IL-35、Beclin-1在乳腺癌患者外周血中的水平及意义

目的探讨白细胞介素(IL)-35、自噬相关蛋白Beclin-1在乳腺癌患者外周血中的水平及意义。方法选取2022年5-10月在上海市嘉定区妇幼保健院诊治的原发性乳腺癌女性患者44例(乳腺癌组)、乳腺良性肿瘤女性患者40例(乳腺良性肿瘤组)及体检的健康者40例(健康对照组)作为研究对象。采用酶联免疫吸附试验检测并比较各组外周血中IL-35和Beclin-1水平,同时检测乳腺癌患者糖类抗原15-3(CA15-3),比较不同临床病理特征的乳腺癌患者IL-35、Beclin-1、CA15-3水平;分析乳腺癌患者外周血IL-35、Beclin-1、CA15-3水平之间的相关性。结果乳腺癌组和乳腺良性肿瘤组外周血IL-35水平均高于健康对照组(P<0.05),Beclin-1水平均低于健康对照组(P<0.05)。乳腺癌组外周血IL-35水平高于乳腺良性肿瘤组(P<0.05),Beclin-1水平低于乳腺良性肿瘤组(P<0.05)。不同病理分级、淋巴结转移情况的乳腺癌患者外周血IL-35、Beclin-1水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);不同雌激素受体(ER)检测结果的乳腺癌患者外周血IL-35水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),而Beclin-1水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。乳腺癌患者外周血IL-35水平与Beclin-1水平呈负相关(r=-0.484,P<0.05);IL-35、Beclin-1水平与CA15-3水平均无相关性(均P>0.05)。结论乳腺癌患者外周血IL-35水平升高、Beclin-1水平降低。不同病理分级、淋巴结转移情况的乳腺癌患者外周血IL-35、Beclin-1水平有明显差异。乳腺癌患者外周血IL-35水平与Beclin-1水平呈负相关,而IL-35、Beclin-1水平与肿瘤标志物CA15-3水平均无关。

SMAD3和CD44在甲状腺乳头状癌组织中的表达水平与临床病理特征及预后的关系

目的探讨信号转导分子3(SMAD3)和白细胞分化抗原44(CD44)在甲状腺乳头状癌(PTC)组织中的表达水平与临床病理特征及预后的关系。方法选取2019年6月-2020年6月收治的PTC患者88例为研究对象,同期取距离癌组织3 cm以上癌旁组织作为对照,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SMAD3和CD44的mRNA表达水平;免疫组化法检测SMAD3和CD44的阳性表达情况。Spearman相关性分析PTC患者癌组织中SMAD3和CD44的mRNA表达水平的关系。SMAD3和CD44与PTC患者预后的关系采用Kaplan-Meier法进行分析。COX回归分析影响PTC患者预后的危险因素。结果与癌旁组织相比,PTC组SMAD3的表达水平显著降低(t=8.484,P<0.05),CD44表达水平显著升高(t=11.232,P<0.05)。相关性分析显示,PTC患者癌组织中SMAD3和CD44的mRNA表达水平呈负相关(r s=-0.519,P<0.05)。与癌旁组织相比,PTC组SMAD3阳性表达率显著降低(χ^(2)=41.905,P<0.05),CD44阳性表达率显著升高(χ^(2)=62.888,P<0.05)。SMAD3表达与TNM分期(χ^(2)=7.678,P=0.006)、淋巴结转移(χ^(2)=20.398,P<0.05)、侵犯包膜(χ^(2)=9.881,P=0.002)有关。CD44表达与TNM分期(χ^(2)=3.959,P=0.047)、淋巴结转移(χ^(2)=20.702,P<0.05)、侵犯包膜(χ^(2)=10.363,P=0.001)有关。术后随访3年发现,SMAD3阳性表达PTC患者生存率高于阴性表达患者生存率(χ^(2)=4.644,P=0.031)。CD44阳性表达PTC患者生存率显著低于阴性表达患者生存率(χ^(2)=5.331,P=0.021)。多因素COX回归分析显示,淋巴结转移、SMAD3和CD44表达是影响PTC患者预后的危险因素(P<0.05)。结论PTC组织中SMAD3呈异常低表达,CD44呈高表达,其水平与PTC患者临床病理特征及预后有关。

