不同输注途径移植骨髓间充质干细胞对阿霉素肾病大鼠疗效初探

目的探索骨髓间充质干细胞(BMSCs)经不同输注方式移植入阿霉素慢性肾病大鼠体内对肾损伤的影响。方法SD大鼠左侧肾切除后以2.5 mg/kg剂量给大鼠尾静脉注射阿霉素,1次/周,连续2次,慢性肾病模型成功后,将成模大鼠36只随机均分为3组:阿霉素慢性肾病对照(ADR)组、干细胞经肾动脉移植(M-A)组、干细胞经外周静脉移植(M-V)组,另选12只正常大鼠设正常对照(N)组。BMSCs经体外培养后,以2×106个/mL经肾动脉注射到M-A组大鼠体内,2×106个/mL经尾静脉注射到M-V组大鼠体内,2周后再次同样方法注射等量BMSCs。检测移植当周、移植后1周、2周大鼠血尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白、24 h尿微量蛋白,末次注射干细胞后第1周于激光聚焦显微镜下观察大鼠肾脏病理和干细胞在肾脏内分布情况。结果M-A组、M-V组和ADR组在各观察时点血尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白总量、24 h尿微量蛋白均明显高于N组(P<0.01)。移植后1、2周M-A组的24 h尿微量蛋白低于ADR组(P<0.01),且M-A组的血肌酐较ADR组和M-V组均降低(P<0.01)。移植后1周,M-A组24 h尿蛋白、24 h尿微量蛋白明显低于M-V组(P<0.01);但2周时尿蛋白和微量蛋白与M-V组的差异无统计学意义。结论BMSCs移植可以改善阿霉素慢性肾病的肾损伤情况,在BMSCs移植后一段时间,BMSCs经肾动脉移植的效果优于经外周静脉移植。

超声微泡辅助干细胞移植治疗急性心肌梗死的实验研究

目的：探讨超声微泡在自体骨髓间充质干细胞（BMMSCs）移植治疗猪急性心肌梗死（AMI）改善心功能中的作用。方法：选取14只3～4月龄小型家猪，抽取骨髓，分离、培养、标记BMMSCs，球囊封堵猪左冠状动脉前降支（LAD）建立AMI模型，分为实验组（超声微泡作用下移植干细胞，n=8）和对照组（无超声微泡作用，n=6），7d后向LAD梗死处输注自体BMMSCs移植治疗。在移植前1d和移植后6周分别行64层螺旋CT心脏扫描及组织病理学检查。结果：与对照组相比。实验组心功能改善更为明显，梗死区毛细血管数（16．37±3．20 vs 59．50±1．87，P〈0．05）、普鲁士蓝染色阳性细胞数（71．63±14．09 vs 540．67±9．48，P〈0．05）、结蛋白免疫组化染色阳性细胞数（31．88±4．16 vs 519．00±2．28，P〈0．05）均明显增加。结论：超声微泡增效自体BMMSCs移植治疗AMI，能更有效地改善心肌梗死后的心功能，促进血管新生。

血管内皮生长因子基因修饰骨髓间充质干细胞移植治疗大鼠糖尿病后肢缺血

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）基因修饰的骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）移植治疗糖尿病后肢缺血的应用价值。方法：制备大鼠Ⅱ型糖尿病后肢缺血模型。实验分为Ad—VEGF转染BM-MSCs移植组，Ad-GFP转染BM-MSCs移植组和BM-MSCs移植对照组。取上述各组BM-MSCs（细胞总数2×106个），分点注射入模型大鼠左后肢的股直肌和腓肠肌中，右后肢相同部位注射等量生理盐水作为对照。于移植后2、6、10周进行数字减影血管造影（DSA）及后肢肌肉毛细血管密度分析，并对Brdu标记各组移植细胞的体内存活进行冷冻切片免疫荧光观察。结果：各检测时间点Ad—VEGF转染BM-MSCs组大鼠双侧后肢血管显影及毛细血管密度均较BM-MSCs组、Ad-GFP转染BM-MSCs组丰富，差异有统计学意义。移植后2周，各组左后肢均见BrdU标记阳性移植细胞。结论：后肢肌肉注射移植VEGF基因修饰BM-MSCs可定植在病损组织中，并可改善大鼠糖尿病后肢缺血血供。

