miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p表达在急性脑梗死患者诊疗中的价值研究

目的 探讨miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p表达在急性脑梗死(ACI)患者诊疗中的应用价值。方法 选取2020年1月至2022年12月南通市第三人民医院全科医学科收治的ACI患者100例作为研究对象,定义为ACI组,根据ACI患者3个月改良Rankin评分量表(mRS评分)将其分为预后良好组(mRS评分≤2分)68例与预后不良组(mRS>2分)32例,另选同期于南通市第三人民医院全科医学科体检的健康者100例作为对照组。记录各组miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p表达水平并进行比较,采用Pearson相关分析探讨两变量的相关性,通过绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p联合检测在ACI诊断中的效能,采用多因素Logistic回归分析探讨ACI预后的危险因素。结果 ACI组平均年龄、吸烟史比例、合并高血压比例、miR-140-3p与miR-128-3p及miR-27-3p表达水平均明显高于对照组(均P<0.05)。miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p联合检测用于诊断ACI的曲线下面积(AUC值)为0.965,敏感度为99.00%,特异度为98.00%,表明miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p联合检测用于诊断ACI的效能更高。预后不良组平均年龄、入院时NIHSS评分、梗死体积、吸烟史比例、合并高血压比例、miR-27-3p、miR-128-3p、miR-140-3p表达水平及3个月mRS评分均明显高于预后良好组(均P<0.05)。经Pearson相关分析表明ACI患者miR-27-3p、miR-128-3p、miR-140-3p表达水平均分别与入院时NIHSS评分、梗死体积、3个月mRS评分呈正相关(均P<0.05)。经多因素Logistic回归分析表明年龄(OR:1.546;95%CI:1.124~1.969)、入院时NIHSS评分(OR:1.721;95%CI:1.229~2.308)、梗死体积(OR:1.853;95%CI:1.436~2.786)、吸烟史(OR:1.517;95%CI:1.168~1.825)、miR-27-3p (OR:2.481;95%CI:1.452~3.201)、miR-128-3p (OR:1.692;95%CI:1.288-2.431)及miR-140-3p (OR:2.032;95%CI:1.141~1.976)均为ACI患者预后的独立危险因素(均P<0.05)。结论 ACI患者miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p表达水平均明显升高,通过三指标联合检测可提高对ACI的诊断效能,而预后不良ACI患者miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p表达水平则升高更为明显,并分别与入院时NIHSS评分、梗死体积、3个月mRS评分呈正相关,且miR-27-3p、miR-128-3p及miR-140-3p均为ACI患者预后的独立危险因素,应予以重点关注。

LncRNA HCG18通过靶向miR-140-3p/PD-L1通路对鼻咽癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨长非编码(lncRNA)HCG18通过微小RNA-140-3p(miR-140-3p)/程序性死亡受体配体1(PD-L1)对鼻咽癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法 选择人鼻咽癌CNE2细胞、人正常鼻黏膜上皮细胞HNEpC细胞,将CNE2细胞分为HCG18组、pcDNA3.1组、sh-HCG18组、sh-NC组、miR-140-3p组、miR-NC组、miR-140-3p inhibitor组、Scramble组、HCG18+miR-NC组、HCG18+miR-140-3p组、miR-140-3p inhibitor+sh-NC组及miR-140-3p inhibitor+sh-PD-L1组。用CCK-8检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭及迁移能力,Western blot检测PD-L1蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测lncRNA HCG18、miR-140-3p及PD-L1 mRNA水平,生物信息学、双荧光素酶报告实验分析lncRNA HCG18、miR-140-3p及PD-L1的靶向关系。结果 CNE2细胞lncRNA HCG18、PD-L1蛋白及其mRNA表达水平高于HNEpC细胞,miR-140-3p表达水平低于HNEpC细胞(P <0.05)。上调lncRNA HCG18或下调miR-140-3p后CNE2细胞增殖、细胞迁移与侵袭能力增强,PD-L1蛋白、PD-L1 mRNA水平升高(P <0.05);下调lncRNA HCG18或上调miR-140-3p后CNE2细胞增殖、细胞迁移与侵袭能力降低,PD-L1蛋白、PD-L1 mRNA水平降低(P <0.05)。miR-140-3p与lncRNA HCG18、PD-L1均有靶向关系。上调miR-140-3p表达可逆转上调lncRNA HCG18对CNE2细胞增殖、迁移与侵袭的促进作用;沉默PD-L1可逆转下调miR-140-3p对CNE2细胞增殖、迁移与侵袭的促进作用。结论 过表达lncRNA HCG18可通过海绵化miR-140-3p,上调PD-L1表达,促进CNE2细胞增殖、迁移与侵袭。

