固相萃取-分光光度法测定人血浆中微量亚甲蓝

目的:建立固相萃取-分光光度法测定血浆微量亚甲蓝(MB)的方法。方法:利用丙酮沉淀血浆蛋白,硅胶G固相萃取纯化MB,分光光度法定量测定含量。结果:血浆中MB的回收率在20～100ng·mL^(-1)是96％～102％(RSD:2％～9％)。结论:本法可使血浆中MB得到很好的富集分离,萃取率较高且稳定。血浆试样的用量可以根据血药浓度的不同相应增减。方法简便,有较好的准确度和重现性,能够满足ng·mL^(-1)级血浆MB的分析需要。

病毒灭活血浆中亚甲蓝残留量超标原因的研究

目的探讨亚甲蓝光化学法病毒灭活后亚甲蓝残留量结果范围及其原因。方法采用固相萃取法,检测不同规格的病毒灭活血浆中亚甲蓝残留量,并分析亚甲蓝残留量超标的原因。结果统计分析不同规格病毒灭活血浆中亚甲蓝残留量,结果有差异。结论根据亚甲蓝残留量超标存在的原因采取相应措施,加强制备过程中关键控制点的监测,减少亚甲蓝残留量超标现象,保证输血安全。

用蒸馏水替代血浆溶解亚甲蓝进行质控的方法可行性探讨

目的按照《血站技术操作规程(2012版)》(以下简称《规程》)附录F.19方法对我站病毒灭活血浆亚甲蓝含量项目进行检测方法验证和用蒸馏水替代血浆溶解亚甲蓝进行质控的方法可行性探讨。方法分别检测含有已知浓度亚甲蓝的标准质控血浆固相萃取后比色、含有已知浓度亚甲蓝的水溶液固相萃取后同法比色和含有已知浓度亚甲蓝1%乙酸甲醇溶液同法直接比色,三组数据相比较,检验固相萃取操作对亚甲蓝萃取程度影响。结果与含有已知浓度亚甲蓝的1%乙酸甲醇溶液直接比色相比,含有等量亚甲蓝水溶液和含有同浓度亚甲蓝的血浆经过Waters Oasis HLB小柱固相萃取到1%乙酸甲醇溶液中,再用分光光度计比色结果相比,亚甲蓝萃取率回收率在92.9%以上,且线性度好。结论 1)固相萃取分光光度计法检测亚甲蓝方法具有良好亚甲蓝回收率和可重复性,作为病毒灭活血浆中亚甲蓝含量常规质控方法是有效可行的。2)同样浓度的亚甲蓝蒸馏水介质和在血浆介质中固相萃取后检测得到亚甲蓝含量值基本一致,表明在血浆缺乏时,可用蒸馏水或1%乙酸甲醇代替血浆做亚甲蓝释放含量检测。

亚甲蓝残留检测验证及在抗新型冠状病毒灭活血浆制备中的应用

目的:建立抗新型冠状病毒(SARS-CoV-2)灭活血浆亚甲蓝残留量的检测方法并用此法检测不同装量的灭活血浆中亚甲蓝残留量。方法:通过固相萃取小柱吸附血浆中亚甲蓝,使用UV-2550紫外分光光度计在654 nm处测定吸光度。测定标准对照血浆与病毒灭活血浆经固相萃取所得洗脱液的吸光度,依据两者的比值得出供试品的亚甲蓝残留量。验证该方法的线性范围、精密度、准确度、定量限等指标。对50,75,100 m L 3种分装规格使用本方法检测其亚甲蓝残留量,每种规格各11批。结果:建立了亚甲蓝残留检测方法,样品的检测浓度范围为0.01~0.05μmol·L-1。各项验证指标为线性(R值)=0.994 4,精密度7%,准确度在102%~110%,定量限为0.013μmol·L-1,定量检测实验CV <5%,验证指标均符合《中华人民共和国药典》2015版规定。各种规格血浆经灭活后,亚甲蓝残留均能在本方法的检测范围内,残留量均远低于标准(≤0.30μmol·L-1)。结论:通过验证得出此方法可用于以上不同规格的抗SARS-CoV-2病毒灭活血浆亚甲蓝残留量检测。