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IL-7的诱导表达增强靶向GPC3 CAR-T细胞的增殖及体外抗肿瘤活性
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作者 龚福生 陈珊珊 +1 位作者 郑秋红 刘沁颖 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期951-956,共6页
目的:探讨IL-7的诱导表达对靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞(CAR-T细胞)的增殖和体外抗肿瘤活性的影响。方法:通过无缝克隆将GPC3 CAR序列片段插入GV400载体的Bam HⅠ/Eco RⅠ位置,构建第二代CAR慢病毒载体... 目的:探讨IL-7的诱导表达对靶向磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)嵌合抗原受体基因修饰T淋巴细胞(CAR-T细胞)的增殖和体外抗肿瘤活性的影响。方法:通过无缝克隆将GPC3 CAR序列片段插入GV400载体的Bam HⅠ/Eco RⅠ位置,构建第二代CAR慢病毒载体GPC3-BBZ及GPC3-BBZ-NFAT-IL-7,以293T细胞包装相应的慢病毒载体后,感染人T细胞制备CAR-T细胞。实验分为未转导T细胞(NT)组、GPC3-BBZ CAR-T细胞组、GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞组。采用流式细胞术检测各组CAR-T细胞中CAR的表达水平,qPCR法检测经GPC3蛋白激活的CAR-T细胞中IL-7 m RNA的表达水平,细胞计数法检测CAR-T细胞在GPC3抗原刺激下的增殖能力,ELISA检测CAR-T细胞在受到肿瘤细胞刺激后IL-7、IFN-γ和TNF-α的分泌水平。应用实时细胞分析(RTCA)技术检测CAR-T细胞对人肝癌Huh-7细胞的杀伤作用。结果:成功构建慢病毒载体GPC3-BBZ和GPC3-BBZ-NFAT-IL-7,制备出靶向GPC3的CAR-T细胞。经GPC3抗原激活后,GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞可有效表达IL-7 mRNA(P<0.01),其表现出更强的增殖能力(P<0.05)。与GPC3-BBZ CAR-T细胞相比,GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞与GPC3阳性靶细胞Huh-7细胞共培养后,分泌更高水平的IL-7、IFN-γ和TNF-α(P<0.01或P<0.001)。RTCA结果显示,GPC3-BBZ-NFAT-IL-7 CAR-T细胞对GPC3阳性Huh-7细胞的杀伤活性显著高于GPC3-BBZ CAR-T细胞(P<0.05)。结论:成功制备可诱导表达IL-7的靶向GPC3的CAR-T细胞,IL-7的诱导表达增强靶向GPC3 CAR-T细胞的免疫活性,在体外展现出较强的肿瘤细胞杀伤能力。 展开更多
关键词 肝细胞癌 磷脂酰肌醇蛋白聚糖3 CAR-T细胞 IL-7 诱导表达
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Study of Swine Leukocyte Antigen Class I-3 (SLA-3) Gene for Inbreeding Wuzhishan Pig 被引量:1
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作者 SUN Jun-li MU Wu-lian +2 位作者 LIU Xiao-lin FENG Shu-tang WANG Su-rong 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2007年第12期1502-1510,共9页
To elucidate the structure of SLA-3 alleles on inbred line of Wuzhishan pig (WZSP) population, we examined the partial exon 1, completed exon 2, and partial exon 3 of SLA-3 loci using the reverse transcription-polym... To elucidate the structure of SLA-3 alleles on inbred line of Wuzhishan pig (WZSP) population, we examined the partial exon 1, completed exon 2, and partial exon 3 of SLA-3 loci using the reverse transcription-polymerase chain reaction (RT- PCR) and the sequencing-based method in 32 WZSPs. According to pedigree and amplification results, PCR products of 8 WZSPs were selected to clone and sequence. Nine different nucleotide sequences were obtained. After comparing the DNA and