ACSL4通过AMPK/mTOR通路抑制七氟醚诱导神经元铁死亡机制的实验研究

目的探讨酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-CoA syntbetase long chain family member 4,ACSL4)在七氟醚(sevoflurane,Sev)诱导的神经元细胞损伤中的作用及机制。方法以人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞为研究对象,分别设置对照组(二甲基亚砜,10μmol/L)、Sev组和Sev+铁死亡抑制剂Ferrostatin-1(Fer-1,10μmol/L)组,采用CCK-8法检测细胞活性。体外构建4.1%Sev暴露的术后认知功能障碍模型,按照转染类别分为Ctrol组、Sev组、Sev+si-NC组、Sev+si-ACSL4组和Sev+si-ACSL4+compound C组。采用比色法检测各组细胞中丙二醛(malonaldehyde,MDA)、4-羟基壬烯醛(4-hydroxynonenal,4-HNE)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)和Fe2+含量;2’,7’-二氯荧光素二乙酸盐(DCFH-DA)荧光探针检测活性氧水平;实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测ACSL4,谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)和溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)mRNA表达;蛋白免疫印迹法(WB)检测ACSL4,GPX4,腺苷酸激活蛋白激酶(adenosine 5’-monophosphate-activated protein kinase,AMPK)、磷酸化(phosphorylated,p)-AMPK,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin)mTOR和p-mTOR蛋白表达。结果CCK-8结果显示,Sev组细胞活力(0.41±0.11)较对照组(0.98±0.07)明显降低,Sev+Fer-1组细胞活力(0.83±0.09)较Sev组显著升高,差异具有统计学意义(t=7.572,5.118,均P<0.01)。Sev组细胞中Fe2+,MDA,4-HNE,ROS水平和p-AMPK/AMPK比率以及ACSL4的mRNA和蛋白表达高于Ctrol组(t=5.900,7.421,4.795,13.517,10.825,9.945,11.334),GSH,p-mTOR/mTOR比率以及SLC7A11,GPX4的mRNA和蛋白表达低于Ctrol组(t=20.438,3.551,11.460,12.211,6.845,8.287),差异具有统计学意义(均P<0.05)。Sev+siACSL4组Fe2+,MDA,4-HNE,ROS水平和p-AMPK/AMPK比率以及ACSL4的mRNA和蛋白表达低于Sev+siNC组(t=3.818,3.164,3.054,4.465,13.088,7.918,9.737),细胞活力、GSH含量、p-mTOR/mTOR比率以及SLC7A11,GPX4的蛋白表达高于Sev+si-NC组(t=2.912,7.248,7.574,20.092,5.915),差异具有统计学意义(均P<0.05)。Sev+si-ACSL4+compound C组细胞活力、GSH含量和SLC7A11,GPX4蛋白表达低于Sev+si-ACSL4组(t=4.435,8.521,4.522,8.767),而Fe2+,MDA,4-HNE和ROS水平高于Sev+si-ACSL4组(t=10.046,4.004,2.957,3.752),差异具有统计学意义(均P<0.05)。结论抑制ACSL4表达可通过激活AMPK/mTOR信号通路减轻Sev诱导的SH-SY5Y细胞铁死亡。

Cathepsin L, transmembrane peptidase/serine subfamily member 2/4, and other host proteases in COVID-19 pathogenesis – with impact on gastrointestinal tract

Severe acute respiratory syndrome coronavirus-2(SARS-CoV-2)seems to employ two routes of entrance to the host cell;via membrane fusion(with the cells expressing both angiotensin converting enzyme 2(ACE2)and transmembrane peptidase/serine subfamily member 2/4(TMPRSS2/4))or via receptor-mediated endocytosis(to the target cells expressing only ACE2).The second mode is associated with cysteine cathepsins(probably cathepsin L)involvement in the virus spike protein(S protein)proteolytic activation.Also furin might activate the virus S protein enabling it to enter cells.Gastrointestinal tract(GIT)involvement in SARS-CoV-2 infection is evident in a subset of coronavirus disease 2019(COVID-19)patients exhibiting GIT symptoms,such as diarrhea,and presenting viral-shedding in feces.Considering the abundance and co-localization of ACE2 and TMPRSS2 in the lower GIT(especially brush-border enterocytes),these two receptors seem to be mainly involved in SARS-CoV-2 invasion of the digestive tract.Additionally,in vitro studies have demonstrated the virions capability of infection and replication in the human epithelial cells lining GIT.However,also furin and cysteine cathepsins(cathepsin L)might participate in the activation of SARS-CoV-2 spike protein contributing to the virus invasiveness within GIT.Moreover,cathepsin L(due to its involvement in extracellular matrix components degradation and remodeling,the processes enhanced during SARS-CoV-2-induced inflammation)might be responsible for the dysregulation of absorption/digestion functions of GIT,thus adding to the observed in some COVID-19 patients symptoms such as diarrhea.