IL-7的诱导表达增强靶向GPC3 CAR-T细胞的增殖及体外抗肿瘤活性

目的:探讨IL-7的诱导表达对靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞(CAR-T细胞)的增殖和体外抗肿瘤活性的影响。方法:通过无缝克隆将GPC3 CAR序列片段插入GV400载体的Bam HⅠ/Eco RⅠ位置,构建第二代CAR慢病毒载体GPC3-BBZ及GPC3-BBZ-NFAT-IL-7,以293T细胞包装相应的慢病毒载体后,感染人T细胞制备CAR-T细胞。实验分为未转导T细胞(NT)组、GPC3-BBZ CAR-T细胞组、GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞组。采用流式细胞术检测各组CAR-T细胞中CAR的表达水平,qPCR法检测经GPC3蛋白激活的CAR-T细胞中IL-7 m RNA的表达水平,细胞计数法检测CAR-T细胞在GPC3抗原刺激下的增殖能力,ELISA检测CAR-T细胞在受到肿瘤细胞刺激后IL-7、IFN-γ和TNF-α的分泌水平。应用实时细胞分析(RTCA)技术检测CAR-T细胞对人肝癌Huh-7细胞的杀伤作用。结果:成功构建慢病毒载体GPC3-BBZ和GPC3-BBZ-NFAT-IL-7,制备出靶向GPC3的CAR-T细胞。经GPC3抗原激活后,GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞可有效表达IL-7 mRNA(P<0.01),其表现出更强的增殖能力(P<0.05)。与GPC3-BBZ CAR-T细胞相比,GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞与GPC3阳性靶细胞Huh-7细胞共培养后,分泌更高水平的IL-7、IFN-γ和TNF-α(P<0.01或P<0.001)。RTCA结果显示,GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞对GPC3阳性Huh-7细胞的杀伤活性显著高于GPC3-BBZ CAR-T细胞(P<0.05)。结论:成功制备可诱导表达IL-7的靶向GPC3的CAR-T细胞,IL-7的诱导表达增强靶向GPC3 CAR-T细胞的免疫活性,在体外展现出较强的肿瘤细胞杀伤能力。

血清MG7-Ag水平、组织Notch-3水平对胃癌的诊断价值

目的分析血清胃癌相关抗原7(MG7-Ag)水平、组织神经源位点缺口同源蛋白3(Notch-3)水平对胃癌的诊断价值。方法回顾性分析2023年1月至12月解放军总医院第二医学中心收治的23例胃癌患者(胃癌组)及50例胃部良性病变者(良性病变组)的临床资料,统计2组患者的基线资料及血清MG7-Ag水平、组织Notch-3水平,分析胃癌的影响因素及血清MG7-Ag水平、组织Notch-3水平对胃癌的诊断效能;并比较不同胃癌患者的血清MG7-Ag水平、组织Notch-3水平,分析血清MG7-Ag水平、组织Notch-3水平与胃癌病理参数(肿瘤直径、TNM分期、血管浸润程度、淋巴结转移)的关系。结果胃癌组患者的血清胃蛋白酶原Ⅰ(PG1)水平低于良性病变组,胃泌素、癌胚抗原(CEA)、MG7-Ag及组织Notch-3水平均高于良性病变组(P<0.05),多因素Logistic回归分析可得出:胃泌素(95%CI:1.033~1.112)、CEA(95%CI:1.882~5.076)、MG7-Ag(95%CI:1.649~4.443)、Notch-3(95%CI:1.639~4.219)为胃癌的危险因素,PG1(95%CI:0.880~0.984)为胃癌的保护因素(P<0.05)。受试者工作特征曲线(ROC)分析结果显示血清MG7-Ag水平、组织Notch-3水平及联合诊断胃癌的敏感度分别为73.90%、78.30%、91.30%,特异度分别为86.00%、82.00%、80.00%;且联合诊断的AUC值为0.958,显著高于单一指标(P<0.05)。直径>3 cm、Ⅲ~Ⅳ级、有血管浸润及淋巴结转移的胃癌患者血清MG7-Ag水平、组织Notch-3水平高于直径≤3 cm、Ⅰ~Ⅱ级、无血管浸润及淋巴结转移者(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示血清MG7-Ag水平、组织Notch-3水平与患者的肿瘤直径、TNM分期、血管浸润程度、淋巴结转移呈正相关关系(P<0.05)。结论胃癌患者的血清MG7-Ag水平、组织Notch-3水平均升高,其水平与肿瘤直径、TNM分期、血管浸润程度、淋巴结转移呈正相关关系,且两者联合对胃癌具有较高的诊断价值。

