miR-21、miR-26a及miR-200a在子痫前期患者中的表达水平及与病情的相关性

目的分析miR-21、miR-26a及miR-200a在子痫前期(PE)患者血清中的表达,并探讨其临床意义。方法选取2019年3月至2021年3月在南京市妇幼保健院治疗的PE患者103例,分为轻度PE组(57例)和重度PE组(46例),另选取同期正常孕妇50例作为对照组。检测各组孕妇血清miR-21、miR-26a及miR-200a表达水平,分析其与年龄、孕周、BMI、血压、24h尿蛋白及不良妊娠结局的相关性,并分析血清miR-21、miR-26a及miR-200a对PE的诊断价值。结果重度PE组BMI、舒张压、收缩压以及24h尿蛋白高于轻度PE组及对照组,且差异具有统计学意义(F值分别为4.116、141.063、143.118和342.736,P<0.05)。对照组、轻度PE组及重度PE组孕妇血清中miR-21、miR-26a及miR-200a的表达水平依次升高。Pearson相关性分析结果显示,血清miR-21、miR-26a及miR-200a的表达水平与血压、24h尿蛋白及不良妊娠结局发生率呈正相关(r值介于0.446~0.832之间,P<0.001)。经受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析发现,血清miR-21、miR-26a及miR-200a联合诊断PE的曲线下面积(AUC)为0.967,敏感度为98.10%,特异性为92.30%。结论PE患者血清miR-21、miR-26a及miR-200a的表达高于正常孕妇,且与患者的临床指标及不良妊娠结局相关,检测血清miR-21、miR-26a、miR-200a水平对早期诊断PE及评估患者预后具有十分重要的意义。

血清miR-200a-3p与miR-30a-5p表达在心力衰竭诊断及预后评估中的价值

目的分析血清中微小核糖核酸200a-3p(miR-200a-3p)和微小核糖核酸30a-5p(miR-30a-5p)表达在心力衰竭(HF)诊断以及HF患者预后评估中的价值。方法前瞻性选取内蒙古医科大学附属医院2018年4月~2020年4月期间收治的HF患者131例为研究对象(HF组),同时期健康体检志愿者131例为对照组;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定血清中miR-200a-3p和miR-30a-5p表达水平;采用Spearman相关分析血清中miR-200a-3p和miR-30a-5p水平与HF患者病情严重程度的相关性;采用ROC曲线分析血清miR-200a-3p和miR-30a-5p对HF的诊断价值;采用Logistic回归分析HF患者预后的影响因素;采用Kaplan-Meier生存分析血清miR-200a-3p和miR-30a-5p表达水平与HF患者预后的关系。结果与对照组相比,HF组血清中miR-200a-3p和miR-30a-5p表达水平显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05);轻度HF、中度HF和重度HF患者血清中miR-200a-3p和miR-30a-5p表达水平依次升高,差异具有统计学意义(P<0.05);Spearman相关分析显示,血清中miR-200a-3p和miR-30a-5p表达水平与HF患者病情严重程度呈正相关(r_(s)=0.442,r_(s)=0.564,均P<0.05);ROC曲线分析结果显示,miR-200a-3p和miR-30a-5p联合诊断HF较miR-200a-3p和miR-30a-5p单一指标诊断效果更好(P<0.05);Logistic回归分析结果发现,NT-proBNP、LVEF、LVEDD、miR-200a-3p和miR-30a-5p是HF患者预后的影响因素(Waldχ^(2)=4.321~128.193,P<0.05);Kaplan-Meier生存分析结果显示,血清中miR-200a-3p和miR-30a-5p高表达患者3年生存率低于miR-200a-3p和miR-30a-5p低表达患者(均P<0.05)。结论HF患者血清中miR-200a-3p和miR-30a-5p表达水平显著升高,二者与HF的发生及患者预后相关。

