血清外泌体SUMO1P3和MALAT1对三阴性乳腺癌患者术后复发转移的预测价值

目的探讨血清外泌体小泛素样修饰子1伪基因3(SUMO1P3)和肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)对三阴性乳腺癌(TNBC)患者术后复发转移的预测价值。方法选取2016年至2020年行手术切除的224例TNBC患者作为研究对象,根据随访期内复发及转移情况分为非复发转移组和复发转移组,收集两组患者的临床病历资料。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测术前血清外泌体SUMO1P3和MALAT1表达,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价SUMO1P3和MALAT1对TNBC术后复发转移的预测价值。采用多因素Logistic回归模型分析影响TNBC术后复发转移的因素。结果共72例患者出现复发或转移。224例TNBC患者SUMO1P3和MALAT1相对表达量分别为3.06±0.68和2.75±0.66,其中复发转移组SUMO1P3和MALAT1相对表达量为3.44±0.67和3.46±0.80,均显著高于非复发转移组的2.88±0.61和2.33±0.48(P<0.001)。ROC曲线结果显示,血清外泌体SUMO1P3和MALAT1联合检测的曲线下面积(AUC)=0.842(95%CI:0.787~0.887),特异度为0.790,灵敏度为0.806,且两指标联合预测的效能优于SUMO1P3和MALAT1单独预测(P<0.05)。多因素Logistic回归模型结果显示,SUMO1P3(OR=4.463,95%CI:2.125~9.372)和MALAT1(OR=9.103,95%CI:4.462~18.573)表达是影响TNBC术后复发转移的独立因素(P<0.05)。结论血清外泌体SUMO1P3和MALAT1与TNBC患者预后密切相关,两指标联合检测对TNBC术后复发或转移具有较高的预测价值。

LncRNA MALAT1通过靶向miR-146a调节PI3K/Akt信号通路影响胃癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的 探究长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)肺腺癌转移相关转录子1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)通过调节miR-146a对胃癌(gastric cancer, GC)细胞的增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法 收集GC组织和配对正常胃上皮组织,将GC细胞MNK-45分为空白对照(blank control, BC)组(未转染)、MALAT1 siRNA-NC组(转染MALAT1 siRNA-NC)、MALAT1 siRNA组(转染MALAT1 siRNA)、miR-146a mimics-NC组(转染miR-146a mimics-NC)、miR-146a mimics组(转染miR-146a mimics)、MALAT1 siRNA+miR-146a inhibitor-NC组(共转染MALAT1 siRNA+miR-146a inhibitor-NC)、MALAT1 siRNA+miR-146a inhibitor组(共转染MALAT1 siRNA+miR-146a inhibitor)。定量荧光PCR(qRT-PCR)检测胃组织或细胞中MALAT1、miR-146a表达量;CCK-8法和克隆形成实验检测细胞增殖能力;Transwell法检测细胞侵袭和迁移能力;RNA pull down实验、双荧光素酶报告实验分析MALAT1和miR-146a的结合情况;Western blot检测磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)通路蛋白及c-Myc、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)蛋白表达量。结果 转染MALAT1 siRNA可明显降低MNK-45细胞的MALAT1表达量,敲低MALAT1或过表达miR-146a可降低细胞活力、克隆能力、迁移和侵袭,增加miR-146a表达,降低PI3Kp85α、PI3Kp85β、c-Myc、MMP9蛋白表达量及p-Akt/Akt水平;MALAT1可结合并靶向下调miR-146a表达;低表达miR-146a可逆转敲低MALAT1对MNK-45细胞增殖、迁移和侵袭的抑制效应。结论 MALAT1可能作为ceRNA吸附并降解miR-146a,敲低MALAT1可上调miR-146a表达,并通过PI3K/Akt通路抑制GC细胞增殖、迁移和侵袭。