protein sequences of the WZSPs SLA-3 alleles with the published GenBank SLA sequences, it was found that the SLA-3 alleles in WZSPs were all novel, but there were very few variations among them. Comparision of SLA-3 and HLA-A protein sequences indicated that there was more sequence homology. Meanwhile, the construction of a phylogenetic tree using the nucleotide sequences of 23 SLA-3 alleles and 1 HLA-A allele represented that the WZSP population owns its unique genetics resource. In this study, the alleles of SLA-3 on WZSP group were successfully detected and analyzed, which provided the firm basis on the genotype of SLA-3 for breeding specific haplotypes WZSPs. 展开更多
关键词 inbreeding Wuzhishan pig leucocyte antigen SLA classical class 1-3 gene RT-PCR
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人类白细胞抗原-DQA1、细胞色素P4503A5*3基因多态性与特发性膜性肾病遗传易感性关联性研究
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作者 纪伟超 郭红英 +2 位作者 李曼曼 成雪红 任美芳 《陕西医学杂志》 CAS 2024年第7期936-939,共4页
目的:探讨分析人类白细胞抗原(HLA)-DQA1、细胞色素P450(CYP)3A5*3基因多态性与特发性膜性肾病(IMN)遗传易感性的关联性。方法:将IMN患者62例作为研究组,另将健康者62例作为对照组。采用聚合酶链反应(PCR)技术和基因测序技术检测入组患... 目的:探讨分析人类白细胞抗原(HLA)-DQA1、细胞色素P450(CYP)3A5*3基因多态性与特发性膜性肾病(IMN)遗传易感性的关联性。方法:将IMN患者62例作为研究组,另将健康者62例作为对照组。采用聚合酶链反应(PCR)技术和基因测序技术检测入组患者的HLA-DQA1(rs2187668)、CYP3A5*3(rs776746)基因型,判断各基因型与IMN患者的关系。结果:研究组中HLA-DQA1 rs2187668基因型AA占比高于对照组(P<0.05),基因型GG、AG占比低于对照组(均P<0.05);研究组等位基因A占比高于对照组(P<0.05)。研究组与对照组CYP3A5*3 rs776746不同基因型占比及等位基因占比比较无统计学差异(均P>0.05)。HLA-DQA1 rs2187668AA基因型IMN患者24 h尿蛋白量和血肌酐水平显著高于AG和GG型,肾小球滤过率显著低于AG和GG型(均P<0.05)。结论:HLA-DQA1 rs2187668位点的基因多态性与IMN的发生有关,AA基因型和等位基因A可增加IMN易感性。 展开更多
关键词 人类白细胞抗原-DQA1 细胞色素P4503A5*3 基因多态性 特发性膜性肾病 遗传易感性 关联性
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PCA3 and TMPRSS2-ERG gene fusions as diagnostic biomarkers for prostate cancer 被引量:13
4
作者 Zheng Yang Lu Yu Zhe Wang 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2016年第1期65-71,共7页
The incidence of prostate cancer (PCa) is rising steadily among males in many countries. Serum prostate-specific antigen (PSA) is widely applied to clinical diagnosis and screening of PCa. However, the so-called g... The incidence of prostate cancer (PCa) is rising steadily among males in many countries. Serum prostate-specific antigen (PSA) is widely applied to clinical diagnosis and screening of PCa. However, the so-called grey area of PSA levels 4.0-10.0 ng/mL has a low specificity of 25-40% resulting in a high rate of negative biopsy and overtreatment. So in