肺癌组织中ERO1L、TNFRSF4的表达与患者免疫功能、炎症反应因子及预后的关系

目的探究肺癌组织中内质网氧化物蛋白(ERO1L)、肿瘤坏死因子受体4(TNFRSF4)的表达与肺癌患者免疫功能、炎症反应因子及其预后的关系。方法选取2018年7月~2020年7月于本院进行手术治疗的108例肺癌患者,收集术中留取的癌组织和癌旁组织标本。采用qRT-PCR检测ERO1L和TNFRSF4的mRNA相对表达量;使用免疫组织化学法检测ERO1L和TNFRSF4蛋白表达情况,分析二者表达水平与患者临床病理特征的关系,采用Kaplan-Meier法分析ERO1L、TNFRSF4蛋白表达水平与患者预后的关系。肺癌患者预后生存率的影响因素采用Cox多因素分析。结果肺癌患者癌组织中ERO1L mRNA表达水平显著高于癌旁组织,TNFRSF4 mRNA表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05);肺癌组织中ERO1L蛋白高表达率显著高于癌旁组织,TNFRSF4蛋白高表达率显著低于癌旁组织(P<0.05)。ERO1L蛋白高表达组患者CD3^(+)、CD4^(+)显著低于低表达组(P<0.05),IL-1β、IL-6、TNF-α显著高于低表达组(P<0.05);TNFRSF4蛋白高表达组患者CD3^(+)、CD4^(+)显著高于低表达组,IL-1β、IL-6、TNF-α显著低于低表达组(P<0.05)。ERO1L高表达组患者3年累积生存率显著低于低表达组(Log rankχ^(2)=6.100,P=0.014),TNFRSF4高表达组患者3年累积生存率显著高于低表达组(Log rankχ^(2)=11.296,P=0.001)。肺癌组织的低分化、淋巴结转移、TNM分期为Ⅲ-Ⅳ期、ERO1L高表达、TNFRSF4低表达是影响患者生存率的危险因素。结论肺癌组织中ERO1L、TNFRSF4表达与患者免疫功能、炎症因子以及预后具有一定关系。

长链脂酰辅酶A合成酶4表达水平对肝癌预后影响的Meta分析

目的评价长链脂酰辅酶A合成酶4(acyl-CoA synthetase long-chain family member 4,ACSL4)对肝癌患者预后的影响。方法系统检索PubMed、Embase、Cochrane Library、Web of science、中国知网、万方医学与维普数据库,检索时间均从建库至2023年2月,收集ACSL4表达对肝癌患者预后影响的队列研究。文献的筛选过程由2名评估员自主完成。将纳入的研究依据纽卡斯尔-渥太华质量评价量表(Newcastle Ottawa Scale,NOS)进行质量评估,提取文献中肝癌患者的临床病理特征、研究的结局指标及HR(95%CI)等相关数据。运用Stata17.0MP软件对文献数据进行统计分析,采用漏斗图与Egger’s检验探讨偏倚风险。结果共纳入6项队列试验(890例肝癌患者)。Meta分析表明,与ACSL4低表达组患者相比,ACSL4高表达组肝癌患者总生存期(overall survival,OS)较短(HR=1.274,95%CI:1.141~1.422,P<0.001);肝癌患者中,男性ACSL4高表达(OR=1.12,95%CI:1.008~1.224,P<0.05)。Egger’s检验表明研究间存在发表偏倚的可能性较小(P=0.055)。ACSL4表达水平与年龄、肿瘤分期、肿瘤大小和肿瘤包膜是否完整以及是否合并肝硬化的相关性无统计学意义(P均>0.05)。结论ACSL4高表达与肝癌患者较短OS的相关性具有统计学意义,但仍需要更多的高质量临床研究进行验证。