miR-200c联合MORC2检测在卵巢癌病情及预后评估中的临床价值

目的研究微小核糖核酸-200c(miR-200c)联合MORC家族CW型锌指蛋白2(MORC2)检测在卵巢癌病情及预后评估中的临床价值。方法选择2017年1月—2019年12月武汉大学人民医院妇产科诊治的卵巢癌患者103例(卵巢癌组)及卵巢良性疾病患者60例(对照组)为研究对象,采用实时荧光定量PCR检测miR-200c及MORC2表达并分析其与临床病理因素的关系;受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-200c联合MORC2预测卵巢癌2年预后不良的效能;多因素Logistic回归分析卵巢癌患者死亡的危险因素;Kaplan-Meier法分析miR-200c和MORC2表达与生存期的关系。结果卵巢癌组患者肿瘤组织miR-200c、MORC2表达高于癌旁组织和对照组(F=1926.617、1832.415,P均<0.001)。低分化、有恶性腹水、肿瘤最大径≥5 cm、有淋巴结转移、有远处转移及Ⅲ~Ⅳ期卵巢癌患者miR-200c、MORC2表达高于中-高分化、无恶性腹水、肿瘤最大径<5 cm、无淋巴结转移、无远处转移及Ⅰ~Ⅱ期患者(t=14.067、12.451、12.871、11.523、16.298、18.351,11.745、10.893、10.462、9.893、14.617、13.269,P均<0.001)。miR-200c、MORC2及二者联合预测卵巢癌患者2年预后不良的AUC分别为0.786、0.792、0.901,二者联合优于各自单独预测效能(Z=8.239、8.025,P均<0.001)。miR-200c≥0.78、MORC2≥0.65、低分化、有恶性腹水、肿瘤最大径≥5 cm、有淋巴结转移、有远处转移、FIGO分期Ⅲ~Ⅳ期为卵巢癌死亡的独立危险因素[OR(95%CI)=5.323(1.812~8.834)、4.802(1.141~8.463)、2.065(1.068~3.062)、2.252(1.145~3.359)、2.140(1.216~3.064)、2.012(1.005~3.019)、2.522(1.625~3.419)、2.186(1.134~3.238)];卵巢癌组中miR-200c≥0.78且MORC2≥0.65卵巢癌患者中位生存期显著低于其他患者(miR-200c<0.78或MORC2<0.65)(Log-Rankχ^(2)=16.371,P<0.05)。结论卵巢癌患者miR-200c及MORC2表达显著升高,在卵巢癌病情及预后评估中具有重要临床价值,两者联合检测时可显著提高预测卵巢癌预后不良的敏感度及特异度。

子宫内膜癌患者血清miR-145、miR-200a及miR-181c表达水平及其临床意义

目的观察子宫内膜癌患者血清miR-145、miR-200a、miR-181c表达变化,探讨其临床意义。方法选取84例子宫内膜癌患者为研究组,同期收治的51例子宫肌瘤患者为对照组。检测两组血清miR-145、miR-200a、miR-181c表达,分析miR-145、miR-200a、miR-181c表达与子宫内膜癌临床病理特征的关系,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-145、miR-200a、miR-181c对子宫内膜癌的诊断效能。结果研究组血清miR-145、miR-181c水平低于对照组,miR-200a水平高于对照组(P<0.05);血清miR-145、miR-200a、miR-181c表达与临床分期、淋巴结转移有关(P<0.05);ROC曲线分析结果显示,miR-145、miR-200a、miR-181c诊断子宫内膜癌的AUC分别为0.954、0.987、0.908。结论子宫内膜癌患者血清miR-145、miR-181c表达下调,miR-200a表达上调,且三者均与淋巴结转移、临床分期有关,可能作为子宫内膜癌诊断的辅助指标。

MiR-200家族与子宫内膜异位症相关性的研究进展

子宫内膜异位症(EMs)是一种具有恶性肿瘤特征的良性疾病,严重影响患者的生活质量,增加患者的医疗、经济负担。目前子宫内膜异位症的发病机制不明,临床治疗效果欠佳。近年来发现,miR-200家族在多种疾病的发病中发挥着重要的作用。有研究表明,miR-200家族在EMs中存在差异表达并稳定存在,认为其在EMs发病过程中起重要作用,但作用机制尚不明确。本文就有关miR-200家族与EMs相关性的研究进行综述,为进一步研究及临床治疗EMs提供新思路。

