Circular dichroism of tail-to-tail bisbenzylisoquinoline and the absolute configuration of daurisoline isolated from Menispermum dauricum

Since two asymmetric centres are usually present in the bisbenzylisoquinolines,the circular dichroism is known to be an important method to elucidate their stereochemistry.We studied the relationships of the CD spectra with the stereochemistry of synthetic RR-(1),SS-(2),RS-daurisoline(3) and SR-daurisoline(4).By comparision of the CD spectrum of natural daurisoline(1)from Menis- permum dauricum(Menispermaceae)with those of synthetic enantiomers,the absolute configuration was established as RR-daurisoline(1).

北豆根化学成分及其抗炎活性研究

北豆根,防己科蝙蝠葛(Menispermum dauricum)的干燥根茎,是重要的中药材。为阐明北豆根的药效物质基础,该研究利用硅胶柱层析、大孔吸附树脂及高压制备HPLC等色谱技术对北豆根化学成分进行系统分离,采用NMR等波谱技术对化合物进行结构鉴定,并通过测定化合物对脂多糖(LPS)诱导的巨噬细胞RAW264.7释放NO和IL-6炎症因子的含量评价其抗炎活性。结果表明:(1)从北豆根甲醇提取物中分离鉴定了15个化合物,分别鉴定为对羟基苯甲醛(1)、香草酸(2)、丁香醛(3)、2-羟基-1-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-1-丙酮(4)、对羟基苯乙酸甲酯(5)、2-(4-羟苯基)-硝基乙烷(6)、对羟基苯乙腈(7)、邻苯二甲酸二丁酯(8)、fragransin B 2(9)、7-hydroxy-3,6-dimethoxy-1,4-phenanthraquinone(10)、棕榈酸(11)、花生酸(12)、β-谷甾醇(13)、β-豆甾醇(14)、胡萝卜苷(15)。其中,化合物4-7、9、12为首次从防己科植物中分离得到,化合物1、3-11、14为首次从蝙蝠葛属植物中分离得到。上述化合物包括苯酚类、木脂素类、菲醌类、脂肪酸类及甾醇类。(2)化合物12在25、50μg·mL^(-1)浓度下可以显著抑制LPS诱导的RAW264.7细胞NO和IL-6的释放,具有潜在的抗炎作用。该研究结果丰富了北豆根的化学多样性,明确了其抗炎活性的活性成分,为药用植物资源的合理利用提供了有效参考。

蝙蝠葛根茎的化学成分研究

目的:研究蝙蝠葛Menispermum dauricum DC.根茎中的化学成分及其生物活性。方法:运用各种正、反相色谱技术对蝙蝠葛根茎的醇提物进行分离纯化,通过各种波谱学手段鉴定化合物结构,并对其进行细胞毒活性测试和抗炎活性评价。结果:从蝙蝠葛根茎95%乙醇提取物中分离得到10个生物碱,分别鉴定为:6-acetyl-5,6-dihydro-1,2-dimethoxy-4H-dibenzo[de,g]-quinoline(1)、sinotumine G(2)、齐兰西夫林碱(3)、amurolin(4)、木兰花碱(5)、N-demethyl-N-formyldehydronuciferine(6)、thalifoline(7)、O-甲基黄堇碱(8)、pecrassipine B(9)、O-甲基蝙蝠葛碱(10)。活性筛选结果表明,化合物1、4、7有一定活性。结论:化合物1为新天然产物,化合物2、3为首次从该属植物中分离得到。化合物4对MCF-7细胞、SMMC-7721细胞有抑制作用,化合物7对5种人癌细胞有抑制作用。化合物1一定程度上可抑制LPS诱导RAW264.7巨噬细胞释放NO,具有一定的抗炎作用。

RP-HPLC法对不同产地蝙蝠葛几种主要生物碱的测定

目的：研究不同产地蝙蝠葛几种主要生物碱在质与量上的区别。方法：采用有机溶剂提取生药，应用ＲＰ－ＨＰＬＣ方法对东北产和咸宁产蝙蝠葛根茎中几种主要脂溶性生物碱进行定性定量测定。结果：东北生药中含量最高的生物碱前３位依次是蝙蝠葛苏林碱、蝙蝠葛碱和ｇｕａｔｅｇａｕｍｅｒｉｎｅ；而咸宁药材则为蝙蝠葛碱、蝙蝠葛诺林碱及蝙蝠葛新诺林碱，不含蝙蝠葛苏林碱。结论：不同产地蝙蝠葛药材所含生物碱在质和量两方面均有显著差异。