角膜缘损伤模型静脉移植兔骨髓间充质干细胞体内动态分布特点的初步研究

目的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,MMSCs)取材方便,可使器官、组织的修复和重建成为可能,但MMSCs在体内的分布、归巢等问题一直是研究热点和难点。文中探讨角膜缘损伤模型静脉移植兔MMSCs的体内动态分布特点。方法选用2.5 kg,月龄2个月的新西兰大白兔60只,入笼养至7 d。随机分为2组,每组30只,正常兔作为对照组,角膜缘碱烧伤兔(制备右眼)作为实验组。分别进行静脉移植MMSCs,观察动物进食、休息状态、行为、排便,是否有腹泻、毛色变化、脱毛等;观察眼部是否有睑球粘连、感染。分别于细胞移植后第3、21、60天耳缘静脉抽取2ml外周血后,空气栓塞处死兔(每组每次处死6只),将眼、肺、心、肝、脾、肾、肌肉和脑组织作冰冻切片,片厚4μm。结果对照组移植术后不同天数MMSCs细胞数目比较的差异无统计学意义(P>0.05);实验组移植术后第3天,外周血中的MMSCs数量较高(2.98±0.11)个,与第21、60天比较,差异有统计学意义(P<0.05),且移植MMSCs的起始数量与外周血中第3天的流式细胞学检测结果呈正相关(r=0.567,P<0.05)。2组间移植术后第3、21、60天细胞数目比较的差异均有统计学意义(P<0.05)。激光共聚焦显像镜下可观察到外源性MMSCs迁移至角膜。对照组在角膜、虹膜、视网膜、脉络膜、虹膜可偶见MMSCs分布。实验组MMSCs数量由多至少依次为角膜缘、角膜中央、结膜、视网膜、脉络膜、虹膜;且MMSCs在角膜缘的分布有"聚集现象";MMSCs经静脉移植后,心、肝、脾肺、肾、肌肉、脑均可见到分布。移植术后不同时间,肺MMSCs数量变化差异有统计学意义(P<0.05),而脾组织中MMSCs数量变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论在角膜损伤修复过程中,静脉移植MMSCs可归巢至角膜损伤部位,在全身实质器官中均有分布,肺组织是主要截流场所,脾是MMSCs破坏与溶解场所。

自体骨髓间充质干细胞移植对兔角膜碱烧伤炎症反应的抑制作用

背景 眼表碱烧伤可引起角膜溃疡及角膜新生血管形成,导致角膜混浊,目前尚无有效的疗法.已有研究认为间充质干细胞（MSCs）移植具有修复角膜损伤的作用,但其在体内对角膜碱烧伤治疗的作用机制尚不清楚. 目的 研究兔自体骨髓间充质干细胞（BM SCs）对碱烧伤角膜的抗炎机制.方法 抽取2～3月龄日本大白兔骨髓,经体外分离培养得到BMSCs并进行传代,取第3代细胞用于实验,倒置相差显微镜下观察培养细胞的形态,采用流式细胞仪检测细胞表面标志物的表达,对细胞进行生物学鉴定.采用角膜贴敷NaOH滤纸法在24只日本大白兔的右眼建立中度角膜碱烧伤模型,然后将造模成功的实验兔应用随机数字表法随机分为2个组,于碱烧伤后1h分别在模型眼结膜下注射同种自体BMSCs悬液300μl（细胞密度5×106/μ1）（BMSCs组）或等容积PBS（PBS组）,每组各12只.分别于移植后3、14和28 d于裂隙灯显微镜下观察角膜的混浊度变化并进行评分,采用组织病理学方法检查角膜组织中炎症反应程度并进行多形核中性粒细胞（PMNs）计数;采用免疫组织化学染色法定位并检测角膜组织中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达.结果 体外分离培养的兔BMSCs贴壁生长,呈长梭形,细胞形态均一,传代后其形态无明显改变.细胞表面黏附分子标志物CD29和CD90阳性表达的细胞比例分别为99.18％和97.94％,而造血细胞标志物CD34和CD31的阳性表达分别为0.74％和0.15％.造模后兔右眼出现角膜混浊、上皮脱落、角膜基质水肿和新生血管形成,移植后14d和28 d BMSCs组混浊度评分分别为2.37±0.52和2.25±0.50,均明显低于PBS组的3.00±0.53和3.25±0.50,差异均有统计学意义（t=2.376、2.828,均P＜0.05）;移植后14 d和28 d BMSCs组角膜中PMNs数目分别为（34.17±1.85）/12个视野和（25.64±3.86）/12个视野,明显少于PBS组的（42.70±1.54）/12个视野和（32.67±1.42）/12个视野,差异均有统计学意义（t=10.021、4.832,均P=0.000）;移植后14 d和28 d BMSCs组角膜组织中MMP-2蛋白的阳性表达量（A值）分别为0.388±0.016和0.384±0.006,明显低于PBS组的0.438±0.006和0.412±0.005,差异均有统计学意义（t=10.205、13.514,均P=0.000）.结论 角膜碱烧伤后早期行自体BMSCs移植可减少PMNs浸润,减轻角膜的炎症反应,下调或抑制MMP-2在受损角膜处的表达,抑制基质胶原纤维的降解,从而减少碱烧伤后角膜溃疡的发生。