探寻miR-200a-3p作为结直肠癌的诊断及预后生物标志物的潜在价值

目的:阐明miR-200a-3p及下游靶基因程序性细胞死亡4(programmed cell death 4,PDCD4)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)诊断及预后的潜在价值。方法:从2017年1月至2019年9月在长沙市第一医院接受根治性切除术或姑息性切除术的CRC患者中收集包含120对CRC组织和相应的癌旁正常组织的队列。另1个队列包括50例诊断为CRC的患者;2019年1月至2020年1月从这些患者手术前后收集术前和术后血清样本。RT-qPCR检测CRC组织和细胞系中miR-200a-3p的表达。将靶向miR-200a-3p(si-miR-200a-3p)和siRNAs阴性对照(si-NC),以及miR-200a-3p过表达(miR-200a-3p-OE)和PDCD4过表达(PDCD4)质粒转染CRC细胞。通过CCK-8测定、集落形成和Transwell细胞侵袭测定来确定miR-200a-3p对CRC细胞生长的影响。雌性BALB/c裸鼠随机分为3组:载体组(Vector组)、miR-200a-3p过表达组(miR-200a-3p-OE组)和miR-200a-3p过表达+PDCD4过表达组(miR-200a-3p-OE+PDCD4组)。构建小鼠远处转移模型,监测肺转移的荧光强度,计数肺转移结节的数量。结果:miR-200a-3p在CRC组织和细胞系中上调。miR-200a-3p高表达与肿瘤大小、肿瘤转移和TNM分期显著相关。miR-200a-3p表达可以作为总生存率(overall survival,OS)(HR=2.077,95%CI=1.079~3.998,P=0.029)和无病生存率(disease free survival,DFS)(HR=2.927,95%CI=1.179~7.270,P=0.021)的独立预后生物标志物。功能研究发现miR-200a-3p结合PDCD4的3'-UTR区,并降低PDCD4在CRC细胞中的表达。PDCD4过表达抑制miR-200a-3p过表达对CRC细胞增殖、集落形成、迁移和侵袭的促进作用。与体外结果一致,在转移的小鼠尾静脉注射模型中,miR-200a-3p-OE+PDCD4组SW480细胞的肺定植、肺转移灶较miR-200a-3p-OE组明显减少(P<0.05)。结论:miR-200a-3p在CRC细胞、组织和血清中表达显著增加,并可以作为诊断和预后的生物标志物。miR-200a-3p过表达通过抑制PDCD4表达促进CRC进展。

LncRNA FEZF1-AS1靶向调控miR-200c-3p对人肺成纤维细胞生物学行为的影响

目的探讨FEZ家族锌指1-反义RNA1(LncRNA FEZF1-AS1)靶向调控miR-200c-3p对人肺成纤维细胞HLF生物学行为的影响。方法采用转化生长因子β1(TGF-β1)诱导HLF向肌成纤维细胞转化,分为空白对照组(Blank组)和造模组(HLF+TGF-β1组),另根据转染质粒不同将细胞分为Blank组、TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组和TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1组。采用Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(CollagenⅠ)和波形蛋白(Vimentin)蛋白的表达。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测LncRNA FEZF1-AS1和miR-200c-3p的表达。采用CCK-8法检测细胞增殖,细胞划痕实验检测迁移能力,Transwell实验检测侵袭能力;采用双萤光素酶实验检测FEZF1-AS1与miR-200c-3p的靶向作用关系。结果与Blank组比较,HLF+TGF-β1组α-SMA、CollagenⅠ、Vimentin蛋白表达及LncRNA FEZF1-AS1表达水平升高,miR-200c-3p表达水平降低(P<0.05);与TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1 NC组比较,TGF-β1+Si LncRNA FEZF1-AS1组细胞增殖、迁移、侵袭能力下降,LncRNA FEZF1-AS1表达及α-SMA、CollagenⅠ、Vimentin蛋白表达水平降低,miR-200c-3p表达水平升高(P<0.05);FEZF1-AS1与miR-200c-3p基因序列上存在结合位点。结论LncRNA FEZF1-AS1通过抑制miR-200c-3p促进特发性肺间质纤维化的发生、发展。

尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c在早期糖尿病肾病诊断中的价值

目的探讨尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c在早期糖尿病肾病(DN)诊断中的价值。方法选取2021年1月—2022年12月金华市人民医院2型糖尿病(T2DM)患者260例,根据其就诊时的微量尿蛋白排泄率(UAER)分为单纯T2DM组(135例)、早期DN组(82例)、临床期DN组(43例)。另选取同期金华市人民医院健康体检者50名作为正常对照组。收集所有研究对象的一般资料,并检测尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c和尿液肌酐(UCr)、尿液尿素氮(UUN)、尿液转化生长因子-β1(TGF-β1,以UCr校正)、糖化血红蛋白(HbA_(1c))、血清尿酸(UA)。采用Pearson相关分析评价各项指标之间的相关性。采用多元逐步回归分析评价尿液TGF-β1的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c诊断早期DN的效能。结果正常对照组、单纯T2DM组、早期DN组和临床期DN组尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-200c相对表达量依次升高(P<0.001),miR-29c相对表达量依次降低(P<0.001)。单纯T2DM组、早期DN组和临床期DN组UUN、UCr、校正TGF-β1和HbA_(1c)、UA水平均高于正常对照组(P<0.05)。单纯T2DM组、早期DN组和临床期DN组UUN、UCr、UA、校正TGF-β1水平和UAER依次升高(P<0.001)。尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-200c与UCr、校正TGF-β1均呈显著正相关(P<0.01),miR-29c与UCr、校正TGF-β1均呈显著负相关(P<0.001),与UUN、UA均无相关性(P>0.05)。HbA_(1c)、UCr和尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c是尿液校正TGF-β1水平的独立影响因素(P<0.01)。尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c单项检测和联合检测诊断早期DN的曲线下面积(AUC)分别为0.823、0.855、0.799、0.557、0.923。结论尿外泌体miR-27a、miR-27b、miR-29c、miR-200c联合检测对早期DN有较好的诊断价值。

结核性脑膜炎患者脑脊液中miR-200a,miR-4652-3p水平表达对疾病严重程度和预后预测价值研究

目的分析结核性脑膜炎(tuberculous meningItis,TBM)患者脑脊液miR-200a和miR-4652-3p表达及其对疾病严重程度和预后的预测价值。方法选择2018年1月~2022年12月于青岛市胸科医院就诊的187例结核性脑膜炎患者,按照病情程度分为Ⅰ期(n=62)、Ⅱ期(n=76)和Ⅲ期(n=49),根据预后情况分为预后良好组(n=131)和预后不良组(n=56)。qRT-PCR法检测脑脊液miR-200a和miR-4652-3水平表达。Spearman法分析miR-200a和miR-4652-3p与临床资料间相关性;ROC曲线分析脑脊液miR-200a和miR-4652-3p水平对结核性脑膜炎患者疾病严重程度及预后的预测价值。多因素Logistic回归分析预后不良影响因素。结果Ⅰ期、Ⅱ期、Ⅲ期结核性脑膜炎患者脑脊液miR-200a(1.05±0.14,0.91±0.14,0.76±0.13)和miR-4652-3p(0.92±0.11,0.78±0.11,0.65±0.10)表达水平依次降低,差异具有统计学意义(F=61.079,87.203,均P<0.001)。预后良好组患者脑脊液miR-200a(0.95±0.14)和miR-4652-3p(0.82±0.11)表达水平显著高于预后不良组患者(0.84±0.13,0.73±0.10),差异具有统计学意义(t=5.025,5.262,均P<0.05);预后良好患者脑脊液腺苷脱氨酶和TNF-α,IL-23,LTB4,CRP,mRS评分显著低于预后不良患者,差异具有统计学意义(t=5.649,7.721,11.150,9.455,11.314,14.407,均P<0.05)。结核性脑膜炎患者脑脊液miR-200a和miR-4652-3p水平呈正相关(r=0.405,P<0.001);miR-200a,miR-4652-3p与LTB4,TNF-α,CRP,mRS评分,IL-23,腺苷脱氨酶呈负相关(r=-0.472,-0.466,-0.461,-0.435,-0.422,-0.419;-0.459,-0.531,-0.471,-0.417,-0.513,-0.408,均P<0.05)。miR-200a,miR-4652-3p预测患者疾病严重程度的AUC(95%CI)分别为0.881(0.825~0.923)和0.878(0.822~0.921),二者联合预测的AUC(95%CI)为0.945(0.902~0.973),高于单项检测,差异具有统计学意义(Z=3.008,2.960,all P=0.003)。脑脊液miR-200a和miR-4652-3p水平评估患者预后不良的AUC(95%CI)为0.749(0.681~0.809)和0.756(0.688~0.816),二者联合评估患者预后不良的AUC(95%CI))为0.839(0.778~0.889),高于二者单独检测,差异有统计学意义(Z=2.994,2.697,P=0.003,0.007)。腺苷脱氨酶[OR(95%CI):1.106(1.033~1.185)]、miR-200a[OR(95%CI):0.529(0.369~0.744)]、miR-4652-3p[OR(95%CI):0.471(0.310~0.715)]、CRP[OR(95%CI):4.423(1.459~13.412)]、TNF-α[OR(95%CI):1.196(1.061~1.348)]、IL-23[OR(95%CI):4.809(1.086~3.013)]和LTB4[OR(95%CI):1.327(1.064~1.655)]为结核性脑膜炎患者预后不良的影响因素(均P<0.05)。结论结核性脑膜炎患者脑脊液miR-200a和miR-4652-3p表达下调,与疾病严重程度及预后密切相关,二者联合能较好地预测结核性脑膜炎严重程度及预后,具有一定临床价值。

