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乳腺癌组织中TIMP-3及DNMT1的表达与患者预后的相关性
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作者 于娇 李汉杰 +3 位作者 陈鑫 王青 葛鹏 李刚 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第17期3248-3253,共6页
目的:分析研究乳腺癌患者中基质金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP-3)及DNA甲基转移酶1(DNMT1)的表达水平与患者临床预后的相关性。方法:收集58例临床资料完整的乳腺癌手术切除标本,采用免疫组化SP法检测癌组织及相应癌旁组织中TIMP-3、DNMT... 目的:分析研究乳腺癌患者中基质金属蛋白酶组织抑制因子3(TIMP-3)及DNA甲基转移酶1(DNMT1)的表达水平与患者临床预后的相关性。方法:收集58例临床资料完整的乳腺癌手术切除标本,采用免疫组化SP法检测癌组织及相应癌旁组织中TIMP-3、DNMT1、ER、PR、HER-2、p53、Ki-67的表达,将TIMP-3、DNMT1表达水平与临床病理参数及随访生存状况进行相关性分析,所有入组患者均进行随访5年以上。结果:我们发现,在乳腺癌组织中,TIMP-3呈低表达,DNMT1呈高表达,TIMP-3及DNMT1的表达呈负相关;TIMP-3表达水平与Ki-67呈负相关,DNMT1表达水平与Ki-67呈正相关,与其他临床病理参数未见相关性。Cox风险比例模型分析显示只有临床分期和DNMT1表达水平是影响总生存期(OS)和无病生存期(DFS)的独立风险因素。TIMP-3低表达组的5年OS和DFS均显著低于高表达组,DNMT1高表达组的5年OS和DFS均显著低于低表达组。结论:研究表明乳腺癌中TIMP-3及DNMT1表达水平与肿瘤细胞恶性表型及患者生存时间有关,可能成为判断乳腺癌预后的一项重要指标,并作为治疗计划制定的依据。 展开更多
关键词 乳腺癌 基质金属蛋白酶组织抑制因子3 DNA甲基转移酶1 总生存期 无病生存期
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METTL3通过mRNA m6A甲基化促进类风湿关节炎滑膜成纤维细胞增殖、迁移及分泌炎症因子
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作者 李娟 蒋扬青 +3 位作者 沈瑞明 李国铨 王敏 徐逢皇 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第4期619-626,共8页
目的探讨甲基转移酶样3(METTL3)对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖、迁移及分泌炎症因子的作用及机制。方法本研究纳入类风湿关节炎及骨关节炎患者各25例,留取滑膜组织,分别用RT-qPCR及免疫组化法检测METTL3表达水平,ELISA检测RNA ... 目的探讨甲基转移酶样3(METTL3)对类风湿关节炎(RA)滑膜成纤维细胞增殖、迁移及分泌炎症因子的作用及机制。方法本研究纳入类风湿关节炎及骨关节炎患者各25例,留取滑膜组织,分别用RT-qPCR及免疫组化法检测METTL3表达水平,ELISA检测RNA m6A浓度;分离培养RA滑膜成纤维细胞,分为NC组、hi-METTL3(过表达METTL3)组、si-METTL3(敲低METTL3)组、STM2457(METTL3抑制剂)干预组,用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡、ELISA检测细胞培养上清液白介素-6(IL-6)、白介素-17A(IL-17A)、肿瘤坏死因子-κB活化受体配体(RANKL)、骨保护素(OPG)的浓度。结果与骨关节炎滑膜组织相比,RA滑膜组织RNA m6A表达显著增高(P<0.05),METTL3的表达显著增高(P<0.05)。过表达METTL3后,滑膜成纤维细胞m6A表达增加,细胞增殖、迁移能力显著提高,凋亡无明显变化,分泌细胞因子IL-6、RANKL显著增加,OPG显著减少(P<0.05)。干扰METTL3表达后,滑膜成纤维细胞m6A表达减少,细胞增殖、迁移显著减低,分泌细胞因子IL-6、RANKL显著降低,OPG显著增高(P<0.05);使用METTL3抑制剂STM2457干预后,滑膜成纤维细胞增殖、迁移显著减低,分泌细胞因子IL-6、RANKL显著降低,OPG显著增高(P<0.05);各组表达IL-17A无显著差异。结论METTL3可能通过RNA m6A甲基化修饰促进RA滑膜成纤维细胞增殖、迁移及促进IL-6、RANKL的表达,抑制OPG的表达。 展开更多
关键词 甲基转移酶样3 甲基化 类风湿关节炎 增殖 迁移 炎症因子
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METTL3调控miR-126介导TGF-β/Smad信号通路影响糖尿病肾病的机制研究
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作者 张静 任荣 帕提古丽·阿斯讨拜 《河北医学》 CAS 2024年第3期377-381,共5页
目的:建立糖尿病肾病(Diabetes Kidney Disease,DKD)大鼠模型,探讨METTL3调控糖尿病肾病的作用机制。方法:将SD大鼠适应性喂养7d后,按照随机数字法分为4组,正常对照组(Control组)、糖尿病肾病模型组(DKD组)、糖尿病肾病模型+METTL3干扰... 目的:建立糖尿病肾病(Diabetes Kidney Disease,DKD)大鼠模型,探讨METTL3调控糖尿病肾病的作用机制。方法:将SD大鼠适应性喂养7d后,按照随机数字法分为4组,正常对照组(Control组)、糖尿病肾病模型组(DKD组)、糖尿病肾病模型+METTL3干扰对照组(DKD+NC组)和糖尿病肾病模型+METTL3干扰组(DKD+siMETTL3组),每组8只。造模结束后收集大鼠血液标本及肾脏组织,采用全自动生化分析仪分析空腹血糖(Fasting blood glucose,FBG)、尿素氮(Blood urea nitrogen,BUN)、24h尿蛋白(Uridine triphosphate,UTP)的表达水平,RT-qPCR法检测miR-126的基因表达,ELISA检测TGF-β1的表达,Western blotting检测METTL3、smad2、smad3、smad7的蛋白水平。结果:与Control组相比,DKD组的FBG、BUN、UTP、TGF-β1、METTL3、smad2、smad3显著升高(P<0.05),体质量、miR-126、smad7显著降低(P<0.05);与DKD组比较,DKD+siMETTL3组的FBG、BUN、UTP、TGF-β1、METTL3、smad2、smad3显著降低(P<0.05),体质量、miR-126、smad7显著升高(P<0.05)。结论:METTL3可以通过调控miR-126及TGF-β/smad通路,介导DKD的进展。 展开更多