miR-140-3p在大鳞副泥鳅雌雄性腺中的差异表达和调控功能的研究

miR-140-3p是在不同物种性腺组织中广泛表达的一种miRNA。本研究利用qRT-PCR方法检测miR-140-3p在大鳞副泥鳅性腺中的雌雄表达差异并预测其生物学功能。结果显示:miR-140-3p在大鳞副泥鳅雌雄鱼的性腺组织中均有表达,且精巢中的表达量显著高于卵巢(P<0.01);KEGG pathway分析表明,靶基因CPEB4和GDF9参与卵母细胞成熟分化过程,富集在与性腺发育、繁殖功能相关的孕激素介导卵母细胞成熟通路、卵母细胞减数分裂通路、卵巢类固醇生成通路。荧光定量结果显示CPEB4和GDF9在卵巢中表达量显著高于精巢(P<0.01),且表达量与miR-140-3p的表达呈显著负相关,说明miR-140-3p和CPEB4、GDF9具有潜在的靶标关系。这为进一步探索miR-140-3p在鱼类性腺发育和繁殖过程中的作用奠定了基础。

LncRNA PSMA3-AS1调节miR-140-3p/DDX5轴对肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化的影响

目的探讨长链非编码RNA人蛋白酶体α亚基3型的反义RNA1(PSMA3-AS1)调节miR-140-3p/DEAD box p68 RNA解旋酶(DDX5)轴对肺癌细胞增殖、凋亡和上皮间质转化(EMT)的影响。方法qRT-PCR、Western blot、免疫组化法分别检测40例肺癌组织和细胞系中PSMA3-AS1、miR-140-3p、DDX5表达。将A549细胞分为:control组、si-NC组、si-PSMA3-AS1组、si-PSMA3-AS1+inhibitor-NC组、si-PSMA3-AS1+miR-140-3p inhibitor组,qRT-PCR检测转染效率;MTT法、流式细胞仪、Transwell小室分别检测细胞增殖、凋亡、迁移与侵袭;Western blot方法检测增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、波形蛋白(vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)及DDX5蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p与PSMA3-AS1和DDX5的关系;构建肺癌裸鼠模型,分为si-NC、si-PSMA3-AS1组,测量肿瘤质量与体积,qRT-PCR检测移植瘤组织中miR-140-3p表达,免疫组化法检测移植瘤组织Ki-67、DDX5蛋白表达。结果在肺癌组织/细胞系中,PSMA3-AS1 mRNA、DDX5蛋白表达升高,miR-140-3p mRNA表达水平降低(P<0.05);敲低PSMA3-AS1表达可显著抑制A549细胞增殖、迁移与侵袭,降低PCNA、MMP-2、vimentin、DDX蛋白表达,促进miR-140-3p、Bax、E-cadherin表达及细胞凋亡(P<0.05);下调miR-140-3p,可减弱敲低PSMA3-AS1对A549细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用及对细胞凋亡的促进作用(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实miR-140-3p与PSMA3-AS1、miR-140-3p与DDX5存在靶向调控关系(P<0.05);体内实验显示,抑制PSMA3-AS1表达可显著降低移植瘤质量和体积,降低Ki-67、DDX5表达水平,升高miR-140-3p表达(P<0.05)。结论敲低PSMA3-AS可能通过调节miR-140-3p/DDX5轴,抑制肺癌细胞的增殖和EMT,促进细胞凋亡。

2型糖尿病患者血清miR-140-3p和EGR1水平与肠道菌群的关系研究

目的 探究2型糖尿病(T2DM)患者血清微小RNA-140-3p(miR-140-3p)和早期生长反应因子1(EGR1)水平与肠道菌群的关系。方法 回顾性选取2021年3月至2022年12月在青岛大学附属青岛市中心医院就诊治疗的125例T2DM患者作为T2DM组,另选取同期体检健康者100名作为对照组。采用实时荧光定量PCR测定血清miR-140-3p、EGR1 mRNA水平,比较对照组与T2DM组的一般资料以及血清miR-140-3p、EGR1 mRNA水平;采用Pearson分析T2DM患者血清miR-140-3p、EGR1 mRNA水平与肠道菌水平的相关性。结果 与对照组比较,T2DM组的体重指数、腰围、空腹血糖、空腹胰岛素、胰岛素抵抗指数、甘油三酯、总胆固醇均显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。T2DM组血清miR-140-3p较对照组均显著下调,血清EGR1 mRNA水平显著上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,T2DM组乳酸杆菌、拟杆菌水平均显著减少,T2DM组双歧杆菌、肠杆菌、肠球菌、酵母菌水平均显著增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,T2DM患者血清miR-140-3p水平与乳酸杆菌、拟杆菌水平均呈正相关(P<0.05),与双歧杆菌、肠杆菌、肠球菌、酵母菌水平均呈负相关(P<0.05);T2DM患者血清EGR1 mRNA水平与乳酸杆菌、拟杆菌水平均呈负相关(P<0.05),与双歧杆菌、肠杆菌、肠球菌、酵母菌水平均呈正相关(P<0.05)。结论 T2DM患者血清miR-140-3p表达水平显著下调,EGR1表达水平显著上调,且与患者肠道菌水平具有一定相关性。