血清Irisin、PTX3及MALAT1水平与糖尿病视网膜病变病情程度的关系及联合诊断价值

目的研究血清鸢尾素(Irisin)、长正五聚蛋白3(PTX3)、人肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)水平与糖尿病视网膜病变(DR)病情程度的关系及联合诊断的价值。方法选取2022年4月至2023年4月沧州市中心医院2型糖尿病(T2DM)合并DR患者85例设为DR组,85例单纯T2DM患者设为非DR组,同时期85例健康志愿者设为对照组。将DR组患者以是否处于增生型DR为标准分为增生型组(38例)与非增生型组(47例)。收集DR组患者病例临床资料,包括性别、舒张压、年龄、收缩压、病程、空腹血糖(FPG)、体质量指数、糖化血红蛋白(HbA1c)、吸烟史、甘油三酯(TG)、饮酒史、收缩期峰值流速、舒张末期峰值流速、阻力指数、空腹胰岛素(FINS)、糖尿病家族史、总胆固醇(TC)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。酶联免疫吸附法检测各组患者血清Irisin、PTX3水平,实时荧光定量PCR法检测血清MALAT1水平。采用Pearson相关性分析检测血清Irisin、PTX3及MALAT1水平与DR患者病情程度的相关性。Logistic回归分析DR患者病情程度的影响因素。受者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清Irisin、PTX3及MALAT1单独诊断DR的价值。ROC曲线、净重新分类指数(NRI)及综合判别改善指数(IDI)分析含与不含血清Irisin、PTX3及MALAT1方案诊断DR的价值。结果3组患者血清Irisin、PTX3、MALAT1水平比较,差异均有统计学意义(均为P<0.001)。增生型组患者病程长于非增生型组,收缩期峰值流速、舒张末期峰值流速、血清Irisin水平均低于非增生型组,阻力指数、FPG、HbA1c、TG、FINS、HOMA-IR及血清PTX3、MALAT1水平均高于非增生型组,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。DR患者血清Irisin水平与DR病情程度呈负相关(r=-0.512,P<0.001),PTX3、MALAT1水平与DR病情程度均呈正相关(r=0.497、0.573,均为P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,病程、FPG、HbA1c、TG、FINS、HOMA-IR、收缩期峰值流速、舒张末期峰值流速、阻力指数及血清Irisin、PTX3、MALAT1水平均为DR病情程度加重的影响因素(均为P<0.05)。血清Irisin、PTX3、MALAT1诊断DR的曲线下面积(AUC)分别为0.743、0.811、0.773。与常规诊断方案比较,含有血清Irisin、PTX3、MALAT1水平的新诊断方案的AUC明显增大(Z=2.708,P=0.007),NRI、IDI分别为0.039(95%CI:0.022~0.069)、0.026(95%CI:0.014~0.047)(均为P<0.05)。结论DR患者血清Irisin水平降低,PTX3、MALAT1水平升高,且与患者DR病情程度密切相关,含有血清Irisin、PTX3、MALAT1指标的诊断方案具有较高的诊断价值。

急性缺血性脑卒中患者血清LncRNA MALAT1、LncRNA MEG3水平与脑梗死体积和神经功能缺损的关系

目的探讨急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者血清长链非编码核糖核酸(long non-coding ribonucleic acid,LncRNA)转移相关肺腺癌转录物1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)、LncRNA母系表达基因3(maternally expressed gene 3,MEG3)水平与脑梗死体积和神经功能缺损的关系。方法选取2020-03/2023-01月作者医院急诊内科收治的AIS患者197例(AIS组),另选同期体检中心体检的103例健康志愿者为对照组。根据脑梗死灶体积将AIS患者分为小体积梗死组(n=62)、中体积梗死组(n=89)、大体积梗死组(n=46),根据入院时美国国立卫生研究所脑卒中评分(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)将AIS患者分为轻度缺损组(n=60)、中度缺损组(n=85)和重度缺损组(n=52)。Pearson相关分析血清LncRNA MALAT1、LncRNA MEG3水平与脑梗死体积、NHISS评分的相关性。受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清LncRNA MALAT1、LncRNA MEG3诊断AIS患者大体积梗死和重度神经功能缺损的价值。结果AIS组血清LncRNA MALAT1、LncRNA MEG3表达高于对照组(P均<0.05)。大体积梗死组血清LncRNA MALAT1、LncRNA MEG3表达均高于中体积梗死组和小体积梗死组(P均<0.05),重度缺损组血清LncRNA MALAT1、LncRNA MEG3表达高于中度缺损组和轻度缺损组(P均<0.05)。AIS患者血清LncRNA MALAT1、LncRNA MEG3表达与脑梗死体积、NHISS评分呈正相关(P<0.05)。血清LncRNA MALAT1、LncRNA MEG3诊断AIS患者大体积梗死和重度神经功能缺损的曲线下面积(area under the curve,AUC)分别为0.811、0.815、0.818、0.777,联合LncRNA MALAT1、LncRNA MEG3诊断AIS患者大体积梗死的AUC分别为0.925、0.873,高于各自单独诊断。结论AIS患者血清LncRNA-MALAT1、LncRNA-MEG3表达上调,且与脑梗死体积增加和神经缺损加重有关,可作为AIS病情评估的潜在指标。