间充质干细胞诱导糖尿病小型猪同种异体胰岛移植的免疫耐受

背景:胰岛移植为有望根治糖尿病的一种方法,而移植排斥问题阻碍了移植的开展,诱导受体对供体移植物的免疫耐受是解决同种异体移植排斥反应的关键。目的:观察骨髓间充质干细胞输注对糖尿病小型猪同种异体胰岛移植物存活时间的影响。方法:无菌条件下抽取动物骨髓,离心弃上清。取单核细胞层,洗涤后加入L-DMEM培养基,调整细胞浓度为1×109L-1。培养48h后换液去除未贴壁的细胞,依据贴壁培养法分离和扩增间充质干细胞。取第5代细胞作为移植供源,调整细胞浓度为1×1010L-1。四氧嘧啶制备糖尿病小型猪模型,随机分为骨髓细胞组和干细胞+骨髓细胞组,经肝门静脉分别植入胰岛细胞、骨髓细胞,胰岛细胞、骨髓细胞和骨髓间充质干细胞。结果与结论:骨髓间充质干细胞联合骨髓细胞输注较单纯骨髓细胞输注能显著延长同种异体小型猪胰岛移植物存活时间(P<0.05),同时受体血清胰岛素能较长时间维持较高水平。提示骨髓间充质干细胞输注能显著延长猪胰岛移植物存活时间,并促进胰岛移植物正常功能的发挥。

骨髓间充质干细胞移植促进脊髓神经功能修复机制的研究

目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSC)移植对脊髓损伤后神经功能恢复、星形胶质细胞增生、空洞形成以及神经细胞凋亡的影响。方法:提取BMSC,制作SD大鼠脊髓损伤模型80只,随机分为对照组(A组)和细胞移植组(B组)。1周后再次手术,用微量注射器刺入B组脊髓损伤部位两端,分别缓慢推入10μLBMSC悬液,A组注入等量PBS,于移植后1、2、4、6、8周观察神经恢复情况;移植后第1、2、3、7、14天行TUNEL染色和电镜检查观察神经细胞凋亡情况。8周后行胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及神经生长抑制因子Nogo-A免疫组化,测量各组脊髓空洞的大小。结果:8周后A组和B组神经功能评估(BBB评分)分别为(22.0±2.1)分和(28.5±2.7)分,14d时凋亡细胞数分别为14.4±2.7和9.1±3.3;白质中GFAP阳性细胞数分别为32.3±1.3和23.7±0.6,Nogo-A阳性神经元分别为(108.6±125.8)个和(78.3±12.4)个,空洞体积分别为(23.3±12.4)mm3和(14.5±10.6)mm3,2组间比较差别均有统计学意义(P<0.05)。结论:骨髓间充质干细胞可通过减少星形胶质细胞的增生,缩小空洞,抑制Nogo-A以及神经细胞凋亡等机制促进脊髓神经功能的恢复。

