影响棉籽粕KOH蛋白质溶解度的因素分析

试验旨在研究影响棉籽粕KOH蛋白质溶解度的因素。利用实验室优化方法和生产实际应用测定低温棉籽粕加工过程中影响物料KOH蛋白质溶解度的因素。结果发现,物料KOH蛋白质溶解度的主要损失在脱脂、脱酚、干燥、蒸脱阶段。在实验室优化的脱酚阶段,逆流萃取方法较浸泡法的溶解度更高,提取温度不能超过55℃,长期存放的脱酚液对物料KOH蛋白质溶解度更高。生产过程中在保证棉酚合格的情况下尽量增加新甲醇浓度和循环液浓度,可提高物料KOH蛋白质溶解度。在干燥阶段要适当提升1#-3#盘式烘干机烘干温度,减少有机溶剂对物料蛋白质变性的影响;蒸脱烘干阶段应当尽量降低直接蒸汽压力、蒸脱机四层温度,从而减少湿热蒸汽对物料KOH蛋白质溶解度的影响。随着储藏时间的增加,棉籽和棉胚的KOH蛋白质溶解度降低,但降低幅度不大。研究表明,选择新鲜的原料、采取逆流萃取的方法、严格控制溶剂萃取脱酚工艺参数可以得到较高的棉籽粕KOH蛋白质溶解度。

苦参总碱注射液的药动学的研究

目的 建立了兔血浆中苦参类生物碱的毛细管电泳分离测定法。方法 在血浆中加入内标西咪替丁后 ,用甲醇进行蛋白沉淀 ,高速离心后 ,直接进样测定。运行缓冲液为 0 .2mol·L-1Tris 4 0mmol·L-1磷酸二氢钠溶液 2 0 %异丙醇 ,用磷酸调pH至 5 .5 ,检测波长为 2 0 5nm。 结果 本测定方法的提取回率为 94 .6 4 %～ 98.78% ,对血浆中氧化槐果碱的最低检测浓度为 0 .2 μg·L-1,氧化苦参碱的最低检测浓度为 1.0 μg·L-1,氧化槐果碱和氧化苦参碱的线性范围分别为 0 .4 1～ 72 .5 μg·L-1和 1.95～ 2 6 8.5 μg·L-1,相关系数分别为 0 .9992和 0 .9994。兔静注 10 0mg·kg-1苦参总碱注射液后 ,用本法测定了兔血浆中氧化槐果碱和氧化苦参碱的浓度经时变化过程 ,并对其药动学参数进行估算。结论 用本法同时测定兔血浆中的氧化槐果碱和氧化苦参碱 ,结果满意 。

人血清中伊立替康的液质联用测定方法

目的 建立高效液相 质谱联用法 (LC MS)测定人血清中伊立替康 (CPT 11)的浓度。方法 液相 :采用WatersSymmetryC18色谱柱 (2 . 1mm× 15 0mm ,5 μm) ;流动相 :甲醇 -5mmol·L-1甲酸铵缓冲液 (38∶6 2 ) ;流速 :0 . 2mL·min-1。质谱 :电喷雾电离源(ESI+ ) ,选择性离子监测 (SIR)质荷比 (m/z)为 5. 87。以盐酸洛贝林为内标 ,采用乙腈沉淀蛋白 ,上清液经酸化后进样分析。结果 本方法在 10～ 10 0 0 0ng·mL-1内线性良好 ,相关系数r=0 996. 7(n =7)。高、中、低浓度质控样品的批内RSD均在 2 . 70 %～ 4 5. 8% ,批间RSD均在 2 . 74 %～ 5 . 82 % ,方法学回收率为 98. 2 1%～ 110 . 4 9% ,最低检测浓度为 0 . 2ng·mL-1。结论 本方法灵敏度高 ,操作简便易行 ,完全能满足体内低药物浓度的测定 ,可用于该药临床药物动力学特性的研究。

毕赤酵母表达系统研究进展

毕赤酵母是外源蛋白表达的一种重要宿主。毕赤酵母表达系统既具有原核表达系统操作简单、价格低廉、生产率高的优点,又具有真核表达系统能对表达后的蛋白折叠、糖基化和形成二硫键等翻译后进行加工和修饰的功能,因此毕赤酵母表达系统具有广泛的应用前景和重要的研究价值。本研究对毕赤酵母表达系统的特点、组成、影响外源基因高效表达的影响因素等进行总结。

苹果籽营养成分测定

苹果籽经皮仁分离,已醚提取,对其出仁率、粗脂肪含量、脂肪酸组成、蛋白质含量和淀粉含量进行了测定。结果表明,苹果籽出仁率为69.36%,籽仁含油率为28.9%,其中主要脂肪酸油酸和亚油酸的含量分别为33.6%和55.5%。籽仁中含蛋白质和淀粉分别为48.72%和5.01%。甲醇提取物含量为10.4%,定性试验表明其中很可能含有酚性的还原物质和糖甙等物质。