妊娠期高血压miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a表达水平及临床意义

目的 探讨妊娠期高血压miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a表达水平及临床意义。方法 回顾性选取83例2022年1月至2023年1月承德市妇幼保健院收治的妊娠期高血压患者的临床资料作为病例组,其中28例妊娠期高血压作为妊娠期高血压组、28例轻度子痫前期作为轻度子痫前期组、27例重度子痫前期作为重度子痫前期组;另随机选择同期于本院产科门诊规律围产期保健并入院待产的94名正常足月单胎妊娠孕妇为对照组。结果 收缩压、舒张压:重度子痫前期组>轻度子痫前期组>妊娠期高血压组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a表达水平:重度子痫前期组>轻度子痫前期组>妊娠期高血压组>对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a水平联合检测诊断妊娠期高血压的AUC值为0.940,高于各指标单独检测(0.768、0.809、0.744、0.795,P<0.05)。病例组不良妊娠结局总发生率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 妊娠期高血压患者不良妊娠结局的几率更大,血清miR-26b、miR-15b、miR-204-5p、miR-200a在妊娠期高血压患者中呈高表达,其表达水平与患者病情严重程度具有一定关系,且四者联合检测对妊娠期高血压的诊断价值更高。

结直肠癌患者血清miR-150-5p和miR-200b-3p水平及临床意义

目的结直肠癌患者血清微小RNA(miR)-150-5p和miR-200b-3p水平及临床意义。方法回顾性选择2020年6月至2022年11月在沧州市人民医院就诊的结直肠癌患者116例为结直肠癌组,同时选取同期在本院治疗的结肠息肉患者60例作为结直肠良性肿瘤组,选择同期在本院行健康体检者60名为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测受试者血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平;采用Pearson相关性分析对结直肠癌患者血清miR-150-5p与miR-200b-3p表达水平的相关性进行分析;分析结直肠癌患者血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平与病理特征的关系;采用受试者操作特征(ROC)曲线分析血清miR-150-5p、miR-200b-3p表达水平对结直肠癌的诊断价值。结果结直肠癌组、结直肠良性肿瘤组血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平均显著低于对照组,且结直肠癌组血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平均显著低于结直肠良性肿瘤组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,结直肠癌患者血清miR-150-5p与miR-200b-3p表达水平呈正相关(r=0.562,P<0.05)。结直肠癌患者血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平与分化程度、淋巴结转移、TNM分期、浸润深度有关(P<0.05),其中低分化、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、浸润深度T 3~T 4的结直肠癌患者血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平显著低于中高分化、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、浸润深度T_(1)~T_(2)的患者(P<0.05)。血清miR-150-5p、miR-200b-3p单独及联合诊断结直肠癌的曲线下面积(AUC)分别为0.800、0.828、0.893,联合诊断AUC显著高于单独预测AUC(P<0.05)。结论结直肠癌患者血清miR-150-5p、miR-200b-3p水平降低,二者可作为诊断结直肠癌发生的辅助指标。