外泌体miR-940在前列腺癌骨转移中的作用

目的探讨外泌体miR-940在前列腺癌(PCa)骨转移中的作用。方法采集2017年6月在温州医科大学附属第一医院就诊的3例正常老年男性及3例PCa骨转移患者的血清标本,采用RT-PCR法检测血清外泌体中微小RNA(miRNA)表达并绘制miRNA谱。培养PCa细胞株PC-3及正常前列腺上皮细胞株RWPE-1,提取并鉴定细胞外泌体;采用RT-PCR法检测细胞外泌体中miR-940表达。PC-3细胞经转染后与人骨髓间充质干细胞(hMSC)共培养48 h,采用RT-PCR法检测成骨细胞分化相关基因表达,Von Kossa染色法检测矿化面积占比。结果与正常老年男性比较,PCa骨转移患者血清外泌体中多个miRNA表达明显升高,其中miR-940尤为明显。在电镜下,PC-3细胞外泌体呈40~100 nm的盘状囊泡,外泌体标志性蛋白VDAC、CD63、Hsp70、CD81表达均明显上调。PC-3细胞外泌体中miR-940表达明显高于RWPE-1细胞外泌体(P<0.05)。在PCa-hMSC共培养体系中,miR-940过表达组ALP、骨钙素(BGLAP)基因表达及矿化面积占比较miR-940敲减组、空白对照组均明显降低(均P<0.05)。结论外泌体miR-940可以有效抑制PCa-hMSC成骨分化,这为转移性PCa个体化治疗提供了新的靶点。

大鼠骨髓间质干细胞和新鲜骨髓细胞静脉移植治疗脑梗死的疗效

目的比较大鼠骨髓间质干细胞(rMSC)和新鲜骨髓细胞(fBMC)静脉移植后在脑梗死时脑内存活、迁移及分化情况,及对神经功能恢复的影响。方法制备大鼠脑梗死模型,经尾静脉将标记的rMSC和fBMC植入体内,于不同时程对神经功能状况进行评分。应用荧光激发及免疫组织化学方法检测移植细胞在脑内存活、迁移及分化情况。细胞化学染色观察rMSC体外分化情况。结果与对照组比较,两移植组神经功能改善明显(P<0.001),组间mNSS评分比较无统计学意义(P>0.05)。两移植组在荧光激发下均可见移植细胞在梗死区及其周边区聚集并存活,且有部分植入细胞分化表达神经细胞表面标志物,在体外rMSC未见类似分化表达。两组植入细胞存活与分化标志表达率差别无统计学意义。结论rMSC和fBMC经静脉移植后在宿主脑内均能够存活、迁移并分化表达神经细胞表型,均有促进脑梗死后神经功能恢复的作用。

骨髓间充质干细胞对小鼠肝硬化模型的作用研究

目的探索小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)的培养和其肝硬化模型的制备,以及两者之间的相互作用。方法首先,提取小鼠骨髓,移至培养瓶中,根据全骨髓贴壁法的原理培养干细胞;然后,采用CCl4为主的方法对小鼠进行肝硬化模型的制备;最后,把培养成功的骨髓干细胞通过肝动脉和尾静脉途径移植治疗造模成功的肝硬化小鼠,观察疗效。结果根据多种单克隆抗体的表达,使用流式细胞仪进行鉴定,成功培养小鼠骨髓间充质干细胞;对造模小鼠肝脏组织进行病理切片,病理报告图示典型的肝硬化,证明造模成功;通过肝动脉和尾静脉途径移植治疗肝硬化模型小鼠,最后报告干细胞治疗的病理结果,肝硬化程度减轻,说明骨髓间充质干细胞具有一定的疗效。结论自体骨髓干细胞移植治疗肝硬化是有效的,但仍需要基础研究和大样本的临床数据。

