCR克隆黄牛MEF2A基因CDS区,并将其插入到质粒载体pEGFP-C1的多克隆位点中,构建真核表达载体pEGFP-C1-... 旨在克隆MEF2A基因和构建其真核表达载体,为黄牛种质资源保存利用以及肉牛转基因育种和产业化提供基因资源和育种素材。本研究通过RT-PCR克隆黄牛MEF2A基因CDS区,并将其插入到质粒载体pEGFP-C1的多克隆位点中,构建真核表达载体pEGFP-C1-MEF2A。同时应用生物学软件分析MEF2A基因及其编码蛋白的生物学特性,了解其复杂的调控机能。结果,MEF2A基因的CDS区全长1 494bp,编码498个氨基酸残基。生物信息学分析表明,N端第2~56位氨基酸肽段为MADS-box结构域,第57~77位氨基酸肽段为MEF2结构域;C端没有明显的功能域。成功的构建了含有牛MEF2A基因的真核表达载体pEGFP-C1-MEF2A。 展开更多
关键词 mef2a基因 克隆 真核表达载体
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MEF2A基因单核苷酸多态性与早发冠心病血瘀证的相关性研究 被引量:3
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作者 李琳 李杰 +5 位作者 胡志希 简维雄 于文欣 候超 凌智 袁倩 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2015年第6期1155-1158,共4页
目的:探讨肌细胞增强因子2A(Myocyte Enhancer Factor 2a,MEF2A)基因单核苷酸多态性(SNP)与早发冠心病血瘀证的相关性。方法:从MEF2A基因选取2个SNP位点rs2033547和rs34851361,建立基于飞行时间质谱分析技术(TOF-MS)的方法,对收集的早发... 目的:探讨肌细胞增强因子2A(Myocyte Enhancer Factor 2a,MEF2A)基因单核苷酸多态性(SNP)与早发冠心病血瘀证的相关性。方法:从MEF2A基因选取2个SNP位点rs2033547和rs34851361,建立基于飞行时间质谱分析技术(TOF-MS)的方法,对收集的早发CHD血瘀证组21例,早发CHD非血瘀组30例,非"早发冠心病"血瘀组25例与健康对照组20例,检测各SNP位点的等位基因和基因分型,对比各组等位基因和各基因型频率,并比较各临床资料。结果:rs2033547、rs34851361都有A和T两种等位基因,包括AA、TT、AT 3种基因型;MEF2A基因多态性位点rs2033547的A等位基因在早发CHD血瘀证组,早发CHD非血瘀证组和非"早发CHD"血瘀证组均高于健康对照组,但差异尚无统计学意义(P>0.05),这可能与样本量不足有关。而MEF2A基因多态性位点rs34851361基因型和等位基因在4组间相似,无统计学意义(P>0.05),两两比较亦无统计学意义(P>0.05)。结论:MEF2A基因多态性位点rs2033547和rs34851361非早发冠心病的易感基因位点。 展开更多
关键词 早发冠心病 mef2a基因 单核苷酸多态性 飞行时间质谱
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MEF2A基因第11号外显子突变的检测及其基因结构分析 被引量:5
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作者 周晓阳 何青 +8 位作者 戴大鹏 肖尧 王群 张志欣 许峰 孙福成 季福绥 钱贻简 蔡剑平 《中国分子心脏病学杂志》 CAS 2006年第4期208-211,F0003,共5页
目的检测我国汉族人群中MEF2A基因第11号外显子区的突变,分析MEF2A特异性突变的基因结构和遗传学意义。方法用PER-SSCP和/或PCR产物直接测序法对536例冠状动脉粥样硬化性心脏病阳性病例、232例冠状动脉粥样硬化性心脏病阴性对照及232... 目的检测我国汉族人群中MEF2A基因第11号外显子区的突变,分析MEF2A特异性突变的基因结构和遗传学意义。方法用PER-SSCP和/或PCR产物直接测序法对536例冠状动脉粥样硬化性心脏病阳性病例、232例冠状动脉粥样硬化性心脏病阴性对照及232例健康体检者的MEF2A基因第11号外显子区进行突变检测,用质粒克隆测序法对各突变位点作进一步验证。结果在冠状动脉粥样硬化性心脏病阳性病例组发现一例MEF2A 21碱基的特异性突变。另外还发现二种罕见的突变类型。结论MEF2A基因第11号外显子区存在多种罕见的突变类型,基因结构分析显示MEF2A基因21碱基特异性突变有多种形成模式。 展开更多
关键词 冠状动脉粥样硬化性心脏病 mef2a 突变
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MEF2A基因多态性与重庆地区汉族人群冠心病的相关性 被引量:2
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作者 肖骏 马渝 +2 位作者 邓松柏 佘强 黄开顺 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第15期2229-2232,共4页