沉默circ_0000218靶向miR-140-3p影响皮肤鳞状细胞癌细胞恶性生物学行为

目的探讨circ_0000218对皮肤鳞状细胞癌(cSCC)细胞恶性生物学行为的影响及可能机制。方法收集21例cSCC组织和21例正常皮肤组织,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测组织中circ_0000218和微小RNA-140-3p(miR-140-3p)表达。体外培养cSCC SCL-1细胞,分别转染si-circ_0000218、miR-140-3p mimics、共转染si-circ_0000218与anti-miR-140-3p后,采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法和克隆形成实验检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,划痕实验检测细胞迁移,蛋白质印迹法(Western blotting)检测细胞中活化的胱天蛋白酶-3(Cleaved caspase-3)蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证circ_0000218和miR-140-3p调控关系。结果cSCC组织中circ_0000218表达量高于正常皮肤组织(P<0.05),而miR-140-3p表达量低于正常皮肤组织(P<0.05);转染si-circ_0000218或miR-140-3p mimics后,cSCC SCL-1细胞光密度(OD)值、集落形成数及划痕愈合率降低(P<0.05),而凋亡率和细胞中Cleaved caspase-3蛋白表达量升高(P<0.05)。circ_0000218靶向负调控miR-140-3p。与转染si-circ_0000218的SCL-1细胞比较,共转染si-circ_0000218与anti-miR-140-3p的SCL-1细胞OD值、集落形成数及划痕愈合率升高(P<0.05),而凋亡率和细胞中Cleaved caspase-3蛋白表达量降低(P<0.05)。结论circ_0000218在cSCC组织中呈高表达,其可能通过靶向抑制miR-140-3p促进cSCC细胞增殖和迁移,而阻碍细胞凋亡,有可能成为cSCC治疗的分子靶点。

miR-140-3p靶向AGT5调控鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移及自噬研究

目的探讨miR-140-3p对鼻咽癌细胞增殖、侵袭、迁移和自噬的影响及其与自噬相关基因5(AGT5)的靶向关系。方法选择人鼻咽癌细胞CNE2细胞、人鼻黏膜上皮细胞HNEpC,根据转染不同质粒分为miR-140-3p组(转染miR-140-3p mimic质粒)、si-miR-140-3p组(转染miR-140-3p inhibitor质粒)、miR-空白对照(NC)组(转染miR-140-3p mimic空载体)、NC组(转染miR-140-3p inhibitor空载体)、si-miR-140-3p+OE组(转染miR-140-3p inhibitor质粒、过表达AGT5空载体)及si-miR-140-3p+AGT5组(转染miR-140-3p inhibitor质粒、过表达-AGT5质粒)。CCK-8实验检测细胞增殖能力,Transwell实验检测细胞侵袭、迁移能力,荧光定量聚合酶链式反应(RT-PCR)检测细胞AGT5 mRNA及miR-106b-5p表达水平,Western blot检测细胞微管关联蛋白轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)、微管关联蛋白轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、AGT5、自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)及p62蛋白表达水平,TargetScan在线网站预测miR-140-3p与AGT5结合位点,双荧光素酶报告基因实验验证miR-140-3p与AGT5的靶向关系。结果CNE2细胞miR-140-3p、AGT5蛋白及AGT5 mRNA表达水平明显低于HNEpC细胞(0.21±0.03 vs 0.87±0.11、0.21±0.06 vs 0.87±0.12、0.32±0.05 vs0.74±0.08)(P<0.01)。上调miR-140-3p的CNE2细胞增殖、侵袭及迁移能力降低,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、AGT5蛋白表达水平升高,p62蛋白表达水平降低(P<0.01);下调miR-140-3p的CNE2细胞增殖、侵袭及迁移能力升高,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin1、AGT5蛋白表达水平降低,p62蛋白表达水平升高(P<0.01)。上调AGT5可逆转敲低miR-140-3p对CNE2细胞增殖、侵袭、迁移的促进作用及自噬的抑制作用。miR-140-3p与AGT5具有靶向调控关系。结论miR-140-3p对CNE2细胞增殖、侵袭、迁移具有抑制作用,对自噬具有促进作用,机制可能与正性调控AGT5有关。