LncRNA MALAT1对狼疮性肾炎小鼠肾小球系膜细胞增殖、凋亡、炎症反应的影响

目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)肺腺癌转移相关转录子1(MALAT1)对狼疮性肾炎(LN)小鼠肾小球系膜细胞(MC)增殖、凋亡、炎症反应及Notch2/hes1通路的影响。方法取10只MRL/MpJ-Faslpr小鼠为LN组,5只健康MRL/MpJ小鼠为正常组,分离培养LN组小鼠肾小球MC细胞,分为Mock组(正常培养)、Vector组(转染MALAT1过表达空载体pcDNA3.1对照)、MALAT1组(转染MALAT1过表达)、SiNC组(转染敲低SiMALAT1阴性对照SiNC)、SiMALAT1-1/2/3组(转染SiMALAT1-1/2/3)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测正常组和LN组小鼠肾组织以及各组MC细胞中MALAT1表达水平;CCK-8和EdU法检测MALAT1对MC细胞增殖的影响;流式细胞术检测各组MC细胞凋亡情况;ELISA检测各组MC细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6水平;Western blot检测MALAT1对MC细胞增殖、凋亡和Notch2/hes1信号通路相关蛋白的影响。结果MALAT1在LN小鼠肾组织中高表达(P<0.05);过表达MALAT1可促进MC细胞增殖和炎症反应,诱导凋亡,同时上调Notch2、hes1蛋白水平;而敲低MALAT1则具有与MALAT1过表达相反的效果(P<0.05)。结论敲低MALAT1可抑制LN小鼠肾小球MC细胞增殖和炎症反应,诱导凋亡,其作用机制可能与抑制Notch2/hes1信号通路有关。

血清LncRNA MALAT1和microRNA-124水平检测对非小细胞肺癌患者预后的评估价值

目的:探究长链非编码RNA-转移相关肺腺癌转录本1(LncRNA MALAT1)和微小RNA-124(microRNA-124)对非小细胞肺癌(NSCLC)患者预后的预测效能。方法:选取2020年06月至2022年06月我院收治的124例NSCLC患者作为研究对象,入院后,收集患者的病历资料,检测入院时外周血LncRNA MALAT1、microRNA-124的相对表达量。电话随访12个月记录患者的死亡率,分为生存组和死亡组,分析NSCLC患者预后的影响因素,评估血清LncRNA MALAT1、microRNA-124对NSCLC患者预后的预测效能。结果:死亡组患者的IV期占比及LncRNA MALAT1相对表达量高于生存组,microRNA-124相对表达量低于生存组。Logistic遂步分析显示,病理分期IV期(OR=12.342,95%CI:4.295~36.765)、LncRNA MALAT1(OR=5.371,95%CI:1.836~15.714)及microRNA-124(OR=0.257,95%CI:0.089~0.752)是NSCLC患者死亡的影响因素(P<0.05)。LncRNA MALAT1与microRNA-124呈负相关(P<0.05)。受试者工作特性曲线(ROC)分析显示,LncRNA MALAT1及microRNA-124单一及联合预测NSCLC患者预后的灵敏度分别为0.741(95%CI:0.601~0.846)、0.759(95%CI:0.621~0.861)、0.815(95%CI:0.682~0.903),特异度分别为0.825(95%CI:0.705~0.906)、0.762(95%CI:0.635~0.856)、0.841(95%CI:0.723~0.917),曲线下面积(AUC)分别为0.781、0.760、0.839。联合预测效能更高(P<0.05)。结论:LncRNA MALAT1及microRNA-124可用于预测NSCLC患者的预后,且预测效能良好。

肺部超声评分联合血清lncRNA MALAT1,lncRNA NEAT1水平对新生儿呼吸窘迫综合征的诊断分析

目的探讨肺超声评分(LUS)联合血清长链非编码RNA(lncRNA)肺腺癌转移相关转录因子1(MALAT1),ln‐cRNA核富含丰富的转录本1(NEAT1)水平对新生儿呼吸窘迫综合征(NRDS)病情程度的诊断价值。方法选取在我院出生的82例NRDS新生儿作为NRDS组,并将其分为轻度组(41例)、中度组(31例)、重度组(10例)。另以我院同期健康的85例新生儿作为对照组,两组新生儿均接受肺部超声检查。采用实时荧光定量PCR检测血清MALAT1、NEAT1表达水平。采用受试者工作特征曲线(ROC)评估LUS联合MALAT1、NEAT1对新生儿中度、重度NRDS的预测价值。Spearman分析NEAT1、MALAT1与LUS相关性。结果与对照组相比,NRDS组左肺、右肺、双侧肺、双肺LUS及血清NEAT1、MALAT1相对表达水平较高,差异有统计学意义(P<0.05);中度组LUS、血清NEAT1、MALAT1相对表达水平高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05);重度组LUS、血清NEAT1、MALAT1相对表达水平高于中度组、轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。LUS联合MALAT1、NEAT1预测中度、重度NRDS的曲线下面积(AUC)分别为0.969、0.965。LUS与血清NEAT1、MALAT1水平呈正相关(P<0.05)。结论LUS及NEAT1、MALAT1表达水平随NRDS患儿病情程度增加而增加,LUS联合MALAT1、NEAT1对中度、重度NRDS有预测价值。