急性胆囊炎患者血清Visfatin、PTX3、CA19-9水平与病情预后的关系

目的探讨急性胆囊炎患者血清内脏脂肪素(Visfatin)、正五聚蛋白3(PTX3)、糖类抗原19-9(CA19-9)水平与病情预后的关系。方法选取2020年9月至2023年9月该院收治的228例急性胆囊炎患者作为研究对象,依据患者的病情严重程度将228例患者分为轻度组(n=81)、中度组(n=102)、重度组(n=45),依据患者预后情况将患者分为预后良好组(n=186)及预后不良组(n=42)。收集患者一般资料,采用酶联免疫吸附试验法检测患者血清Visfatin、PTX3水平,采用化学发光免疫分析法测定血清CA19-9水平。对急性胆囊炎患者预后影响因素进行单因素及多因素分析,以及绘制受试者工作特征曲线分析血清Visfatin、PTX3、CA19-9水平对急性胆囊炎患者预后不良的诊断价值。结果中度组、重度组血清Visfatin、PTX3、CA19-9与轻度组比较,差异有统计学意义(P<0.05);重度组血清Visfatin、PTX3、CA19-9与中度组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良组胆囊厚度、胆囊长径、胆囊短径及血清Visfatin、PTX3、CA19-9水平与预后良好组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示血清Visfatin、PTX3、CA19-9水平是患者预后不良的影响因素(P<0.05)。血清Visfatin、PTX3、CA19-9水平联合诊断的曲线下面积显著大于Visfatin单独诊断的曲线下面积(Z=4.577,P<0.001)和PTX3单独诊断的曲线下面积(Z=3.132,P=0.002)及CA19-9单独诊断的曲线下面积(Z=2.766,P=0.006)。结论急性胆囊炎患者血清Visfatin、PTX3、CA19-9升高,且与患者病情有关,三者联合诊断患者预后不良的价值较好。

替格瑞洛联合二丁酰环磷腺苷钙治疗心律失常的疗效及其对血清Gal-3与CD40L水平的影响

目的:探讨替格瑞洛联合二丁酰环磷腺苷钙治疗心律失常的疗效及其对患者血清半乳糖凝集素3(Gal-3)、白细胞分化抗原40配体(CD40L)水平的影响。方法:将104例心律失常患者按照治疗方式不同分为对照组和研究组,每组各52例。对照组患者采用二丁酰环磷腺苷钙治疗;研究组采用替格瑞洛联合二丁酰环磷腺苷钙治疗,两组均治疗2个月。比较两组患者治疗前后心功能[左室射血分数(LVEF)、左室收缩末期内径(LVESD)、左心室舒张末期直径(LVEDD)]、心肌损伤标志物[心肌肌钙蛋白T(cTnT)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、N末端脑钠肽前体(NT-proBNP)]、炎症因子[肿瘤坏死因子ɑ(TNF-ɑ)、高敏C反应蛋白(hs-CRP)、白细胞介素6(IL-6)]、半乳糖凝集素3(Gal-3)、肿瘤坏死因子相关激活蛋白(CD40L)、血管内皮功能[一氧化氮(NO)、内皮素1(ET-1)]及临床疗效。结果:治疗后,两组LVEF、NO水平均升高,且研究组高于对照组(P<0.05);两组LVESD、LVEDD、cTnT、CK-MB、NT-proBNP、TNF-ɑ、hs-CRP、IL-6、Gal-3、CD40L、ET-1水平均降低,且研究组低于对照组(P<0.05)。研究组临床疗效高于对照组(P<0.05)。结论:替格瑞洛与二丁酰环磷腺苷钙联合治疗,可改善心律失常患者心功能,减轻心肌损伤程度,提高临床疗效,加速恢复,疗效较显著。

血清人附睾蛋白4、糖类抗原15-3、ROMA指数对上皮性卵巢癌复发的预测价值

目的分析血清人附睾蛋白4(HE4)、糖类抗原15-3(CA15-3)联合卵巢癌风险评估模型(ROMA)指数对上皮性卵巢癌(EOC)复发的预测价值。方法选取2018年1月1日至2022年1月1日于该院妇产科就诊的135例EOC患者作为研究对象。分析HE4、CA15-3水平及ROMA指数在不同肿瘤类型、淋巴结转移情况、国际妇产联盟分期(FIGO)分期及复发情况的EOC患者上的差异。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析HE4、CA15-3及ROMA指数单独及3项指标联合检测对EOC患者3年复发的预测价值。结果浆液性囊腺癌患者的ROMA指数、HE4、CA15-3水平均高于黏液性囊腺癌、子宫内膜样腺癌、交界性癌、透明细胞癌、其他类型癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05);子宫内膜样腺癌患者HE4水平明显高于黏液性囊腺癌、交界性癌、透明细胞癌及其他类型癌患者,且透明细胞癌患者HE4水平明显高于黏液性囊腺癌、交界性癌及其他类型癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05);透明细胞癌患者CA15-3水平明显高于黏液性囊腺癌、子宫内膜样腺癌、交界性癌及其他类型癌患者,且子宫内膜样腺癌患者CA15-3水平明显高于黏液性囊腺癌、交界性癌及其他类型癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05);子宫内膜样腺癌患者ROMA指数明显高于黏液性囊腺癌、交界性癌、透明细胞癌及其他类型癌患者,且透明细胞癌患者ROMA指数明显高于黏液性囊腺癌、交界性癌及其他类型癌患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。FIGO分期Ⅲ期患者ROMA指数、HE4、CA15-3水平均明显高于FIGO分期Ⅰ期及FIGO分期Ⅱ期患者,且FIGOⅡ期患者明显高于FIGOⅠ期患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。有淋巴结转移的患者ROMA指数、HE4、CA15-3水平均明显高于无淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。在规定的时间内,共计有28例患者出现复发,107例患者未出现复发。EOC复发患者的ROMA指数、HE4、CA15-3水平均明显高于未复发EOC患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,HE4、CA15-3、ROMA指数单独及3项指标联合预测ECO患者3年内复发的曲线下面积(AUC)分别为0.670、0.716、0.669及0.798。结论EOC患者血清HE4、CA15-3水平及ROMA指数与患者的术后复发密切相关,术前联合检测血清HE4、CA15-3水平及ROMA指数有助于进一步提高对EOC患者术后复发的预测价值。