LncRNA TUG1调节miR-140-3p对胆管癌细胞生物学行为的影响

目的:探讨长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(LncRNA TUG1)对胆管癌细胞生物学行为的影响及作用机制。方法:q RT-PCR检测人胆管癌细胞系LncRNA TUG1与mi R-140-3p表达,筛选最佳干预细胞。在胆管癌细胞QBC939中抑制LncRNA TUG1表达或同时抑制LncRNA TUG1与mi R-140-3p表达,分别检测QBC939细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及相关蛋白表达。双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA TUG1与mi R-140-3p的靶向关系。结果:LncRNA TUG1在胆管癌细胞表达水平升高,选择QBC939细胞进行后续实验;抑制LncRNA TUG1表达可显著抑制QBC939细胞增殖、迁移与侵袭,促进细胞凋亡,并显著降低PCNA、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平,升高Caspase-3蛋白表达水平(P<0.05);双荧光素酶报告基因实验结果证实LncRNA TUG1可靶向调控mi R-140-3p表达;抑制mi R-140-3p表达可逆转抑制LncRNA TUG1表达对QBC939细胞的作用。结论:LncRNA TUG1在胆管癌细胞上调表达,抑制LncRNA TUG1表达可靶向上调mi R-140-3p表达,抑制胆管癌细胞增殖、迁移及侵袭,促进细胞凋亡。

血清中miR-140-3p、miR-192-5p、miR-223-3p联合检测对早期鼻咽癌的诊断价值

目的探讨血清中miR-140-3p、miR-192-5p、miR-223-3p联合检测对早期鼻咽癌的诊断价值。方法纳入收治的早期鼻咽癌患者90例为研究组,鼻咽炎患者90例为炎症组、90例健康体检者为对照组。检测3组血清中miR-140-3p、miR-192-5p、miR-223-3p的表达水平。用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve,ROC)的AUC分析血清中miR-140-3p、miR-192-5p、miR-223-3p检测在早期鼻咽癌中的诊断意义。结果研究组、炎症组、对照组血清中miR-140-3p、miR-192-5p、miR-223-3p的表达水平具有显著差异(P<0.05)。血清中miR-140-3p、miR-192-5p、miR-223-3p单项检测研究组与炎症组的灵敏度为91%、89%、98%,特异度分别为90%、90%、94%。血清中miR-140-3p、miR-192-5p、miR-223-3p单项检测研究组与对照组的灵敏度为96%、94%、95%,特异度均为95%。血清中miR-140-3p、miR-192-5p、miR-223-3p联合检测对早期鼻咽癌的诊断灵敏度为94.44%,特异度为93.89%,准确度为94.07%。结论血清中miR-140-3p、miR-192-5p、miR-223-3p的表达水平检测可作为早期鼻咽癌的潜在标志。

冠心病病人血清lncRNA TUG1和miR-140-3p水平与血清炎性因子、斑块稳定性指标的相关性

目的:探讨冠心病病人长链非编码RNA牛磺酸上调基因1(lncRNA TUG1)、微小RNA-140-3p(miR-140-3p)与血清炎性因子、斑块稳定性指标的关系。方法:选取我院收治的140例冠心病病人为研究对象,其中稳定型心绞痛(SAP)病人(SAP组)68例,不稳定型心绞痛(UAP)病人(UAP组)72例,同期选取66名健康体检者作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测血清lncRNA TUG1、miR-140-3p水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清炎性因子白介素(IL)-6、IL-1β、IL-18、C-反应蛋白(CRP)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)及斑块稳定性指标正五聚素-3(PTX3)、脂蛋白相关磷脂酶-A2(Lp-PLA2)、成纤维细胞生长因子-23(FGF23)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平,采用彩色多普勒超声诊断仪测量内膜中层厚度(IMT);采用Pearson相关分析法分析冠心病病人血清lncRNA TUG1、miR-140-3p水平与炎性因子、斑块稳定性指标的相关性。结果:UAP组血清lncRNA TUG1及IL-6、CRP、TNF-α、IL-1β、IL-18、sICAM-1、IMT、PTX3、Lp-PLA2、FGF23、MMP-9水平高于SAP组和对照组,miR-140-3p水平低于SAP组和对照组(P<0.05);SAP组血清lncRNA TUG1及IL-6、CRP、TNF-α、IL-1β、IL-18、sICAM-1、IMT、PTX3、Lp-PLA2、FGF23、MMP-9水平高于对照组,miR-140-3p水平低于对照组(P<0.05)。SAP、UAP病人血清lncRNA TUG1与miR-140-3p水平均呈负相关(r值分别为-0.522,-0.586,P<0.001),且炎性因子IL-6、CRP、TNF-α、IL-1β、IL-18、sICAM-1及斑块稳定性指标IMT、PTX3、Lp-PLA2、FGF23、MMP-9与lncRNA TUG1均呈正相关(P<0.001),与miR-140-3p均呈负相关(P<0.001)。结论:冠心病病人血清lncRNA TUG1水平升高,miR-140-3p水平下降,且二者与炎性因子、斑块稳定性指标均有一定的相关性。