关键词 MIR-126 糖尿病肾病 甲基转移酶样3 TGF-Β/SMAD信号通路
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METTL3调控miR-126-5p对人肾小球系膜细胞焦亡的影响及机制研究
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作者 冯琦 徐超 布合力其·麦麦提 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第4期564-571,共8页
目的:研究甲基转移酶样蛋白3(METTL3)调控miR-126-5p对人肾小球系膜细胞(HRMC)焦亡的影响并探讨潜在机制。方法:将HRMC分为7组,即对照组、高糖处理组、pcD-null组、pcD-METTL3组、pcD-METTL3+miR-126-5p抑制剂(inhibitor)组、pcD-METTL3... 目的:研究甲基转移酶样蛋白3(METTL3)调控miR-126-5p对人肾小球系膜细胞(HRMC)焦亡的影响并探讨潜在机制。方法:将HRMC分为7组,即对照组、高糖处理组、pcD-null组、pcD-METTL3组、pcD-METTL3+miR-126-5p抑制剂(inhibitor)组、pcD-METTL3+inhibitor-NC组、pcD-METTL3+inhibitor+AKT抑制剂(AZD5363)组。用流式细胞仪检测细胞焦亡,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-126-5p表达,western blotting检测METTL3、Gasdermin D、NLRP3、磷酸化(p-)AKT、p-NF-κB表达。用RNA甲基化免疫沉淀技术(Me-RIP)测定miR-126-5p前体的m6A修饰水平。结果:与对照组比较较,高糖处理组细胞焦亡增多,miR-126-5p前体N6-甲基腺苷(m6A)修饰增加,p-AKT和p-NF-κB表达水平升高,METTL3和miR-126-5p表达水平降低(均P<0.05)。转染METTL3过表达载体后,高糖处理的细胞上述指标发生了显著逆转(均P<0.05)。而在过表达METTL3的基础上加入miR-126-5p inhibitor后,miR-126-5p表达下调,细胞焦亡增多,p-AKT、p-NF-κB表达上调(均P<0.05),但METTL3表达水平和miR-126-5p前体m6A修饰无显著变化(P>0.05)。在过表达METTL3的基础上加入AZD5363后,细胞焦亡减少(P<0.05),p-AKT、p-NF-κB表达下调,METTL3和miR-126-5p表达及miR-126-5p前体m6A修饰无显著改变(P>0.05)。结论:METTL3促进miR-126-5p的m6A甲基化,并通过抑制AKT/NF-κB信号通路减少高糖诱导的肾小球系膜细胞焦亡。 展开更多
关键词 METTL3 miR-126-5p N6-甲基腺苷 肾小球系膜细胞 细胞焦亡
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Bioinformatics Analysis on Histone H3-lys-4 Methyltransferase MLL3 被引量:1
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作者 尚明保 杨旬旬 +3 位作者 吴风瑞 丁彪 刘勇 李文雍 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2012年第3期512-516,550,共6页
[Objective] This study aimed to conduct bioinformatics analysis of histone H3-1ys-4 (H3K4) methyltransferase MLL3 in animals, thus exploring its relatively conservative evolution to reveal the role of histon H3K4 tr... [Objective] This study aimed to conduct bioinformatics analysis of histone H3-1ys-4 (H3K4) methyltransferase MLL3 in animals, thus exploring its relatively conservative evolution to reveal the role of histon H3K4 trimethyltransferase MLL3 in human cancers. [Method] By using bioinformatics method, gene structure, amino acid sequences, phylogenetic tree, chromosomal localization and synteny of mouse MLL3 were analyzed. [Result] Primary structure of the encoded mouse MLL3 protein con- tained seven zinc finger domains, an HMG-box (High mobility group-box protein), a FYRN (F/Y-rich N-terminus) domain, a FYRC (F/Yrich C-terminus) domain, a SET domain and a postSET domain. Results of sequence comparison and homology showed that 19 animal species in this study all had these structures basically, which indicated that these structures were relatively conserved in the evolution; specifically, the SET domain was highly conserved and was necessary to maintain the activity of histone methyltransferases. Results of phylogenetic analysis showed that the loca- tions of the 19 animal species in evolutionary tree were consistent with the taxo- nomic status. Results