血清miR-200b、miR-135b表达对急性缺血性脑卒中患者脑侧支循环状态及认知功能障碍评估的价值

目的探讨血清微小核糖核酸-200b(miR-200b)、miR-135b表达对急性缺血性脑卒中(AIS)患者脑侧支循环状态及认知功能障碍评估的价值。方法选取海军军医大学第一附属医院2022年3月至2023年3月收治的153例AIS患者作为研究对象,依据数字减影血管造影(DSA)侧支循环状态评分将其分为侧支循环良好组(n=81)和侧支循环不良组(n=72),观察血清miR-200b、miR-135b表达水平。并参照蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评估所有患者认知功能状态,依据是否存在认知功能障碍将患者分为非障碍组(n=74)及障碍组(n=79),观察不同认知功能状态患者血清miR-200b、miR-135b水平变化,通过Pearson相关性分析血清miR-200b、miR-135b表达水平与AIS患者脑侧支循环状态及认知功能障碍的相关性。结果侧支循环良好组患者血清miR-200b、miR-135b表达水平及MoCA评分均高于侧支循环不良组患者(P<0.05)。非障碍组患者血清miR-200b、miR-135b表达水平均高于障碍组患者(P<0.05)。Pearson相关性分析显示:血清miR-200b、miR-135b表达水平与AIS患者脑侧支循环状态呈正相关(r=0.746、0.724,P<0.05);与AIS患者认知功能状态呈正相关(r=0.721、0.703,P<0.05)。ROC曲线分析显示:miR-200b预测不良脑侧支循环发生的约登指数(0.685)最大时对应截断值为0.64,曲线下面积为0.853,预测敏感度为83.33%,特异度为85.19%;miR-135b预测不良脑侧支循环发生的约登指数(0.650)最大时对应截断值为1.16,曲线下面积为0.833,预测敏感度为84.72%,特异度为80.25%。miR-200b预测认知功能障碍发生的约登指数(0.595)最大时对应截断值为0.71,曲线下面积为0.827,预测敏感度为79.75%,特异度为79.73%;miR-135b预测认知功能障碍发生的约登指数(0.488)最大时对应截断值为1.18,曲线下面积为0.800,预测敏感度为77.22%,特异度为71.62%结论血清miR-200b、miR-135b在不良脑侧支循环状态及认知功能障碍的AIS患者中表达水平较低,两者与AIS患者脑侧支循环状态及认知功能状态呈正相关,对不良脑侧支循环及认知功能障碍发生的预测价值较高。

阴道彩超联合血清β-hCG、miR-200c对早期异位妊娠的临床诊断价值

目的:探究经阴道彩超联合血清β-人绒毛膜促性腺激素(β-hCG)、miR-200c对早期异位妊娠(EP)的临床诊断价值。方法:回顾性选取2020年1月-2022年5月在本院住院治疗的早期EP患者204例作为EP组,另选取同期进行围产期保健检查的200例健康孕妇作为正常妊娠组。以诊断性刮宫或病理检查结果为金标准,收集所有受试者的临床资料,对所有受试者进行阴道彩超检测,同时检测其外周血β-HGG水平,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测血清中miR-200c表达水平。采用多因素logistic分析探究以上各项指标表达水平对EP的影响。结果:两组患者的人工流产占比、自然流产占比、年龄、体质量指数(BMI)、产次、孕次、孕周对比均无统计学差异(P>0.05),两组EP组患者外周血血管内皮生长因子(VEGF)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)以及肌酸激酶(CK)水平对比无统计学差异(P>0.05)。EP组患者血清miR-200c相对表达量以及血清β-hCG浓度均低于正常妊娠组(P<0.05)。阴道超声检测结果对比,EP组阻力指数(RI)、脉搏指数(PI)均大于对照组(P<0.05)。ROC分析显示,阴道超声RI、PI及血清β-hCG、miR-200c联合诊断EP的敏感度、特异度分别为97.55%、96.50%,AUC为0.989。结论:阴道彩超、血清β-hCG、miR-200c水平均能协助区分早期EP、正常妊娠,三者联合的诊断价值最高,值得临床重视。

