MEN1基因在前列腺癌中生物学功能的研究进展

近二十年来,我国前列腺癌的发病率逐年攀升,已经成为泌尿外科三大恶性肿瘤中最常见的一种。当下我国前列腺癌患者中,初诊即晚期的比例相比于欧美日等发达国家仍然较高,且有超过70%的晚期前列腺癌病患发生转移,若出现远处转移,其患者生存率仅为30%。因此,进一步寻找新的诊疗分子靶点就具有更加重要的现实意义和理论价值。研究证实多发性内分泌肿瘤1型(MEN1)基因编码的menin蛋白参与前列腺癌的发生发展,同时menin是前列腺治疗潜在的新靶点。该文将对MEN1基因结构及menin在前列腺癌中的生物学功能进行概述,重点探讨menin调控前列腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的分子机理。以期为MEN1基因及menin蛋白在前列腺癌中的深入研究提供参考。

MEN1基因阴性的多发性内分泌腺瘤1型合并2型糖尿病1例病例报道

多发性内分泌腺瘤病(MEN)是一组遗传性多种内分泌器官发生肿瘤综合征的总称,是指一个人同时或先后出现两个或两个以上的内分泌腺增生或肿瘤病变,可合并功能亢进[1]。多发性内分泌腺瘤1型(MEN1)是多发性内分泌腺瘤病的一种类型,是一种罕见的常染色体显性遗传综合征,又称为Weber综合征,以甲状旁腺肿瘤、胃肠胰腺神经内分泌肿瘤和垂体前叶肿瘤为特征[2]。MEN1也可累及肾上腺皮质和其他组织(如甲状腺、支气管、胸腺、脂肪等)[3]。MEN1临床上比较罕见,尤其是症状、体征不典型者,更容易漏诊、误诊。本科近期收治MEN1阴性的多发性内分泌腺瘤1型合并2型糖尿病1例,现报告如下,以提高临床医师对本病的认识。

纳豆芽孢杆菌men基因过表达菌株的构建及提高溶氧强化MK-7合成

近年来,维生素K2更多的生理功能被发现,除了促进凝血之外,还能预防骨质疏松症和心血管疾病,有望治疗肿瘤和帕金森症.纳豆芽孢杆菌是被美国食品药品管理局认证的一种益生菌,可以用来生物制备维生素K2,其主要的产物形式为人体内半衰期较长、生物利用度较高的MK-7,在规模化生物制备维生素K2中的应用潜力较大.本研究优化枯草芽孢杆菌的Sipizizen转化法,使其适用于纳豆芽孢杆菌的分子转化;构建甲萘醌合成途径所涉及的全部8个men基因的过表达载体,并考察其转化纳豆芽孢杆菌之后发酵MK-7的性能变化;筛选出对MK-7合成影响较大的3个酶,分别为异戊烯基转移酶(MenA)、1,4-二羟基-2-萘甲酰辅酶A合酶(MenB)和去甲基萘醌甲基转移酶(MenG).通过对menA、menB和menG组合过表达筛选出一株MK-7产率较高的改造菌株(BN-pABG).在5L发酵罐中,通过供氧调控进一步优化其合成MK-7的生理过程,改造菌株的终产量为62.21 mg/L,较出发菌提高了1.26倍.这些结果表明menA、menB和menG组合过表达后对纳豆芽孢杆菌合成MK-7具有较强的促进作用,同时供氧条件的优化也对MK-7的合成有提升效果.(图6表6参21)

MEN1基因与胃肠道胰腺神经内分泌肿瘤

MEN1基因为多发性内分泌腺肿瘤(MEN1)的易感基因,在调节基因的转录、维持基因的稳定、调控细胞的分裂和增殖方面起重要作用,而MEN1基因失活可能与胃肠道胰腺神经内分泌肿瘤(GEP-NET)发生机制有关。

