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miR-422a过表达联合EPO对H2O2诱导的PC12细胞活力、凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响 被引量:1
1
作者 顾然 王露 +1 位作者 唐蔓 胡晓 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2019年第4期593-596,共4页
目的:探讨过表达miR-422a和促红细胞生成素(EPO)单独或联合作用对过氧化氢(H2O2)诱导的PC12细胞活力、凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:将PC12细胞分为空白组、H2O2组(300μmol/LH2O2处理4h)、miR-NC组(H2O2刺激前转染空质粒48h)、m... 目的:探讨过表达miR-422a和促红细胞生成素(EPO)单独或联合作用对过氧化氢(H2O2)诱导的PC12细胞活力、凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响。方法:将PC12细胞分为空白组、H2O2组(300μmol/LH2O2处理4h)、miR-NC组(H2O2刺激前转染空质粒48h)、miR-422a组(H2O2刺激前转染100nmol/LmiR-422amimics48h)、EPO组(H2O2刺激前用1IU/mLEPO处理细胞2h);miR-422a+EPO组(H2O2刺激前同上,用EPO及miR-422amimics处理细胞)。用qRT-PCR、MTT法、AnnexinV-FITC/PI双染法及Westernblot分别检测miR-422amRNA表达、细胞活力、细胞凋亡及p-AKT蛋白表达。结果:H2O2刺激可降低PC12细胞miR-422a表达,转染miR-422amimics后miR-422a的表达升高(P<0.05)。H2O2刺激可抑制细胞活力,促进细胞凋亡,下调p-AKT蛋白的表达;过表达miR-422a及EPO均可增强细胞活力,抑制细胞凋亡,上调p-AKT表达,二者合用效应更强(P<0.05)。结论:过表达miR-422a及EPO均可增强H2O2诱导的PC12细胞活力,降低细胞凋亡率,两者合用效应更强,其机制可能与激活PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多
关键词 PC12细胞 mir-422a 促红细胞生成素 凋亡 PI3K/AKT信号通路
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创伤性脑损伤患者血清miR-422a水平变化的初步探讨 被引量:2
2
作者 刘丽玥 闫静 宋佳希 《临床检验杂志》 CAS 2019年第5期345-348,共4页
目的检测创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)患者血清miR-422a的表达水平,探讨其作为TBI诊断及预后判断指标的临床应用价值。方法采用TaqMan实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测75例轻度创伤性脑损伤(mTBI)、75例重度创伤性... 目的检测创伤性脑损伤(traumatic brain injury,TBI)患者血清miR-422a的表达水平,探讨其作为TBI诊断及预后判断指标的临床应用价值。方法采用TaqMan实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测75例轻度创伤性脑损伤(mTBI)、75例重度创伤性脑损伤(sTBI)及75例健康人对照者血清miR-422a的表达水平,比较CT阳性和阴性患者血清miR-422a表达水平的差异;采用ROC曲线评估miR-422a对mTBI和sTBI的诊断效能,Spearman相关性分析评估miR-422a与TBI患者病情和预后的关系。结果与健康人对照组[(31.1×10^-5(18×10^-5,51.5×10^-5)]相比,mTBI[81.6×10^-5(51.2×10^-5, 131.1×10^-5)]和sTBI[132.5×10^-5(51.5×10^-5,240.5×10^-5)]患者血清miR-422a水平均明显升高(Z=-6.647,P<0.001;Z=-7.345,P<0.001),且sTBI患者血清miR-422a水平明显高于mTBI患者(Z=-2.573,P=0.01)。ROC曲线分析显示,miR-422a用于鉴别健康人对照组与TBI患者的曲线下面积(AUCROC)为0.831(95%CI:0.776~0.886,P<0.001);用于鉴别健康人对照组与mTBI患者的AUCROC为0.814(95%CI:0.744~0.885,P<0.001);用于鉴别健康人对照组与sTBI患者的AUCROC为0.847(95%CI:0.785~0.910,P<0.001)。TBI患者CT阳性组血清miR-422a水平明显高于CT阴性组(P=0.025)。此外,TBI患者预后较差组的miR-422a表达水平明显高于预后较好组(P=0.031)。相关性分析显示,TBI患者血清miR-422a的表达水平与GCS评分(r=-0.231,P=0.004)、GOS评分(r=-0.208,P=0.011)均呈负相关。结论 TBI患者血清miR-422a表达水平明显升高,且与病情和预后相关,是潜在的TBI辅助诊断指标。 展开更多
关键词 创伤性脑损伤 血清 mir-422a 分子标志物 临床价值