蝙蝠葛酚性碱对大鼠局灶性脑缺血-再灌注继发炎性损伤的保护作用

目的 研究蝙蝠葛酚性碱对大鼠局灶性脑缺血 再灌注继发炎性损伤的保护作用及其机制。方法 用线栓法制作大鼠右侧大脑中动脉栓塞模型 ,缺血 2h后 ,将线抽出实行再灌注 ,观察蝙蝠葛酚性碱对粘附分子 (ICAM 1)表达、白细胞的粘附与浸润、髓过氧化物酶 (MPO)活性和一氧化氮 (NO)含量的影响。结果 蝙蝠葛酚性碱可明显抑制ICAM 1的表达 ,减轻白细胞的粘附与浸润 ,降低缺血侧大脑皮层和海马组织中的MPO活性和NO含量。结论 蝙蝠葛酚性碱对大鼠局灶性脑缺血 再灌注后的炎性损伤有明显保护作用 ,其机制可能与抑制ICAM 1表达 ,减轻白细胞的粘附与浸润 。

蝙蝠葛酚性碱的抗心律失常作用

用哇巴因致豚鼠心律失常、乌头碱致大鼠心律失常、电刺激致兔室颤、大鼠冠脉结扎致复灌性心律失常模型证实蝙蝠葛酚性碱具剂量依赖性的抗室性心律失常作用；用氟化钙一乙酰胆碱致小鼠房颤模型，结果提示蝙蝠葛酚性碱具有抗房性心律失常作用。离体试验显示蝙蝠葛酚性碱具有浓度依赖性延长豚鼠心室乳头肌ＡＰＤ＿（５０）、ＡＰＤ＿（９０）和ＥＲＰ以及降低ＡＰＡ、减馒Ｖ＿（ｍａｘ）的作用。

蝙蝠葛中异喹啉酮的分离与鉴定

目的 为阐明防己科植物蝙蝠葛的有效成分 ,对其根茎进行了化学成分研究。方法 运用层析手段和波谱方法分离并鉴定了 5个异喹啉酮化合物。结果 它们的结构分别为 :northalifoline(Ⅰ ) ,thalifoline(Ⅱ ) ,corydaldine(Ⅲ ) ,N methylcorydaldine(Ⅳ ) ,doryphornine(Ⅴ )。结论 5个化合物均为从蝙蝠葛中首次分离得到。

蝙蝠葛酚性碱对人肿瘤细胞PC-3、BT5637增殖的影响

目的观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)体外抗肿瘤作用。方法采用MTT比色法测定不同浓度的蝙蝠葛酚性碱对体外处理PC-3(前列腺癌)和BT5637(膀胱癌)细胞株24h的存活率。同时测定药物处理不同细胞株的细胞增殖抑制率和IC50及IC90。实验设立阴性空白对照组和氟尿嘧啶阳性对照组。结果不同浓度蝙蝠葛酚性碱对PC-3和BT5637细胞株的细胞增殖具有抑制作用,抑制作用呈浓度依赖关系,与空白对照组比较具有统计学意义。结论蝙蝠葛酚性碱对体外培养人肿瘤细胞株的增殖有明显的抑制和杀伤作用,显示其具有细胞毒效应。

蝙蝠葛酚性碱对小鼠脑缺血-再灌注脑组织Bax和Bcl-2蛋白表达的影响

目的 研究蝙蝠葛酚性碱对小鼠脑缺血 -再灌注后脑组织凋亡相关蛋白表达的影响。方法 采用免疫组织化学方法观察凋亡促进蛋白 Bax、凋亡抑制蛋白 Bcl- 2的表达。结果 皮质于缺血复灌 12 h、海马 CA1 区于缺血复灌 2 4 h Bax表达明显增多 ,Bcl- 2表达明显减少 ,蝙蝠葛酚性碱预防给药能抑制脑组织 Bax的表达 ,并促进 Bcl- 2表达 ,减少脑细胞凋亡。结论 蝙蝠葛酚性碱能抑制缺血 -再灌后脑组织损伤 ,使凋亡细胞减少 。

毛细管电泳高频电导法测定北豆根药材中粉防己碱和青藤碱的含量

目的:建立用毛细管电泳高频电导法测定北豆根中生物碱含量的方法,并比较不同提取方法中各组分含量差异。方法:以融硅毛细管(150μm×60 cm)为分离柱,1 mmol·L^(-1)HAc+2 mmol·L^(-1)NH_4Ac+10 mmol·L^(-1)β-CD+2mmol·L^(-1)SDS 缓冲液为电泳介质,分离电压14.0 kV,用高频电导检测法测定了北豆根药材中粉防己碱和青藤碱的含量。结果:粉防己碱和青藤碱的线性范围分别为12.5～900μg·mL^(-1)和25.0～1.00×10~3μg·mL^(-1),平均回收率分别为96.1%和95.6%。结论:本法可用于北豆根药材中有效成分的定量分离和检测。