多发性内分泌腺瘤综合征家系MEN1基因突变及功能分析

目的对一例多发性内分泌腺瘤综合征(multiple endocrine neoplasia type 1,MEN1)家系进行基因突变检测及功能分析,以探讨MEN1发病的分子机制。方法对家系两名确诊患者及其他6名成员进行相关生化检查,留取外周血液标本,提取基因组DNA,采用PCR方法扩增MEN1基因所有编码序列,包括9个外显子及外显子/内含子边界,并进行直接测序。免疫组织化学法对2名患者肿瘤组织menin蛋白进行检测。结果 2名患者MEN1基因第三外显子存在插入突变c.433_434ins CTTC,可导致开放阅读框移位并提前出现终止密码子。家系其他成员未发现MEN1基因突变。患者肿瘤组织中无menin蛋白表达。结论一种新型的MEN1基因突变形式被定位,这将有利于MEN1疾病的早期分子诊断。

新的MEN1基因剪切突变导致多发性内分泌腺瘤病Ⅰ型的家系研究

目的对1例多发性内分泌腺瘤病Ⅰ型(MEN1)患者进行基因诊断和家系成员的随访。方法收集MEN1患者的临床及家系资料,抽取先证者及5位家系成员外周血提取DNA,对MEN1基因的10个外显子进行PCR扩增,用全自动测序仪进行测序分析。结果(1)经MEN1基因突变检测证实,先证者存在内含子5剪切位点的突变(IVS7+2T→G)。(2)先证者无临床表现的儿子也携带此突变,在基因诊断7个月后出现了明显的临床表现,术后病理证实为胰岛β细胞瘤和左肾上腺腺瘤。结论临床医师应常规对所有MEN1患者及其家系高危成员尽早进行基因突变分析和筛查,并严格随访,从而改善疾病的预后。

MEN1基因与肺神经内分泌肿瘤

MEN1基因为近年发现的多内分泌肿瘤综合征1型(multiple endocrine neoplasia type 1 syndrome,MEN1)的易感基因。肺神经内分泌肿瘤约占肺癌的1/3,包括典型类癌、非典型类癌、小细胞未分化肺癌及大细胞神经内分泌癌。本文综述了MEN1基因的结构、功能、失活机制的研究进展及与其肺神经内分泌肿瘤发生、发展的关系,分析了MEN1基因研究中存在的问题。

肾上腺皮质肿瘤与MEN1基因的相关性研究

目的从分子水平上揭示散发性肾上腺皮质肿瘤的发病与MEN1基因突变的相互关系,为今后开展症状前诊断和产前基因诊断创造前提条件。方法在对先证者进行临床诊断的基础上,用微量快提法制备模板DNA,用自行设计的9对引物对先证者MEN1基因的所有编码区以及外显子与内含子的交界部位进行PCR扩增和DNA序列分析。结果先证者MEN1基因第4内含子存在隐蔽性拼接位点IVS4 as(-9)G>A的杂合突变,而正常对照无此突变。结论所用检测方法快速简便、微量经济,可用于肾上腺皮质肿瘤的快速确诊。所发现的MEN1基因的IVS4 as(-9)G>A隐蔽性拼接位点突变为国内首报的病理性突变。

MEN1基因阴性的多发性内分泌腺瘤病1型1例

多发性内分泌腺瘤病1型(multiple endocrine neoplasia type 1,MEN1)为一种常染色体显性遗传的内分泌肿瘤综合征。常见临床表现为甲状旁腺功能亢进、胃肠胰神经内分泌肿瘤及垂体前叶肿瘤,同时大部分患者存在MEN1基因突变。近年来随着基因检测的普及,MEN1基因检测在MEN1的诊断中起到重要作用。然而临床上逐渐发现临床症状典型、MEN1基因阴性的患者,这为该病的诊断带来了挑战。本文总结1例临床表现为甲状旁腺功能亢进、胰腺神经内分泌肿瘤、垂体无功能微腺瘤、未发现MEN1基因突变患者的临床资料、治疗及随访情况,综合分析临床资料和基因检测对MEN1诊断和早期治疗的重要意义。