大鼠急性甲醇中毒大脑皮质单核细胞趋化蛋白-1蛋白的表达

目的观察大鼠急性甲醇中毒后单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)在大脑皮质的表达变化。方法应用通有混合气体(N2O/O2)的密闭有机玻璃箱并灌胃相应剂量甲醇溶液复制急性高剂量和低剂量甲醇中毒大鼠模型,运用Western Blot和免疫组化染色检测不同时间点大脑皮质中MCP-1的表达变化。结果 Western Blot显示急性甲醇中毒后低剂量组和高剂量组MCP-1蛋白表达在12 h明显升高(P<0.01),24 h达高峰,然后逐渐下降,3 d仍高于对照组(P<0.01)。高剂量组MCP-1蛋白表达在12 h和24 h高于低剂量组(P<0.05),3 d组MCP-1的表达无显著差异。免疫组化染色显示对照组大鼠大脑未见明显MCP-1阳性表达,急性甲醇中毒后,高剂量组24 h MCP-1阳性表达数增加,3 d达高峰,和对照组相比有显著差异(P<0.01),阳性表达多集中在梨状皮质,1周阳性反应减少,但与对照组相比仍有显著差异(P<0.01)。结论大鼠急性甲醇中毒后,脑组织MCP-1蛋白表达显著增高并持续一定时间,可能参与了脑组织病理变化过程,程度与甲醇中毒剂量有关。

甲醇固定导致绿色荧光蛋白的荧光消失

发现用甲醇固定转染了绿色荧光蛋白(GFP)基因的细胞会导致GFP的荧光消失,而当用聚甲醛固定时,GFP的荧光就没有失去。因此建议避免用甲醇对有GFP表达的细胞进行免疫组化前的固定。

HPLC-UV测定人血浆瑞芬太尼浓度

目的建立高效液相色谱-紫外检测法测定人血浆瑞芬太尼浓度。方法人血浆经甲醇沉淀蛋白后先用氯丁烷萃取,再将药物提取至0.01mol·L-1盐酸中。以HypersilCN(4.6mm×250mm,5μm)为固定相;0.02mol·L-1NaH2PO4水溶液-乙腈(70:30),内含三乙胺0.01%为流动相,流速1.5mL·min-1,紫外检测波长为210nm。结果标准曲线在1.0-100ng·mL-1内线性关系良好(r=0.9984)。3种不同浓度平均方法回收率为(113.18±12.26)%,提取回收率为(87.90±3.21)%,日内RSD和日间RSD分别小于10%,15%。结论本方法准确、灵敏、专一性好,适用于临床瑞芬太尼血药浓度检测和药动学研究。

发酵法开发甲醇蛋白的研究

通过大量实验从土壤中分离筛选出 1株同化甲醇能力较强的菌株 15 35 7,该菌能以甲醇作为碳源进行单细胞蛋白的发酵。甲醇蛋白得率为 41.5 %,粗蛋白含量为 80 .9%,各类氨基酸齐全 ,8种主要氨基酸含量丰富。毒性试验证明是一种安全的饲料添加剂 ,喂养蛋鸡应用试验表明 ,可代替鱼粉 。

煤矿甲烷生物转化生产高附加值产物的研究

中国煤矿甲烷的排放量较高,对环境和生态造成了严重影响。为了减少这些甲烷,提出采用生物方法将其转化,如甲烷氧化菌。甲烷氧化菌是自然界中氧化大气中甲烷最主要的微生物。就中国煤矿甲烷的排放和利用现状进行了简要介绍。重点阐述了甲烷氧化菌氧化甲烷的机理,并就目前利用甲烷氧化菌转化甲烷生产甲醇、聚羟基丁酸(PHB)和单细胞蛋白的研究现状和发展前景进行了介绍。

高效液相色谱法测定血浆中甲磺酸加替沙星的含量

目的 建立测定血浆中甲磺酸加替沙星浓度的高效液相色谱法。方法 待测血浆中加入内标环丙沙星后 ,以甲醇直接沉淀蛋白 ,进行高效液相荧光检测 ,色谱柱为ZorbaxSB C18,流动相为 0 .1mol·L-1磷酸盐缓冲液 甲醇 (6 8∶32 ) ,0 .1mol·L-1磷酸盐缓冲液中含有 0 .0 0 5mol·L-1离子对试剂氢氧化四丁基铵 (IPR A) ,pH值为 2 .35。流速 1.0mL·min-1,激发波长 2 95nm ,发射波长 4 95nm。结果 本测定方法的线形范围为 0 .0 6 2 5～ 1.0 0 0 0 μg·mL-1,r =0 .9990 ,日内、日间RSD均小于10 % ,回收率为 93.1%～ 94 .0 % ,血浆中甲磺酸加替沙星的最低检测限为 0 .0 313μg·mL-1。结论 本法精密、准确 ,适用于临床上血药浓度监测 ,人体药动学和生物利用度研究。