血清PKN1、TNFRSF4、DDIT4预测子宫内膜癌患者淋巴结转移及预后的临床价值

目的探讨血清蛋白激酶N1(PKN1)、肿瘤坏死因子受体超家族成员4(TNFRSF4)、DNA损伤诱导转录因子4(DDIT4)预测子宫内膜癌患者淋巴结转移和预后的临床价值。方法选取2019年10月至2021年10月于唐山市妇幼保健院治疗的180例子宫内膜癌患者为子宫内膜癌组。另选取同期在该院治疗的子宫良性疾病患者180例作为良性疾病组,以及在该院体检的180例健康者作为健康组。子宫内膜癌组根据是否发生淋巴结转移分为淋巴结转移组42例和无淋巴结转移组138例,按照随访结果将患者分为预后不良组和预后良好组。比较各组血清PKN1、TNFRSF4、DDIT4水平,Logistic模型分析患者预后的影响因素,以及绘制受试者工作特征曲线分析血清PKN1、TNFRSF4、DDIT4对患者预后的预测价值。结果与健康组比较,子宫内膜癌组、良性疾病组血清PKN1、DDIT4水平升高,血清TNFRSF4水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。淋巴结转移组血清PKN1、DDIT4水平高于无淋巴结转移组,TNFRSF4水平低于无淋巴结转移组,差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良组低分化程度、淋巴脉管间隙浸润阳性、肌层浸润≥1/2的占比高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。预后不良组血清PKN1、DDIT4水平高于预后良好组,TNFRSF4水平低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清PKN1、DDIT4、LVSI、肌层浸润是子宫内膜癌预后的危险因素,血清TNFRSF4为子宫内膜癌预后的保护因素(P<0.05)。血清PKN1、TNFRSF4、DDIT4联合对子宫内膜癌患者预后状况的预测效能高于各血清指标单独预测(P<0.05)。结论血清PKN1、TNFRSF4、DDIT4与子宫内膜癌患者淋巴结转移及预后有关,且对患者预后的预测效能较高。

脑胶质瘤组织PLEKHA4表达变化及其影响因素分析

目的探讨脑胶质瘤组织Pleckstrin同源域A族成员4(PLEKHA4)表达变化及其影响因素。方法选取胶质瘤手术切除患者癌组织及相应癌旁组织标本52例,其中WHO分级Ⅰ~Ⅱ级21例、Ⅲ~Ⅳ级31例,p53分型野生型23例、突变型29例。采用免疫组化和免疫印迹两种方法检测脑胶质瘤患者癌旁组织、胶质瘤组织中的PLEKHA4表达,观察PLEKHA4不同表达水平胶质瘤患者的临床特点及临床预后情况,分析影响胶质瘤组织中PLEKHA4表达的相关因素。结果52例患者胶质瘤组织PLEKHA4均为阳性表达,表达部位主要在胶质瘤组织细胞质和细胞膜中;癌旁组织未见PLEKHA4阳性表达。癌旁组织、Ⅰ~Ⅱ级胶质瘤、Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤PLEKHA4相对表达量分别为0.419±0.101、0.968±0.061、1.366±0.096;PLEKHA4在胶质瘤组织中的相对表达量高于癌旁组织,Ⅲ~Ⅳ级胶质瘤组织PLEKHA4相对表达量高于Ⅰ~Ⅱ级胶质瘤组织(P均<0.05)。胶质瘤组织不同PLEKHA4表达水平患者WHO分级、p53分型比较差异有统计学意义(P均<0.05)。Logistic回归分析显示,胶质瘤WHO分级、p53分型是PLEKHA4表达的独立影响因素(P均<0.05)。术后随访2年,PLEKHA4高表达患者生存率为28.6%,PLEKHA4低表达患者生存率为70.8%,二者生存率比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论胶质瘤组织PLEKHA4高表达,患者WHO分型、p53分型是胶质瘤组织PLEKHA4表达的影响因素,PLEKHA4表达与患者临床预后相关。

鼻咽癌组织中GPX4和SLC7A11的表达及临床意义

目的探讨鼻咽癌(NPC)组织中谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)的表达及临床意义。方法将2016年3月至2017年3月于本院诊治的98例NPC患者纳入研究作为NPC组,同期因鼻中隔偏曲接受手术治疗的患者作为对照组。采用免疫组化检测NPC组织和正常鼻黏膜组织中GPX4、SLC7A11的表达情况。采用Spearman秩相关分析癌组织中GPX4、SLC7A11表达的相关性。比较不同NPC临床参数患者之间GPX4、SLC7A11表达阳性率。采用Kaplan-Meier法分析GPX4、SLC7A11表达对NPC患者生存预后的影响。采用单因素及多因素Cox回归分析NPC患者生存预后的影响因素。结果NPC组织中GPX4、SLC7A11表达阳性率分别为75.51%(74/98)、73.47%(72/98),分别高于正常鼻黏膜组织中的11.67%(7/60)、13.33%(8/60),差异均有统计学意义(P<0.001)。NPC组织中GPX4与SLC7A11表达呈正相关(r=0.724,P<0.001)。不同临床分期、肿瘤分化程度、淋巴结转移情况及放疗敏感性NPC患者癌组织中GPX4、SLC7A11表达阳性率比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。GPX4阳性及阴性表达组的5年总体生存率分别为66.22%(49/74)、91.67%(22/24);GPX4阳性表达组累积生存明显低于阴性表达组(Log-rankχ^(2)=5.822,P<0.001)。SLC7A11阳性及阴性表达组5年总体生存率分别为66.67%(48/72)、88.46%(23/26);SLC7A11阳性表达组累积生存明显低于阴性表达组(Log-rankχ^(2)=5.041,P=0.012)。临床分期Ⅲ~Ⅳ期(HR=1.608,95%CI:1.225~2.112)、淋巴结转移(HR=1.917,95%CI:1.319~2.799)、GPX4阳性(HR=1.839,95%CI:1.228~2.753)、SLC7A11阳性(HR=1.738,95%CI:1.246~2.426)是影响NPC患者生存预后的独立危险因素。结论NPC中GPX4、SLC7A11表达水平升高,两者与不良临床病理特征有关,是NPC患者预后评估的潜在标志物。