人类白细胞抗原-DQA1、细胞色素P4503A5*3基因多态性与特发性膜性肾病遗传易感性关联性研究

目的:探讨分析人类白细胞抗原(HLA)-DQA1、细胞色素P450(CYP)3A5*3基因多态性与特发性膜性肾病(IMN)遗传易感性的关联性。方法:将IMN患者62例作为研究组,另将健康者62例作为对照组。采用聚合酶链反应(PCR)技术和基因测序技术检测入组患者的HLA-DQA1(rs2187668)、CYP3A5*3(rs776746)基因型,判断各基因型与IMN患者的关系。结果:研究组中HLA-DQA1 rs2187668基因型AA占比高于对照组(P<0.05),基因型GG、AG占比低于对照组(均P<0.05);研究组等位基因A占比高于对照组(P<0.05)。研究组与对照组CYP3A5*3 rs776746不同基因型占比及等位基因占比比较无统计学差异(均P>0.05)。HLA-DQA1 rs2187668AA基因型IMN患者24 h尿蛋白量和血肌酐水平显著高于AG和GG型,肾小球滤过率显著低于AG和GG型(均P<0.05)。结论:HLA-DQA1 rs2187668位点的基因多态性与IMN的发生有关,AA基因型和等位基因A可增加IMN易感性。

壳多糖酶3样蛋白1在肺癌诊断中的临床价值

目的探讨壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)在肺癌诊断中的临床价值。方法选取2022年1-12月安徽医科大学第一附属医院北区收治的106例肺癌患者为肺癌组,同期收治的76例肺良性疾病患者作为肺良性疾病组及20例健康体检者作为对照组,采用酶联免疫吸附试验法检测CHI3L1水平,化学发光法检测癌胚抗原(CEA)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、细胞角蛋白19片段(CYFRA21-1)、鳞状细胞癌抗原(SCC-Ag)、胃泌素释放肽前体(ProGRP)水平。结果肺癌组血清CEA、ProGRP、NSE、CYFRA21-1、CHI3L1水平较对照组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。肺癌组血清CEA较肺良性疾病组明显升高,而血清CHI3L1较肺良性疾病组明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。与肺腺癌、肺鳞癌患者比较,小细胞肺癌患者血清NSE、ProGRP水平较高,差异有统计学意义(P<0.05);与肺腺癌、小细胞肺癌患者比较,肺鳞癌患者血清CYFRA21-1水平较高,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,肺癌组Ⅰ~Ⅱ期患者血清NSE、CYFRA21-1、CHI3L1水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。对CEA、ProGRP、NSE、CYFRA21-1、CHI3L1进行多因素Logistic逐步回归分析,发现NSE、CHI3L1对肺癌的发生产生影响。CHI3L1、NSE联合检测诊断肺癌的灵敏度为96.2%,特异度为90.0%,曲线下面积为0.965。结论血清CHI3L1可辅助肺癌的诊断与鉴别诊断,CHI3L1、NSE联合检测有助于临床对肺癌的早期发现,具有良好的临床应用价值。