miR-200a抑制YAP1基因表达对肺癌细胞增殖的影响

目的:研究微小RNA-200a(miR-200a)对肺癌细胞增殖的影响,并探讨其分子机制。方法:采用Real-time PCR检测15例非小细胞肺癌组织和对应癌旁组织、人肺癌细胞株(A549、NCI-H520、SK-MES-1)及人正常肺支气管上皮细胞株16HBE中miR-200a的表达水平。用CCK-8法检测miR-200a对A549肺癌细胞增殖活性的影响。通过生物信息学方法预测miR-200a可能的靶基因,双荧光素酶报告基因实验结合Real-time PCR和Western blot验证miR-200a对靶基因YAP1的调控作用。CCK-8法检测下调靶基因YAP1对A549肺癌细胞株增殖活性的影响。结果:miR-200a在非小细胞肺癌组织和肺癌细胞系中表达明显降低(P<0.01)。上调miR-200a表达后明显抑制A549肺癌细胞的增殖活力(P<0.01)。双荧光素酶报告基因显示miR-200a可以直接作用于靶基因YAP1的3'-UTR区域抑制荧光素酶活性(P<0.01),Real-time PCR和Western blot检测显示上调miR-200a的表达能够明显下调A549肺癌细胞YAP1 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01)。CCK-8法显示下调YAP1的表达能够明显抑制A549肺癌细胞的增殖活性(P<0.01)。结论:miR-200a通过靶向作用于YAP1基因来抑制肺癌细胞的增殖,从而在肺癌中发挥抑癌基因的功能。

miR-200a对奶山羊乳腺上皮细胞乳脂合成相关基因mRNA表达的影响

旨在构建pAd-pri-miR-200a重组腺病毒,使其在奶山羊乳腺上皮细胞中稳定表达miR-200a,研究miR-200a对乳脂合成相关基因mRNA表达的影响。以西农萨能羊DNA为模板扩增pri-miR-200a。采用Ad-Easy系统构建重组腺病毒载体pAd-pri-miR-200a,并于HEK 293细胞株中进行病毒的包装、扩繁。TCI50法测定病毒滴度。qRT-PCR检测miR-200a及16个乳脂合成相关基因mRNA表达水平。序列分析结果显示,pri-miR-200a包括pre-miR-200a86bp和侧翼序列共297bp。酶切结果证实pAd-pri-miR-200a构建成功。Ad-pri-miR-200a滴度达8×109 PFU.mL-1。实时定量结果表明,Ad-pri-miR-200a(MOI为200)感染奶山羊乳腺上皮细胞72h,miR-200a的表达量较对照高出2.4倍。同时miR-200a的过表达引起10个基因mRNA表达量下调,6个基因mRNA表达量上调。其中脂肪酸从头合成相关基因FASN、脂滴生成相关基因TIP47及脂肪酸运输相关基因FABP4降幅较大,分别下降了0.47、0.89及0.65倍。而TAG生成相关基因DGAT1和脂解相关基因HSL较对照分别增加了0.52和1.49倍。本研究获得的重组腺病毒Ad-pri-miR-200a能在山羊乳腺上皮细胞中稳定表达miR-200a,同时miR-200a过表达影响乳脂合成相关基因mRNA表达水平。

miR-200a靶向雌孕激素受体抑制子宫内膜癌细胞生长的作用研究

目的:探讨miR-200a对子宫内膜癌细胞雌孕激素受体的靶向作用及生长的影响。方法:选取两种人子宫内膜癌细胞株KLE和Ishikawa,q PCR法检测miR-200a、ESR1和PGR含量,Western blot法检测ER和PR表达。分别在Ishikawa、KLE细胞株中敲除、过表达miR-200a,检测miR-200a对Ishikawa细胞中ESR1和PGR mRNA含量,以及ER和PR表达水平的影响。采用MTT、流式细胞仪、细胞划痕实验和Transwell实验检测miR-200a对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。结果:Ishikawa细胞中miR-200a、ESR1和PGR含量及ER和PR表达水平均高于KLE细胞(P<0.01)。敲除miR-200a后,可降低Ishikawa细胞中ESR1和PGR含量及ER和PR表达水平(P<0.01)。敲除miR-200a后,细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强,细胞凋亡水平下降,过表达miR-200a则呈相反效应(P<0.01)。给予他莫昔芬和RU-486后,上述效应均被一定程度逆转(P<0.01)。结论:miR-200a可靶向作用于子宫内膜癌细胞雌孕激素受体,进而抑制细胞的增殖、迁移和侵袭,有效促进细胞的凋亡。