过敏性鼻炎病人外周血MALAT1、miR-17-5p的表达及临床意义

目的:探讨过敏性鼻炎病人外周血肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)、微小RNA17-5p(miR-17-5p)的表达水平及其临床意义。方法:选取过敏性鼻炎病人125例作为观察组,择同期体检健康者62名作为对照组。以荧光定量聚合酶链反应检测受试者外周血MALAT1、miR-17-5p表达水平,绘制ROC曲线评估外周血MALAT1、miR-17-5p对过敏性鼻炎发生的诊断价值,Spearman相关性分析外周血MALAT1、miR-17-5p与病人疾病严重程度的相关性,再以多因素logistic回归分析影响过敏性鼻炎严重程度的独立危险因素。结果:观察组外周血MALAT1 mRNA水平低于对照组,miR-17-5p水平高于对照组(P<0.05);ROC曲线分析显示,MALAT1 mRNA曲线下面积为0.812,miR-17-5p曲线下面积为0.845,MALAT1 mRNA灵敏性优于miR-17-5p,特异性低于miR-17-5p,两者联合检测诊断价值更高;中重度过敏性鼻炎病人血清MALAT1 mRNA水平明显低于轻度病人(P<0.05),miR-17-5p水平明显高于轻度病人(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示,外周血MALAT1 mRNA水平与过敏性鼻炎疾病严重程度呈负相关关系(r=-0.779,P<0.01),miR-17-5p水平与疾病严重程度呈正相关关系(r=0.774,P<0.01);多因素logistic回归分析结果显示,低水平MALAT1 mRNA、高水平miR-17-5p为影响过敏性鼻炎严重程度的独立危险因素(P<0.05)。结论:过敏性鼻炎病人外周血中MALAT1 mRNA呈低表达,miR-17-5p呈高表达,与疾病严重程度关系密切,为影响过敏性鼻炎严重程度的独立危险因素,可能作为诊断过敏性鼻炎及评估疾病严重程度的潜在指标。

血清LncRNA-MALAT1、Ang-2与重症急性胰腺炎患者并发急性胃肠损伤的相关性研究

目的探讨血清长链非编码RNA-肺腺癌转移相关转录本1(LncRNA-MALAT1)、血管生成素-2(Ang-2)与重症急性胰腺炎(SAP)患者并发急性胃肠损伤(AGI)的相关性。方法选取2021年1月—2023年1月苏州大学附属苏州市第九人民医院重症医学科收治的轻症急性胰腺炎(AP)患者78例为轻症AP组、中度AP患者78例为中度AP组、SAP患者145例为SAP组,根据是否并发AGI将SAP患者分为AGI亚组83例和非AGI亚组62例。采用实时荧光定量PCR检测血清LncRNA-MALAT1水平,酶联免疫吸附法检测血清Ang-2水平;多因素Logistic回归分析SAP患者并发AGI的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线评价血清LncRNA-MALAT1、Ang-2水平对SAP患者并发AGI的预测价值。结果轻症AP组、中度AP组、SAP组血清LncRNA-MALAT1、Ang-2水平依次升高(F/P=659.197/<0.001、682.682/<0.001);145例SAP患者AGI发生率为57.24%(83/145),AGI亚组SAP患者多器官功能障碍综合征(MODS)比例、急性生理和慢性健康评估Ⅱ(APACHEⅡ)评分、ICU停留时间及血清D-乳酸、LncRNA-MALAT1、Ang-2水平高于非AGI亚组(χ^(2)/t/P=19.273/<0.001、5.052/<0.001、5.308/<0.001、4.085/<0.001、6.864/<0.001、6.824/<0.001);多因素Logistic回归结果示,MODS、APACHEⅡ评分高、D-乳酸高、LncRNA-MALAT1高、Ang-2高为SAP患者并发AGI的独立危险因素[OR(95%CI)=4.496(1.335~15.138)、1.331(1.142~1.551)、1.070(1.020~1.123)、1.101(1.055~1.148)、1.571(1.239~1.994)];血清LncRNA-MALAT1、Ang-2水平及二者联合预测SAP患者并发AGI的AUC分别为0.790、0.785、0.895,二者联合的AUC大于血清LncRNA-MALAT1、Ang-2水平单独预测(Z/P=3.143/0.002、3.650/<0.001)。结论血清LncRNA-MALAT1、Ang-2水平升高与SAP患者并发AGI独立相关,血清LncRNA-MALAT1联合Ang-2水平预测SAP患者并发AGI的价值较高。