of synteny analysis showed that there were the same gene in the upstream and downstream of the mouse and human MLL3 gene which were located on different chromosomes, indicating that the mouse and human MLL3 gene had collinearity. [Conclusion] This study had revealed the primary structure of MLL3 nucleotide sequence and amino acid sequence, which had not only laid the foundation for the future research of high-level structure and function of MLL3 protein but also provided the basis for the follow-up study of primer design, promoter analysis, gene cloning and regulation patterns of localization and expression of mouse MLL3 gene. 展开更多
关键词 Histone methyltransferase MLL3 SET domain BIOINFORMATICS
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METTL3在同型半胱氨酸诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用
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作者 马凌桔 汪乐新 +7 位作者 迟宏扬 张竞文 彭红建 高春兰 姜怡邓 黄晖 杨力 马胜超 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第26期4221-4225,共5页
背景:高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)血症与胰岛β细胞功能密切相关,但其具体分子机制尚不完全明确。目的:探讨METTL3在Hcy诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用。方法:取第3,4代小鼠胰岛β细胞进行实验。①细胞模型建立和分组:对照组细... 背景:高同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)血症与胰岛β细胞功能密切相关,但其具体分子机制尚不完全明确。目的:探讨METTL3在Hcy诱导小鼠胰岛β细胞自噬中的作用。方法:取第3,4代小鼠胰岛β细胞进行实验。①细胞模型建立和分组:对照组细胞不加入Hcy,Hcy组细胞加入浓度为100µmol/L Hcy干预48h;②按Lipofectamine^(TM) 2000说明书将过表达质粒Ad-METTL3及si-METTL3转染小鼠胰岛β细胞,设计3种不同干扰片段,PCR验证、筛选出干扰效率最好的干扰片段;③转染后实验分组:对照组、Hcy组、Ad-NC(阴性对照)+Hcy组、Ad-METTL3+Hcy组、si-NC(阴性对照)+Hcy组和si-METTL3+Hcy组;④采用qRT-PCR及Western blot检测细胞中METTL3及细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ、p62的表达;ELISA法测定胰岛素水平来评价胰岛β细胞胰岛素分泌能力;分别过表达和干扰METTL3后检测细胞自噬相关蛋白及胰岛素水平。结果与结论:①与对照组相比,Hcy组自噬相关蛋白LC3Ⅱ/Ⅰ的表达水平升高(P<0.05),而p62表达明显降低(P<0.05),胰岛素分泌能力明显下降(P<0.05);②与对照组相比,Hcy组中METTL3蛋白及mRNA水平表达均降低(P<0.05);③胰岛β细胞中沉默METTL3后,Hcy进一步上调了细胞中LC3Ⅱ/Ⅰ的表达(P<0.05),而p62表达显著下降(P<0.05),细胞中胰岛素水平增加(P<0.05);过表达METTL3后,Hcy则使LC3Ⅱ/Ⅰ表达显著降低且p62表达则增高(P<0.05);④结论:METTL3参与了Hcy诱导的胰岛β细胞自噬调控,对胰岛素的分泌发挥着调控作用。 展开更多
关键词 N6-甲基腺苷甲基转移酶3 胰岛Β细胞 同型半胱氨酸 细胞自噬 LC3Ⅱ/Ⅰ
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DNMT3a在肺腺癌中的表达及癌细胞迁移的影响分析
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作者 蒋梦龙 郑丽云 +3 位作者 葛威 康宁宁 许峰 张仁泉 《安徽医学》 2024年第8期946-953,共8页
目的探讨DNA甲基转移酶3a(DNMT3a)在肺腺癌中的表达水平及影响肺腺癌细胞迁移的分子机制。方法回顾性分析2023年1~12月在安徽医科大学第一附属医院胸外科接受手术治疗的41例肺腺癌患者临床资料,使用IHC和蛋白质印迹实验(WB)检测并分析DN... 目的探讨DNA甲基转移酶3a(DNMT3a)在肺腺癌中的表达水平及影响肺腺癌细胞迁移的分子机制。方法回顾性分析2023年1~12月在安徽医科大学第一附属医院胸外科接受手术治疗的41例肺腺癌患者临床资料,使用IHC和蛋白质印迹实验(WB)检测并分析DNMT3a在41例患者肺腺癌组织及癌旁组织中的表达水平;通过分析TCGA数据库揭示DNMT3a与肺腺癌患者预后关系。慢病毒介导SK-LU-1和A549细胞系过表达或敲低DNMT3a,通过IHC、WB、实时荧光定量聚合链反应(qRT-PCR)、DNMT3a抑制剂实验观察DNMT3a对蜗牛家族转录因子(Snail)表达的影响;细胞划痕实验和Transwell细胞迁移实验检测过表达或敲低DNMT3a对肺腺癌细胞迁移的影响。结果DNMT3a高表达对比DNMT3a低表达的肺腺癌患者生存期较短,差异有统计学意义(P<0.01);DNMT3a和Snail在肺腺癌组织中较癌旁组织相比均高表达(P<0.01),且DNMT3a和Snail在肺腺癌组织中的表达呈正相关(r=0.612,P<0.01)。与对照组相比,过表达DNMT3a的SK-LU-1细胞中Snail表达上调并增加了肺腺癌细胞的迁移数量(P<0.01),敲低DNMT3a的A549细胞中Snail表达下调并减少了肺腺癌细胞的迁移数量(P<0.01)。结论DNMT3a在肺腺癌组织中高表达且与不良预后显著相关,DNMT3a通过上调Snail的表达促进肺腺癌细胞的迁移。 展开更多
关键词 肺腺癌 甲基化转移酶3a 蜗牛家族转录因子 迁移 上皮间质转化