order to treat PCa patients in early stage, there is an urgent need for new biomarkers in PCa diagnosis. The PCA3 gene, a non-coding RNA (ncRNA) that is highly expressed in prostate cancer (PCa) cells, has been identified as a molecular biomarkers to detect PCa, of which PCA3 has already under clinical application. PCA3 is strongly overexpressed in malignant prostate tissue compared to benign or normal adjacent one. Newly, PCA3 is considered to be a promising biomarker in clinical diagnosis and targeted therapy. The diagnostic significance of PCA3, however, is awaiting further researches. Moreover, it has been demonstrated recently that TMPRSS2-ERG gene fusion is identified as the predominant genetic change in patients diagnosed with PCa. Recent study revealed that combination of the PC43 and TMPRSS2-ERG gene fusion test optimizes PCa detection compared with that of single biomarker, which would lead to a considerable reduction of the number of prostate biopsies. In this review, we focused on the potential use of PCA3 and TMPRSS2-ERG gene fusion detection in the diagnosis of PCa. 展开更多
关键词 Prostate prostate cancer antigen 3 (PCa3 TMPRSS2-ERG gene fusion prostate cancer (PCa) biomarker
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弓形虫表面抗原SAG3基因和IL-2基因佐剂混合诱导小鼠免疫应答研究 被引量:18
5
作者 周永安 余新炳 +4 位作者 陈海峰 郑焕钦 殷国荣 吴忠道 陈观今 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第11期945-948,共4页
目的了解编码SAG3的重组质粒和IL-2基因佐剂在小鼠体内的免疫反应,为进一步的核酸疫苗及免疫学研究创造条件。方法将编码SAG3的质粒和鼠源性IL-2表达载体以100μg的剂量感染小鼠,3周中两次以相同的剂量加强免疫,分别以PBS和空质粒pcDNA... 目的了解编码SAG3的重组质粒和IL-2基因佐剂在小鼠体内的免疫反应,为进一步的核酸疫苗及免疫学研究创造条件。方法将编码SAG3的质粒和鼠源性IL-2表达载体以100μg的剂量感染小鼠,3周中两次以相同的剂量加强免疫,分别以PBS和空质粒pcDNA3.1感染。采用ELISA法测定抗体水平、亚型、IFN-γI、L-4和IL-2的含量,RT-PCR方法检测注射部位目的基因的转录,所有鼠均由强毒力ZS2株弓形虫感染。结果SAG3表达质粒3次免疫后鼠体内特异IgG水平明显上升,IL-2表达质粒的联合使用导致IgG2a水平的升高和IFN-γ的产生,提高了其分泌IL-2的水平,但对IL-4的水平产生轻微的影响;RT-PCR显示首次使用导致IgG2a水平的升高和IFN-γ的产生,提高了其分泌IL-2的水平,但对IL-4的水平产生轻微的影响;RT-PCR显示首次免疫15天后,目的基因在肌肉组织中仍有表达;混合质粒注射和小鼠抗弓形虫感染的存活时间延长。结论由SAG3 DNA诱导的免疫应答因IL-2表达质粒的共同注射而增强,DNA疫苗和适当细胞因子的共注射对抵抗弓形虫感染的效果值得进一步研究。 展开更多
关键词 DNA免疫 弓形虫表面抗原SAG3 基因佐剂 免疫应答
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结直肠癌中Galectin-3和β-catenin的表达与相关性研究 被引量:7
6
作者 朱晓群 黄文斌 +1 位作者 邵金贵 张允贵 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2010年第1期38-42,共5页