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miR-422a通过ATG12调控骨肉瘤细胞自噬及凋亡的研究 被引量:2
3
作者 范锲 李文浩 +3 位作者 丘德赞 黄孝英 何基琛 李浩曦 《临床医学研究与实践》 2021年第7期10-13,23,共5页
目的探讨miR-422a调控骨肉瘤细胞自噬及凋亡的作用和机制及其与靶基因ATG12的关系。方法采用瞬时转染miR-422a模拟物和抑制物分别上调或下调骨肉瘤细胞的miR-422a表达水平,采用MTT法检测各时间点骨肉瘤细胞的增殖能力,瞬时转染miR-422a... 目的探讨miR-422a调控骨肉瘤细胞自噬及凋亡的作用和机制及其与靶基因ATG12的关系。方法采用瞬时转染miR-422a模拟物和抑制物分别上调或下调骨肉瘤细胞的miR-422a表达水平,采用MTT法检测各时间点骨肉瘤细胞的增殖能力,瞬时转染miR-422a后采用流式细胞术检测骨肉瘤细胞凋亡情况,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测转染miR-422a对靶基因mRNA的影响。结果RT-qPCR结果显示,miR-422a在肿瘤组织及细胞中均高表达,ATG12在肿瘤组织及细胞中均低表达。MTT法结果显示,miR-422a-mimic组吸光度值明显升高,miR-422a-inhibitor组吸光度值明显降低(P<0.05)。流式细胞术检测结果显示,miR-422a-inhibitor组细胞凋亡率高于空白组与NC组(P<0.0001)。Western blot检测结果显示,miR-422a-mimic组细胞中ATG12、LC3-Ⅱ和LC3-Ⅰ蛋白量明显低于空白组与NC组(P<0.05);miR-422a-inhibitor组细胞中ATG12、LC3-Ⅱ蛋白量明显高于空白组与NC组,LC3-Ⅰ蛋白量明显低于空白组与NC组(P<0.05);miR-422a-inhibitor组细胞中LC3-Ⅱ/Ⅰ明显高于空白组与NC组(P<0.05)。结论miR-422a/ATG12信号轴可能调控骨肉瘤细胞的自噬及凋亡。 展开更多
关键词 骨肉瘤 mir-422a 自噬 ATG12 凋亡
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miR-422a is an independent prognostic factor and functions as a potential tumor suppressor in colorectal cancer 被引量:3
4
作者 Gui-Xi Zheng Ai-Lin Qu +3 位作者 Yong-Mei Yang Xin Zhang Shou-Cai Zhang Chuan-Xin Wang 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2016年第24期5589-5597,共9页
AIM: To determine the expression of mi R-422 a in colorectal cancer(CRC) tissues and to further explore the prognostic value and function of mi R-422 a in CRC carcinogenesis.METHODS: mi R-422 a expression was analyzed... AIM: To determine the expression of mi R-422 a in colorectal cancer(CRC) tissues and to further explore the prognostic value and function of mi R-422 a in CRC carcinogenesis.METHODS: mi R-422 a expression was analyzed in 102 CRC tissues and paired normal mucosa adjacent to carcinoma by quantitative real-time PCR. The relationship of mi R-422 a expression with clinicopathological parameters was also analyzed. Kaplan-Meier analysis and Cox multivariate analysis were performed to estimate the potential role of mi R-422 a. Cell proliferation, migration, and invasion were used for in vitro functional analysis of mi R-422 a.RESULTS: The levels of mi R-422 a were dramatically reduced in CRC tissues compared with normal mucosa(P < 0.05), and significantly correlated with local invasion(P = 0.004) and lymph node metastasis(P < 0.001). Kaplan-Meier survival and Cox regression multivariate analyses revealed that