血清HAS2、GDF3及CEACAM1在乳腺癌患者行根治术前后的变化特征及其与术后切口部位感染、局部复发的相关性分析

目的探讨血清透明质酸合成酶2(HAS2)、人生长分化因子3(GDF3)及癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)在乳腺癌患者行根治术前后的变化特征及其与术后切口部位感染、局部复发的相关性。方法回顾性选取商洛市中心医院2020年10月至2022年10月收治的乳腺癌患者80例作为研究对象,所有患者均采取根治性手术治疗,对所有患者进行1年随访,分别记录所有患者手术前、术后1周、术后1个月及术后1年HAS2、GDF3及CEACAM1水平变化情况。根据患者术后切口部位感染情况分为感染组(n=15)和非感染组(n=65),分析HAS2、GDF3及CEACAM1与术后切口部位感染的关系,并分析影响术后切口部位感染的危险因素。对所有患者进行1年随访,依照其术后1年内局部复发情况分为复发组(n=20)与非复发组(n=60),分析HAS2、GDF3及CEACAM1与术后局部复发的关系,并分析影响术后局部复发的危险因素。结果乳腺癌患者行根治术后1周、术后1个月及术后1年,HAS2表达水平分别为(211.80±23.82)、(173.69±19.75)、(171.43±22.64)pg/mL,均明显低于手术前[(256.57±38.24)pg/mL],GDF3表达水平分别为(121.23±25.16)、(98.27±13.35)、(95.85±17.84)pg/mL,均明显低于手术前[(157.19±26.24)pg/mL],CEACAM1水平分别为(21.57±5.24)、(34.46±4.46)、(25.34±3.75)μg/L,均高于手术前[(7.80±3.82)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。感染组与非感染组患者HAS2水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);感染组GDF3表达水平为(166.35±23.61)pg/mL,高于非感染组[(148.83±30.68)pg/mL],CEACAM1水平为(5.65±1.14)μg/L,低于非感染组[(8.15±2.36)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。GDF3与术后切口部位感染呈正相关(r=0.425,P<0.05),CEACAM1与术后切口部位感染呈负相关(r=-0.537,P<0.05)。且经多因素Logistics回归分析发现,GDF3为乳腺癌根治术后切口部位感染的独立危险因素(P<0.05)。复发组HAS2、GDF3表达水平分别为(315.63±42.63)pg/mL、(179.46±32.53)pg/mL,均明显高于非复发组[(216.83.±27.85)pg/mL、(143.64±21.63)pg/mL],CEACAM1水平为(3.52±1.06)μg/L,低于非复发组[(6.78±2.62)μg/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。HAS2、GDF3与术后局部复发呈正相关(r=0.426、0.634,P<0.05),CEACAM1与术后局部复发呈负相关(r=-0.542,P<0.05)。且经多因素Logistics回归分析发现,HAS2、GDF3为乳腺癌根治术后局部复发的独立危险因素,CEACAM1为乳腺癌根治术后局部复发的保护因素(P<0.05)。结论乳腺癌患者行根治术前后血清HAS2、GDF3及CEACAM1水平均会出现显著变化,且发现GDF3是术后切口部位感染发生的影响因素,HAS2、GDF3及CEACAM1是术后局部复发的影响因素。

1例RHD-CE(3-7)-D基因重组与RHCE变异型患者的血清学与分子生物学分析

目的 研究分析1例Rh血型弱D、弱cE患者的血清学与分子生物学特征,为该类患者的临床安全输血提供实验依据。方法 采用微柱凝胶卡法对患者红细胞进行ABO、RhDCcEe抗原的鉴定,同时采用试管法进行血型复核,抗人球蛋白卡法筛查不规则抗体;采用PCR-SSP法对RhDCcEe(RhD、RhC、Rhc、RhE、Rhe)基因型进行检测;三代全长测序技术对RHD/RHCE基因序列进行测序分析。结果 微柱凝胶卡法鉴定ABO、RhD、RhCcEe血型抗原的结果为:A抗原(-)、B抗原(-)、RhD(1+)、RhC(4+)、Rhc(1+)、RhE(1+)、Rhe(4+)、对照孔(-);试管法ABO、RhD、RhCcEe抗原鉴定该患者表型为:A抗原(-)、B抗原(-)、RhD(w+)、RhC(4+)、Rhc(w+)、RhE(w+)、Rhe(4+),对照管(-);抗人球蛋白卡法筛查患者不规则抗体阴性;PCR-SSP法血型基因分型RhDCcEe结果:RhD(+)、RhC(+)、Rhc(+)、RhE(+)、Rhe(+);RHD/RHCE基因结果:RHD单倍体1为外显子1-10全缺失,而单倍体2为外显子RHD-CE基因重组融合,且确认其重组类型为RHD-CE(3-7)-D,起点在外显子2(g.20238-20312之间),终点在外显子8(g49184-50480之间),同时RHCE基因第6外显子存在新碱基点突变RHCE*cE(827C>A)。结论RHD-CE(3-7)-D基因重组融合与RHCE*cE(827C>A)新等位基因突变可能引起D、cE血型抗原弱表达,为临床安全输血提供了重要的实验数据支持。