异基因骨髓间充质干细胞移植治疗小鼠前列腺癌的实验研究

目的观察非清髓性异基因骨髓间充质干细胞移植对小鼠前列腺移植瘤的治疗效果。方法应用全骨髓培养法培养BALB/c小鼠骨髓间充质干细胞,通过流式细胞术检测第四代细胞中CD44阳性细胞率,并通过油红染色鉴定由骨髓间充质干细胞分化的脂肪细胞。应用C57小鼠源性前列腺癌株RM-1(2×10~6/只)制成C57BL小鼠皮下移植瘤模型,分为对照组和异基因骨髓间充质干细胞移植组,每组10只。应用FC方案(氟达拉滨30mg/m^2,-d^(1-5);环磷酰胺300mg/m^2,-d^(1-3))对非对照组小鼠进行非清髓性预处理。异基因干细胞移植组小鼠经尾静脉注入骨髓间充质干细胞1×10~6个/只。记录并比较两组小鼠的肿瘤体积及生存时间。结果全骨髓培养法培养的第四代细胞中CD44阳性率为84.29%,油红染色证实由骨髓间充质干细胞自然分化的脂肪细胞存在。与对照组相比,异基因骨髓间充质干细胞移植显著的抑制了小鼠前列腺癌的生长(P=0.047),并明显延长了异基因骨髓间充质干细胞移植组小鼠的生存时间(P=0.00001)。结论异基因骨髓间充质干细胞移植显著的抑制了小鼠前列腺癌的生长,延长了受体小鼠的生存时间,预示了将骨髓间充质干细胞作为抑癌基因载体的良好前景。

间充质干细胞在小鼠体内可以向前列腺癌组织募集促进前列腺癌的生长

目的探索间充质干细胞在小鼠体内与前列腺癌组织生长的关系,以期为前列腺癌的治疗探索新的靶点。方法野生型C57BL/6小鼠经致死剂量照射后,接受EGFP绿色荧光转基因C57BL/6小鼠的MSCs以及野生型小鼠全骨髓细胞的混合移植。1月后在骨髓移植成功的小鼠身上建立前列腺癌RM-1细胞皮下移植瘤模型,检测前列腺癌肿瘤的生长情况。同时以荧光显微镜显像技术及流式细胞仪技术观察、检测MSCs在小鼠前列腺癌组织中的表达情况。结果皮下接种RM-1前列腺癌细胞后,给予小鼠尾静脉注射MSCs的实验组肿瘤的生长速度要快于注射生理盐水的对照组,肿瘤重量分别为(3.730±0.632)g、(2.019±0.254)g(P<0.05);无论是骨髓移植后内源性的MSCs还是直接尾静脉注射的外源性MSCs都可以在前列腺癌组织中检测到。结论内源性以及外源性的MSCs都可以向前列腺癌组织趋化募集,并促进前列腺癌的生长。

骨髓间充质干细胞源外泌体miR-21-5p通过下调PHLPP2促进前列腺癌PC-3细胞的增殖、迁移和侵袭

目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)来源的外泌体对前列腺癌细胞PC-3的增殖、迁移和侵袭的影响及其作用机制。方法:采用q PCR检测miR-21-5p在前列腺癌细胞系中的表达水平。采用电子显微镜观察BMSC分离出的外泌体形态,Western blotting检测外泌体表面标志物的表达以及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白E-cadherin、N-cadherin和Vimentin的表达。采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-21-5p和同源血小板富亮氨酸复重蛋白磷酸酶2(PH domain leucine-rich repeat protein phosphatase 2,PHLPP2)的靶向调控关系。向PC-3细胞培养液中加入10μl的BMSC外泌体悬液(Exo组)、转染sh-PHLPP2或antagomiR,CCK-8和Transwell实验检测PC-3细胞增殖和迁移能力。结果:miR-21-5p在前列腺癌PC-3细胞系中高表达。成功分离BMSC培养液上清中的外泌体,透射电子显微镜下观察到外泌体典型的囊泡状结构,且表达CD9、CD63和CD81等特异性蛋白。Exo组中PC-3细胞的增殖、侵袭[(421.34±22.45)vs(200.09±14.22)个,P<0.05]、迁移能力和N-cadherin、Vimentin和miR-21-5p的表达水平均显著高于对照组(均P<0.05)。证实PHLPP2是miR-21-5p的靶基因。与对照组相比,Exo组和sh-PHLPP2组PC-3细胞中PHLPP2的表达明显降低(0.66±0.09、0.42±0.05 vs 1.09±0.08,均P<0.01),细胞增殖、侵袭和迁移[(87.23±12.67)%、(82.45±10.13)%vs(66.46±9.13)%]能力均显著提高(均P<0.01),E-cadherin表达水平显著降低而N-cadherin和Vimentin表达水平显著升高(均P<0.05)。结论:miR-21-5p在前列腺癌PC-3细胞系中高表达,BMSC外泌体miR-21-5p通过靶向下调PHLPP2提高PC-3细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