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肺腺癌组织中METTL3蛋白表达水平及其与18 F-FDG最大标准摄取值的相关性
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作者 廖勇胜 赵志宏 +1 位作者 左志刚 黎林 《检验医学与临床》 CAS 2024年第15期2221-2225,共5页
目的探讨肺腺癌(LUAD)组织中甲基转移酶3(METTL3)蛋白表达水平及其与18 F-氟脱氧葡萄糖(18 F-FDG)最大标准摄取值(SUVmax)的相关性。方法回顾性分析2017年1月至2018年12月在该院进行肺部手术前接受18 F-FDG PET/CT扫描的所有LUAD患者资... 目的探讨肺腺癌(LUAD)组织中甲基转移酶3(METTL3)蛋白表达水平及其与18 F-氟脱氧葡萄糖(18 F-FDG)最大标准摄取值(SUVmax)的相关性。方法回顾性分析2017年1月至2018年12月在该院进行肺部手术前接受18 F-FDG PET/CT扫描的所有LUAD患者资料,共收集89例LUAD患者的肿瘤组织标本及其相匹配的30例癌旁组织标本。采用免疫组织化学染色法检测LUAD组织中METTL3蛋白表达水平。对所有患者随访1年,并进行生存分析。采用Spearman相关对METTL3蛋白表达评分与PET/CT参数的相关性进行分析。结果TCGA数据库癌症基因组图谱数据显示,483例LUAD组织中METTL3 mRNA表达水平明显高于59例正常肺组织,差异有统计学意义(P<0.05)。89例LUAD组织中METTL3蛋白阳性表达率为52.81%(47/89),与相匹配的30例癌旁组织比较,LUAD组织中METTL3蛋白阳性表达率(56.67%)明显高于癌旁组织(16.67%),差异有统计学意义(P<0.05)。不同肿瘤最大径、肿瘤分化程度和淋巴结转移LUAD患者肿瘤组织METTL3蛋白表达情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。与METTL3阴性组比较,METTL3阳性组SUVmax明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,LUAD患者METTL3蛋白表达评分与SUVmax呈明显正相关(r=0.667,P<0.001)。SUVmax预测METTL3阳性表达的受试者工作特征曲线下面积为0.851(95%CI:0.773~0.928),对应的最佳截断值为10.55,灵敏度和特异度分别为83.0%和73.8%。随访期间,METTL3蛋白阳性组较阴性组中位总生存期更短,且总生存率更低,差异有统计学意义(χ^(2)=9.726,P=0.002)。结论LUAD组织中METTL3有望成为新的病理诊断和预后标志物。LUAD组织中METTL3蛋白表达评分与18 F-FDG SUVmax呈正相关,18 F-FDG SUVmax可能是反映METTL3蛋白表达评分的无创检测工具。 展开更多
关键词 甲基转移酶3 肺腺癌 18 F-氟脱氧葡萄糖 原位癌
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老年带状疱疹急性期METTL3及Gal⁃3表达水平对带状疱疹后遗神经痛的预测价值 被引量:2
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作者 张玉林 方启帆 +2 位作者 赵永明 吴泽宇 杨颖 《实用老年医学》 CAS 2024年第4期348-352,共5页
目的研究老年带状疱疹(herpes zoster,HZ)病人急性期外周血甲基转移酶样因子3(METTL3)及半乳糖凝集素3(Gal-3)的表达情况,并探讨其预测带状疱疹后遗神经痛(postherpetic neuralgia,PHN)的价值。方法选取我院2019年1月至2022年1月诊治的... 目的研究老年带状疱疹(herpes zoster,HZ)病人急性期外周血甲基转移酶样因子3(METTL3)及半乳糖凝集素3(Gal-3)的表达情况,并探讨其预测带状疱疹后遗神经痛(postherpetic neuralgia,PHN)的价值。方法选取我院2019年1月至2022年1月诊治的190例老年HZ病人为研究对象,另选取50例健康体检的老年人为对照组,检测受试对象外周血METTL3 mRNA及血清Gal-3蛋白表达水平并进行比较分析。根据HZ病人是否发生PHN分为PHN组(n=44)和无PHN组(NPHN组)(n=146),采用Logistic回归分析PHN的相关因素,绘制ROC曲线评估METTL3 mRNA及Gal-3蛋白表达水平对PHN的预测价值。结果HZ病人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中METTL3 mRNA相对表达量低于对照组,血清Gal-3蛋白水平高于对照组,差异具有统计学意义(均P<0.05)。老年PHN病人METTL3 mRNA表达水平与VAS评分呈负相关(r=-0.612,P<0.05),血清Gal-3蛋白水平与VAS评分呈正相关(r=0.604,P<0.05)。Logistic回归分析结果显示,病程(OR=1.756,95%CI:1.253~2.460)、Gal-3蛋白(OR=1.318,95%CI:1.025~1.693)是影响老年PHN发生的风险因素,METTL3 mRNA(OR=0.742,95%CI:0.581~0.948)是保护因素。METTL3 mRNA及Gal-3蛋白联合预测老年PHN的曲线下面积为0.924(95%CI:0.843~0.958),高于单项检测0.812(0.774~0.861)、0.859(0.811~0.897),差异具有统计学意义(Z=4.312、3.363,均P<0.05)。结论老年急性期HZ病人外周血PBMC中METTL3 mRNA表达降低,血清Gal-3蛋白表达升高,两者联合对老年PHN的发生具有较高的预测价值。 展开更多
关键词 老年人 带状疱疹 带状疱疹后遗神经痛 甲基转移酶样因子3 半乳糖凝集素3 预测价值
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N^(6)-甲基腺苷(m6A)转移酶METTL3和m6A调控LINC01465在肝细胞癌增殖转移中的作用机制
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作者 刘肸琳 龙朴泽 +1 位作者 黄云美 罗春英 《遵义医科大学学报》 2024年第2期135-144,共10页