结肠癌组织中miR-183-5p和THEM4的表达水平及临床意义

目的:研究结肠癌组织中微小RNA-183-5p(miR-183-5p)和硫酯酶超家族成员4(THEM4)的表达水平及其临床意义。方法:收集河北中石油中心医院96例结肠癌患者为研究对象,在进行根治切除术过程中收集患者结肠癌组织及癌旁正常组织。检测结肠癌组织及癌旁正常组织中miR-183-5p和THEM4 m RNA的相对表达水平。分析两者的相关性及其与预后的关系。Cox回归分析影响结肠癌患者预后的危险因素。结果:与癌旁正常组织相比,结肠癌组织中miR-183-5p表达水平升高(P<0.05),THEM4 m RNA表达水平降低(P<0.05)。结肠癌组织中miR-183-5p与THEM4 m RNA表达呈负相关(r=-0.529,P<0.05)。miR-183-5p高表达组生存率低于低表达组(P<0.05),THEM4高表达组生存率显著高于低表达组(P<0.05)。TNM分期(Ⅲ~Ⅳ)、miR-183-5p高表达、THEM4低表达是结肠癌患者不良预后的危险因素(P<0.05)。结论:结肠癌织中miR-183-5p表达水平升高,THEM4表达水平降低,两者均与患者临床病理特征及预后密切相关。

Nr4a1激动剂胞孢子酮B挽救小鼠噪声性听力损失

目的:探究核受体亚家族4A组成员1(nuclear receptor subfamily 4 group A member 1,Nr4a1)Nr4a1激动剂胞孢子酮B(cytosporone B,Csn-B)对小鼠噪声暴露后听力损失的治疗作用。方法:采用双氧水刺激HEI-OC1毛细胞系的方法构建氧化应激细胞模型;通过实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,q PCR)检测细胞中Nr4a1的mRNA表达水平;分别通过细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)及流式细胞术的方法检测细胞活力和细胞凋亡水平以评估Csn-B预处理后经双氧水刺激的细胞状态。构建小鼠噪声性听力损失模型,运用qPCR和免疫荧光技术检测噪声暴露后Nr4a1在小鼠耳蜗中的表达;通过检测听性脑干反应(auditory brainstem response,ABR)评估噪声暴露后以及Csn-B连续治疗13 d后小鼠听力情况。结果:双氧水刺激后HEI-OC1毛细胞中Nr4a1表达上升,细胞活力显著下降,凋亡水平显著升高;Csn-B预处理HEI-OC1毛细胞经双氧水刺激,细胞活力显著高于对照组而凋亡水平则显著低于对照组。在体研究结果显示,噪声暴露后小鼠听力显著降低,Nr4a1在小鼠耳蜗中的表达水平显著升高。噪声暴露后经Csn-B治疗小鼠听力得到改善,主要表现为Click-ABR以及Tone Burst-ABR(4000、8000Hz处)阈值下降。结论:Nr4a1激动剂Csn-B增强内耳毛细胞对氧化应激损伤的抵御能力,部分改善噪声暴露后的小鼠听力。

