术前miR 376c 3p水平与宫颈癌临床病理特征及预测术后复发价值

目的:探讨术前微小RNA 376c 3p(miR 376c 3p)表达水平与宫颈癌临床病理特征关系及对术后复发的预测价值。方法:2012年1月-2015年1月在本院行宫颈癌根治术的原发性宫颈癌患者90例为宫颈癌组,同期行宫颈活检诊断为宫颈上皮内瘤变者100例为宫颈良性病变组,对比两组术前宫颈病灶活检组织中miR 376c 3p表达水平。分析宫颈癌患者miR 376c 3p表达与临床病理特征关系,根据miR 376c 3p中位数将宫颈癌患者分为高、低组,采用Kaplan Meier生存曲线分析患者生存状况,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析术前miR 376c 3p表达水平对术后复发的预测价值。结果:宫颈癌组术前病灶活检组织中miR 376c 3p的表达水平(0.65±0.08)低于宫颈良性病变组(0.86±0.10)(P<0.05)。术前miR 376c 3p表达水平,在不同肿瘤最大直径、国际妇产科联盟(FIGO)分期、淋巴结转移、间质浸润深度的宫颈癌患者间存在差异(P<0.05),在不同年龄、月经状态、病理类型的宫颈癌患者间无差异(P>0.05)。Kaplan Meier生存曲线显示,高miR 376c 3p组患者无复发生存状况优于低miR 376c 3p组(P<0.05)。ROC曲线发现,宫颈癌患者术前miR 376c 3p表达水平预测术后复发截点值0.625,曲线下面积为0.688(95%CI:0.544~0.833),灵敏度52.6%、特异度78.6%。结论:宫颈癌组织中存在miR 376c 3p异常低表达,且水平与临床病理特征相关,对评估患者无复发生存状况、预测术后复发方面有一定价值。

miR-376c-3p通过靶向谷氨酸受体相互作用蛋白1影响乳腺癌细胞的增殖和迁移

目的:探讨miR-376c-3p在乳腺癌中的表达水平、生物学功能及分子调控机制。方法:通过实时荧光定量PCR检测乳腺上皮MCF-10A细胞及乳腺癌细胞中miR-376c-3p表达水平;然后,用miR-376c-3p mimic转染乳腺癌MCF-7与MDA-MB-231细胞,用平板克隆实验、划痕实验以及Transwell实验分别检测其增殖与迁移能力。利用Starbase数据库预测miR-376c-3p的下游靶基因,并通过蛋白质印迹实验进行验证。结果:与人乳腺上皮MCF-10A细胞相比,乳腺癌MCF-7和MDA-MB-231细胞中miR-376c-3p表达水平显著降低(P<0.01);平板克隆实验显示,过表达miR-376c-3p可以显著抑制乳腺癌细胞增殖(P均<0.05);Transwell实验和划痕实验表明,miR-376c-3p表达上调可抑制乳腺癌细胞迁移能力;通过生物信息学预测分析,结果显示miR-376c-3p可以与谷氨酸受体相互作用蛋白1(glutamate receptor interacting protein 1,GRIP1)结合,且蛋白质印迹实验证实过表达miR-376c-3p可以抑制乳腺癌细胞GRIP1表达,同时波形蛋白表达水平明显下调,E-钙黏蛋白表达明显上调。结论:在乳腺癌细胞中,miR-376c-3p表达下调;在体外,过表达miR-376c-3p可显著抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,可能通过靶向GRIP1调节乳腺癌细胞上皮间质转化进程。

结肠癌患者血清miR-221-3p、miR-376c-3p表达及其与预后的关系

目的研究结肠癌患者血清微小RNA(miR)-221-3p、miR-376c-3p的表达及意义。方法选取2016年5月—2018年5月湖南中医药大学第二附属医院肛肠科诊治结肠癌患者104例作为结肠癌组,以非肿瘤结肠病患者56例作为良性疾病组,门诊健康体检者50例为健康对照组。应用荧光定量PCR法检测3组血清miR-221-3p、miR-376c-3p表达。Pearson相关分析结肠癌患者血清miR-221-3p与miR-376c-3p表达的相关性,分析血清miR-221-3p、miR-376c-3p表达与临床病理参数的关系及其对结肠癌患者3年总体生存率的影响。结果血清miR-221-3p、miR-376c-3p水平比较,结肠癌组>良性疾病组>健康对照组,差异均有统计学意义(F/P=407.412/0.000、333.341/0.000)。血清miR-221-3p与miR-376c-3p的表达呈正相关(r=0.567,P=0.000)。结肠癌Duke分期C~D期、肿瘤低分化及有淋巴结转移患者血清miR-221-3p、miR-376c-3p表达均分别高于Duke分期A~B期、肿瘤高中分化及无淋巴结转移患者(miR-221-3p:t/P=6.535/0.000、7.789/0.000、8.124/0.000;miR-376c-3p:t/P=5.872/0.000、8.849/0.000、12.577/0.000)。血清miR-221-3p、miR-376c-3p高表达的结肠癌患者3年总体生存率低于低表达者(χ^(2)/P=7.134/0.000、5.736/0.002)。miR-221-3p高表达、miR-376c-3p高表达是结肠癌患者预后不良的独立危险因素[OR(95%CI)=11.352(3.313~31.882)、12.860(3.921~42.279)]。结论结肠癌患者血清miR-221-3p、miR-376c-3p表达上调,其表达与肿瘤分期、分化程度、有无淋巴结转移有关,是新的结肠癌预后判断的分子标志物。

miRNA-376c-3p调控CASP-7表达抑制人胃肠道间质瘤GIST-T1细胞生长和迁移

目的:探讨miRNA-376c-3p(miR-376c-3p)对人胃肠道间质瘤GIST-T1细胞迁移、增殖和凋亡的影响及其可能的调控机制。方法:qRT-PCR法检测13例胃间质瘤患者肿瘤和癌旁对照组织中miR-376c-3p表达;将miR-376c-3p类似物(mimic)、抑制物(inhibitor)和各自阴性对照分别转染GIST-T1细胞,另设空白对照组;qRT-PCR检测转染细胞miR-376c-3p表达;然后用CCK8检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell小室检测细胞迁移能力;通过Western Blot及qRT-PCR法检测miR-376c-3p对CASP-7(Caspase-7)表达量的影响。结果:在胃间质瘤患者癌组织中,miR-376c-3p表达水平显著降低,为癌旁对照组织的58.7%(P<0.01);qRT-PCR显示:转染miR-376c-3p mimic后,GIST-T1细胞miR-376c-3p表达明显上调(P<0.01),而转染miR-376c-3p inhibitor后表达受抑制(P<0.01);miR-376c-3p mimic转染组细胞增殖活性、迁移能力明显抑制(P<0.01),凋亡率增强(P<0.05);另外miR-376c-3p过表达后CASP-7mRNA和蛋白水平出现上调,相反地,miR-376c-3p抑制却导致CASP-7mRNA和蛋白水平下调(P<0.05)。结论:在人胃肠道间质瘤GIST-T1细胞中miR-376c-3p可以间接调控CASP-7的表达,抑制细胞增殖、迁移能力,促进细胞凋亡。