目的探讨甲基转移酶样3(METTL3)在肝癌细胞中调控m6A水平,影响长链非编码(lncRNA)LINC01465的表达,促进肝癌细胞增殖转移的机制。方法利用人类癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析METTL3在肝癌组织和正常肝组织中的表达差异及与患者预后的关... 目的探讨甲基转移酶样3(METTL3)在肝癌细胞中调控m6A水平,影响长链非编码(lncRNA)LINC01465的表达,促进肝癌细胞增殖转移的机制。方法利用人类癌症基因组图谱(TCGA)数据库分析METTL3在肝癌组织和正常肝组织中的表达差异及与患者预后的关系;用Western blot、RT-qPCR分析验证METTL3在细胞、组织中的表达;用m6A比色法验证肝癌细胞及正常肝细胞中的m6A水平;敲低METTL3后进行CCK-8、克隆形成、Transwell迁移、侵袭实验,研究METTL3对肝癌增殖转移的调控作用;转录组RNA m6A甲基化测序确定METTL3的下游调控基因LINC01465。RT-qPCR验证沉默METTL3后LINC01465的表达量,以及LINC01465在肝细胞癌中的表达水平。结果METTL3在肝癌组织和细胞中明显高表达且与患者预后较差相关;高表达的METTL3促进HCC细胞增殖、迁移和侵袭;METTL3影响LINC01465的m6A水平及其表达量来促进肝细胞癌的发展进程。结论METTL3可通过m6A依赖的方式来影响LINC01465的表达水平,促进肝癌细胞增殖转移,METTL3可能成为肝癌预后及治疗的靶向标志物。 展开更多
关键词 甲基转移酶样3 m6A甲基化 LINC01465 肝细胞癌
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METTL3调控miR-301a促进缺氧环境下内皮集落形成细胞血管生成
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作者 蒋丽花 陈翌 黄旋平 《广西医科大学学报》 CAS 2024年第6期841-848,共8页
目的:探讨缺氧环境对内皮集落形成细胞(ECFCs)血管生成能力的影响及甲基转移酶样3(METTL3)的调控作用。方法:分离、培养犬外周血ECFCs。实验分为正常对照组与缺氧实验组。缺氧实验组分别使用含50μmol/L、100μmol/L和200μmol/L氯化钴(... 目的:探讨缺氧环境对内皮集落形成细胞(ECFCs)血管生成能力的影响及甲基转移酶样3(METTL3)的调控作用。方法:分离、培养犬外周血ECFCs。实验分为正常对照组与缺氧实验组。缺氧实验组分别使用含50μmol/L、100μmol/L和200μmol/L氯化钴(CoCl_(2))的培养基处理细胞24 h,对照组CoCl_(2)浓度为0。CCK-8检测不同浓度CoCl_(2)对ECFCs增殖的影响,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)的表达,筛选适宜浓度的CoCl_(2)用于缺氧环境构建。Transwell实验和管形成实验分别检测ECFCs迁移和血管生成能力。RT-qPCR和western blotting检测血管内皮生长因子(VEGF)、CD31、METTL3、miR-301a的表达情况。构建沉默METTL3慢病毒转染ECFCs,将ECFCs分为NC-shRNA组和METTL3-shRNA组。RT-qPCR和western blotting检测ECFCs细胞中VEGF、CD31、METTL3、miR-301a表达水平的变化。结果:与正常对照组比较,50μmol/L和100μmol/L的CoCl_(2)培养ECFCs 24 h后可促进细胞增殖(均P<0.0001),HIF-1α随着CoCl_(2)浓度升高而高表达(P<0.01)。100μmol/L CoCl_(2)组中ECFCs迁移能力和血管生成能力提高(均P<0.01),VEGF、CD31、METTL3、miR-301a mRNA水平表达升高(均P<0.01),VEGF、CD31、METTL3蛋白表达升高(均P<0.01)。与NC-shRNA组比较,METTL3-shRNA组中VEGF、CD31、METTL3、miR-301a mRNA表达降低(均P<0.05),VEGF、CD31、METTL3蛋白表达降低(均P<0.05)。结论:适宜的缺氧干预可提高ECFCs增殖、迁移和血管生成能力,METTL3/miR-301a轴可能参与调控血管生成。 展开更多
关键词 缺氧 内皮集落形成细胞 血管生成 甲基转移酶样3
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Influence of DNA methyltransferase 3b on FHIT expression and DNA methylation of the FHIT promoter region in hepatoma SMMC-7721 cells 被引量:1
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作者 Wang, Jia-Xiang Zhang, Yong-Gan Zhao, Long-Shuan 《Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International》 SCIE CAS 2009年第3期273-277,共5页
BACKGROUND: Alterations in DNA methylation occur during the pathogenesis of human tumors. In this study, we investigated the influence of DNA methyltransferase 3b (DNMT3b) on fragile histidine trial (FHIT) expression ... BACKGROUND: Alterations in DNA methylation occur during the pathogenesis of human tumors. In this study, we investigated the influence of DNA methyltransferase 3b (DNMT3b) on fragile histidine trial (FHIT) expression and on DNA methylation of the FHIT promoter region in the hepatoma cell line SMMC-7721. METHODS: DNMT3b siRNA was used to down-regulate DNMT3b expression. DNMT3b and FHIT proteins were determined by Western blotting. Methylation-specific PCR was used to analyze the methylation status of the FHIT gene. RESULTS: After DNMT3b siRNA transfection, the expression of DNMT3b was inhibited in SMMC-7721 cells, and the expression of FHIT was significantly higher than that in the control group. There was no significant difference in methylation status between the DNMT3b siRNA transfected cells and control cells. CONCLUSION: DNMT3b may play an important role in regulation of FHIT expression in hepatoma SMMC-7721 cells, but not through methylation of the FHIT promoter. (Hepatobiliary Pancreat Dis Int 2009; 8: 273-277) 展开更多