茯苓酸通过调节Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路抑制氧糖剥夺/复氧诱导的心肌细胞铁死亡

目的:探究茯苓酸通过调节核因子E2相关因子2(Nrf2)/溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)信号通路抑制氧糖剥夺/复氧(OGD/R)诱导的心肌细胞铁死亡的机制。方法:体外培养大鼠心肌细胞H9c2,诱导建立细胞OGD/R模型后以0、1.0、2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L茯苓酸处理24 h,通过细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法检测各处理组细胞活力后筛选出合适的茯苓酸作用浓度。将H9c2细胞随机分为对照组、模型组、茯苓酸组、ML385组(Nrf2抑制剂组)、茯苓酸+ML385组,除对照组外其余各组建立细胞OGD/R模型后以茯苓酸、ML385分组处理,采用CCK-8法与流式细胞实验分别检测各组H9c2细胞活力、凋亡率;采用试剂盒检测各组H9c2细胞培养基上清中乳酸脱氢酶(LDH)、促炎因子[前列腺素E2(PGE2)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]、抗炎因子白细胞介素(IL)-10水平及细胞抗氧化因子[过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)]、铁死亡相关指标[铁含量、丙二醛(MDA)]水平;采用免疫印迹实验检测各组H9c2细胞凋亡及Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路相关蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组细胞凋亡率、LDH释放量、细胞培养基上清中PGE2及TNF-α水平、细胞铁含量、MDA水平及Bax、Caspase-3蛋白表达均升高(P<0.05),细胞活力、细胞培养基上清中IL-10水平、细胞CAT及GSH水平、Bcl-2及Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达降低(P<0.05)。与模型组比较,茯苓酸组细胞凋亡率、LDH释放量、细胞培养基上清中PGE2及TNF-α水平、细胞铁含量、MDA水平及Bax、Caspase-3蛋白表达均降低(P<0.05),细胞活力、细胞培养基上清中IL-10水平、细胞CAT及GSH水平、Bcl-2及Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达升高(P<0.05);ML385组细胞凋亡率、LDH释放量、细胞培养基上清中PGE2及TNF-α水平、细胞铁含量、MDA水平及Bax、Caspase-3蛋白表达均升高(P<0.05),细胞活力、细胞培养基上清中IL-10水平、细胞CAT及GSH水平、Bcl-2及Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达降低(P<0.05)。与茯苓酸组比较,茯苓酸+ML385组细胞凋亡率、LDH释放量、细胞培养基上清中PGE2及TNF-α水平、细胞铁含量、MDA水平及Bax、Caspase-3蛋白表达均升高(P<0.05),细胞活力、细胞培养基上清中IL-10水平、细胞CAT及GSH水平、Bcl-2及Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达降低(P<0.05)。结论:茯苓酸可通过激活Nrf2/SLC7A11/GPX4信号而抑制OGD/R诱导的心肌细胞炎症、脂质过氧化与铁死亡,增强其抗氧化活性及细胞活力,最终减轻其细胞凋亡损伤。

金盏花苷E通过自噬途径下调GPX4和SLC7A11抑制肝癌细胞的增殖和迁移

目的探讨金盏花苷E抑制肝癌细胞增殖和迁移的分子机制。方法金盏花苷E处理肝癌细胞,CCK-8检测细胞活力;Western blotting检测GPX4、SLC7A11、LC3、P62的表达以及Akt/mTOR的磷酸化。自噬抑制剂LY294002和激活剂Rapamycin与金盏花苷E联合处理肝癌细胞,EdU和Transwell实验分别检测肝癌细胞的增殖和迁移能力。TCGA数据库分析GPX4和SLC7A11在肝癌及正常肝组织中的表达水平,以及与肝癌患者存活之间的关系。Western blotting和qPCR分别检测GPX4和SLC7A11在肝癌细胞和正常肝细胞中的表达水平。结果金盏花苷E能够显著抑制肝癌细胞的存活(P<0.05);GPX4和SLC7A11在肝癌组织和肝癌细胞中均显著高表达;GPX4和SLC7A11的表达与肝癌患者存活呈显著负相关(P<0.001);金盏花苷E显著抑制GPX4和SLC7A11蛋白的表达,激活Akt-mTOR通路,增强LC3Ⅱ的表达(P<0.01);自噬激活剂Rapamycin显著增强金盏花苷E对GPX4和SLC7A11的抑制作用,而自噬抑制剂LY294002则明显逆转了金盏花苷E对GPX4和SLC7A11的抑制作用(P<0.05);抑制自噬途径能够逆转金盏花苷E对肝癌细胞增殖和迁移的抑制作用,增强自噬途径则发生相反的变化(P<0.01)。结论金盏花苷E经自噬途径下调GPX4和SLC7A11抑制肝癌细胞的增殖和迁移。