Men1通过调控FTO/ALKBH5表达和减少m6A甲基化而抑制小鼠肾纤维化

目的:探讨Men1基因在小鼠肾纤维化中的调控作用及分子机制。方法:使用C57BL/6小鼠建立单侧输尿管结扎(UUO)诱导的小鼠肾纤维化模型,随机分为sham组、UUO-3 d组、UUO-7 d组和UUO-14 d组,每组15只;构建条件性Men1敲除的小鼠模型,将Men1敲除的C57BL/6小鼠随机分为sham-Men1-WT、sham-Men1-CKO、UUO-Men1-WT和UUO-Men1-CKO组,每组8只。采用HE染色、Masson染色和天狼星红染色检测UUO诱导肾损伤及肾纤维化分析。构建MEN1敲除的人肾小管上皮HK-2细胞。通过RT-qPCR、Western blot、免疫组化染色和免疫荧光染色检测UUO小鼠肾组织和体外转化生长因子β(TGF-β;10μg/L)处理的HK-2细胞中MEN1、纤维化标志物(α-平滑肌肌动蛋白、Ⅲ型胶原和纤连蛋白1)、m^(6)A相关蛋白[甲基转移酶样蛋白3(METTL3)、METTL14、YTH结构域家族蛋白2(YTHDF2)、AlkB同源蛋白5(ALKBH5)和脂肪质量及肥胖相关蛋白(FTO)]的mRNA和蛋白表达;斑点印迹(dot blot)实验检测小鼠肾组织和HK-2细胞中m^(6)A甲基化水平。结果:Men1的表达随着肾纤维化加剧逐渐降低(P<0.01);Men1抑制肾组织中纤维化标志物的表达,Men1敲除增加UUO和TGF-β诱导的纤维化胶原的累积(P<0.01);Men1敲除小鼠肾组织和HK-2细胞中FTO和ALKBH5的表达下调(P<0.01),m^(6)A甲基化修饰水平升高(P<0.01);过表达FTO显著降低Men1缺失引起的m^(6)A修饰累积和肾纤维化(P<0.01)。结论:Men1基因缺失促进小鼠肾纤维化;Men1通过调控FTO/ALKBH5的表达降低m^(6)A修饰,从而抑制小鼠肾纤维化。

MEN1基因对果蝇运动能力的影响

MEN1基因突变会引起多发性内分泌肿瘤Ⅰ型综合征,该基因为肿瘤抑制基因,编码Menin蛋白。Menin表达异常可引起多种多发性内分泌疾病,Menin基因缺陷的性质多样化,并覆盖整个基因。基因缺陷常产生一截短并失去功能的Menin。

MEN1缺失通过诱导DNA损伤累积抑制乳腺癌细胞的恶性表型

目的:探讨多发性内分泌肿瘤1型综合征(multiple endocrine neoplasia type 1,MEN1)编码基因MEN1在乳腺癌细胞恶性表型调控中的作用及分子机制。方法:TCGA数据库分析乳腺癌组织(n=1097)和正常乳腺组织(n=114)中MEN1基因的mRNA表达水平;收集临床乳腺癌组织标本(n=13)和癌旁组织(n=4),采用RT-qPCR和免疫组化法检测其中MEN1基因的mRNA水平和menin蛋白的表达;CRISPR/Cas9技术构建MEN1基因敲除的MDA-MB-231(MDA-MB-231/KO)细胞,细胞经menin-MLL抑制剂MI-3单独或联合甲基硝基亚硝基胍(N-meth⁃yl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine,MNNG)、阿霉素(doxorubicin,DOX)、紫杉醇(paclitaxel,TAX)、他莫昔芬(tamoxifen,TAM)作用后运用CCK-8、克隆形成实验、EdU染色及流式细胞术分别检测细胞增殖和细胞凋亡,免疫荧光染色法检测细胞γH2AX和53BP1的表达,Western blot法检测细胞γH2AX、RAD51、BRCA1、53BP1、KU70和KU80的蛋白表达。结果:TCGA数据库分析结果显示,与正常乳腺组织比较,MEN1基因在乳腺癌组织中的表达量显著增高(P<0.05);免疫组化和RT-qPCR结果显示,与癌旁组织比较,menin的蛋白水平和MEN1的mRNA水平显著升高(P<0.05);MEN1基因敲除或MI-3作用显著抑制乳腺癌细胞的增殖,诱导细胞凋亡,增强乳腺癌细胞对MNNG的敏感性(P<0.05);免疫荧光结果显示,MEN1基因敲除显著增强MDA-MB-231细胞核中γH2AX的染色强度而降低53BP1的染色强度(P<0.05);Western blot结果显示,MEN1基因敲除显著抑制MDA-MB-231细胞中RAD51、BRCA1及53BP1的蛋白表达,而促进KU70和KU80蛋白的表达(P<0.05)。结论:MEN1基因是乳腺癌诱导因子,MEN1缺失可抑制同源重组修复而代偿性激活非同源末端连接,引起乳腺癌细胞中DNA损伤累积,增强乳腺癌细胞对DNA损伤诱导剂的敏感性。