胃癌患者癌组织和血清外泌体中LncRNA CCAT1、miR-140-3p表达及其临床意义

目的观察胃癌患者癌组织和血清外泌体中LncRNA结肠癌相关转录因子1(CCAT1)、微小核糖核酸-140-3p(miR-140-3p)表达情况并分析其临床意义。方法选取93例行胃癌根治术的胃癌患者为胃癌组,47例胃部良性病变患者为良性病变组,47例健康体检者为健康对照组。采集所有研究对象静脉血,提取血清外泌体,于胃癌患者行胃癌根治术过程中留取患者肿瘤组织样本及癌旁组织样本,采用RT-qPCR法检测血清外泌体及胃癌、癌旁组织中的LncRNA CCAT1、miR-140-3p。对胃癌患者随访5年,记录患者生存时间并计算5年生存率。采用Pearson相关分析法分析患者癌组织及血清外泌体中LncRNA CCAT1与miR-140-3p的相关性;比较不同病理特征胃癌患者癌组织及血清外泌体LncRNA CCAT1、miR-140-3p表达,以胃癌患者癌组织LncRNA CCAT1、miR-140-3p表达的平均值为界限,将患者分为高、低LncRNA CCAT1、miR-140-3p者,采用K-M生存曲线比较高、低LncRNA CCAT1、miR-140-3p患者5年总生存率;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清外泌体LncRNA CCAT1、miR-140-3p对胃癌的诊断价值。结果患者胃癌组织LncRNA CCAT1表达高于癌旁组织,miR-140-3p表达低于癌旁组织(P均<0.05)。血清外泌体LncRNA CCAT1表达健康对照组<良性病变组<胃癌组,miR-140-3p表达健康对照组>良性病变组>胃癌组(P均<0.05)。Pearson相关分析显示,胃癌患者癌组织及血清外泌体中LncRNA CCAT1表达与miR-140-3p表达均呈负相关(r分别为-0.726、-0.639,P均<0.05)。不同肿瘤分化程度、浸润深度、临床分期及淋巴结转移情况的胃癌患者癌组织及血清外泌体中LncRNA CCAT1、miR-140-3p表达比较差异具有统计学意义(P均<0.05)。癌组织及血清外泌体LncRNA CCAT1高表达的胃癌患者5年总生存率低于LncRNA CCAT1低表达患者,miR-140-3p高表达的胃癌患者5年总生存率高于miR-140-3p低表达患者(P均<0.01)。ROC分析结果显示,血清外泌体LncRNA CCAT1、miR-140-3p预测胃癌的曲线下面积(AUC)分别为0.712、0.766,两者联合诊断胃癌的AUC为0.845。结论胃癌患者癌组织及血清外泌体中LncRNA CCAT1表达上调、miR-140-3p表达下调,其表达与患者肿瘤分化程度、浸润深度、临床分期及淋巴结转移情况及预后有关,血清外泌体LncRNA CCAT1、miR-140-3p联合对胃癌具有较高的诊断价值。

miR-140-3p靶向调控KMT5B对老年牙髓干细胞成牙本质分化的影响及机制

目的 分析微小RNA(miR)-140-3p靶向调控甲基转移酶(KMT)5B对老年牙髓干细胞成牙本质分化的影响及机制。方法 采用实时荧光定量法进行鉴定miR-140-3p、KMT5B表达量,通过倒置显微镜对矿化结节情况进行观察,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖情况,通过Western印迹对成牙关键转录因子Runt相关转录因子(RUNX)2、牙本质涎磷蛋白(DSPP)、骨桥蛋白(OPN)、P21、细胞周期蛋白(Cyclin)D1相对表达量进行检测。结果 与未分化牙髓干细胞对比,分化牙髓干细胞miR-140-3p表达量显著升高,KMT5B表达量显著降低(P<0.05)。与si-NC组相比,si-miR-140-3p组miR-140-3p表达显著降低(P<0.05),表明干扰miR-140-3p的牙髓干细胞株构建成功,与si-NC组相比,si-miR-140-3p组矿化结节相对数量、Runx2蛋白、DSPP蛋白、OPN蛋白、OD值、CyclinD1显著降低,P21显著升高(P<0.05)。与KMT5B-NC组相比,KMT5B组KMT5B表达量升高(P<0.05),表明上调KMT5B的牙髓干细胞构建成功,与KMT5B-NC组相比,KMT5B组矿化结节相对数量、Runx2蛋白、DSPP蛋白、OPN蛋白、OD值、CyclinD1显著降低,P21显著升高(P<0.05)。双荧光素酶报告试验显示,与KMT5B-NC组相比,KMT5B可使WT-miR-140-3p荧光素酶活性显著降低(P<0.05),对MUT-miR-140-3p荧光素酶活性影响较小(P>0.05)。与si-NC组相比,抑制miR-140-3p表达可使牙髓干细胞中KMT5B表达显著升高(P<0.05),与si-miR-140-3p+anti-KMT5B-NC组相比,si-miR-140-3p+anti-KMT5B组矿化结节相对数量、Runx2蛋白、DSPP蛋白、OPN蛋白、OD值、CyclinD1显著升高,P21显著降低(P<0.05)。结论 干扰miR-140-3p可通过靶向调控KMT5B表达,促进牙髓干细胞成牙本质分化及增殖。