IGFBP-3抗原的真核表达分析及校准品制备评估

目的:观察IGFBP-3抗原在不同真核细胞中的表达差异,筛选最优的IGFBP-3抗原进行IGFBP-3抗原诊断试剂盒开发的校准品性能分析。方法:将人IGFBP-3基因分别克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9K及哺乳动物细胞表达载体pCMV中,分别转化毕赤酵母GS115、HEK293细胞及CHO细胞进行表达。以Ni-NTA和SDS-PAGE技术对表达产物进行活性分析及纯化鉴定,利用IGFBP-3检测试剂盒对纯化抗原进行校准品性能分析。结果:IGFBP-3抗原表达过程中易降解,仅在HEK293细胞中成功得到全长蛋白,且配制成的校准品考核反应性及稳定性均满足需求,为诊断试剂盒的进一步开发奠定了坚实基础。结论:HEK293体系表达的IGFBP-3抗原更适用于试剂盒校准品。

3种灵长类动物SAGE1与INTS3相互作用保守性的验证

目的·研究恒河猴(Rhesus)、狨猴(Marmoset)、倭狐猴(Mouse Lemur)这3种代表性灵长类动物的癌-睾丸抗原(cancer-testis antigen,CTA)家族成员之一的肉瘤抗原1(sarcoma antigen 1,SAGE1)的进化,及其与整合体复合物(integrator complex,INT)亚基INTS3之间的相互作用的保守性。方法·首先在HEK293T细胞中利用免疫共沉淀(coimmunoprecipitation,Co-IP)的方法验证3种灵长类动物的SAGE1和INTS3相互作用。随后在互作蛋白截短的片段上分别添加His-SUMO和GST标签,并在大肠埃希菌中进行表达,经过系列纯化步骤得到目标蛋白。通过表面等离子体共振(surface plasmon resonance,SPR)实验测定目标蛋白之间的结合强弱,借助广角激光散射凝胶排阻层析(size exclusion chromatographywithmulti-anglelightscattering,SEC-MALS)技术检测复合物的结合比例,并利用分子对接技术预测SAGE1和INTS3截短体的结合模型。分析人类INTS3和SAGE1互作界面,挑选在灵长类中也相对保守的关键互作氨基酸位点,将其突变后再次使用Co-IP分析INTS3和SAGE1的结合情况。结果·通过Co-IP方法,确定3种灵长类动物中INTS3和SAGE1全长蛋白之间存在相互作用。截短体蛋白经过外源诱导表达和多步纯化,获得高纯度蛋白样品;经过SPR对其进行结合和解离检测分析,得到了它们的解离常数在微摩尔级别;并且SEC-MALS结果显示INTS3与SAGE1的结合比例为2∶1。使用分子对接预测SAGE1和INTS3截短体结合模型,发现该复合物具有典型的“蝴蝶型结构”,由INTS3二聚体组成“蝴蝶身体”,由SAGE1组成“蝴蝶头部”,结合界面中疏水相互作用构成了主要的互作模式。分析突变后的SAGE1与INTS3全长蛋白相互作用,它们之间的结合明显减弱。结论·恒河猴、狨猴、倭狐猴中INTS3与SAGE1存在相互作用,并且相互作用具有高度的保守性。

散结镇痛胶囊联合地诺孕素对子宫内膜异位症患者性激素水平及血清CA199、Gal-3表达的影响

目的研究散结镇痛胶囊联合地诺孕素对子宫内膜异位症(EMS)患者性激素水平及血清糖类抗原199(CA199)、半乳糖凝集素3(Gal-3)表达的影响。方法前瞻性选取2020年2月至2022年2月于邢台市人民医院治疗的EMS患者200例作为研究对象,按照随机数字表法将患者分为对照组(n=100)和观察组(n=100)。对照组服用地诺孕素片治疗,观察组服用散结镇痛胶囊+地诺孕素片治疗。两组均连续治疗3个月后评价疗效。比较两组患者的临床疗效,治疗前与治疗3个月后的痛经评分[视觉模拟评分法(VAS)评分]、性激素[雌二醇、孕酮、黄体生成素(LH)和促卵泡刺激素(FSH)]水平及血清CA199、Gal-3水平,以及不良反应发生情况。结果观察组总有效率为93.00%,明显高于对照组(74.00%),差异有统计学意义(P<0.05)。治疗3个月后,两组痛经评分均较治疗前降低,且观察组患者痛经评分为(1.54±0.53)分,明显低于对照组[(2.21±0.77)分],差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗3个月后,两组雌二醇、孕酮、LH及FSH水平均较治疗前明显降低,且观察组患者的雌二醇、孕酮、LH及FSH水平分别为(106.16±20.45)pmol/L、(0.42±0.24)nmol/L、(5.43±1.42)IU/L及(5.02±1.53)IU/L,均显著低于对照组[(121.88±15.23)pmol/L、(0.63±0.18)nmol/L、(5.92±1.69)IU/L及(5.61±1.74)IU/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗3个月后,两组血清CA199、Gal-3水平均较治疗前有明显降低,且观察组患者的血清CA199、Gal-3水平分别为(28.25±4.45)Um/L、(5.54±2.41)ng/L,均显著低于对照组[(36.37±6.26)Um/L、(6.88±3.35)ng/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。两组患者总不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论采用散结镇痛胶囊联合地诺孕素对子宫内膜异位症患者进行治疗,可有效提高临床疗效,减轻患者痛经程度,改善性激素水平及血清CA199、Gal-3表达,值得临床推广应用。