lncRNA MALAT1/HMGB1在缺血后处理减轻缺血再灌注损伤中的作用

目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肺腺癌转录子1(MALAT1)以及下游调控蛋白高迁移率族蛋白B1(High-mobility group protein box-1,HMGB1)在缺血后处理降低大鼠心肌缺血-再灌注损伤(ischemia/reperfusion injury,IRI)中的作用。方法将24只大鼠饲养7天后,随机分成3组:假手术(Sham)组、缺血再灌注(ischemia/reperfusion,IR)组、缺血后处理(ischemic post-conditioning,IPO)组。模型构建完毕24 h进行检测大鼠血清中心肌肌钙蛋白I(cTnI)和白介素6(IL-6)表达水平,取材检测大鼠心肌梗死面积,检测大鼠心肌组织中MALAT1转录表达水平的差异,HMGB1、Toll样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)蛋白含量差异。结果与Sham组比较,IR、IPO组血清中cTnI、IL-6水平明显升高,心肌梗死面积明显增加,心肌组织中MALAT1表达水平显著上调,HMGB1、TLR4水平明显升高(P<0.05)。与IR组比较,IPO组cTnI浓度显著降低,心肌梗死面积显著减小,心肌组织中lncRNA-MALAT1相对表达量降低,HMGB1、TLR4蛋白含量降低(P<0.05)。结论及时的缺血后处理可有效减缓大鼠心肌缺血-再灌注的损伤程度,其相关机制可能与抑制MALAT1调节控制HMGB1、TLR4表达水平之间有一定的关联。

血清CTSB、lncRNA MALAT1水平与脓毒症相关急性肾损伤严重程度的关系及预后预测价值

目的探讨脓毒症相关急性肾损伤(SA-AKI)患者血清组织蛋白酶B(CTSB)、长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(lncRNA MALAT1)水平与病情严重程度的关系及其对预后的预测价值。方法选取2021年1月至2023年1月德阳市人民医院收治的80例SA-AKI患者为SA-AKI组,另选取同期80例单纯脓毒症患者为单纯脓毒症组,根据病情严重程度将SA-AKI患者分为1期(22例)、2期(27例)、3期(31例),并根据28 d临床结局分为死亡组(35例)和存活组(45例)。采用酶联免疫吸附试验和实时荧光定量PCR检测血清CTSB与lncRNA MALAT1水平,多因素Logistic回归分析SA-AKI患者预后不良的影响因素,受试者工作特征曲线分析血清CTSB、lncRNA MALAT1水平对SA-AKI患者死亡的预测价值。结果与单纯脓毒症组比较,SA-AKI组血清CTSB、lncRNA MALAT1水平升高(P<0.05)。1期、2期、3期SA-AKI患者血清CTSB、lncRNA MALAT1水平依次升高(P<0.05)。80例SA-AKI患者28 d病死率为43.75%。AKI分期3期、急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ评分、序贯器官衰竭评估评分、血乳酸、CTSB、lncRNA MALAT1升高为SA-AKI患者死亡的独立危险因素(P<0.05)。血清CTSB联合lncRNA MALAT1水平预测SA-AKI患者死亡的曲线下面积为0.894,大于血清CTSB、lncRNA MALAT1水平单独预测的0.797、0.793(P<0.05)。结论SA-AKI患者血清CTSB、lncRNA MALAT1水平升高与病情加重和预后不良密切相关,血清CTSB联合lncRNA MALAT1水平对SA-AKI患者预后的预测价值较高。

下肢动脉硬化闭塞症患者支架植入术后血清LncRNA-MALAT1、LncRNA-XIST与1年内支架内再狭窄相关性研究

目的探讨下肢动脉硬化闭塞症(LEASO)患者支架植入术后血清长链非编码RNA(LncRNA)-肺腺癌转移相关转录本1(MALAT1)、LncRNA-X失活特异性转录本(XIST)与1年内支架内再狭窄(ISR)的相关性。方法回顾性选取2018年1月—2022年12月在内蒙古医科大学附属肿瘤医院血管外科行支架植入术的LEASO患者147例作为研究对象,根据1年内是否发生ISR分为ISR组41例和无ISR组106例,采用实时荧光定量PCR检测术后血清LncRNA-MALAT1、LncRNA-XIST水平;通过Pearson法分析LEASO患者血清LncRNA-MALAT1、LncRNA-XIST水平与管腔直径缩小率的相关性;多因素Logistic回归分析LEASO患者支架植入术后1年内ISR的影响因素;ROC曲线分析血清LncRNA-MALAT1、LncRNA-XIST水平对LEASO患者支架植入术后1年内ISR的预测价值。结果随访1年,147例LEASO患者支架植入术后ISR发生率为27.89%(41/147);与无ISR组比较,ISR组血清LncRNA-MALAT1、LncRNA-XIST水平升高(t/P=5.949/<0.001、5.927/<0.001);Pearson相关性分析显示,LEASO患者血清LncRNA-MALAT1、LncRNA-XIST水平与管腔直径缩小率呈正相关(r/P=0.596/<0.001、0.588/<0.001);多因素Logistic回归显示,糖尿病和C反应蛋白、LncRNA-MALAT1、LncRNA-XIST升高为LEASO患者支架植入术后1年内ISR的独立危险因素[OR(95%CI)=3.185(1.155~8.781)、1.187(1.003~1.404)、1.433(1.199~1.713)、1.575(1.242~1.998)];ROC曲线显示,血清LncRNA-MALAT1、LncRNA-XIST水平联合预测LEASO患者支架植入术后1年内ISR的曲线下面积为0.906,大于血清LncRNA-MALAT1、LncRNA-XIST水平单独预测的0.799、0.786(Z/P=3.176/0.002、3.513/<0.001)。结论LEASO患者支架植入术后血清LncRNA-MALAT1、LncRNA-XIST水平升高是1年内ISR的独立危险因素,血清LncRNA-MALAT1、LncRNA-XIST水平联合对LEASO患者支架植入术后1年内ISR有较高的预测价值。