关键词 liver neoplasms DNA methyltransferase 3b fragile histidine trial METHYLATION gene expression
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结直肠癌组织中METTL3、miR-23a-3p表达与病理参数及术后肝转移的关系
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作者 王广月 周林妍 《新疆医科大学学报》 CAS 2024年第5期729-733,739,共6页
目的探讨结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)组织中甲基转移样酶3(Methyltransferase-like protein 3,METTL3)、微小核糖核酸-23a-3p(miRNA-23a-3p,miR-23a-3p)表达与病理参数及CRC术后肝转移的关系。方法选取2018年3月至2021年6月中国医... 目的探讨结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)组织中甲基转移样酶3(Methyltransferase-like protein 3,METTL3)、微小核糖核酸-23a-3p(miRNA-23a-3p,miR-23a-3p)表达与病理参数及CRC术后肝转移的关系。方法选取2018年3月至2021年6月中国医科大学附属盛京医院收治的145例CRC患者,患者均进行CRC根治术,术中取患者CRC组织及癌旁组织样本,采用荧光定量聚合酶链反应法检测METTL3 mRNA、miR-23a-3p水平,分析不同病理参数的CRC组织METTL3 mRNA、miR-23a-3p表达情况。收集患者临床病理资料,采用Cox比例风险模型对预后因素进行单变量和多变量分析。术后随访2年,统计患者术后肝转移发生情况,并采用受试者工作特征(Receiver operating characteristic,ROC)曲线分析血清METTL3 mRNA、miR-23a-3p对CRC术后肝转移的预测价值。结果CRC组织中METTL3 mRNA、miR-23a-3p水平均高于癌旁组织(P<0.05);国际抗癌联盟肿瘤通用分期(Tumor node metastasis,TNM)Ⅲ期CRC患者METTL3 mRNA水平高于Ⅱ期,低分化CRC患者METTL3 mRNA水平高于中-高分化(P<0.05);TNMⅢ期CRC患者miR-23a-3p水平高于Ⅱ期,发生淋巴转移CRC患者METTL3 mRNA水平高于未发生淋巴转移CRC患者(P<0.05);单因素及多因素Cox分析显示,TNM分期Ⅲ期、低分化、淋巴转移、METTL3 mRNA及miR-23a-3p高水平是CRC术后肝转移的独立危险因素(P<0.05);ROC分析结果显示,血清METTL3 mRNA、miR-23a-3p单独及联合预测CRC术后肝转移的曲线下面积(Area under the curve,AUC)分别为0.748(0.669~0.816)、0.778(0.701~0.842)、0.882(0.818~0.930),二者联合检测预测CRC术后肝转移的效能高于单独检测(Z=2.387、2.027,P均<0.05)。结论CRC组织中METTL3、miR-23a-3p表达均异常升高,METTL3与TNM分期、分化程度相关,miR-23a-3p与TNM分期、淋巴转移相关,METTL3、miR-23a-3p联合对预测CRC术后肝转移具有更高价值。 展开更多
关键词 直肠癌 甲基转移样酶3 微小核糖核酸-23a-3p 病理参数 术后肝转移 预测
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石榴花水提物调节AHR/BNIP3改善糖尿病小鼠肝脏胰岛素信号 被引量:1
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作者 叶雨萌 荣雨 +2 位作者 李包娟 周克春 张䶮之 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第7期320-327,共8页
目的:探讨石榴花水提物(pomegranate flower water extract,PFW)对2型糖尿病小鼠肝脏胰岛素信号传导的影响及机制。方法:将C57BL/6J随机分为正常组、模型组、二甲双胍组(Met)、石榴花水提物低剂量组(PFWL)和石榴花水提物高剂量组(PFWH)... 目的:探讨石榴花水提物(pomegranate flower water extract,PFW)对2型糖尿病小鼠肝脏胰岛素信号传导的影响及机制。方法:将C57BL/6J随机分为正常组、模型组、二甲双胍组(Met)、石榴花水提物低剂量组(PFWL)和石榴花水提物高剂量组(PFWH)。连续给药11周后,称小鼠体质量,检测空腹血糖(FBG)、胰岛素(INS)、甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)的含量,计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR);苏木素-伊红(HE)染色观察肝组织病理变化;Western blot法检测肝组织中胰岛素受体底物1(IRS1)、p-IRS1(Ser307)、蛋白激酶B(AKT)、p-AKT(Ser473)、糖原合成酶激酶-3β(Gsk3β)、p-Gsk3β(S9)、芳香烃受体(AhR)、磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶(PEMT)、Bcl-2/腺病毒E1B-19kDa相互作用蛋白3(BNIP3)蛋白表达。结果:与模型组比较,PFWH组FBG、INS、HOMA-IR、TG和TC含量极显著降低(P<0.01);PFWH组小鼠肝细胞内脂肪滴明显减少;PFWH组极显著升高肝脏中IRS1、p-AKT(Ser473)/AKT、p-Gsk3β(S9)/Gsk3β、BNIP3蛋白表达(P<0.01),极显著降低p-IRS1(Ser307)/IRS1、AHR、PEMT蛋白表达(P<0.01)。结论:PFW可能通过调节AHR/BNIP3抑制肝脏脂质沉积,改善p-IRS1(Ser307)/p-AKT(Ser473)/p-GSK3β(S9)胰岛素信号通路转导。 展开更多