铁死亡诱导剂Erastin下调ACSL4抑制肝癌细胞体外增殖

目的分析酯酰辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)在肝癌中的表达,探究铁死亡调控ACSL4对癌细胞增殖能力的影响。方法收集肝癌和癌旁正常肝组织临床样本,HE染色病理学鉴定后,微量法检测丙二醛(MDA)含量,RT-qPCR检测ACSL4与增殖细胞核抗原(PCNA)的mRNA表达,Western blotting检测ACSL4与PCNA的蛋白表达。体外培养Huh-7人肝癌细胞,先分为3组:即铁死亡诱导剂Erastin组、抑制剂Fer-1组、以及Erastin与Fer-1联合作用组;其中Erastin或Fer-1组均包含0、20、40、60、80、100μmol/L共6个浓度,然后采用筛选的Erastin浓度80μmol/L+(0、30、60、90μmol/L)Fer-1,筛选Fer-1浓度后再分为3组:对照组、80μmol/L Erastin单独处理组、80μmol/L Erastin+60μmol/L Fer-1联合处理组,均作用48 h。干预ACSL4、PCNA的表达后,平板克隆实验检测细胞增殖能力的改变,微量法检测MDA含量的变化。结果相较于癌旁正常肝组织,肝癌组织中MDA含量降低(P<0.01),ACSL4、PCNA的mRNA和蛋白表达均显著增强(P<0.05);Erastin可抑制ACSL4、PCNA的mRNA和蛋白表达(P<0.01),并抑制细胞增殖(P<0.001)、上调MDA含量(P<0.01);单独使用Fer-1对细胞存活率无影响;但加入Erastin后再应用Fer-1,则可逆转Erastin对ACSL4、PCNA表达(P<0.05),细胞增殖能力的抑制(P<0.001),MDA含量的上调(P<0.05)。结论ACSL4在肝癌中表达增强,Erastin可提高MDA含量、下调ACSL4表达,诱导肝癌细胞铁死亡,抑制癌细胞增殖;Fer-1则可逆转Erastin的上述作用。

前列腺癌患者血清SLC7A11和GPX4水平与化疗敏感性及预后的关系

目的 分析前列腺癌患者血清溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)水平与化疗敏感性及预后的关系。方法 选取2019年1月至2022年12月该院收治的106例前列腺癌患者作为前列腺癌组,另选取同时期来该院体检的106例健康男性作为对照组;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中SLC7A11和GPX4水平;采用多因素Logistic回归分析影响前列腺癌患者预后的因素;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清中SLC7A11和GPX4水平对前列腺癌患者预后的预测价值。结果 与对照组比较,前列腺癌组血清中SLC7A11和GPX4水平显著升高(P<0.05);与化疗前比较,化疗后前列腺癌患者血清中SLC7A11和GPX4水平显著降低(P<0.05);不同肿瘤最大径、Gleason评分、临床病理分期、淋巴结转移、肿瘤分化程度及前列腺特异度抗原(PSA)水平前列腺癌患者血清中SLC7A11水平比较,差异有统计学意义(P<0.05);不同肿瘤分化程度、Gleason评分、临床病理分期、淋巴结转移及PSA水平前列腺癌患者血清中GPX4水平比较差异有统计学意义(P<0.05);预后不良组血清中SLC7A11和GPX4水平较预后良好组显著升高(P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示,SLC7A11及GPX4水平是前列腺癌预后的影响因素(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,血清中SLC7A11和GPX4水平联合预测前列腺癌患者预后的价值较单项指标预测价值更好(P<0.05)。结论 前列腺癌患者血清中SLC7A11和GPX4水平显著升高,二者与化疗敏感性存在密切关系,可作为前列腺癌患者预后预测的生物标志物。

淫羊藿苷通过上调SLC7A11/GPX4轴减轻铁死亡改善心力衰竭

目的 基于脂质过氧化研究淫羊藿苷抗异丙肾上腺素所致小鼠心力衰竭的作用机制。方法 将C57BL/6小鼠随机分为空白组、异丙肾上腺素模型组(ISO,15 mg/kg)、氯沙坦阳性药组(Los, 9 mg/kg),以及淫羊藿苷低剂量组(ICA-L组,15 mg/kg)、淫羊藿苷高剂量组(ICA-H组,60 mg/kg)。采用小动物超声检测仪检测小鼠心功能(EF%、FS%)的变化,计算小鼠心脏指数。采用HE染色观察小鼠左心室组织病理变化,采用布鲁士蓝染色观察小鼠左心室组织铁离子的积累。采用Western blot检测小鼠左心室组织中铁死亡相关蛋白SLC7A11、GPX4、4-HNE、ACSL4、LPCAT3、TFR1、DMT1的表达。结果 ICA和Los可以改善ISO引起的小鼠左心室射血分数和短轴缩短率的降低,减轻ISO所致的左心室组织病理损伤以及铁离子过度积累,抑制ISO所致左心室组织中SLC7A11、GPX4蛋白的下调,4-HNE、ACSL4、LPCAT3、TFR1、DMT1蛋白的上调(P<0.05)。结论 ICA可能通过上调SLC7A11/GPX4轴抗脂质过氧化,减轻铁死亡,改善ISO所诱导的小鼠心力衰竭。