甲醇联合改性大豆蛋白胶黏剂的研究

以甲醇、十二烷基磺酸钠、尿素为原料,研究了它们对大豆分离蛋白改性后胶黏性的改观作用。结果表明:随着甲醇含量的增加胶合强度先增后减,当甲醇含量占总体质量分数15%时胶合强度最好。取该条件下的大豆蛋白胶黏剂进行有关反应次序的对比试验。研究表明其部分干态胶合强度略有下降,湿态胶合强度有提升,且反应次序为SDS、甲醇、尿素所得的胶黏剂胶合强度达到最优。DSC、SEM图像和IR图像分析结果说明经此方法改性后的蛋白质展现出更多的二级结构从而大幅度的提升了其胶粘性,与此同时改性后的大豆蛋白玻璃化转化温度降低,从而降低了热压温度,说明经甲醇联合改性后的大豆蛋白胶黏剂不但能更加适应规模化的工业生产还可以节约资源。

甲醇蛋白的生产及发展前景

分析和预测了甲醇蛋白的市场需求,介绍了甲醇蛋白的工业生产方法。在对引进ICI公司技术和设备建设甲醇蛋白装置进行效益分析的基础上,提出在我公司建一套20 kt/a甲醇蛋白装置的建议。

甲醇蛋白生产技术

论述我国生产甲醇蛋白的意义、生产方法、主要设备和建厂技术经济指标。

甲醇蛋白的生产方法及技术经济分析

论述了我国生产甲醇蛋白的意义,介绍了目前世界上甲醇蛋白的生产方法和主要设备,从原料消耗、能耗、基本投资、成本和价格方面对建设装置进行了技术经济分析。

甲醇蛋白纤维的结构与性能研究

利用扫描电镜和电子单纤维强力仪等对甲醇蛋白纤维的结构和性能进行研究,得出以下结论:甲醇蛋白纤维的特征峰与黏胶相近,蛋白质含量较少;截面结构与黏胶接近;结晶度小于黏胶;湿态断裂强度是干态下的78.18%;结节拉伸断裂强度为直接拉伸状态下的77.45%,钩接拉伸断裂强度为直接拉伸状态下的54.18%;抱合力较差;耐热性能良好.

甲醇蛋白生产技术

介绍我国生产甲醇蛋白的意义，目 前世界上主要的生产方法和设备，以及建装置的技术经济指标。

猪瘟病毒Erns蛋白在毕赤酵母中的表达及鉴定

为制备猪瘟病毒(CSFV)特异性诊断抗原,根据国内CSFV流行毒株的序列合成了其主要的保护性抗原Erns蛋白的基因序列,将合成的基因按设计的酶切位点与毕赤酵母表达载体pPIC9K连接,构建了重组表达质粒pPIC9K-Erns。用SalⅠ将重组表达质粒线性化后,转化GS115酵母菌。经筛选、鉴定,成功获得了表达CSFV的Erns蛋白的阳性重组酵母菌。该阳性重组酵母菌经甲醇诱导,在培养液上清中可检测到目的蛋白。Western-blot结果显示,该蛋白能特异识别CSFV抗体,且具有很好的反应原性。

甲醇细菌P_(8414)菌株的研究

从福建三明污水沟分离一株甲醇细菌P_(3414)菌株。该菌能生长在以甲醇为唯一碳源和能源的无机培养基中,不需要生长素或维生素。摇瓶 72 n干菌体得率达 0.359g/g甲醇。研究其培养条件:培养基、甲醇浓度、pH、碳源和氮源利用,并测得菌体含粗蛋白为75.1％、核酸为5.6％、总氨基酸为 53.6％。经鉴定该菌株为假单胞菌(Pseudomonas sp.),其DNA的G+C含量为69.8 mol％。

甲醇蛋白改性粘胶纤维的结构与性能

为提高粘胶纤维的附加值,利用甲醇蛋白与粘胶原液共混制备了甲醇蛋白改性粘胶纤维,并使用凯氏定氮仪、红外光谱仪、扫描电子显微镜、X射线衍射仪和纤维力学性能测试等手段研究了甲醇蛋白改性粘胶纤维性能与结构的关系。结果表明:与普通粘胶纤维相比,甲醇蛋白改性粘胶纤维的结晶度降低,截面异形度略有降低,锯齿型趋势减弱,光泽略有变暗,纤维断裂强度降低,断裂伸长也降低;由于甲醇蛋白的引入可赋予其蛋白纤维的特征,从纤维的红外图谱观察和纤维含氮量测试结果推测已经成功制得了甲醇蛋白改性粘胶纤维。