血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平与妊娠期糖尿病患者不良妊娠结局的相关性

目的:分析血清内脂素、长链非编码RNA肺腺癌转移相关转录本1(LncRNA MALAT1)、糖化血红蛋白(HbA1c)水平与妊娠期糖尿病(GDM)患者不良妊娠结局的相关性。方法:选取2021年4月至2023年4月该院收治的103例GDM患者为研究对象,纳入观察组,另选取同期于本院进行产检的103名健康孕妇为对照组,检测两组血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平,并随访至GDM患者分娩。比较两组、不同妊娠结局GDM患者血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平,并采用Pearson相关性分析血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平与GDM患者不良妊娠结局的相关性。结果:观察组血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);不良妊娠结局GDM患者血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平均高于正常妊娠结局GDM患者,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson相关性分析结果显示,血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平与GDM患者不良妊娠结局均呈正相关(r>0,P<0.05)。结论:血清内脂素、LncRNA MALAT1、HbA1c水平与GDM患者不良妊娠结局均呈正相关。

电针联合康复训练介导LncRNA MALAT1/BDNF调控脑缺血再灌注损伤小鼠皮层突触可塑性的研究

目的探究电针联合康复训练对脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury,CIRI)小鼠皮层突触可塑性改善的作用机制。方法选取2024年1—6月安徽中医药大学第二附属医院购买的30只SPF级C57BL/6小鼠作为研究对象,根据随机数字表法分为Sham组、MCAO/R(M)组、ER-M组、sh-NC-M组、sh-MALAT1-M组和sh-MALAT1-M-ER组,每组5只。改良神经严重度评分(Modified Neurological Severity Score,mNSS)量表评价造模完成后1 d和治疗第7天小鼠的神经功能;检测小鼠脑梗死体积;透射电镜观察小鼠突触超微结构;Western blot分析脑组织脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)、突触后致密物95(postsynaptic density 95,PSD95)、神经突触素1(synapsin-1)蛋白表达;qRT-PCR检测长链非编码肺腺癌转移相关转录本1(long non-coding RNA metastasis associated lung adenocarcinoma transcript 1,LncRNA MALAT1)、BDNF、PSD95、synapsin-1的RNA表达水平;Pearson分析LncRNA MALAT1与BDNF mRNA水平的相关性;RNA结合蛋白免疫沉淀分析LncRNA MALAT1与BDNF的相互作用。结果造模后第1天,其余组小鼠mNSS评分均高于Sham组,差异有统计学意义(P均<0.05);与Sham组相比,M组和sh-NC-M组治疗第7天的mNSS评分、脑梗死体积、LncRNA MALAT1水平明显增加,ER-M组明显低于M组,sh-MALAT1-M组明显低于sh-NC-M组,sh-MALAT1-M-ER组明显低于ER-M组和sh-MALAT1-M组,差异有统计学意义(P均<0.05);M组和sh-NC-M组突触数量、BDNF、PSD95、synapsin-1蛋白及mRNA表达较Sham组明显降低,ER-M组明显高于M组,sh-MALAT1-M组明显高于sh-NC-M组,sh-MALAT1-M-ER组明显高于ER-M组和sh-MALAT1-M组,差异有统计学意义(P均<0.05);LncRNA MALAT1与BDNF mRNA存在明显相关性(r=-0.751,P<0.001);与使用免疫球蛋白G进行免疫共沉淀的对照组相比,BDNF蛋白-RNA复合物中LncRNA MALAT1明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论电针联合康复训练可通过介导LncRNA MALAT1/BDNF促进CIRI小鼠神经功能恢复,减小脑梗死体积,改善大脑皮层突触可塑性。