血清HE4、CA125、CA15-3水平联合检测在卵巢肿瘤良恶性诊断中的效能

目的:分析人附睾蛋白4(HE4)、癌胚抗原125(CA125)、糖类抗原15-3(CA15-3)水平联合检测在卵巢肿瘤良恶性诊断中的效能。方法:选取2022年1月至2023年6月该院收治的78例卵巢肿瘤患者进行横断面研究,依据病理学检查结果将其分为卵巢癌组48例和卵巢良性病变组30例,另选取同期30名体检的健康女性设为对照组。比较三组、不同分期卵巢癌组患者血清HE4、CA125、CA15-3水平,绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析HE4、CA125、CA15-3水平单项及联合检测在卵巢肿瘤良恶性诊断中的效能。结果:卵巢癌组HE4、CA125、CA15-3水平均高于卵巢良性病变组、对照组,卵巢良性病变组CA125水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);卵巢良性病变组与对照组HE4、CA15-3水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05);Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌患者HE4、CA125、CA15-3水平均高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异有统计学意义(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,HE4、CA125、CA15-3水平单项及联合检测诊断卵巢癌的曲线下面积分别为0.731、0.695、0.636、0.953,且联合检测诊断效能高于三者单项检测诊断效能。结论:血清HE4、CA125、CA15-3水平联合检测诊断卵巢肿瘤良恶性的效能高于三者单项检测诊断。

血清CHI3L1、CA19-9、GP73水平联合检测在肝硬化鉴别诊断中的价值

目的:观察血清壳多糖酶3样蛋白1(CHI3L1)、糖类抗原19-9(CA19-9)、高尔基体蛋白73(GP73)水平联合检测在肝硬化鉴别诊断中的价值。方法:选取2020年4月至2022年7月该院收治的81例肝硬化患者进行横断面研究,设为肝硬化组。选取同期81例肝炎患者进行横断面研究,设为肝炎组。比较两组入院时血清CHI3L1、CA19-9、GP73水平;采用点二列相关性分析对血清CHI3L1、CA19-9、GP73水平与肝硬化的相关性进行分析;绘制ROC曲线,分析血清CHI3L1、CA19-9、GP73水平单项及联合检测鉴别诊断肝硬化的价值。结果:肝硬化组血清CHI3L1、CA19-9、GP73水平均高于肝炎组,差异有统计学意义(P<0.05);点二列相关性分析结果显示,血清CHI3L1、CA19-9、GP73水平与肝硬化呈正相关(r>0,P<0.05);ROC曲线结果显示,入院时血清CHI3L1、CA19-9、GP73水平联合检测诊断肝硬化的曲线下面积(AUC)为0.908,高于三者单项检测诊断(AUC=0.758、0.813、0.724,P<0.05)。结论:血清CHI3L1、CA19-9、GP73水平联合检测诊断肝硬化的价值高于三者单项检测诊断。

外周血CTLA4、TIM3对重症肺炎合并呼吸衰竭患儿疾病转归的预测价值

目的探讨外周血细胞毒性T淋巴细胞相关抗原(CTLA4)、T细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM3)对重症肺炎合并呼吸衰竭患儿疾病转归的预测价值。方法选取2021年5月至2022年8月该院收治的108例重症肺炎合并呼吸衰竭患儿作为研究组。另选取同期来该院体检的120例健康儿童作为健康组。根据研究组30 d转归情况不同分为存活组(n=77)和死亡组(n=31)两个亚组。采用流式细胞仪检测外周血T细胞上CTLA4、TIM3表达水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估CTLA4、TIM3对重症肺炎合并呼吸衰竭患儿预后的评估价值,多因素Logistic回归分析探讨重症肺炎合并呼吸衰竭患儿死亡的影响因素。结果研究组外周血T细胞上CTLA4、TIM3水平高于健康组,差异有统计学意义(P<0.05)。死亡组外周血T细胞上CTLA4、TIM3水平高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清CTLA4、TIM3预测重症肺炎合并呼吸衰竭患儿预后的曲线下面积(95%CI)分别为0.779(95%CI:0.728~0.828)、0.842(95%CI:0.791~0.893),最佳截断值分别为9.67%、49.22%,特异度分别为57.14%、62.34%,灵敏度分别为90.32%、90.32%,二者联合检测的曲线下面积(95%CI)为0.929(0.888~0.970),特异度为85.71%,灵敏度为87.10%。存活组年龄、出生体质量、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)评分、合并低氧血症、合并高碳酸血症、白细胞计数(WBC)、C反应蛋白(CRP)与死亡组比较差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,APACHEⅡ评分≥18分(OR=2.143,95%CI:1.503~3.055)、CTLA4≥9.67%(OR=2.497,95%CI:1.658~3.761)、TIM3≥49.22%(OR=3.025,95%CI:1.943~4.711)是重症肺炎合并呼吸衰竭患儿死亡的危险因素(P<0.05)。结论重症肺炎合并呼吸衰竭患儿外周血T细胞上CTLA4、TIM3水平明显升高,且与疾病转归密切相关,有望作为评估患儿病情变化的生物学指标。