兔骨髓间充质干细胞在兔角膜缘干细胞完全缺乏模型眼表的分化

目的探讨兔骨髓间充质干细胞(BMSC)移植到兔角膜缘干细胞完全缺乏模型后是否能分化成角膜上皮细胞。方法 3~5月龄清洁级日本大耳白兔24只,采用全周角膜缘板层切除术加中央角膜上皮刮除术建立兔右眼角膜缘干细胞完全缺乏模型,4周后观察眼表形态,行苏木素-伊红(HE)染色、过碘酸-雪夫(PAS)染色及DAPI染色鉴定模型成功与否,选取成功模型18只(36只眼),应用随机数字表法分为对照组(18只兔左眼)、模型组、羊膜组、羊膜加BMSC组,后3组每组6只(兔右眼)。取第三代(P3)兔BMSC,以去上皮羊膜为载体培养观察,待细胞铺满羊膜达90%以上时进行移植手术,于移植术后12周观察兔右眼表形态,行HE染色观察角膜结构,免疫荧光检测兔BMSC分化方向。结果建模后4周有21只兔右眼眼表形态评分达到7分及7分以上,行HE染色、PAS染色、DAPI染色,结果显示角膜缘及角膜上皮细胞层被清除,浅基质层大量炎症细胞浸润及新生血管形成,可见杯状细胞形成,说明模型构建成功。移植术后12周照相观察眼表形态,与自身兔左眼角膜相比,模型组兔右眼角膜混浊,有大量新生血管,羊膜组右眼角膜轻度混浊,有少量新生血管,羊膜加BMSC组兔右眼角膜透明,未见新生血管;HE染色显示羊膜加BMSC组角膜结构修复完整,免疫荧光检测到羊膜加BMSC组有角膜分化的特异性标记因子CK3+12表达,而羊膜组未见表达。结论兔BMSC移植到兔角膜缘干细胞完全缺乏模型后,在体内能够分化成角膜上皮细胞或角膜样上皮细胞,恢复眼表结构及功能。

前列腺癌种植性动物模型概述

前列腺癌动物模型是研究前列腺癌发病机制、肿瘤与宿主关系、肿瘤侵袭及转移机制及评价治疗效果的重要工具。目前前列腺癌动物模型制作方法较多,应用最广泛的是种植性动物模型。本文就前列腺癌种植性动物模型的相关研究做一概述。

骨髓间充质干细胞移植对大鼠暴发性肝功能衰竭治疗作用的初步观察

目的探讨骨髓间充质干细胞（MSC）移植对大鼠暴发性肝功能衰竭（FHF）的治疗作用。方法全骨髓细胞贴壁培养筛选法分离纯化大鼠MSC；四氯化碳灌胃制作大鼠FHF模型，分为实验组和模型对照组，各20只，8只灌服等剂量0．9％氯化钠溶液作为空白对照组。将4’，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）标记的大鼠MSc1．0×10^6从尾静脉移植入实验组和空白对照组，等剂量0．9％氯化钠溶液尾静脉注入模型对照组；分别于术后7、14d处死各组部分大鼠，评价实验组与模型对照组大鼠一般状况、生存率、肝功能、TNF-a水平、肝脏病理、MsC归巢至肝脏的情况。正态分布资料采用两个独立样本t检验，非正态分布资料采用非参数检验。结果术后3d开始，实验组存活大鼠一般情况比模型对照组好转更加明显；术后7d，实验组与模型对照组各有15只和8只大鼠存活，差异有统计学意义（X^2-4．122，P〈0．05）；术后7d以及14d，实验组与模型对照组相比，肝功能指标、TNF-a水平均差异均有统计学意义（均P（0．05），病理学检查肝组织炎性反应改善情况实验组均更为明显；术后实验组MSC归巢细胞逐渐增多，空白对照组只观察到很少量归巢细胞。结论MSC经尾静脉同种异体移植，可以归巢到肝功能衰竭大鼠肝脏，改善大鼠免疫和肝脏组织炎性反应坏死状态，促进FHF大鼠肝功能的恢复，对FHF具有明显的治疗作用。