MALAT1通过VHL／β-catenin通路影响口腔鳞状细胞癌生长侵袭的实验研究

目的:探讨肺腺癌转移相关转录因子1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)生长侵袭的影响及其作用机制。方法:使用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)敲低MALAT1在人OSCC细胞系SCC25、UM1中的表达;CCK-8法、流式细胞术检测敲低MALAT1表达后OSCC增殖能力、细胞周期及细胞凋亡的变化;细胞迁移实验及Transwell实验检测细胞运动及侵袭能力的变化;蛋白质印迹法检测细胞周期及凋亡相关蛋白、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)及侵袭相关蛋白、VHL及β-catenin等蛋白表达变化。结果:敲低OSCC中MALAT1表达后,细胞增殖能力显著下降,细胞周期出现G1/S期阻滞,周期相关蛋白cyclin D1表达减少,P21表达增多;细胞凋亡增多,凋亡相关蛋白cleaved caspase-3、Bax表达增多;且EMT相关蛋白N-cadherin、vimentin表达减少,E-cadherin表达增多,侵袭相关蛋白MMP-2、MMP-9蛋白表达减少,细胞迁移、侵袭能力下降;同时发现敲低MALAT1表达后VHL蛋白表达增多,β-catenin蛋白表达减少。结论:MALAT1是OSCC生长侵袭的重要调节因素,可能通过VHL/β-catenin通路发挥调控作用。

槲皮素通过下调MALAT1抑制膝骨关节炎小鼠软骨损伤及软骨细胞凋亡的相关机制

目的探究槲皮素(quercetin,QUE)通过下调人肺腺癌转移相关转录本1(metastasis-associated lung adenocarcinoma transcript 1,MALAT1)抑制膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)小鼠软骨损伤及软骨细胞凋亡的相关机制。方法将雄性C57BL/6小鼠分为假手术组、OA组、OA+QUE组,每组各10只。采用内侧半月板失稳术(destabilization of medial meniscus,DMM)诱导膝OA模型,术后5周,小鼠膝关节腔内注射100μL 0.9%(质量分数)氯化钠注射液或QUE(8μmol/L),每周2次,共8周。术后13周,处死小鼠并采集膝关节,分别进行病理观察、Western blot或反转录定量聚合酶链反应检测。从健康雄性C57BL/6小鼠的膝关节软骨中分离软骨细胞,进行原代培养,分为空白组、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)组、QUE组、IL-1β+QUE组。IL-1β组用小鼠重组IL-1β处理24 h;QUE组用2~256μmol/L QUE作用48 h;IL-1β+QUE组先用IL-1β处理24 h,然后再用4、8、16μmol/L QUE作用;空白组不做任何特殊处理。噻唑兰(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)试剂检测细胞活力。结果与假手术组相比,OA组小鼠OARSI评分(4.50±1.08分vs.0.40±0.52分)、MALAT1 mRNA(1.47±0.06 vs.1.00±0.04)和核因子κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)mRNA(1.71±0.08 vs.1.00±0.03)以及白细胞介素6(interleukin 6,IL-6)、基质金属蛋白酶13(matrix metalloproteinase 13,MMP-13)、caspase-3蛋白表达水平显著升高,同时miR-9表达(0.78±0.03 vs.1.00±0.03)降低(P<0.05);相反地,OA+QUE组小鼠OARSI评分改善至2.40±1.26分,同时MALAT1、miR-9、NF-κB、IL-6、MMP-13和caspase-3表达较OA组被逆转(P<0.05)。miR-9存在与MALAT1和NF-κB结合的靶向互补序列,而且QUE可抑制MALAT1启动子的转录活性和相对mRNA表达水平。对于细胞实验,与空白组相比,IL-1β组miR-9表达降低(0.45±0.04 vs.1.00±0.03),NF-κB表达(1.52±0.08 vs.0.99±0.02)升高(P<0.05);而IL-1β+QUE组miR-9和NF-κB表达水平则以剂量依赖性方式较IL-1β组被反转(P<0.05)。结论通过QUE直接靶向MALAT1/miR-9/NF-κB轴可能是治疗KOA的一种新的治疗策略。

长链非编码RNA MALAT1调控Rac1b表达与结直肠癌侵袭和转移的关系

目的:探讨MALAT1调控Rac1b的表达与结直肠癌侵袭和转移的关系。方法:结直肠癌患者组织样本手术切除后30 min内于-80℃保存;实时荧光定量PCR检测肿瘤组织和配对正常组织中MALAT1和Rac1b mRNA的表达;RNA干扰沉默结直肠癌细胞MALAT1表达,通过Western blot检测Rac1b和上皮间质化标志物的表达,Ed U实验检测其对细胞增殖的影响;Transwell小室实验检测MALAT1低表达后对细胞迁移和侵袭的影响。结果:MALAT1在结直肠癌中低表达;干扰MALAT1表达后,Rac1b的表达升高,细胞增殖加快,且上皮间质化标志物E-cadherin和β-catenin表达升高。干扰MALAT1的表达可明显促进结直肠癌侵袭和细胞的迁移和侵袭。结论:MALAT1低表达与结直肠癌侵袭和转移密切相关,并且这一相关性是通过调控Rac1b的表达实现的。