circFAM73A靶向调控miR-140-3p对高糖诱导人视网膜血管内皮细胞凋亡、迁移和炎症因子释放的影响

目的:探讨circFAM73A靶向调控miR-140-3p对高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞凋亡、迁移和炎症因子释放的影响及作用机制。方法:将人视网膜血管内皮细胞分别采用5.5 mmol/L葡萄糖(NG组)或25 mmol/L葡萄糖(HG组)处理,在HG组分别转染si-circRNA FAM73A和miR-140-3p inhibitors后,RT-qPCR检测circRNA FAM73A、miR-140-3p、TNF-α和IL-6表达水平;流式细胞术和Western blot分别检测细胞凋亡情况和凋亡相关分子Cleaved caspase 3的表达水平;Transwell检测细胞迁移情况;双荧光素酶报告实验与RIP检测circRNA FAM73A和miR-140-3p的靶向结合情况。结果:circFAM73A的表达水平在高糖处理人视网膜血管内皮细胞后显著升高,miR-140-3p的表达水平显著下降(均P<0.05);沉默circFAM73A能够显著抑制高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞凋亡、迁移、炎症因子TNF-α和IL-6的释放(均P<0.05);低表达miR-140-3p能够显著促进高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞凋亡、迁移、炎症因子TNF-α和IL-6的释放(均P<0.05);双荧光素酶报告和RIP实验证实circRNA FAM73A能够靶向结合miR-140-3p;共转染si-circRNA FAM73A和miR-140-3p inhibitors能够显著减弱低表达miR-140-3p对人视网膜血管内皮细胞凋亡、迁移和炎症因子释放的作用(均P<0.05)。结论:沉默circFAM73A能够通过靶向结合miR-140-3p抑制高糖诱导的人视网膜血管内皮细胞凋亡、迁移和炎症因子释放。

MicroRNA-22-3p在食管鳞状细胞癌中的表达及临床意义

目的探讨MicroRNA-22-3p(miR-22-3p)在食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)组织中的表达情况,并分析miR-22-3p与食管鳞状细胞癌临床病理特征、预后之间的关系。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应法(qPCR)检测miR-22-3p在77例ESCC组织和癌旁正常组织中的表达差异及其与食管鳞状细胞癌的临床病理特征、预后的相关性。结果 miR-22-3p不同程度高表达36.4%(28/77),正常表达20.8%(16/77),低表达42.8%(33/77)。miR-22-3p相对高表达的患者无病生存期较非高表达患者长(P<0.05),但miR-22-3p的表达水平与临床病理特征(性别、年龄、肿瘤位置、分化程度、浸润程度、淋巴结转移、TNM分期、肿瘤家族史、吸烟和饮酒)之间均无相关性(P>0.05)。结论 miR-22-3p在食管癌的发生发展中起着抑癌因子的作用,其高表达能延长食管癌患者的生存时间。

miR-140-3p调节非小细胞肺癌细胞功能的研究

目的:探讨调控miR-140-3p表达对非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)细胞株A549和NCI-H1299细胞行为的影响。方法:体外培养A549和NCI-H1299细胞,转染miR-140-3p mimic(过表达)或miR-140-3p inhibitor(抑制表达),通过EdU检测细胞增殖率,通过Transwell及划痕实验检测细胞迁移能力,通过生物信息学工具预测miR-140-3p的潜在靶基因,通过生物信息学软件构建基因调控网络。结果:过表达miR-140-3p后,A549和NCI-H1299细胞的增殖率升高,迁移能力下降;相反,抑制miR-140-3p的表达后,细胞的增殖率较低,但迁移能力提高。生物信息学分析结合实时定量反转录聚合酶链式反应验证提示,miR-140-3p可能靶向CBL基因,影响细胞生物学过程。结论:miR-140-3p对NSCLC细胞具有促进细胞增殖和抑制细胞迁移的作用。