目的探讨重庆地区汉族人群MEF2A基因第11外显子CAG重复序列多态性与冠心病易感性的关系。方法对232例冠心病患者及240名对照者的MEF2A基因第11外显子进行PCR扩增和DNA直接测序,以检测CAG重复序列多态性,并结合临床资料进行分析。结果未... 目的探讨重庆地区汉族人群MEF2A基因第11外显子CAG重复序列多态性与冠心病易感性的关系。方法对232例冠心病患者及240名对照者的MEF2A基因第11外显子进行PCR扩增和DNA直接测序,以检测CAG重复序列多态性,并结合临床资料进行分析。结果未发现MEF2A基因11号外显子存在21碱基对的缺失突变,MEF2A基因11号外显子CAG重复序列存在多态性,等位基因频率分布在两组间的差异无统计学意义(P>0.05);CAG重复序列多态性与冠心病无明显相关性(P>0.05)。结论 MEF2A基因11号外显子CAG重复序列多态性和重庆地区汉族人群中冠心病的风险无明显相关性。 展开更多
关键词 冠心病 mef2a基因 基因突变 基因多态性
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兴义鸭MEF2A基因的SNPs筛选及其生物信息学分析 被引量:2
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作者 彭邦星 李辉 +3 位作者 张达 易恒洁 赵忠海 廉明政 《广东农业科学》 CAS 2015年第4期86-92,F0002,共8页
为了解鸭MEF2A基因的功能和结构以及其对鸭遗传效应的影响,采用混合DNA池、基因克隆、PCR产物直接测序和生物信息学相结合的方法 ,对兴义鸭的MEF2A基因进行研究。结果并未发现SNP位点,运用生物信息学方法对其蛋白质一级结构和二级结构... 为了解鸭MEF2A基因的功能和结构以及其对鸭遗传效应的影响,采用混合DNA池、基因克隆、PCR产物直接测序和生物信息学相结合的方法 ,对兴义鸭的MEF2A基因进行研究。结果并未发现SNP位点,运用生物信息学方法对其蛋白质一级结构和二级结构进行分析,发现其包含33个α螺旋、20个β折叠、44个无规则卷曲。将获得的鸭的MEF2A蛋白序列与NCBI上提交的家鼠、牛、斑马鱼、猪、鸡的MEF2A序列相比对,结果显示:鸭与鸡、鱼的亲缘关系相近,与家鼠的亲缘关系较远。 展开更多
关键词 兴义鸭 mef2a基因 SNPS 生物信息学
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MEF 2A基因沉默对小鼠主动脉内皮细胞ICAM-1、VCAM-1表达的影响 被引量:3
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作者 李松森 牛晓华 +1 位作者 张守彦 王学慧 《中国循证心血管医学杂志》 2018年第6期685-689,共5页
目的探讨肌细胞增强因子2A(MEF 2A)基因沉默对小鼠主动脉内皮细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)及纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)表达的影响。方法建立MEF 2A基因沉默慢病毒转染体系,另外体外培养Apo E-/-小鼠主动... 目的探讨肌细胞增强因子2A(MEF 2A)基因沉默对小鼠主动脉内皮细胞间黏附分子-1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)及纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)表达的影响。方法建立MEF 2A基因沉默慢病毒转染体系,另外体外培养Apo E-/-小鼠主动脉内皮细胞。分为MACE细胞空白对照组、MACE细胞慢病毒阴性对照组、MACE细胞MEF 2A RNAi A、B、C、D组(选择沉默率最高的靶点),Apo E-/-小鼠主动脉内皮细胞组。采用RT-PCR、ELISA和Western blot方法检测各组细胞MEF 2A、ICAM-1、VCAM-1和PAI-1表达情况。结果 Apo E-/-小鼠主动脉内皮细胞MEF 2A m RNA表达水平明显高于MACE空白对照组细胞(P<0.05)。MEF 2A基因B位点沉默率最高,MEF 2A m RNA表达水平明显低于其他各组细胞,与MACE空白对照组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。经ELISA、RT-PCR和western blot检测结果显示,MEF 2A RNAi的MACE细胞组细胞和Apo E-/-小鼠主动脉内皮细胞中ICAM-1、VCAM-1、PAI-1蛋白和m RNA表达水平分别较空白对照组和阴性对照组明显上调(P<0.05)。MEF 2A表达量与ICAM-l、VCAM-1和PAI-1的表达量呈现负相关性(r=-0.985,-0.805,-0.959,P均<0.05)。结论 MEF 2A在动脉粥样硬化小鼠主动脉内皮细胞中表达降低,MEF 2A基因沉默可明显上调ICAM-1、VCAM-1、PAI-1的表达。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 mef 2a 细胞间黏附分子-1 血管细胞黏附分子-1 基因沉默
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马身猪MEF2A基因4种可变剪接体的克隆和生物信息学分析 被引量:1
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作者 张旗 郭晓红 +7 位作者 高鹏飞 靳玉舒 李萌 成志敏 张宁芳 乐宝玉 曹果清 李步高 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第4期965-972,共8页