关键词 石榴花水取物 胰岛素信号通路 芳香烃受体 Bcl-2/腺病毒E1B-19kDa相互作用蛋白3 磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶
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组蛋白甲基化转移酶SMYD3在肺癌中的研究进展
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作者 宋志鑫 王晓玲 +4 位作者 孟粤 朱殷栋 祁菁菁 黄沁琳 刘军 《南通大学学报(医学版)》 2024年第5期479-482,共4页
组蛋白甲基化转移酶SET和MYND结构域蛋白3(SET and MYND domain-containing protein 3,SMYD3)是催化组蛋白和非组蛋白底物甲基化的酶,在许多生物学环境中发挥关键作用,如肌肉发育和部分癌症的进展。本综述对SMYD3进行相关的基本介绍,并... 组蛋白甲基化转移酶SET和MYND结构域蛋白3(SET and MYND domain-containing protein 3,SMYD3)是催化组蛋白和非组蛋白底物甲基化的酶,在许多生物学环境中发挥关键作用,如肌肉发育和部分癌症的进展。本综述对SMYD3进行相关的基本介绍,并探讨SMYD3在肺癌中的研究,旨在为SMYD3在肺癌中的进一步研究提供依据。 展开更多
关键词 肺癌 组蛋白赖氨酸甲基化转移酶 SET和MYND结构域蛋白3 肿瘤微环境 免疫逃逸
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METTL3及其在胃癌发生发展及治疗中作用的研究进展
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作者 尉戎戎 付兆媛 +2 位作者 苏海霞 高永泽 赫子娇 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第20期4010-4014,共5页
N6-甲基腺苷(N6-methyladensine,m6A)修饰在细胞分化、免疫和肿瘤发生发展中具有重要作用,也是近几年表观转录组学的研究热点。甲基转移酶3(methyltransferase-like 3,METTL3)是m6A甲基转移酶复合体(methyltransferase complex,MTC)中... N6-甲基腺苷(N6-methyladensine,m6A)修饰在细胞分化、免疫和肿瘤发生发展中具有重要作用,也是近几年表观转录组学的研究热点。甲基转移酶3(methyltransferase-like 3,METTL3)是m6A甲基转移酶复合体(methyltransferase complex,MTC)中的唯一催化亚基,其介导的m6A修饰在胃癌(gastric cancer,GC)发生发展中起着重要作用,因此可能成为新的肿瘤表观遗传调节剂。该文系统总结METTL3的结构基础、生物学功能,并阐述了METTL3在胃癌中的致癌功能及其潜在分子机制,以期为胃癌的治疗提供新的思路及方案。 展开更多
关键词 甲基转移酶样3 N6-甲基腺苷修饰 表观遗传修饰 胃癌
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m6A甲基转移酶样蛋白3在溃疡性结肠炎病人结肠组织中的表达及意义
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作者 张娟 李清 刘飞燕 《蚌埠医学院学报》 CAS 2024年第10期1349-1353,共5页
目的:探讨m6A甲基转移酶样蛋白3(METTL3)在溃疡性结肠炎(UC)病人结肠组织中的表达及其临床意义。方法:纳入UC病人100例作为研究对象,依据Mayo评分方法判定病情活动度:轻度活动期30例,中度活动期34例,重度活动期36例。根据预后情况分为... 目的:探讨m6A甲基转移酶样蛋白3(METTL3)在溃疡性结肠炎(UC)病人结肠组织中的表达及其临床意义。方法:纳入UC病人100例作为研究对象,依据Mayo评分方法判定病情活动度:轻度活动期30例,中度活动期34例,重度活动期36例。根据预后情况分为不良预后组(56例)和预后良好组(44例)。另以同期结肠息肉病人60例为对照组。通过qRT-PCR法检测UC病人及对照组结肠黏膜METTL3 mRNA的表达,采用免疫组织化学法检测UC病人METTL3蛋白水平。比较UC不同严重程度病人METTL3 mRNA及蛋白表达变化,分析其与UC严重程度及预后的关系;受试者工作特征(ROC)曲线评价METTL3 mRNA对UC预后的预测效能;Cox回归分析影响UC预后不良的相关因素。结果:研究组病人结肠黏膜METTL3 mRNA水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。与轻度活动期相比较,中度活动期与重度活动期病人结肠黏膜METTL3 mRNA水平以及阳性率显著升高(P<0.05);与中度活动期相比较,重度活动期病人结肠黏膜METTL3 mRNA水平以及阳性率显著升高(P<0.05)。预后不良组病人Mayo评分、METTL3 mRNA水平、METTL3阳性表达率及CRP均显著高于预后良好组(P<0.05~P<0.01)。Spearman相关性分析结果显示,研究组病人METTL3 mRNA与Mayo评分呈正相关关系(r=0.540,P<0.05)。ROC结果显示,METTL3 mRNA诊断病人预后的曲线下面积为0.882(95%CI:0.813~0.951),灵敏度为82.10%,特异度为86.40%。Cox回归分析显示,Mayo评分、METTL3 mRNA水平升高是UC病人发生不良预后的独立危险因素(P<0.05)。结论:UC病人METTL3水平与预后有关,其高水平可提示病人预后不良。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 m6A甲基转移酶样蛋白3 结肠组织
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RNA甲基转移酶METTL3在急性髓系白血病发生发展及耐药中的研究进展
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作者 杨晶晶 张夏玮 +1 位作者 栾松华 窦立萍 《解放军医学院学报》 CAS 2024年第5期567-570,F0003,共5页