目的探讨结直肠癌中Galectin-3和β-catenin的表达与临床病理参数之间的关系。方法采用免疫组化En Vision法检测83例结直肠癌组织中galectin-3和β-catenin的表达。结果Galectin-3在结直肠癌中的阳性表达率为81.9%,β-catenin的异常表... 目的探讨结直肠癌中Galectin-3和β-catenin的表达与临床病理参数之间的关系。方法采用免疫组化En Vision法检测83例结直肠癌组织中galectin-3和β-catenin的表达。结果Galectin-3在结直肠癌中的阳性表达率为81.9%,β-catenin的异常表达率为62.7%。结直肠癌中galectin-3的表达与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移和病理分期有关(P<0.05),而与患者年龄、肿瘤部位、肿瘤大小和脉管侵犯无关(P>0.05)。结直肠癌中β-catenin的异常表达与分化程度、淋巴结转移、脉管侵犯和病理分期有关(P<0.05),而与患者年龄、肿瘤部位、肿瘤大小和浸润深度无关(P>0.05)。结直肠癌中galectin-3的表达与β-catenin异常表达呈正相关(P<0.05)。结论Galectin-3的表达可能与结直肠癌的高浸润转移能力有关,其可能是通过β-catenin表达异常而促进肿瘤的浸润扩散。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 基因表达 抗原 GALECTIN-3 Β-CATENIN 免疫组织化学
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肝细胞癌组织中Glypican-3基因表达及其调控机制 被引量:5
7
作者 缪辉来 邱志东 +3 位作者 温继育 谢贵林 陈念平 陈明 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1730-1733,共4页
目的:探讨肝细胞癌中Glypican-3(GPC3)基因表达及调控机制。方法:采用RT-PCR和聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法分别检测48例肝细胞癌的癌组织、39例癌旁组织和31例正常肝组织中GPC3 mRNA的表达和基因突变;免疫组化S-P法检测G... 目的:探讨肝细胞癌中Glypican-3(GPC3)基因表达及调控机制。方法:采用RT-PCR和聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)方法分别检测48例肝细胞癌的癌组织、39例癌旁组织和31例正常肝组织中GPC3 mRNA的表达和基因突变;免疫组化S-P法检测GPC3、P53和PCNA蛋白的表达。结果:GPC3 mRNA在肝细胞癌的癌组织中的阳性表达率为77.1%,但其在癌旁和正常肝组织中不表达;肝细胞癌的癌组织中未发现GPC3基因突变;GPC3与P53蛋白表达无相关性(r=-0.12574,P>0.05),肝细胞癌的癌组织中GPC3表达阳性和阴性的增殖细胞核抗原(PCNA)平均指数分别为(46.32±27.54)%、(39.83±21.47)%,P>0.05。结论:肝细胞癌组织中GPC3 mRNA高表达与基因突变无关,没有直接影响P53和PCNA蛋白表达。 展开更多
关键词 肝细胞 GLYPICAN-3 基因突变 P53 增殖细胞核抗原
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黑色素瘤抗原基因-3在直肠癌的表达及意义 被引量:5
8
作者 李新明 陶凯雄 +4 位作者 王国斌 张宁 吴相柏 张景辉 田源 《中国普外基础与临床杂志》 CAS 2006年第3期308-310,320,共4页
目的检测黑色素瘤抗原基因3(MAGE3)在直肠癌中的表达,探索其与直肠癌临床病理的关系及其在直肠癌免疫治疗中的应用价值。方法采用RT PCR法,对33例直肠癌患者的癌组织及其相应距肿瘤边缘(5±1)cm的癌旁组织和手术切缘(乙状结肠端)以... 目的检测黑色素瘤抗原基因3(MAGE3)在直肠癌中的表达,探索其与直肠癌临床病理的关系及其在直肠癌免疫治疗中的应用价值。方法采用RT PCR法,对33例直肠癌患者的癌组织及其相应距肿瘤边缘(5±1)cm的癌旁组织和手术切缘(乙状结肠端)以及3例直肠息肉标本(无瘤)的MAGE3的表达情况进行检测,并对RT PCR扩增产物中的目的基因片段进行DNA测序验证。结果33例直肠癌组织中,MAGE3基因的表达阳性率为42.42%(14/33),在癌旁组织和手术切缘组织中,MAGE3基因的表达阳性率分别为18.18%(6/33)和15.15%(5/33),3例直肠息肉标本未见MAGE3表达。肿瘤组织MAGE3基因表达阳性率均显著高于癌旁组织和手术切缘组织(P<0.05);而与患者年龄、性别、肿瘤组织学类型、Dukes分期及淋巴结转移无关(P>0.05)。结论基于MAGE3基因在直肠癌中的高表达率,MAGE3表达的蛋白可以作为一种有前途的靶点用于免疫治疗,同时有望成为一种筛查和随访指标。 展开更多
关键词 直肠癌 黑色素瘤抗原基因-3 基因表达
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五指山小型猪近交系白细胞抗原Ⅰ类3基因的研究 被引量:5
9
作者 孙俊丽 牟玉莲 +2 位作者 刘小林 冯书堂 王素荣 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期2053-2061,共9页