miR-200a对非小细胞肺癌迁移、侵袭的调控作用及机制研究

目的:研究miR-200a对非小细胞肺癌迁移、侵袭的调控作用及机制。方法:培养肺癌A549细胞并分组,阴性对照(NC)过表达组转染NC的模拟物,miR-200a过表达组转染miR-200a的模拟物,NC抑制组转染NC的抑制物,miR-200a抑制组转染miR-200a的抑制物。采用划痕实验检测细胞的迁移能力,采用transwell检测细胞的侵袭能力,采用Western blotting检测迁移基因N-钙黏蛋白(N-cadherin)及波形蛋白(Vimentin)、侵袭基因基质金属蛋白酶(MMP)2及MMP9、β-catenin的表达量。结果:与NC过表达组比较,miR-200a过表达组的迁移和侵袭能力明显减弱,N-cadherin、Vimentin、MMP2、MMP9、β-catenin的表达量明显减少;与NC抑制组比较,miR-200a抑制组的迁移和侵袭能力明显增强,N-cadherin、Vimentin、MMP2、MMP9、β-catenin的表达量明显增加。结论:miR-200a能够抑制非小细胞肺癌的迁移、侵袭且这一抑制作用与靶向抑制β-catenin有关。

半滑舌鳎miR-200a和miR-200b前体克隆及其免疫应答分析

为了探究半滑舌鳎(Cynoglossus semilaevis)miR-200a和miR-200b在免疫应答中的作用,采用PCR方法克隆了半滑舌鳎miR-200家族的miR-200a和miR-200b的前体序列,长度分别为82和88 bp;用The mfold Web Server和Clustalx1.83软件对其前体序列进行了二级结构和同源性分析,miR-200a和miR-200b都具有典型的颈环结构,与其他物种具有较高的同源性。qRT-PCR分析结果显示,miR-200a和miR-200b在健康半滑舌鳎13种组织(肝脏、肠、脾脏、头肾、后肾、鳃、血液、脑、皮肤、肌肉、胃、心脏和卵巢)中均有表达,miR-200a在头肾中表达量最高,在血液中表达量最低,miR-200b在肝脏中表达量最高,在肌肉中表达量最低;miR-200a和miR-200b在鳗弧菌(Vibrio anguillarum)感染半滑舌鳎后不同时间点的4种免疫相关组织(肝脏、肠、脾脏和头肾)中的表达呈现出先上调后下降的规律,但表达达到峰值的时间点有所不同。miR-200a在肝脏和脾中的表达峰值出现在鳗弧菌感染后6h,在肠和头肾中则是鳗弧菌感染后12h,miR-200b在肠、脾和头肾中均在鳗弧菌感染后12h达到表达高峰;miR-200a和miR-200b在脂多糖(LPS)、肽聚糖(PGN)、葡聚糖(WGP)、聚肌胞苷酸(poly I:C)4种病原模拟物刺激后的半滑舌鳎肝脏细胞系中呈现出上调表达趋势,其中Poly I:C刺激半滑舌鳎肝脏细胞系后miR-200a上调表达趋势明显,6h的表达量为0h的9倍,在WGP刺激半滑舌鳎肝脏细胞后miR-200b上调表达趋势明显,2h的表达量为0的9倍。研究结果为揭示miRNA在半滑舌鳎免疫应答中的作用提供了科学依据。

miR-200a与肿瘤关系

miR-200a是miR-200家族的主要成员之一,在多数的肿瘤中表达下调,主要通过调控上皮间质化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程,对肿瘤的发生和侵袭转移起着关键的作用,其表达与肿瘤患者的预后也有着明显的关系。近年来许多研究致力于miR-200a在肿瘤领域的研究,它的发现为肿瘤发病机制的研究及诊疗、预后提供了新的思路。

基于S7-200 PLC的步进电机运动控制系统设计

提出基于西门子S7-200 PLC的步进电机运动控制系统的设计与实现。由于S7-200系列PLC不支持圆弧插补功能,采用极限逼近的算法,利用PLC输出高速脉冲信号和方向信号驱动步进电动机进行画圆的工作,并通过系统的调试对该方法进行了验证。