加入脾氨肽口服液培养的人肺癌细胞系A549增殖凋亡及线粒体膜电位、活性氧簇表达观察

目的观察脾氨肽口服液对人肺癌细胞系A549增殖凋亡迁移是否有影响,并进一步探讨脾氨肽口服液的可能作用机制。方法取对数生长期A549细胞,随机分为四组,1、2、3组分别在含10%胎牛血清的DMEM培养基中加入0.5、1.0及2.0 mg/mL脾氨肽口服液,4组不做任何处理,观察细胞的增殖、凋亡及迁移情况,检测各组细胞线粒体膜电位及活性氧簇(ROS)。结果与4组比较,培养24 h时1、2、3组细胞的细胞活力低,各时间点2、3组细胞的细胞汇合度低、相对划痕区域密度小;培养24 h时1、2、3组细胞的细胞凋亡率高,线粒体膜电位低,培养24 h时2、3组细胞的ROS相对表达量高(P均<0.05)。随脾氨肽口服液浓度上升,A549细胞活力逐渐下降、细胞汇合度降低、细胞凋亡率升高、相对划痕区域密度降低、线粒体膜电位下降,ROS相对表达量升高,且呈剂量依赖性(P均<0.05)。结论脾氨肽口服液可抑制A549细胞的增殖迁移,促进细胞凋亡,其中2.0 mg/mL的脾氨肽口服液作用更明显。脾氨肽口服液可能通过降低细胞线粒体膜电位、促进细胞ROS表达抑制A549细胞的增殖迁移、促进细胞凋亡。

通心络干预心肌微血管内皮细胞条件培养液对心肌细胞的保护作用

目的观察心肌微血管内皮细胞条件培养液对心肌细胞的影响及通心络的干预作用。方法制备3种心肌微血管内皮细胞条件培养液:正常内皮细胞条件培养液(N-CM),同型半胱氨酸诱导损伤的心肌微血管内皮细胞条件培养液(H-CM)和通心络干预的心肌微血管内皮细胞条件培养液(T-CM)。将心肌细胞随机分为4组:正常对照组、N-CM组、T-CM组及H-CM组,采用相应培养液培养。倒置显微镜观察心肌细胞形态,酶联免疫吸附法检测细胞上清液心肌肌钙蛋白T(cTnT)含量,JC-1试剂盒测定细胞中线粒体膜电位(MMP),Western blot法检测细胞色素C(Cyt C)和钙网蛋白(CRT)蛋白表达。结果与正常对照组比较,N-CM组细胞形态无明显变化,细胞上清液cTnT含量、MMP水平、CRT及Cyt C蛋白表达无明显变化(P>0.05);与N-CM组比较,H-CM组细胞皱缩,细胞边缘模糊,有大量坏死细胞漂浮,细胞上清液cTnT含量、CRT及Cyt C蛋白表达升高,MMP水平降低(P<0.01);与H-CM组比较,T-CM组细胞无明显皱缩,细胞边缘较清楚,坏死漂浮细胞减少,细胞上清液cTnT含量、CRT及Cyt C蛋白表达降低,MMP水平升高(P<0.05,P<0.01)。结论受损心肌微血管内皮细胞的条件培养液可损伤心肌细胞,其损伤机制可能与CRT介导的线粒体功能受损有关,通心络可抑制该损伤过程。