【目的】为探讨五指山小型猪(WZSP)近交系群体中SLAⅠ3(SLA-3)位点等位基因分布结构及其特性。【方法】利用4对引物,采用RT-PCR扩增了32头WZSPSLA-3基因部分外显子1、外显子2和大部分外显子3序列。根据家系和扩增结果,选择8头个体的PCR... 【目的】为探讨五指山小型猪(WZSP)近交系群体中SLAⅠ3(SLA-3)位点等位基因分布结构及其特性。【方法】利用4对引物,采用RT-PCR扩增了32头WZSPSLA-3基因部分外显子1、外显子2和大部分外显子3序列。根据家系和扩增结果,选择8头个体的PCR产物克隆测序。【结果】获得9个不同的核苷酸序列。与GenBank中所用SLA-3基因的核苷酸序列及其编码的氨基酸序列进行比较分析,确定这9个序列均为SLA-3位点上的新等位基因,但这些等位基因间核苷酸变异很少;氨基酸序列比较发现猪和人之间有很高的保守性。同时,构建了23个SLA-3的等位基因和1个HLA-A等位基因核苷酸序列的系统树。【结论】WZSP在SLA-3位点和其它猪品种有明显的差异,拥有其独特的遗传资源。从分子水平为WZSPSLA-3基因的分子分型及特异单倍体猪的培育和异种器官移植实验用动物的研究提供理论依据。 展开更多
关键词 五指山小型猪近交系 白细胞抗原 经典SLAⅠ3基因 RT-PCR
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日本血吸虫14-3-3抗原编码基因的克隆及序列测定 被引量:5
10
作者 汪学龙 沈继龙 蒋作君 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2001年第5期45-47,共3页
为了寻找日本血吸虫病新的诊断和候选疫苗分子 ,设计合成引物 ,以日本血吸虫成虫cDNA第一链为模板 ,用PCR法扩增出日本血吸虫 14 - 3 - 3抗原 (Sj14 - 3 - 3 )基因编码序列 ,其大小约 784bp ,将其克隆入pGEM -T载体 ,重组质粒pGEM -T -S... 为了寻找日本血吸虫病新的诊断和候选疫苗分子 ,设计合成引物 ,以日本血吸虫成虫cDNA第一链为模板 ,用PCR法扩增出日本血吸虫 14 - 3 - 3抗原 (Sj14 - 3 - 3 )基因编码序列 ,其大小约 784bp ,将其克隆入pGEM -T载体 ,重组质粒pGEM -T -Sj14 - 3 - 3经双酶切和以质粒为模板进行PCR扩增 ,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段 ,序列测定结果表明具有一个长度为 765bp的完整开放阅读框 ,与曼氏血吸虫 14 - 3 - 3核苷酸序列有高度同源性。本实验克隆了日本血吸虫 14 - 3 - 3抗原的编码基因 ,并进行了序列测定 ,为进一步研究提供了条件。 展开更多
关键词 日本血吸虫 14-3-3抗原 基因克隆 序列测定
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黑色素瘤抗原基因-1,3基因在肺癌组织中的表达及其意义 被引量:2
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作者 白黎智 姜志良 +1 位作者 王林 朴斐 《临床军医杂志》 CAS 2005年第3期294-296,共3页
目的了解肺癌组织中和黑色素瘤抗原基因(MAGE)1,3基因的表达,并探讨其作为免疫治疗的靶抗原在肺癌中的应用价值。方法采用RTPCR法检测72例肺癌患者的肿瘤组织和相应的癌旁“正常”组织中MAGE1,3基因的表达情况。结果72例肺癌组织中,MAGE... 目的了解肺癌组织中和黑色素瘤抗原基因(MAGE)1,3基因的表达,并探讨其作为免疫治疗的靶抗原在肺癌中的应用价值。方法采用RTPCR法检测72例肺癌患者的肿瘤组织和相应的癌旁“正常”组织中MAGE1,3基因的表达情况。结果72例肺癌组织中,MAGE1表达阳性率为72%(52/72例)MAGE3表达阳性率为69%(50/72例)MAGE1,3表达双阳性率为52%(38/72例),MAGE1,3任一基因表达阳性者64例,阳性率为89%(64/72例)。癌旁"正常"组织中MAGE1,3基因表达阳性率分别为47%(34/72例)和44%(32/72例),MAGE1,3表达双阳性率为31%(22/72例)。肺癌组织MAGE1,3基因表达阳性率均高于癌旁“正常”组织,5株肺细胞株MAGE1,3基因表达均为阳性。结论基于MAGE1,3基因在肺癌中的高表达率,可利用其作为靶分子进行免疫治疗,同时也可作为一种有临床价值的随访指标。 展开更多
关键词 肺癌组织 3基因 抗原基因-1 MAGE-1 其意义 表达及 黑色素瘤抗原基因 基因表达 PCR法检测 免疫治疗 阳性率 应用价值 肿瘤组织 肺癌患者 表达情况 临床价值 靶抗原 癌旁 RT- 阳性者 细胞株 表达率 靶分子
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MAGE-3逆抗原转染树突状细胞的抗胃癌免疫效率 被引量:2
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作者 黎皓 陈雪华 +5 位作者 俞焙秦 柯山 郑重 朱正纲 顾琴龙 刘炳亚 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期512-515,共4页
目的构建逆抗原表达载体,以获得理想的肿瘤疫苗。方法运用RT-PCR方法合成MAGE-3cDNA,分别将RANTES基因分泌段前导序列和受体Fc段克隆至MAGE-3cDNA两端(pS-MAGE-3-Fc)再转染入DC表达,将致敏的DC与外周血T细胞和胃癌细胞共培养,观察产生... 目的构建逆抗原表达载体,以获得理想的肿瘤疫苗。方法运用RT-PCR方法合成MAGE-3cDNA,分别将RANTES基因分泌段前导序列和受体Fc段克隆至MAGE-3cDNA两端(pS-MAGE-3-Fc)再转染入DC表达,将致敏的DC与外周血T细胞和胃癌细胞共培养,观察产生的免疫效应。结果转染pS-MAGE-3-Fc的DC诱导的刺激淋巴细胞增殖反应和CTL杀伤效应均显著高于转染pMAGE-3的转染组和对照组(P<0.05)。结论逆抗原策略是理想的肿瘤疫苗策略,能够显著提高肿瘤免疫效率。 展开更多