本研究旨在克隆马身猪肌细胞增强因子2A(myocyte enhancer factor 2A,MEF2A)基因的不同剪接体类型。依据转录组测序对可变剪接的预测结果,试验扩增MEF2A基因第5~8外显子之间的编码区,用生物信息学软件分析了马身猪MEF2A基因不同剪接体... 本研究旨在克隆马身猪肌细胞增强因子2A(myocyte enhancer factor 2A,MEF2A)基因的不同剪接体类型。依据转录组测序对可变剪接的预测结果,试验扩增MEF2A基因第5~8外显子之间的编码区,用生物信息学软件分析了马身猪MEF2A基因不同剪接体的序列特性,预测保守结构域,构建系统进化树,比对不同物种MEF2A的氨基酸同源性。结果显示,获得了4个MEF2A基因的剪接体,MEF2A1的第5~8外显子正常剪接;MEF2A2缺失了第5外显子,第6外显子的5′端多出138bp,第7外显子的3′端多出102bp;MEF2A3缺失了第5外显子,第6外显子的5′端多出138bp;MEF2A4第7外显子的3′端多出102bp。插入的138bp序列编码的蛋白质中存在1个保守结构域HJURP_C,这可能与MEF2A参与肝细胞纤维化作用有关。MEF2A1和MEF2A4与猪MEF2A1(GenBank登录号:NP_001090890.1)同属于一个亚群,同源性高达98.9%,MEF2A2和MEF2A3与猪MEF2A2(GenBank登录号:NP_001093168.1)同属于一个亚群,同源性分别为98.2%和98.9%。本试验成功克隆了4个MEF2A基因的剪接体,为进一步研究其蛋白功能奠定基础。 展开更多
关键词 马身猪 mef2a基因 可变剪接 生物信息学
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MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其转录激活活性的相关性 被引量:1
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作者 戴大鹏 郑君德 +2 位作者 周晓阳 张铁梅 蔡剑平 《医学研究杂志》 2009年第4期22-25,共4页
目的探讨MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其转录激活活性的相关性。方法PCR法扩增富含组氨酸钙结合蛋白(histidine—rich calcium—binding protein,HRC)基因启动子/增强子序列,插入报告载体pGL3-Basic中,生成pGL... 目的探讨MEF2A第11号外显子CAG三联核苷酸重复序列的改变与其转录激活活性的相关性。方法PCR法扩增富含组氨酸钙结合蛋白(histidine—rich calcium—binding protein,HRC)基因启动子/增强子序列,插入报告载体pGL3-Basic中,生成pGL3-HRC enhancer质粒,该质粒与全长野生型MEF2A cDNA表达质粒pCDNA—MEFcDNA,或含4~15个CAG的变异型MEF2AcDNA表达质粒pCDNA—MEFcDNA—CAGr,以及内参质粒pRL—TK,用脂质体转染法共转染于293T细胞,Western blot检测MEF2A蛋白的表达,双荧光素酶检测系统测定报告分子的表达。结果成功构建了MEF2A蛋白体外转录激活活性检测系统;所构建的含4~15个CAG序列的MEF2A变异蛋白,与含11个CAG序列的野生型MEF2A蛋白之间其转录激活活性没有显著性差异。结论目前已发现的MEF2A第11号外显子CAG重复数目的改变不会影响MEF2A蛋白的转录激活活性。 展开更多
关键词 mef2a 三联核苷酸重复序列 HRC增强子 转录激活作用
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MEF2A基因第11外显子CAG重复序列多态性与冠心病易感性研究 被引量:2
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作者 但秋红 陆林 +1 位作者 陈秋静 何汝敏 《诊断学理论与实践》 2008年第4期404-407,共4页
目的:探讨中国上海地区汉族人群MEF2A基因第11外显子CAG重复序列多态性与其冠心病易感性的关系。方法:对300例冠心病患者(冠心病组)及100名健康体检者(健康对照组)的MEF2A基因第11外显子进行PCR扩增DNA直接测序,以检测CAC重复序列多态性... 目的:探讨中国上海地区汉族人群MEF2A基因第11外显子CAG重复序列多态性与其冠心病易感性的关系。方法:对300例冠心病患者(冠心病组)及100名健康体检者(健康对照组)的MEF2A基因第11外显子进行PCR扩增DNA直接测序,以检测CAC重复序列多态性,并结合临床资料进行分析。结果:2组均存在杂合性CAG重复序列,CAG重复序列数为4~11。将短CAG重复序列数(n=4~7)定义为等位基因S;长CAG重复数(n=8~11)定义为等位基因L。健康对照组中等位基因S及基因型SL频率均高于冠心病组,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论:MEF2A基因第11外显子CAG重复序列多态性与冠心病易感性相关,等位基因L可能是中国上海地区汉族人群的冠心病易患因素。 展开更多
关键词 基因 mef2a 冠心病 多态性
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