mi R-422 a expression(HR = 0.568, P = 0.015) and clinical TNM stage(HR = 2.942, P = 0.003) were independent prognostic factorsfor overall survival in CRC patients. Furthermore, in vitro experiments showed that overexpression of mi R-422 a inhibited the proliferation, migration, and invasion of SW480 and HT-29 cells.CONCLUSION: Down-regulation of mi R-422 a may serve as an independent prognosis factor in CRC. Mi R-422 a functions as a tumor suppressor and regulates progression of CRC. 展开更多
关键词 COLORECTAL cancer Micro RNA mi R-422a PROGNOSIS In VITRO function
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miR-422a靶向激肽释放酶-4抑制宫颈癌细胞的增殖、迁移与侵袭
5
作者 宋鹏霞 李群锋 +1 位作者 曹焰晖 姚水洪 《天津医药》 CAS 北大核心 2021年第10期1031-1037,共7页
目的探讨miR-422a靶向激肽释放酶-4(KLK4)对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR法(qPCR)检测人宫颈癌细胞HeLa、SiHa和人正常宫颈上皮细胞H8中miR-422a的表达;将宫颈癌HeLa细胞分为blank组、miR-NC组、miR-422a组、... 目的探讨miR-422a靶向激肽释放酶-4(KLK4)对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR法(qPCR)检测人宫颈癌细胞HeLa、SiHa和人正常宫颈上皮细胞H8中miR-422a的表达;将宫颈癌HeLa细胞分为blank组、miR-NC组、miR-422a组、mut miR-422a组、miR-422a+pcDNA组、miR-422a+pcDNA-KLK4组。CCK-8实验和Transwell实验检测各组宫颈癌HeLa细胞增殖、迁移和侵袭的能力;TargetScan软件预测miR-422a可能调控结合的靶基因,双荧光素酶活性实验对靶向关系进行验证。Western blot检测各组细胞KLK4蛋白表达水平。结果与人正常宫颈上皮细胞H8相比,宫颈癌HeLa、SiHa细胞中miR-422a呈现低表达(P<0.01),选择宫颈癌HeLa细胞进行后续实验;与miR-NC组和blank组相比,miR-422a组培养4、6 d细胞增殖能力降低,培养6、12 h细胞迁移和侵袭数量减少(P<0.05);与miR-422a+pcDNA组相比,miR-422a+pcDNA-KLK4组培养4、6 d细胞增殖能力明显升高,培养6、12 h细胞迁移和侵袭数量增加(P<0.01)。TargetScan软件预测发现KLK4基因与miR-422a存在结合位点,并经双荧光素酶报告基因实验验证。与miR-NC组相比,miR-422a组中KLK4蛋白的表达水平降低,与miR-422a组相比,mut miR-422a组中KLK4蛋白的表达水平升高(P<0.01),与miR-422a+pcDNA组相比,miR-422a+pcDNA-KLK4组中KLK4蛋白的表达水平升高(P<0.01)。结论miR-422a可通过靶向KLK4蛋白的表达抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 激肽释放酶类 微RNAS HELA细胞 细胞增殖 细胞运动 细胞侵袭 mir-422a
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创伤性颅脑损伤患者血清miR-422a,miR-212-5p表达水平与病情和预后的相关性研究 被引量:3
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作者 赵大龙 田金灵 《现代检验医学杂志》 CAS 2022年第1期67-71,共5页
目的探讨创伤性颅脑损伤患者血清miR-422a,miR-212-5p表达与病情和预后的相关性,分析miR-422a,miR-212-5p诊断创伤性脑损伤患者预后的价值。方法连续性选择2018年4月~2020年6月山东省菏泽市中医院收治的173例创伤性颅脑损伤患者(创伤组... 目的探讨创伤性颅脑损伤患者血清miR-422a,miR-212-5p表达与病情和预后的相关性,分析miR-422a,miR-212-5p诊断创伤性脑损伤患者预后的价值。方法连续性选择2018年4月~2020年6月山东省菏泽市中医院收治的173例创伤性颅脑损伤患者(创伤组)和同期125例志愿者(对照组)。根据格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分将创伤组患者分为轻度组(GCS评分13~15分,57例),中度组(GCS评分9~12分,63例)和重度组(GCS评分3~8分,53例),追踪临床结局,根据格拉斯哥预后量表(GOS)评分将患者分为预后不良组(GOS评分1~3分,62例)和预后良好组(GOS评分4~5分,111例)。