缺氧预处理激活HIF-1α/MALAT1/VEGFA通路促进骨髓间充质干细胞生存和血管再生

背景:既往研究发现缺氧预处理能够提高骨髓间充质干细胞生存和改善其移植治疗效率,且此效应主要由缺氧诱导因子1α(hypoxia induced factor-1α,HIF-1α)介导,但下游机制未明。目的:体外观察缺氧预处理对骨髓间充质干细胞生存和血管再生能力的影响,探讨HIF-1α/MALAT1/VEGFA通路在其中的调控作用。方法:将体外培养的骨髓间充质干细胞分为缺氧实验组(体积分数为1%O2)和常氧对照组(体积分数为20%O2),培养24 h后检测细胞增殖、凋亡以及血管形成情况以及HIF-1α、MALAT1和VEGFA的表达;在此基础上,分别采用相应的siRNA抑制HIF-1α以及MALAT1的表达,以HIF-1αsiRNA scramble和MALAT1 siRNA scramble作为阴性对照,再进行缺氧预处理,检测并比较各组通路因子的表达变化。结果与结论:①与常氧对照组相比,缺氧实验组细胞生存力明显增强,凋亡比例显著减少,血管管腔样结构明显增多(P<0.01),HIF-1α、MALAT1和VEGFA的表达均明显增高(P<0.01);②在抑制HIF-1α的基础上进行缺氧预处理,MALAT1和VEGFA表达均明显下降(P<0.01);而抑制MALAT1后,VEGFA的表达亦显著降低(P<0.01);③结果表明,缺氧预处理能够通过激活HIF-1α/MALAT1/VEGFA通路促进骨髓间充质干细胞生存和血管再生。

类风湿性关节炎患者外周血单个核细胞MALAT1表达降低、 hsa-miR155-3p表达增加并参与Notch信号通路调节

目的观察类风湿性关节炎(RA)患者长链非编码RNA(lncRNA)转移相关肺腺癌转录本1(MALAT1)、hsa-miR155-3p表达及其与Notch信号通路关系,探讨RA可能发病机制。方法采取RA患者(RA组)、健康对照者(NC组)外周血,采用高通量基因测序筛选差异表达的lncRNA和mRNA。利用反转录PCR检测筛选的lncRNA MALAT1和hsa-miR155-3p及Notch信号通路受体配体表达。结果通过lncRNA测序分析发现,共有9158条差异表达的lncRNA。基因本体(GO)功能分类注释得出差异表达的mRNA参与免疫炎症反应、细胞转录调节等。通过通路(pathway)分析显示差异表达的mRNA与免疫炎症、应激、Notch通路等功能基因变化有关。经顺式(Cis)和反式(Trans)预测,Jagged1/2、Delta1/2、Notch1/2可能与RA发生密切相关。与NC组相比,RA组MALAT1降低,hsa-miR155-3p明显升高;Notch通路配体Delta1、Delta2、Jagged1、Jagged2及受体Notch1、Notch2表达升高。相关性分析显示,hsa-miR155-3p与MALAT1呈负相关,hsa-miR155-3p与Notch通路Delta1、Jagged1呈正相关,MALAT1与Jagged2呈负相关。结论RA患者lncRNA MALAT1降低、hsa-miR155-3p增加,共同调节Notch信号通路变化。

非小细胞肺癌患者血清中MALAT1表达水平及其临床意义

目的探讨肺腺癌转移相关转录因子1(MALAT1)在非小细胞肺癌(NSCLC)患者血清中的表达水平及其诊断价值。方法提取60例NSCLC患者、42例肺良性病变患者及50例健康人血清中的总RNA,用Taq Man实时荧光定量RT-PCR检测MALAT1基因的表达水平并分析其与NSCLC患者临床病理因素的关系,以受试者工作特征曲线(ROC)分析血清MALAT1的诊断效能。结果肺癌组血清MALAT1相对表达水平(0.51±0.09)低于肺良性病变组(0.80±0.12)及健康人对照组(1.01±0.30),差异有统计学意义(q分别为13.95、12.27,P<0.01);肺良性病变组血清MALAT1表达水平低于健康人对照组(q=10.24,P<0.01);腺癌患者血清MALAT1相对表达量(0.57±0.04)较鳞癌患者(0.45±0.07)明显增高(t=4.260,P<0.01),而与TNM分期、淋巴结转移和肿瘤分布部位无显著相关性(P>0.05);ROC曲线下面积(AUCROC)为0.956,当cut off值为0.62时,敏感性和特异性分别是87.5%和94.1%,诊断指数为181.6%。结论血清MALAT1检测效能好,可用于NSCLC的诊断及病理类型的鉴别。