关键词 黑色素瘤抗原编码基因-3 逆抗原 树突状细胞 转染 主要组织相容性复合体
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胃癌组织中黑色素瘤抗原基因-1,3基因的表达及其意义 被引量:1
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作者 刘炳亚 陈雪华 +5 位作者 李建芳 张奕 瞿颖 顾琴龙 朱正纲 林言箴 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第8期571-574,共4页
目的 了解胃癌组织中黑色素瘤抗原基因 (MAGE) 1、3基因的表达 ,并探讨其作为免疫治疗的靶抗原在胃癌中的应用价值。方法 采用RT PCR法检测 36例胃癌患者的肿瘤组织和相应的癌旁“正常”黏膜中MAGE 1、3基因的表达情况 ,并以 37例慢... 目的 了解胃癌组织中黑色素瘤抗原基因 (MAGE) 1、3基因的表达 ,并探讨其作为免疫治疗的靶抗原在胃癌中的应用价值。方法 采用RT PCR法检测 36例胃癌患者的肿瘤组织和相应的癌旁“正常”黏膜中MAGE 1、3基因的表达情况 ,并以 37例慢性胃炎患者的胃镜活检组织和 4株胃癌细胞株作为对照。结果  36例胃癌组织中 ,MAGE 1表达阳性率为 72 .2 2 % (2 6 / 36例 ) ,MAGE 3表达阳性率为 6 9.4 4 % (2 5 / 36例 ) ,MAGE 1、3表达双阳性率为 5 2 .78% (19/ 36例 ) ,MAGE 1、3任一基因表达阳性者 32例 ,阳性率为 88.89% (32 / 36例 )。癌旁“正常”黏膜中MAGE 1、3基因表达阳性率分别为 4 7.2 2 % (17/ 36例 )和 4 4 .4 4 % (16 / 36例 ) ,MAGE 1、3表达双阳性率为 30 .5 6 % (11/ 36例 )。 37例慢性胃炎组织中 ,MAGE 1、3表达阳性率分别为 2 9.73% (11/ 37例 )和2 7.0 3% (10 / 37例 ) ,MAGE 1、3表达双阳性率为 8.11% (3/ 37例 )。胃癌组织MAGE 1、3基因表达阳性率均高于癌旁“正常”黏膜组织和慢性胃炎患者。 4株胃癌细胞株MAGE 1、3基因表达均为阳性。结论 基于MAGE 1、3基因在胃癌中的高表达率 ,可利用其作为靶分子进行免疫治疗 。 展开更多
关键词 胃癌 黑色素瘤抗原基因-1 黑色素瘤抗原基因-3 基因表达
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外周血前列腺癌抗原3基因检测对前列腺癌诊断的meta分析 被引量:4
14
作者 闫瑾 李小珍 杨飞 《现代检验医学杂志》 CAS 2019年第5期40-44,51,共6页
目的系统评价外周血前列腺癌抗原3(PCA3)基因检测对前列腺癌的诊断效能。方法计算机检索Medline,Embase,Cochrane Library,CNKI和WANFANG等国内、外数据库至2018年12月,应用RevMan5.0,Meta-Disc1.4和Stata12.0软件进行meta分析。结果106... 目的系统评价外周血前列腺癌抗原3(PCA3)基因检测对前列腺癌的诊断效能。方法计算机检索Medline,Embase,Cochrane Library,CNKI和WANFANG等国内、外数据库至2018年12月,应用RevMan5.0,Meta-Disc1.4和Stata12.0软件进行meta分析。结果1060例受试者共纳入11项研究。结果显示,外周血PCA3检验诊断前列腺癌的敏感度和特异度分别为0.58,95%CI[0.53,0.63]和0.94,95%CI[0.92,0.96],阳性似然比、阴性似然比分别为8.96,95%CI[5.22,15.40]和0.32,95%CI[0.16,0.67];ROC曲线下面积为0.9379±0.0346,Q指数为0.8749±0.0433。结论外周血PCA3基因检测诊断前列腺癌特异度较高,但敏感度一般,具有排除诊断的能力,需对该检测方法进一步评价。 展开更多
关键词 前列腺癌抗原3基因 诊断试验 前列腺癌 META分析
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人MAGE-3基因片段的克隆与测序 被引量:2
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作者 彭培立 吕颖捷 +1 位作者 赵国强 董子明 《河南大学学报(医学版)》 CAS 2005年第2期20-23,共4页
目的克隆表达人MAGE-3基因片段(210~623位碱基),以便研究其对MAGE-3阳性恶性肿瘤的生物学作用。方法为选择靶基因,采用分子生物学软件分析MAGE-3基因抗原表位;并设计MAGE-3靶区域引物。从人肺癌组织标本中提取mRNA,用RT-PCR法从中扩增... 目的克隆表达人MAGE-3基因片段(210~623位碱基),以便研究其对MAGE-3阳性恶性肿瘤的生物学作用。方法为选择靶基因,采用分子生物学软件分析MAGE-3基因抗原表位;并设计MAGE-3靶区域引物。从人肺癌组织标本中提取mRNA,用RT-PCR法从中扩增出MAGE-3片段,对其进行XhoⅠⅡ酶切鉴定;将扩增片段克隆于pGEM-TEasy载体中,转化JM109,进行阳性筛选后,运用pGEM-TEasy质粒的T7/SP6作为引物对重组子鉴定,并进行DNA测序。结果抗原表位分析表明MAGE-3基因片段(210~623位碱基)为抗原决定簇丰富区段。RNA体外扩增得到的片段为414bp,并经XhoⅠⅡ酶切鉴定得到证实;pGEM-TEasy-MAGE-3经筛选鉴定正确,DNA测序结果与Genebank比较完全相同,表明靶基因成功插入pGEM-TEasy。结论该片段可用于真核及原核表达。 展开更多