LncRNA XIST通过调控miR-140-3p/PD-L1轴促进弥漫大B细胞淋巴瘤细胞的增殖与迁移

目的探讨LncRNA X失活特异性转录本(XIST)通过miR-140-3p/程序性死亡配体-1(PD-L1)轴对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、迁移的影响。方法以2015年至2017年期间我科室收治的40例DLBCL患者的淋巴结活检组织标本,以及人DLBCL细胞系OCI-LY19、SU-DHL-4、U2932为研究对象,qRT-PCR检测XIST表达,分析XIST表达与DLBCL患者临床病理特征的关系;利用LipofectamineTM2000转染试剂对U2932细胞进行转染,分组为:空白组、miR-NC组、miR-140-3p mim⁃ics组、OE-NC组、OE-XIST组、OE-PD-L1组、OE-XIST+miR-NC组、OE-XIST+miR-140-3p mimics组、OE-XIST+si-NC组、OEXIST+si-PD-L1组,qRT-PCR检测各组细胞中miR-140-3p及XIST表达水平;MTT法检测各组细胞增殖情况;Transwell实验检测各组细胞迁移情况;双荧光素酶报告基因检测实验分别验证XIST与miR-140-3p、miR-140-3p与PD-L1的靶向关系;West⁃ern blot检测各组细胞中PD-L1蛋白表达。结果XIST在DLBCL组织和细胞OCI-LY19、SU-DHL-4、U2932中高表达,且U2932细胞中XIST的表达水平最高,因此后续实验以U2932细胞为研究对象;XIST的表达与DLBCL患者的Hans分型有关,而与DLBCL患者的性别、年龄、Ann Arbor分期、国际预后指数(IPI)评分无关;XIST靶向负调控miR-140-3p的表达,miR-140-3p靶向负调控PD-L1的表达,XIST正向调控PD-L1的表达;与空白组、OE-NC组比较,OE-PD-L1组细胞中PD-L1蛋白、OD490nm值(24、48、72 h)、迁移细胞数目显著升高(P<0.05);与OE-XIST组和OE-XIST+miR-NC组比较,OE-XIST+miR-140-3p mimics组中miR-140-3p表达水平显著升高,PD-L1蛋白表达水平、细胞增殖能力及迁移细胞数目显著降低(P<0.05);与OE-XIST组和OE-XIST+si-NC组比较,OE-XIST+si-PD-L1组中miR-140-3p表达水平无显著变化,而PD-L1蛋白表达水平、细胞增殖能力及迁移细胞数目显著降低(P<0.05)。结论LncRNA XIST通过靶向调控miR-140-3p/PD-L1轴促进DLBCL细胞增殖与迁移。

血清miR-140-3p、sLOX-1对急性STEMI患者PCI术后支架内再狭窄的预测能效

目的探讨血清微小RNA(miR)-140-3p、可溶性凝集素样氧化型低密度脂蛋白受体-1(sLOX-1)对急性ST段抬高型心肌梗死(ASTEMI)患者经皮冠状动脉介入治疗(PCI)术后支架内再狭窄的预测价值。方法选取2019年1月至2021年1月于郑州市第七人民医院心内科收治的247例接受PCI的STEMI患者,根据PCI术后1年是否发生支架内再狭窄分为再狭窄组(n=38)和无再狭窄组(n=209)。收集患者基础资料,RT-PCR测定患者血清miR-140-3p水平,酶联免疫吸附法测定血清sLOX-1水平。分析ASTEMI患者PCI术后支架内再狭窄影响因素,ROC曲线判断血清miR-140-3p、sLOX-1水平对ASTEMI患者PCI术后支架内再狭窄的预测价值。结果与无再狭窄组比较,再狭窄组高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、左心室射血分数(LVEF)、急诊PCI比例、支架内径及血清miR-140-3p水平降低,空腹血糖(FBG)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、支架长度、Gensini积分及血清sLOX-1水平升高(P<0.05)。多因素Logistics回归分析显示,hs-CRP(OR=2.797,95%CI:1.506~5.194)、急诊PCI(OR=0.186,95%CI:0.106~0.319)、支架内径(OR=0.382,95%CI:0.106~0.319)、miR-140-3p(OR=0.785,95%CI:0.525~0.883)为ASTEMI患者PCI术后支架内再狭窄独立保护因素,Gensini积分(OR=1.228,95%CI:1.086~1.389)、sLOX-1(OR=1.035,95%CI:1.018~1.052)为其独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线显示,miR-140-3p联合sLOX-1(AUC=0.892,95%CI:0.847~0.928)预测STEMI患者PCI后支架内再狭窄的AUC明显大于miR-140-3p(AUC=0.791,95%CI:0.735~0.840)、sLOX-1(AUC=0.784,95%CI:0.728~0.834)单独预测,其敏感度、特异度、准确度为81.58%、85.65%、85.02%。结论PCI术后支架内再狭窄ASTEMI患者血清miR-140-3p水平明显降低,sLOX-1水平明显提升,miR-140-3p为PCI术后支架内再狭窄的独立保护因素,sLOX-1为其独立危险因素,二者均对支架内再狭窄具有一定预测价值,联合预测价值更高。