MEN1/menin协同细胞内信号通路参与机体代谢调控

MEN1基因是其表现病征——多发性内分泌肿瘤Ⅰ型综合征的关键致病基因之一。该基因编码的蛋白menin不仅可以与大量关键转录因子相互作用,通过表观遗传方式调控其靶基因的转录和细胞表型,也可与大量的细胞内信号通路因子相互作用,广泛参与机体正常发育和代谢的平衡稳态调节,同时,我们的研究证明该基因的表达对于奶牛乳腺上皮细胞的生长也具有很重要的调控功能。本文综述了MEN1/menin协同不同信号通路参与机体代谢调节机制的新进展,这些新的发现将有助于我们全面了解MEN1/menin在各物种机体代谢中的调节作用;同时基于各物种间MEN1/menin的高度保守性,也将为该基因在家畜领域的研究提供必要的信息储备、新的研究思路和切入点。

多发性内分泌肿瘤Ⅰ型肿瘤抑制蛋白Menin在乳腺肿瘤中的检测

Menin是多发性内分泌肿瘤Ⅰ型的肿瘤抑制基因MEN1基因编码的一个由610个氨基酸组成的蛋白质。MEN1基因的正常表达具有广泛的抑制肿瘤发生的作用。本研究采用免疫组织化学方法，从常见的激素依赖肿瘤乳腺肿瘤入手，了解Menin在乳腺肿瘤中是否表达及其在不同病理类型中的表达是否存在差异，从MEM基因表达产物的角度，初步探讨MEN1基因表达在乳腺肿瘤发病机制中的作用。

多发性内分泌腺瘤1型的妊娠期管理:家系临床和基因分析并文献回顾

目的探讨多发性内分泌腺瘤1型(MEN1)的妊娠期临床特点和管理策略。方法收集1例MEN1先证者的性别、年龄、详细病史、临床症状、体征、实验室检查、影像学检查和病理学检查数据,并收集该MEN1家系中20名成员的人口学特征、临床特征和辅助检查。为回顾MEN1妊娠期病例,以“Multiple Endocrine Neoplasia Type 1”和“Pregnant”为关键词在PubMed搜索,以“多发性内分泌腺瘤病”和“妊娠”在万方数据知识服务平台搜索。结果本例MEN1先证者以垂体微腺瘤(溢乳、催乳素升高)、胰腺内分泌肿瘤(低血糖)及甲状旁腺腺瘤(无症状、甲状旁腺素和血钙升高)为主要临床表现。基因分析证实MEN1基因9号外显子(CGA>TGA,Arg415Term)突变为先证者致病基因。先证者的父亲和女儿携带该致病基因并有甲状旁腺功能亢进。先证者在药物治疗垂体微腺瘤和手术治疗胰腺内分泌肿瘤、甲状旁腺腺瘤后顺利妊娠并成功分娩1名女婴,其间无再次出现溢乳和低血糖发作,血PTH和血钙水平稳定,胎儿生长发育正常。共检索到相关英文病例报道7例,中文病例1例。总结既往文献报道的8例MEN1妊娠期病例,所有MEN1患者均于育龄期起病。甲状旁腺、胰腺和垂体是最常出现临床症状的内分泌腺体,多数患者存在家族史和相应的MEN1基因突变,其中7例患者在严密病情监测和治疗下成功分娩。结论临床医师对妊娠期MEN1患者的积极检测和诊疗,将有助于改善MEN1患者及其子代的预后。