检测所有受试者血清miR-422a,miR-212-5p表达,比较组间差异,分析miR-422a,miR-212-5p与创伤性颅脑损伤患者预后的关系以及miR-422a,miR-212-5p预测患者预后的价值。结果创伤组血清miR-422a表达高于对照组(3.02±1.02 vs 0.95±0.21),miR-212-5p表达低于对照组(1.03±0.28 vs 2.85±0.61),差异均有统计学意义(t=22.340,34.544,均P<0.05)。重度组血清miR-422a表达高于中度组和轻度组(4.01±0.13 vs 2.92±0.66,2.21±0.12;t=11.824,75.516,均P<0.05),miR-212-5p表达低于中度组和轻度组(0.84±0.06 vs 0.97±0.25,1.27±0.04;t=3.695,44.512,均P<0.05),预后不良组血清miR-422a表达高于预后良好组(4.05±0.11 vs 2.44±0.31,t=22.340,P<0.05),miR-212-5p表达低于预后良好组(0.83±0.06 vs 1.14±0.21,t=22.340,P<0.05),差异均有统计学意义。低GCS评分(OR=0.825,95%CI:0.721~0.945),高miR-422a表达(OR=1.394,95%CI:1.194~1.627),低miR-212-5p表达(OR=0.744,95%CI:0.667~0.831)是创伤性颅脑损伤患者预后不良的危险因素(均P<0.05)。联合miR-422a,miR-212-5p预测创伤性颅脑损伤患者预后不良的曲线下面积为0.907,高于单独检测miR-422a,miR-212-5p的0.797,0.775(Z=2.412,2.561,均P<0.05)。结论miR-422a过表达和miR-212-5p表达缺失与创伤性脑损伤严重程度和不良预后有关,可作为预后预测的潜在生物学指标。 展开更多
关键词 微小核糖核酸-422a 微小核糖核酸-212-5p 创伤性脑损伤
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大鼠力竭游泳运动外周血内mi-422a与大脑皮质Bcl-w表达与运动性中枢疲劳 被引量:2
7
作者 杨立 《成都体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2010年第9期69-71,共3页
研究目的:探讨外周血内Mir-422a可否监测运动性中枢疲劳。研究方法:健康雄性Wister大鼠36只,随机分为对照组(C组)、一次性力竭运动组(E组)。力竭运动后即刻、12h和24h取各组外周血和大脑皮质分别采用real-time PCR和免疫组织化学技术检... 研究目的:探讨外周血内Mir-422a可否监测运动性中枢疲劳。研究方法:健康雄性Wister大鼠36只,随机分为对照组(C组)、一次性力竭运动组(E组)。力竭运动后即刻、12h和24h取各组外周血和大脑皮质分别采用real-time PCR和免疫组织化学技术检测各组外周血Mir-422a和大脑皮质Bcl-w表达。结果:力竭运动后即刻Mir-422a表达降低(P<0.05),而Bcl-w表达升高(P<0.05);12h后Mir-422a表达逐渐升高,而Bcl-w表达逐渐降低,24h均基本恢复到安静水平。结论:外周血内Mir-422a的表达有望成为运动性中枢疲劳的监测指标。 展开更多
关键词 运动性中枢疲劳 力竭游泳运动 mir-422a bcl—w
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hsa-miR-422a靶基因在增生性瘢痕中的表达及生物信息分析
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作者 张泽伟 顾舒晨 +6 位作者 黄昕 赵奕暄 刘云菡 邝依敏 骆申英 李广帅 昝涛 《中华医学美学美容杂志》 2023年第1期1-6,共6页
目的检测hsa-miR-422a在增生性瘢痕的表达,用生物信息学方法预测其靶基因,并分析其生物学功能。方法2020年6—12月,上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科收集3份增生性瘢痕组织和3份上睑单睑患者皮肤组织(男3例,女3例,年龄20~42... 目的检测hsa-miR-422a在增生性瘢痕的表达,用生物信息学方法预测其靶基因,并分析其生物学功能。方法2020年6—12月,上海交通大学医学院附属第九人民医院整复外科收集3份增生性瘢痕组织和3份上睑单睑患者皮肤组织(男3例,女3例,年龄20~42岁,平均28.3岁),分离培养成纤维细胞,用实时定量PCR检测hsa-miR-422a表达;用starBase和TargetScan数据库预测hsa-miR-422a靶向基因及长链非编码RNA(lncRNAs),构建ceRNA网络。对hsa-miR-422a靶基因进行GO功能注释和KEGG通路分析;通过构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络筛选关键基因,并预测其生物学功能。用实时定量PCR检测验证关键靶基因在增生性瘢痕组织的表达。结果增生性瘢痕组织和成纤维细胞中,hsa-miR-422a表达量明显低于正常皮肤(P<0.05)。starBase和TargetScan数据库预测到hsa-miR-422a靶向的133个基因和1033个lncRNA,由此构建以hsa-miR-422a为中心的ceRNA网络。靶基因PPI网络分析筛选出MAPK1、GRB2和IGF1R等10个关键基因,其功能主要与蛋白丝氨酸/苏氨酸/酪氨酸激酶活动、泛素蛋白连接酶结合、成纤维细胞生长因子受体通路、肌细胞增殖等相关,且主要富集于FoxO、mTOR、Toll样受体、Ras、MAPK、PI3K-Akt、干细胞调控等通路。关键靶基因MAPK1、GRB2和IGF1R在增生性瘢痕组织中表达明显高于正常皮肤(P<0.05)。结论hsa-miR-422a在增生性瘢痕表达较低,可能与MAPK1等关键靶基因构成ceRNA网络,在增生性瘢痕的发生发展中发挥调控作用。 展开更多