枸杞多糖通过SLC7A11/GPX4通路抑制铁死亡减轻小鼠脑缺血再灌注损伤

目的:探讨枸杞多糖(LBP)是否通过溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化酶4(GPX4)通路抑制铁死亡进而减轻脑缺血再灌注损伤。方法:使用大脑中动脉栓塞(MCAO)方法建立小鼠脑缺血再灌注(I/R)损伤模型,并同时给予枸杞多糖处理。小鼠被随机分为3组:假手术(Sham)组,I/R组,以及I/R+LBP组。使用2,3,5氯化三苯基四氮唑(TTC)染色来观察脑梗死体积;通过神经功能缺损评分来评估小鼠的神经功能;利用超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和亚铁离子(Fe^(2+))检测试剂盒来检测SOD、GSH、MDA和Fe^(2+)的水平变化;利用Western Blot检测抗铁死亡相关蛋白,包括SLC7A11、GPX4以及核因子红细胞系2相关因子2(Nrf2)的表达情况。结果:枸杞多糖能够减少I/R小鼠的脑梗死体积,改善I/R小鼠神经功能;枸杞多糖增加I/R损伤小鼠中SOD和GSH的含量、减少MDA的含量;Western Blot结果:I/R组脑组织中抗铁死亡相关蛋白SLC7A11、GPX4、Nrf2的表达水平明显低于Sham组;而通过枸杞多糖处理后,I/R+LBP组中SLC7A11、GPX4、Nrf2的水平明显高于I/R组。结论:枸杞多糖可能通过SLC7A11/GPX4信号通路抑制铁死亡来减轻脑缺血再灌注损伤。枸杞多糖对脑缺血再灌注损伤具有神经保护作用,是一种潜在的神经保护剂。

结直肠癌患者血浆lncRNA-FER1L4、miR-18a-5p水平与临床特征及术后复发的关系

目的探讨血浆长链非编码RNA-FER1样家族成员4(lncRNA-FER1L4)、微小RNA-18a-5p(miR-18a-5p)水平与结直肠癌患者临床特征及术后复发的关系。方法选取2019年6月至2022年6月在江苏省宿迁市第一人民医院住院并进行手术的110例结直肠癌患者作为研究对象,根据结直肠癌是否复发分为复发组和无复发组。收集患者临床特征资料,检测血浆lncRNA-FER1L4、miR-18a-5p水平,进行生物信息学分析。采用Pearson相关分析结直肠癌术后复发患者血浆lncRNA-FER1L4水平与miR-18a-5p水平的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血浆lncRNA-FER1L4、miR-18a-5p对结直肠癌患者术后复发的预测价值。采用多因素Logistic回归分析结直肠癌患者术后复发的危险因素。结果低肿瘤分化、TNM分期为Ⅲ期、有淋巴结转移和脉管浸润患者血浆lncRNA-FER1L4水平低于中高肿瘤分化、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移和无脉管浸润患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。低肿瘤分化、TNM分期为Ⅲ期有淋巴结转移和脉管浸润患者血浆miR-18a-5p水平高于中高肿瘤分化、TNM分期为Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移和无脉管浸润患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。无复发组有72例患者,复发组有38例患者。复发组血浆lncRNA-FER1L4水平低于无复发组,miR-18a-5p水平高于无复发组,差异均有统计学意义(P<0.05)。生物信息学分析结果显示,lncRNA-FER1L4与miR-18a-5p可能存在靶向关系。Pearson相关分析结果显示,结直肠癌术后复发患者血浆lncRNA-FER1L4水平和miR-18a-5p水平呈负相关(r=-0.488,P=0.002)。ROC曲线分析结果显示,lncRNA-FER1L4、miR-18a-5p单独及2项指标联合预测结直肠癌患者术后复发的曲线下面积(AUC)分别为0.899、0.843、0.944。2项指标联合预测的AUC高于lncRNA-FER1L4、miR-18a-5p单独预测的AUC(Z=2.859、3.311,P<0.05)。复发组低肿瘤分化、TNM分期为Ⅲ期、有淋巴结转移和脉管浸润的患者比例高于无复发组,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,血浆miR-18a-5p水平升高、lncRNA-FER1L4水平降低是结直肠癌患者术后复发的危险因素(P<0.05)。结论结直肠癌患者血浆lncRNA-FER1L4水平降低,miR-18a-5p水平升高,二者与结直肠癌患者临床特征和术后复发有关,且可作为结直肠癌患者术后复发的辅助预测指标。