circRNA_0031269调控miR-127-3p影响宫颈癌细胞的增殖及迁移

目的 探讨circRNA_0031269调控mi R-127-3p影响宫颈癌细胞的增殖及迁移。方法 选取深圳市南山区前海蛇口自贸区医院2020年3月—2021年4月妇科肿瘤专科收治的40例宫颈癌患者,经手术治疗切除的癌组织和癌旁组织。采用实时荧光定量聚合酶联反应(quantitativereal-time PCR,q RT-PCR)检测不同组织中circ RNA_0031269和mi R-127-3p的相对表达;双荧光素酶报告基因检测观察circRNA_0031269和miR-127-3p的靶向关系。采用MTT、Transwell细胞实验检测宫颈癌细胞增殖、迁移能力。结果 癌组织中circ RNA_0031269表达高于癌旁组织,mi R-127-3p表达低于癌旁组织(P<0.05);miR-127-3p过表达可降低WT-circ RNA0031269的荧光酶活性,与anti-miR-NC组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);anti-miR-127-3p过表达可抑制He La细胞增殖、迁移,与anti-miR-NC组比较,差异具有统计学意义(P<0.05);抑制circ RNA_0031269表达可抑制He La细胞增殖、迁移,上调miR-127-3p表达,与si-NC组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 circ RNA0031269可通过上调miR-127-3p表达降低宫颈癌He La细胞的增殖和迁移。

miR-140-3p通过靶向PD-L1抑制非小细胞肺癌A549细胞的活力、迁移和侵袭

目的:探究微小RNA-140-3p(mi R-140-3p)对程序性细胞死亡配体1(PD-L1)的靶向关系以及对非小细胞肺癌A549细胞的活力、迁移和侵袭的影响。方法:使用RT-qPCR检测HLF-1、A549和H1299不同细胞株中mi R-140-3p的表达水平,选择差异最显著的A549细胞用作后续研究对象; Target Scan软件预测和双萤光素酶报告基因实验验证mi R-140-3p和PD-L1之间的靶向关系; RT-qPCR和Western blot检测转染mi R-140-3p模拟物和抑制剂对PD-L1表达水平的影响; MTT法检测mi R-140-3p和PD-L1对A549细胞活力的影响; Transwell实验检测mi R-140-3p和PD-L1对A549细胞迁移和侵袭的影响。结果:mi R-140-3p在人肺癌A549和H1299细胞的表达中显著下调(P <0. 05); mi R-140-3p高表达能够使PD-L1表达下调,对A549细胞的活力、迁移和侵袭具有抑制作用;转染pc DNA3. 0-PD-L1能够阻断mi R-140-3p对A549细胞活力、迁移和侵袭的抑制作用。结论:mi R-140-3p可通过靶向负调控PD-L1抑制A549细胞的活力、迁移和侵袭。

膝骨关节炎患者关节液中miR-140-3p表达可反映骨关节炎进程

背景:骨关节炎是一种与年龄相关,以关节软骨退变为特点的关节疾病。目的:检测膝关节液中mi R-140-3p的表达,明确其表达量是否与骨关节炎严重程度相关。方法:共收集到健康志愿者、痛风性关节炎患者、类风湿性关节炎患者各10例,膝骨关节炎患者45例,其中骨关节炎早期、中期、晚期各15例。应用实时荧光定量PCR检测各组膝关节液中mi R-140-3p的表达。结果与结论:1骨关节炎组mi R-140-3p的表达明显下调,非骨关节炎组与骨关节炎组间表达量差异有显著性意义(P<0.05),健康对照组、痛风性关节炎与类风湿性关节炎组间差异无显著性意义(P>0.05);2健康对照组mi R-140-3p的表达量是骨关节炎组的11.4倍,随骨关节炎严重程度的增加mi R-140-3p表达量呈相对减少的趋势;3进一步行Spearman等级相关分析显示:骨关节炎的严重程度与mi R-140-3p的表达量均呈负相关;4结果表明,关节液中mi R-140-3p的表达量可以在一定程度上反映骨关节炎病程的进展。