关键词 瘢痕 肥大性 基因 hsa-mir-422a 生物信息学 竞争性内源RNA 富集分析
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抑制LINC00958表达调控miR-422a促进结直肠癌细胞凋亡及放射敏感性的机制 被引量:1
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作者 梁鸿 张辉 张超 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第12期1118-1123,共6页
目的探讨lncRNA LINC00958对结直肠癌细胞凋亡及放射敏感性的影响以及其作用机制。方法将pcDNA、pcDNA-LINC00958、si-NC、si-LINC00958、miR-NC和miR-422a质粒分别转染到SW480细胞中,并分别记为pcDNA组、pcDNA-LINC00958组、si-NC组、s... 目的探讨lncRNA LINC00958对结直肠癌细胞凋亡及放射敏感性的影响以及其作用机制。方法将pcDNA、pcDNA-LINC00958、si-NC、si-LINC00958、miR-NC和miR-422a质粒分别转染到SW480细胞中,并分别记为pcDNA组、pcDNA-LINC00958组、si-NC组、si-LINC00958组、miR-NC组和miR-422a组;将anti-miR-NC和anti-miR-422a质粒分别与si-LINC00958共转染到SW480细胞中,并分别记为si-LINC00958+anti-miR-NC组和si-LINC00958+anti-miR-422a组;分别将miR-NC和miR-422a分别转染到WT-LINC00958和MUT-LINC00958组细胞中,检测荧光活性;转染均用脂质体法。采用qRT-PCR检测miR-422a和LINC00958的表达;Western blot检测蛋白表达;流式细胞术检测细胞凋亡;细胞克隆形成实验检测对结直肠癌细胞放射敏感性的影响;双荧光素酶报告基因检测实验检测荧光活性。结果结直肠癌细胞中LINC00958高表达,miR-422a低表达;抑制LINC00958表达和过表达miR-422a,可促进结直肠癌细胞凋亡,并增加细胞放射敏感性。LINC00958可靶向调节miR-422a表达;抑制miR-422a,逆转了抑制LINC00958表达对结直肠癌细胞的放射增敏和细胞凋亡促进的作用。结论抑制LINC00958表达,增加结直肠癌细胞的放射敏感性,并促细胞凋亡,其机制可能与调控miR-422a有关,将为结直肠癌治疗提供新靶点和新思路。 展开更多
关键词 LINC00958基因 mir-422a基因 结直肠癌细胞系 放射敏感性
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水翁花对过氧化氢诱导神经细胞凋亡的影响 被引量:5
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作者 于广周 谭文刚 张昊 《分子诊断与治疗杂志》 2019年第6期517-521,544,共6页
目的探讨水翁花对过氧化氢(H2O2)诱导神经细胞PC12凋亡的影响及其作用机制。方法构建PC12氧化应激损伤模型,不同浓度的水翁花干预H2O2诱导的PC12细胞,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;检测细胞SOD水平。qRT PCR法检测水翁花对miR 422a表... 目的探讨水翁花对过氧化氢(H2O2)诱导神经细胞PC12凋亡的影响及其作用机制。方法构建PC12氧化应激损伤模型,不同浓度的水翁花干预H2O2诱导的PC12细胞,应用流式细胞仪检测细胞凋亡率;检测细胞SOD水平。qRT PCR法检测水翁花对miR 422a表达的影响;过表达miR 422a或抑制miR 422a表达对H2O2诱导的PC12细胞凋亡及SOD活性的影响。Western blot法测定细胞中Bcl 2、Bax的表达变化。结果H2O2诱导的PC12细胞凋亡率升高(P<0.05),SOD活性降低(P<0.05),抑制miR 422a表达(P<0.05),而水翁花处理后,PC12细胞凋亡率降低(P<0.05),SOD活性增强(P<0.05),促进miR 422a表达(P<0.05),Bcl 2表达上调(P<0.05),Bax表达下调(P<0.05);过表达miR 422a可抑制H2O2诱导的PC12细胞凋亡(P<0.05),增强SOD活性(P<0.05);抑制miR 422a表达可逆转水翁花对H2O2诱导的PC12细胞凋亡、SOD活性的影响。结论水翁花可通过上调miR 422a表达对H2O2诱导的PC12细胞损伤发挥保护作用,其可能作用机制与抗细胞凋亡及抗氧化作用相关。 展开更多
关键词 水翁花 过氧化氢 mir 422a PC12细胞 凋亡
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