血清sCD14、Lp(a)、Gal-3与冠状动脉粥样硬化血管内皮功能及斑块易损性的关系分析

目的探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病患者血清可溶性白细胞分化抗原(sCD14)、脂蛋白a[Lp(a)]、半乳糖凝集素-3(Gal-3)的变化与内皮功能损伤、斑块易损性的关系。方法回顾性选取2020年4月至2022年4月在新疆医科大学第一附属医院被确诊的100例冠状动脉粥样硬化性心脏病患者作为冠心病组、选取同期因高血压等疾病入住新疆医科大学第一附属医院心血管内科的100例患者作为对照组,对比两组患者的血清sCD14、Lp(a)、Gal-3、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)水平。对两组患者实施冠状动脉CT成像(CTA)检查,其中检测出软斑块患者39例、纤维斑块患者30例、钙化斑块患者31例;对两组患者实施外周动脉反应性充血指数(RHI)检查,发生内皮功能损伤的患者有69例,正常内皮功能31例。根据斑块特征、血管内皮功能损伤情况进行分层分析,分析sCD14、Lp(a)、Gal-3与一氧化氮、ET-1的相关性。结果冠心病组患者的一氧化氮水平低于对照组,sCD14、Lp(a)、Gal-3、ET-1水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。软斑块患者的一氧化氮水平低于纤维斑块、钙化斑块患者,sCD14、Lp(a)、Gal-3、ET-1水平高于纤维斑块、钙化斑块患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。内皮功能损伤患者的一氧化氮水平低于内皮功能正常的冠心病患者,sCD14、ET-1水平均高于内皮功能正常的冠心病患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。经线性相关分析,冠心病组患者sCD14与一氧化氮呈显著负相关(P<0.05),与ET-1水平呈显著正相关(P<0.05);冠心病患者的Lp(a)、Gal-3与一氧化氮、ET-1之间无明显的相关性(P>0.05)。结论冠状动脉粥样硬化性心脏病患者一氧化氮水平显著降低,血清sCD14、Lp(a)、Gal-3、ET-1水平显著升高,并且与斑块易损性、血管内皮功能损伤有关。

Activation of killer cells with soluble gastric cancer antigen combined with anti-CD3 McAb

ＩＮＴＲＯＤＵＣＴＩＯＮＴｈｅｒｅｈａｖｅｂｅｅｎｍａｎｙｒｅｐｏｒｔｓｏｎｃａｎｃｅｒｔｈｅｒａｐｙｗｉｔｈｌｙｍｐｈｏｋｉｎｅａｃｔｉｖａｔｅｄｋｉｌｅｒ（ＬＡＫ）ｃｅｌｓａｎｄｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ２（ＩＬ２），ｂｕｔｔｈｅｐｒｏｌｉｆｅ...

Study of Swine Leukocyte Antigen Class I-3 (SLA-3) Gene for Inbreeding Wuzhishan Pig

To elucidate the structure of SLA-3 alleles on inbred line of Wuzhishan pig （WZSP） population, we examined the partial exon 1, completed exon 2, and partial exon 3 of SLA-3 loci using the reverse transcription-polymerase chain reaction （RT- PCR） and the sequencing-based method in 32 WZSPs. According to pedigree and amplification results, PCR products of 8 WZSPs were selected to clone and sequence. Nine different nucleotide sequences were obtained. After comparing the DNA and protein sequences of the WZSPs SLA-3 alleles with the published GenBank SLA sequences, it was found that the SLA-3 alleles in WZSPs were all novel, but there were very few variations among them. Comparision of SLA-3 and HLA-A protein sequences indicated that there was more sequence homology. Meanwhile, the construction of a phylogenetic tree using the nucleotide sequences of 23 SLA-3 alleles and 1 HLA-A allele represented that the WZSP population owns its unique genetics resource. In this study, the alleles of SLA-3 on WZSP group were successfully detected and analyzed, which provided the firm basis on the genotype of SLA-3 for breeding specific haplotypes WZSPs.