MEN1基因突变和menin蛋白在乳腺癌中的作用

乳腺癌已成为全球女性患者最大的癌症负担。在中国,近10%的女性乳腺癌患者发病与遗传相关,受多个易感基因调控。乳腺癌患者存在多发性内分泌肿瘤1型(multiple endocrine neoplasia type 1,MEN1)基因显著突变,MEN1突变女性患乳腺癌风险显著增加,发病年龄提前。关于MEN1影响乳腺癌发病与进展的系统研究仍然有限。因此,本文将基于MEN1基因和MEN1编码的menin蛋白的结构、功能作一概述,以探讨MEN1与menin在乳腺癌发生发展及内分泌治疗中的作用机制,并介绍了基于menin的乳腺癌潜在治疗靶点,旨在为乳腺癌的早期筛查及个体化防治提供理论支持和科学指导。

以合并纵隔肿瘤为主的多发性内分泌腺瘤病1型:病例报道与文献回顾

多发性内分泌腺瘤病是一组以多个不同的内分泌腺在同一个体先后或同时发生、以功能亢进为主要表现的常染色体显性遗传性疾病,分为多发性内分泌腺瘤病1型(MEN1)和多发性内分泌腺瘤病2型(MEN2),其中MEN1发生的重要原因是MEN1基因突变,导致肿瘤细胞11号染色体不同程度的杂合缺失,menin蛋白消失,临床主要表现为甲状旁腺腺瘤、胃肠胰腺内分泌肿瘤和垂体前叶瘤。MEN2又分为MEN2A和MEN2B,主要原因与原癌基因RET突变有关,临床表现为甲状腺髓样癌、嗜铬细胞瘤、甲状旁腺增生和黏膜神经纤维瘤。

MEN1基因突变所致多内分泌腺瘤病1型二例及其家系研究

目的探讨多内分泌腺瘤病1型的发病与MEN1基因突变的相互关系及其遗传特征。方法从2个家系中的患者及其家庭成员抽提外周血淋巴细胞基因组DNA,运用PCR、DNA测序分析技术检测MEN1基因所有10个外显子,进一步用亚克隆测序鉴定其杂合性。结果发现两个家系中的先证者MEN1基因均在第二号外显子存在杂合突变,分别为372-373insACCTGTCTATCATCGCCG和357-360delCTGT,前一种突变为一种新的突变类型。结论在2个多内分泌腺瘤病1型中国人家系检出2种MEN1基因突变,其中MEN1基因372-373ins ACCTGTCTATCATCGCCG为一种新的MEN1基因突变。

一个多发性内分泌腺瘤病1型家系MEN1基因突变的研究

目的检测一个多发性内分泌腺瘤病1型家系的MEN1基因突变情况。方法提取12名家系成员外周血基因组DNA，对MEN1基因所有10个外显子进行聚合酶链反应及产物直接测序，亚克隆测序鉴定其杂合性。结果家系中1例病理确诊甲状旁腺增生的患者存在MEN1基因第10外显子突变1649—1650insC，导致密码子514发生移码突变，另外筛盒出2名家系成员也为该突变携带者，临床检测符合MEN1诊断标准。结论存多发性内分泌腺瘤病1型中国人家系中检测出MEN1基因杂合突变1649—1650insC，该突变在中国人尚未见报道，同时，对家系成员进行基因筛查可以早期诊断该疾病。