蝙蝠葛酚性碱抗突变作用的研究

目的应用昆明小鼠股骨骨髓嗜多染红细胞微核实验,研究蝙蝠葛酚性碱（phenolic alkaloids from menispermum dauricum,PAMD）的致突变作用和抗突变作用.方法均在10～40 mg/kg剂量下,连续腹腔注射给药11d,在致突变实验,末次给药6 h后处死小鼠,检测骨髓嗜多染红细胞微核率.在抗突变实验,小鼠在于处死前的24 h,腹腔注射40 mg/kg环磷酰胺（cyclophosphamide,CP）或2 mg/kg丝裂霉素C（mitomycinc,MC）,末次给药6 h后取样.结果蝙蝠葛酚性碱与对照组相比未诱发骨髓嗜多染红细胞微核率的增高（微核细胞率＜3‰）.蝙蝠葛酚性碱可使环磷酰胺和丝裂霉素C诱发的骨髓细胞微核率增高数值出现明显的降低.PAMD＋CP组微核细胞抑制率分别为61.83%、43.51%和22.52%.PAMD＋MC组微核细胞抑制率分别为31.09%、21.50%和8.29%.结论蝙蝠葛酚性碱具有一定的抗突变作用,而无致突变作用.

北豆根根茎中双苄基异喹啉类生物碱成分研究

目的:研究北豆根根茎中双苄基异喹啉类生物碱成分。方法:利用硅胶柱色谱、高效液相色谱等色谱技术分离得到单体化合物,利用NMR鉴定化合物结构。结果:从北豆根根茎中分离得到7个双苄基异喹啉类生物碱,经波谱分析分别鉴定为新四川轮环藤因(1),华东唐松草碱(2),盾叶轮环藤碱(3),高芳香花桂林碱(4),四川轮环藤宁碱(5),四川轮环藤因(6)和裂环异粉防己碱(7)。化合物1~3和5具有较好的抑制人肝癌细胞(Hep G-2)增殖的活性,IC50值分别为0.58、0.73、0.90、1.66μmol·L^(-1)。结论:化合物1~7为从该植物中首次分离得到。

蝙蝠葛酚性碱对犬冠状动脉结扎形成心肌梗死的保护作用

目的 :研究蝙蝠葛酚性碱 (PAMD)对急性心肌梗死的保护作用。方法 :用麻醉犬冠状动脉结扎造成心肌梗死模型 ,设立PAMD 3 5和 7mg·kg-1两剂量组 ,地奥心血康 (DAXXK) 4 0mg·kg-1阳性对照组 ,伪手术组及模型对照组。观察各组心电图ST段 ,血清LDK和CK ,以及心肌梗死范围的变化。结果 :PAMD 7 0mg·kg-1组30min时 ,在对抗ST段上移及降低LDH活性上优于DAXXK 4 0mg·kg-1组 (P <0 0 1) ,降低CK活性的作用与DAXXK相当 (P >0 0 5 ) ;7 0mg·kg-1PAMD组降低梗死范围与DAXXK 4 0mg·kg-1组作用无显著差异 (P >0 0 5 )。结论 :PAMD对结扎犬冠脉造成急性心肌梗死有保护作用。

蝙蝠葛酚性碱对血栓形成和血小板聚集的影响

目的观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)对血栓形成、血小板聚集的影响并研究其作用机制。方法用动静脉短路血栓形成模型观察血栓形成;比浊法测定血小板聚集度;电镜技术观察血小板超微结构变化;放射免疫法测定TXB2和6-酮基-PGF1α的水平;硝酸还原酶法测定兔血浆NO浓度。结果PAMD体内给药可剂量依赖性地抑制血栓形成及由ADP,AA和THR诱导的大鼠和兔的血小板的聚集;可显著抑制血小板超微结构的变化;能明显升高兔血管壁6-酮基-PGF1α产生量,对血小板释放的TXB2无明显影响;还可提高兔血浆NO的浓度。结论PAMD具抗血栓形成和抗血小板聚集的作用,其机制与增加血管壁PG I2含量,提高兔血浆NO的浓度有关。

蝙蝠葛酚性碱对BxPC-3荷瘤小鼠细胞凋亡基因p53表达的影响

目的:观察蝙蝠葛酚性碱(PAMD)的抗肿瘤作用并进一步探讨其作用机制。方法:通过实时定量PCR(Real-time PCR)技术观察PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3皮下异位移植瘤细胞凋亡相关基因p53mRNA表达的影响,以此探讨PAMD抗肿瘤作用机理。结果:PAMD能够显著降低胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤组织中p53 mRNA表达量。结论:PAMD对胰腺癌细胞株BxPC-3裸鼠皮下异位移植瘤表现出明显抑制作用,能够有效的抑制肿瘤生长,其机理可能与凋亡相关基因表达有关。