骨髓间充质干细胞移植对急性胰腺炎后肠黏膜屏障的影响

目的研究大鼠骨髓间充质干细胞（MSC）在急性胰腺炎后肠黏膜损伤修复中的作用。方法从雄性SD大鼠股骨骨髓腔获取并培养MSC。20只雌性SD大鼠分成3组：急性重症胰腺炎（SAP）组（n=6）和MSC治疗组（n=8），均分2次以腹腔内注射L-精氨酸（2g／kg）造模，成模12h后，MSC治疗组予尾静脉注射MSC5×10^6个／只，连续3d，SAP组予尾静脉注射同体积0．9％NaCl溶液；正常对照组（n=6）仅腹腔注射0．9％NaCl溶液，未做任何处理。所有大鼠于造模72h后处死，取回肠组织HE染色行病理评分，RT-PCR方法检测回肠和胰腺组织中肿瘤坏死因子（TNF）-amRNA和白细胞介素（IL）-18mRNA表达水平，PCR检测胰腺和肠道组织的Y染色体性别决定基因Sry。结果SAP组和MSC治疗组胰腺中TNF—amRNA和IL-1βmRNA的相对表达量均．较正常对照组明显升高（7．22±1．99，3．46±1．75比1．32±1．04；2．71±0．56，1．92±0．28比0．61±0．45），差异有统计学意义（F=18．375，F=22．701；P〈0．05）；MSC治疗组中二者的相对表达量较SAP组明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05）。SAP组和MSC治疗组肠道中TNF—amRNA和IL-1βmRNA的相对表达量均较正常对照组明显升高（3．93±1．08，2．13±0．53比0．68±0．42；2．44±1．54，1．02±0．44比0．60±0．14），差异有统计学意义（F=21．772，F=6．132；P〈0．05）；MSC治疗组中二者的相对表达量较SAP组明显下降，差异有统计学意义（P〈0．05）。病理评分显示：与SAP组相比，MSC治疗组大鼠肠黏膜病理损伤减轻（3．83±0．28比2．83±0．56），且差异有统计学意义（F=12．013，P〈0．05）。MSC治疗组中胰腺及肠道组织中均可检测到Sry基因表达。结论异体MSC移植抑制急性胰腺炎后促炎因子水平，减轻肠黏膜损伤，可能参与肠道组织的修复。

Y染色体追踪大鼠骨髓间充质干细胞心肌移植的实验研究

目的利用Y染色体检测雄性大鼠的骨髓间充质干细胞(MSCs)移植到雌性大鼠心肌梗死模型中的存活情况。方法采用全骨髓贴壁筛选法体外培养雄性大鼠的骨髓间充质干细胞作为移植细胞,选取80只雌性大鼠通过结扎左冠状动脉前降支制备心肌梗死模型,其中45只成功建立模型。成模后2周按以下分组进行细胞移植:将模型动物随机分为心外膜直接注射MSCs组(A组,n=15)、经静脉移植MSCs组(B组,n=15)和经静脉注射等量DMEM培养液组(C组,n=15),通过实时定量PCR检测雄性大鼠Y染色体特有的SRY基因,观察移植后1 d、1周、2周及3周时MSCs在梗死心肌的存活情况。结果经心外膜直接注射组和经静脉移植组通过PCR均可检测出SRY基因的存在,移植后两组的心功能得到明显的改善(P<0.05)。结论 MSCs经心外膜和静脉移植均可分布于心肌梗死周围区域,对梗死后大鼠的心脏具有保护作用。