急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)是成人最常见的血液系统恶性肿瘤,其广泛的基因组变化和分子突变为药物的开发提供了潜在靶点。目前靶向治疗药物及免疫治疗无法替代传统的“3+7”方案。30%~40%的初治AML患者对于传统蒽环类... 急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)是成人最常见的血液系统恶性肿瘤,其广泛的基因组变化和分子突变为药物的开发提供了潜在靶点。目前靶向治疗药物及免疫治疗无法替代传统的“3+7”方案。30%~40%的初治AML患者对于传统蒽环类方案原发耐药,治疗效果极差,是AML治疗及研究领域的重大难题。甲基转移酶样3(methyltransferaselike 3,METTL3)作为重要的甲基转移酶在调节AML发生发展及耐药中具有重要意义。本文总结了METTL3在AML发生发展及耐药中的作用及其在抗白血病治疗中的潜力,以期为克服AML的耐药及复发提供新思路及潜在治疗靶点。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 RNA甲基化 N6-甲基腺苷 甲基转移酶样3 耐药
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AS3MT基因多态性与癫痫患儿临床特征、治疗效果的关系
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作者 戴锦 刘巧美 周进芳 《联勤军事医学》 CAS 2024年第2期144-148,共5页
目的探讨亚砷酸甲基转移酶([Arsenic(+3 oxidation state)methyltransferase,AS3MT])基因多态性与癫痫患儿临床特征、治疗效果的关系。方法将2019-07/2022-07月作者医院收治的164例癫痫患儿作为癫痫组,同时选取210例健康儿童作为健康组... 目的探讨亚砷酸甲基转移酶([Arsenic(+3 oxidation state)methyltransferase,AS3MT])基因多态性与癫痫患儿临床特征、治疗效果的关系。方法将2019-07/2022-07月作者医院收治的164例癫痫患儿作为癫痫组,同时选取210例健康儿童作为健康组。癫痫组规律接受6个月及以上丙戊酸钠治疗,根据治疗效果不同分为有效组(n=129)和无效组(n=35)。采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)技术鉴定AS3MT rs7085104基因分型;采用Hardy-Weinberg遗传平衡度检验进行样本代表性评估;采用单因素及多因素Logistic回归分析探讨影响癫痫患儿治疗效果的因素。结果健康组与癫痫组AS3MT rs7085104 AA、GA、GG三种基因型均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律(P>0.05)。癫痫组AS3MT rs7085104 AA、GA、GG基因型频率分别为31.10%、48.17%、20.73%,健康组AA、GA、GG基因型频率分别为15.71%、38.10%、46.19%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。癫痫每月发作频率>3次、有出生窒息史、有热性惊厥史患儿AS3MT rs7085104 AA、GA基因型分布频率分别高于癫痫每月发作频率≤3次、无出生窒息史、无热性惊厥史患儿,而GG基因型分布频率分别低于癫痫每月发作频率≤3次、无出生窒息史、无热性惊厥史患儿(P<0.05)。有效组AS3MT rs7085104 AA、GA、GG基因型频率分别为24.81%、52.71%、22.48%,无效组AA、GA、GG基因型频率分别为54.29%、31.43%、14.28%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,癫痫每月发作频率>3次[OR=2.776,95%置信区间(confidence interval,CI):1.751~4.440]、有热性惊厥史(OR=2.375,95%CI:1.555~3.627)、AS3MT rs7085104 GA基因型(GA vs.AA,OR=0.397,95%CI:0.257~0.612)、AS3MT rs7085104 GG基因型(GG vs.AA,OR=0.322,95%CI:0.200~0.518)是癫痫患儿治疗无效的影响因素(P<0.05)。结论AS3MT rs7085104基因多态性与癫痫患儿每月发作频率、出生窒息史、热性惊厥史有关,同时影响丙戊酸钠的治疗效果,且携带AA基因型患儿的治疗效果更差。 展开更多
关键词 亚砷酸甲基转移酶 基因多态性 癫痫 丙戊酸钠 疗效
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METTL3介导的PDK1 mRNA m^(6)A修饰通过Akt/mTOR信号通路促进肺上皮细胞增殖
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作者 靳艾 李梦宇 孙青竹 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期934-946,共13页
腺苷N6-位点甲基化(m^(6)A)在细胞增殖过程中发挥重要作用。RNA甲基转移酶3(METTL3)作为催化m^(6)A关键酶,其介导m^(6)A修饰在肺上皮细胞增殖中的作用机制尚不明确。本研究旨在探讨METTL3介导m^(6)A修饰调控肺上皮细胞增殖的效应及机制... 腺苷N6-位点甲基化(m^(6)A)在细胞增殖过程中发挥重要作用。RNA甲基转移酶3(METTL3)作为催化m^(6)A关键酶,其介导m^(6)A修饰在肺上皮细胞增殖中的作用机制尚不明确。本研究旨在探讨METTL3介导m^(6)A修饰调控肺上皮细胞增殖的效应及机制。结果显示,在肺上皮细胞中敲低METTL 3显著抑制细胞生长,而过表达METTL3则促进了细胞增殖(P<0.05)。进一步的蛋白质免疫印迹结果显示,细胞生长和增殖的关键蛋白质PCNA在METTL 3敲降的肺上皮细胞中蛋白质水平的表达显著下调,并且Akt以及mTOR的磷酸化水平显著降低(P<0.05)。细胞免疫荧光结果发现,METTL 3敲降的肺上皮细胞中m^(6)A修饰水平显著降低(P<0.05)。实时荧光定量PCR及蛋白质免疫印迹结果表明,Akt-mTOR信号通路上游调控分子PDK1的mRNA和蛋白质表达水平在METTL 3敲降的肺上皮细胞中显著下降(P<0.05)。机制上,m^(6)A-IP-qPCR和RIP-qPCR结果进一步表明,METTL3催化PDK 1 mRNA的3′UTR区域m^(6)A修饰,进而被YTH N6-甲基腺苷RNA结合蛋白1(YTHDF1)识别,增强其mRNA的稳定性。总之,本研究揭示了METTL3通过增强PDK1 m^(6)A修饰,进而激活Akt-mTOR信号通路,促进细胞增殖。本研究为METTL3在上皮细胞增殖中的新角色提供了证据,同时为治疗肺上皮细胞损伤修复提供了新的治疗靶点。 展开更多
关键词 甲基转移酶3 RNA m^(6)A修饰 细胞增殖 肺上皮细胞 磷酸肌醇依赖性蛋白激酶-1
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