蝙蝠葛酚性碱抗神经元缺血再灌注损伤的作用机制

目的探讨蝙蝠葛酚性碱(PAMd)抗神经元细胞缺血再灌注损伤的作用机制。方法体外培养小鼠神经母细胞瘤细胞株N2a,缺糖、缺氧和缺血清(OGSD)培养90 min,更换正常培养液并加入不同浓度的PAMd,继续培养不同时间后,收集细胞培养液,测定乳酸脱氢酶(LDH)活性和神经递质含量;收集细胞,测定以下指标:①MTT法检测细胞生存活力;②荧光光度法分析胞质活性氧(ROS)含量;③激光共聚焦分析线粒体跨膜电位;④Western blot检测胞质细胞色素C(Cyt C);⑤采用Caspase 3可见光底物DEVD-pNa测定Caspase 3活性。结果①PAMd促进OGSD处理后的N2a细胞存活;②PAMd抑制OGSD处理后的N2a细胞释放兴奋性神经递质;③PAMd直接清除细胞内的ROS;④PAMd能维持线粒体跨膜电位的稳定;⑤PAMd抑制线粒体Cyt C释放和抑制胞质Caspase 3活性。结论PAMd通过阻断线粒体凋亡途径和抗氧化作用发挥神经元保护作用。

蝙蝠葛中一新双苄基异喹啉生物碱

防己科植物蝙蝠葛（ＭｅｎｉｓｐｅｒｍｕｍｄａｕｒｉｃｕｍＤＣ．）根茎中的脂溶性酚性生物碱具有抗多种实验性心律失常活性〔１〕，近年研究表明，其主成分蝙蝠葛碱（ｄａｕｒｉｃｉｎｅ，１）和蝙蝠葛苏林碱（ｄａｕｒｉｓｏｌｉｎｅ，２）延长心肌动作电位时呈使用...

北豆根根茎中生物碱类化学成分及其生物活性研究

目的:对北豆根根茎中的生物碱类化合物进行分离、结构鉴定及抗炎活性研究。方法:将药材北豆根干燥,粉碎,用HCl水溶液(pH 3.0)渗漉提取。提取液调节pH至7.0,减压回收得干浸膏,过碱性硅胶柱色谱、ODS柱色谱富集得到生物碱部位。以甲醇-水为流动相,用高效液相色谱对生物碱部位进行分离纯化。对得到的单体化合物,运用NMR、ESIMS等多种谱学技术进行结构鉴定。结果:从北豆根根茎中分离鉴定了10个生物碱化合物,分别为阿普菲类生物碱lakshminine(1),telazoline(2),daurioxoisoporphine A(3),daurioxoisoporphine B(4),吗啡烷类生物碱scrodentoside A(5),双苄基异喹啉类生物碱(-)-1,3,4-dehydrocepharanthine(6),(+)-1,3,4-dehydrocepharanthine-2'β-N-oxide(7),cissampentine A(8),cissampentine B(9)和(-)-pseudocurine(10)。体外抗炎活性研究表明,化合物6,8,9和10具有抑制大鼠巨噬细胞一氧化氮生成的作用,IC50分别为6.0、12.0、8.5、9.7μmol·L-1。结论:生物碱化合物1~10均首次从该植物中获得。

蝙蝠葛酚性碱对犬血流动力学及冠脉循环的影响

目的 研究蝙蝠葛酚性碱 (PAMD)对正常麻醉犬血流动力学、冠脉循环及心肌氧代谢的影响。方法 设立生理盐水阴性对照组及PAMD 3 5和 7 0mg·kg- 1 两剂量组 ,在不同时间点观察各组犬血流动力学、冠脉循环及心肌氧代谢的相关指标的改变。结果 与药前相比 ,PAMD两剂量组均可降低左心室收缩压 (LVSP)和±dp dtmax,减慢心率 ,增加心肌氧含量、降低心肌氧利用率 ,且具有增加冠状动脉血流量 ,降低冠状动脉阻力和外周阻力的作用。对血压、心输出量和左室舒张末压 (LVEDP)无显著影响。结论 PAMD能改善血流动力学。

蝙蝠葛酚性碱对动物学习记忆能力的影响

目的:观察并比较蝙蝠葛酚性碱和吡拉西坦(脑复康)对大鼠和小鼠学习能力的影响。方法:以东莨菪碱和乙醇分别使动物发生学习记忆获得障碍和记忆再现障碍,采用迷津法和跳台法进行测试。结果:蝙蝠葛酚性碱和脑复康对东莨菪碱和乙醇所致的学习记忆障碍均有改善作用;与模型组比较,蝙蝠葛酚性碱组、脑复康组P均<0.05,蝙蝠葛酚性碱100mg/kg组比50mg/kg组效果好。结论:蝙蝠葛酚性碱对动物学习记忆障碍有改善作用。