关键词 基因片段 MAGE-3基因 DNA测序 抗原表位分析 酶切鉴定 生物学作用 分子生物学 癌组织标本 JM109 抗原决定簇 克隆表达 恶性肿瘤 软件分析 mRNA PCR法 扩增片段 体外扩增 原核表达 靶基因 重组子 碱基 阳性 引物 筛选
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尿液前列腺癌基因3检测诊断前列腺癌的Meta分析 被引量:4
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作者 高建军 韩瑞发 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期483-486,共4页
目的采用Meta分析的方法评价尿液前列腺癌基因3(PCA3)检测在前列腺癌诊断中的应用价值。方法通过计算机检索PubMed(1966年1月—2010年10月)、Cochrane Library(2010年第3期)、中国学术期刊全文数据库(CNKI,1994年3月—2010年10月),收集... 目的采用Meta分析的方法评价尿液前列腺癌基因3(PCA3)检测在前列腺癌诊断中的应用价值。方法通过计算机检索PubMed(1966年1月—2010年10月)、Cochrane Library(2010年第3期)、中国学术期刊全文数据库(CNKI,1994年3月—2010年10月),收集公开发表的关于尿液PCA3检测用于前列腺癌诊断的队列研究或病例对照研究。应用Meta-disc 1.4和STATA 11.0统计软件进行分析,评价尿液PCA3检测诊断前列腺癌的敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比和受试者工作特征(ROC)曲线下面积。结果共纳入11项研究,2 694例受试者。Meta分析结果显示,尿液PCA3检测诊断前列腺癌的敏感度和特异度分别为61%〔95%CI(58%,64%)〕和72%〔95%CI(70%,74%)〕,阳性似然比、阴性似然比分别为2.23〔95%CI(1.88,2.66)〕和0.54〔95%CI(0.46,0.62)〕;ROC曲线下面积为0.73〔95%CI(0.69,0.77)〕。结论尿液PCA3检测诊断前列腺癌的敏感度和特异度尚可,且有检测方便、无创等优点,可作为临床上无创诊断前列腺癌的有效方法。 展开更多
关键词 前列腺癌基因3 前列腺特异抗原 前列腺肿瘤 诊断 META分析
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MAGE-3抗原肽致敏树突状细胞的体内抗膀胱癌作用及机制 被引量:1
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作者 马鸣 李秀真 +3 位作者 王超 郭洪敏 马鑫 张旭 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第8期1-3,共3页
目的探讨黑色素瘤-3基因(MAGE-3)抗原肽致敏的树突状细胞(DC)体内对膀胱癌肿瘤的抑制作用及机制。方法采用Ficoll法从HLA-A2型个体外周血中分离单个核细胞,用GM-CSF和IL-4诱导扩增DC,再经MAGE-3抗原肽致敏,致敏DC细胞和同型T淋巴细胞共... 目的探讨黑色素瘤-3基因(MAGE-3)抗原肽致敏的树突状细胞(DC)体内对膀胱癌肿瘤的抑制作用及机制。方法采用Ficoll法从HLA-A2型个体外周血中分离单个核细胞,用GM-CSF和IL-4诱导扩增DC,再经MAGE-3抗原肽致敏,致敏DC细胞和同型T淋巴细胞共培养诱导细胞毒性T淋巴细胞(CTL),经过尾静脉注入膀胱癌荷瘤小鼠,观察其对肿瘤体积及重量的影响。结果MAGE-3抗原肽致敏的DC诱导产生的CTL可明显缩小瘤体、降低瘤重。结论MAGE-3九肽致敏DC诱导CTL体内具有抑制膀胱癌细胞增长的作用;其机制可能为激活T淋巴细胞。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 膀胱癌 树突状细胞 抗原肽 黑色素瘤-3基因
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CpG ODN协同MAGE-3抗原肽致敏DC疫苗对膀胱癌细胞BIU-87的抑制作用 被引量:1
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作者 李秀真 薛庆节 +5 位作者 路海 聂尚丹 王晖 李运清 赵龙玉 谭文彬 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期891-897,共7页