鼻咽癌患者血清SMAD家族成员4、组织多肽特异性抗原表达水平及与临床特征和预后的关系

目的探讨鼻咽癌(NPC)患者血清SMAD家族成员4(SMAD4)、组织多肽特异性抗原(TPS)表达水平及与临床特征和预后的关系。方法选取43例NPC患者作为NPC组,40例健康体检者作为健康组,比较两组受试者血清SMAD4、TPS水平,分析SMAD4、TPS与NPC患者临床特征的关系。采用Cox回归模型分析NPC患者预后的影响因素。结果NPC组患者血清SMAD4水平明显低于健康组,TPS水平明显高于健康组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。不同临床分期、颈淋巴结转移情况、颅神经侵犯情况NPC患者血清SMAD4、TPS水平比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。Cox回归分析结果显示,有颅神经侵犯、血清SMAD4水平﹤97.43 ng/L、血清TPS水平≥164.44 U/L均为NPC患者预后不良的独立危险因素(P﹤0.01)。结论NPC患者血清SMAD4呈异常低表达,TPS呈异常高表达,其水平与NPC患者的临床特征有关,且与预后相关。

LILRB4在肿瘤微环境中的作用及其在肿瘤治疗中的应用进展

人类白细胞免疫球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)是一种免疫抑制性受体,正常生理情况下,其在单核细胞、巨噬细胞及树突状细胞上表达。LILRB4在多种肿瘤组织中的肿瘤细胞及巨噬细胞、自然杀伤细胞等免疫细胞中的表达高于相应正常组织,能够影响肿瘤细胞的生物学行为及肿瘤免疫微环境,显著促进肿瘤进展,且LILRB4的肿瘤免疫治疗显示出良好的疗效。该文对LILRB4在血液系统肿瘤、实体肿瘤中的表达与作用,以及靶向LILRB4治疗肿瘤的策略进行综述。

ING4在正常子宫内膜及子宫内膜癌的表达及临床意义

目的:研究生长抑制因子4(ING4)在正常子宫内膜及子宫内膜癌组织中的表达,探讨ING4在子宫内膜癌发生、发展中的作用,为子宫内膜癌的临床预防及治疗提供新的标志物。方法:利用荧光定量PCR、半定量RT-PCR、Western-blot及免疫组化等方法分别检测正常子宫内膜细胞及子宫内膜癌细胞系Ishikawa、HHUA及子宫内膜癌组织中ING4基因的表达,并进行分析比较。结果:子宫内膜癌细胞中ING4基因的表达量显著低于正常子宫内膜细胞(P<0.05),且ING4在Ishikawa和HHUA这两种子宫内膜癌细胞系之间的表达量没有显著性差异(P>0.05)。Western-blot结果显示,正常子宫内膜细胞的ING4蛋白表达量显著高于Ishikawa和HHUA这两种细胞系(P<0.05),HHUA细胞系的ING4蛋白表达量显著高于Ishikawa细胞系(P<0.05)。免疫组化结果显示,ING4在不同组织内的表达量差异有统计学意义(P<0.05),正常子宫内膜细胞内的表达量最高,其次是复杂性及不典型增生子宫内膜,子宫内膜癌内的ING4表达量最低。结论:ING4基因表达的下调与子宫内膜癌发生、发展可能有一定关系,对子宫内膜癌的诊断有一定的参考意义。

乐安油田草4块沙四段储层沉积特征与非均质性研究

储层沉积特征和非均质性已成为制约边际稠油油藏开发生产的瓶颈。利用地震、钻井、测井、岩心资料,对乐安油田草4块沙四段储层的沉积特征与非均质性及其对稠油开发的影响进行了研究。结果表明,研究区草4块沙四段发育两个三级层序,其岩石矿物学特征不同,沉积特征明显不同,含油性也不同;沙四上亚段为滨浅湖滩坝相沉积,而沙四下亚段为近岸水下扇沉积,其控制着95%的储量。储层渗透率变异系数为0.61～1.43,突进系数为2.21～5.41,渗透率级差大,层内、层间非均质性强,平面上非均质性相对较弱。综合评价出了有利的开发层段,其中沙四段4砂层组的3,4小层为有利开发层段,油层分布稳定,连通性好,可采用小井距强化注水面积井网或蒸汽吞吐热采开发,并采取适当的防砂措施。