目的:探讨含未甲基化胞嘧啶鸟嘌呤(CpG)序列的细菌寡核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN)免疫佐剂在增强黑色素瘤抗原基因-3(melanoma antigen gene-3,MAGE-3)抗原肽致敏DC抗膀胱肿瘤细胞的作用及其分子机制。方法:采用Ficoll法... 目的:探讨含未甲基化胞嘧啶鸟嘌呤(CpG)序列的细菌寡核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide,CpG ODN)免疫佐剂在增强黑色素瘤抗原基因-3(melanoma antigen gene-3,MAGE-3)抗原肽致敏DC抗膀胱肿瘤细胞的作用及其分子机制。方法:采用Ficoll法从健康志愿者HLA-A2型外周血中分离单个核细胞,常规方法诱导培养制备成熟DC。MTT法检测不同方式(MAGE-3、CpG ODN、MAGE-3+CpG ODN和无关抗原对照)致敏DC对T淋巴细胞增殖和CTL对靶细胞BIU-87的杀伤作用。CpG ODN+MAGE-3抗原肽致敏DC抗裸鼠BIU-87膀胱癌细胞移植瘤治疗7、11 d测定移植瘤质量变化,MTT和Western blotting法分别检测移植瘤细胞的增殖水平及其凋亡蛋白表达的变化。结果:CpG ODN+MAGE-3抗原肽致敏DC能够促进T淋巴细胞增殖(P<0.05),并显著提高活化T淋巴细胞的CTL对靶细胞BIU-87的杀伤活性(P<0.05)。体内实验表明,致敏DC治疗7、11 d的各组移植瘤质量均明显降低(均P<0.05),移植瘤的增殖能力下降也较明显(P<0.05);与其他致敏DC方式相比较,尤以CpG ODN+MAGE-3致敏DC组在治疗11 d时的移植瘤质量降低非常显著(P<0.01),且明显促进荷瘤小鼠脾脏单个核细胞的增殖能力(P<0.01);该组在治疗第3天起移植瘤组织Bcl-2表达水平明显降低、Bax水平明显升高(均P<0.05或P<0.01)。结论:CpG ODN能促进MAGE-3抗原肽致敏DC对膀胱癌BIU-87细胞的抑制作用,为膀胱癌DC疫苗的临床应用提供了实验依据。 展开更多
关键词 膀胱癌 BIU-8细胞 树突状细胞 含CpG序列的细菌寡核苷酸 黑色素瘤抗原基因-3
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痰标本p16基因启动子区甲基化联合血清细胞角蛋白19片段和癌抗原15-3对非小细胞肺癌的诊断价值 被引量:4
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作者 郭秀娟 沈莉 《临床荟萃》 CAS 北大核心 2008年第15期1067-1070,共4页
目的评价痰液标本中p16基因启动子区甲基化联合血清中细胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment,CYFRA 21-1)和癌抗原15-3(CA15-3)的检测对非小细胞肺癌(NSCLC)的诊断价值。方法用巢式甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测100例NSCLC患... 目的评价痰液标本中p16基因启动子区甲基化联合血清中细胞角蛋白19片段(cytokeratin 19 fragment,CYFRA 21-1)和癌抗原15-3(CA15-3)的检测对非小细胞肺癌(NSCLC)的诊断价值。方法用巢式甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)检测100例NSCLC患者痰液p16基因启动子区甲基化联合化学发光法检测患者血清中CYFRA21-1和CA15-3的水平,评价3种肿瘤标志物联合检测对NSCLC的诊断价值。结果NSCLC患者痰液中p16基因启动子区甲基化阳性率为61.0%;NSCLC患者血清中CYFRA21-1和CA15-3的实验敏感度分别为58.0%和38.0%;联合检测可明显提高NSCLC的检出率,敏感度79.0%,明显高于各种肿瘤标志物单项检测。结论痰液标本中p16基因启动子区甲基化联合血清中CYFRA21-1和CA15-3的检测可明显提高NSCLC的检出率,为早期诊断NSCLC提供了依据。 展开更多
关键词 非小细胞肺 基因 p16 甲基化 CA-15—3抗原 角蛋白19 诊断
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MAGE-3在胃癌组织中的表达及其临床意义 被引量:1
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作者 何宋兵 汪良 +3 位作者 吴雨岗 陈彦 孙康 张雁云 《中国现代普通外科进展》 CAS 2007年第3期230-232,239,共4页
目的:检测黑色素瘤抗原基因-3(MAGE-3)在胃癌组织中的表达,探讨其在胃癌免疫治疗中的应用价值。方法:应用RT-PCR方法对40例胃癌组织和相应的癌旁组织以及20例胃慢性炎症组织中的MAGE-3基因进行检测,随机选取RT-PCR阳性扩增产物进行测序... 目的:检测黑色素瘤抗原基因-3(MAGE-3)在胃癌组织中的表达,探讨其在胃癌免疫治疗中的应用价值。方法:应用RT-PCR方法对40例胃癌组织和相应的癌旁组织以及20例胃慢性炎症组织中的MAGE-3基因进行检测,随机选取RT-PCR阳性扩增产物进行测序,并结合临床病理参数进行研究分析。结果:在40例胃癌组织中,MAGE-3基因的表达阳性率为67.5%(27/40),明显高于在相应的癌旁组织15%(6/40)及胃慢性炎症组织中的表达阳性率10%(2/20)。DNA测序证实RT-PCR产物确为MAGE-3基因的目的片段。胃癌组织中MAGE-3基因表达的阳性率与胃癌的浸润深度有关,而与病理分期、分化程度和淋巴转移无关。结论:MAGE-3基因在胃癌组织中有较高的表达率,可望将其编码的蛋白作为靶分子应用于胃癌的免疫治疗。 展开更多
关键词 胃肿瘤 黑色素瘤抗原基因-3
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