circNHSL1通过调控miR-125b-5p/HMGB3轴抑制人乳腺癌细胞系增殖及促凋亡

目的探讨circNHSL1调控miR-125b-5p/HMGB3轴对乳腺癌细胞生物行为的影响。方法将乳腺癌细胞系T47D分为si-NC组、si-circNHSL1组、miR-NC组、miR-125b-5p mimic组、si-circNHSL1+miR-125b-5p inhibitor组。RT-qPCR测定circNHSL1和miR-125b-5p在乳腺癌组织和癌旁组织中的表达。Western blot检测高迁移率族蛋白3(HMGB3)蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验确定circNHSL1与miR-125b-5p、miR-125b-5p与HMGB3之间的相互作用。CCK-8法检测增殖抑制率;集落形成实验检测集落形成数;流式细胞术检测凋亡率;Transwell实验检测迁移和侵袭细胞数。结果与癌旁组织比较,乳腺癌组织中circNHSL1和HMGB3表达升高(P<0.05),miR-125b-5p相对水平显著降低(P<0.05)。miR-125b-5p分别与circNHSL1、HMGB3直接结合。circNHSL1敲低下调T47D细胞中circNHSL1和HMGB3表达,上调miR-125b-5p表达(P<0.05);而miR-125b-5p mimic转染后上调miR-125b-5p表达,下调HMGB3表达(P<0.05);且miR-125b-5p inhibitor转染能够逆转circNHSL1沉默对miR-125b-5p以及HMGB3表达的影响。circNHSL1低表达或miR-125b-5p高表达增加T47D细胞抑制率、集落形成数以及细胞凋亡率,减少迁移数、侵袭数(P<0.05);且miR-125b-5p inhibitor的转染挽救circNHSL1沉默对细胞表型的影响(P<0.05)。结论干扰circNHSL1通过上调miR-125b-5p/HMGB3轴可促进乳腺癌细胞凋亡,抑制其增殖、迁移和侵袭。

miR-125b-5p、miR-1207-3p、miR-802在前列腺癌组织中的表达及其与临床病理特征和预后的关系

目的分析前列腺癌(PCa)组织中miR-125b-5p、miR-1207-3p、miR-802表达水平,并探析指标与病理参数、预后的关系。方法选取161例PCa患者作为研究对象,病例收集时间为2019年1月至2021年7月,收集地点为宁波市医疗中心李惠利医院。患者从确诊当日起开始随访,随访时间截至2024年7月,随访期间失访3例,最终纳入158例进行研究,根据预后情况分为预后不良组(53例)和预后良好组(105例)。收集PCa患者手术切除的新鲜癌组织和癌旁组织标本,比较癌组织和癌旁组织miR-125b-5p、miR-1207-3p、miR-802表达,分析PCa患者癌组织miR-125b-5p、miR-1207-3p、miR-802表达与临床病理特征的关系,比较不同预后PCa患者癌组织miR-125b-5p、miR-1207-3p、miR-802表达。应用Cox回归分析PCa患者不良预后的危险因素,并将预后不良组纳入阳性,预后良好组纳入阴性,分析癌组织miR-125b-5p、miR-1207-3p、miR-802对PCa患者不良预后的预测价值,应用受试者工作特征曲线(ROC)获取曲线下面积(AUC)。结果PCa患者癌组织miR-125b-5p、miR-802表达低于癌旁组织(P<0.05),癌组织miR-1207-3p表达高于癌旁组织(P<0.05)。Gleason评分>7分、Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移的PCa患者癌组织miR-125b-5p、miR-802表达低于Gleason评分≤7分、Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移者(P<0.05);而癌组织miR-1207-3p表达高于Gleason评分≤7分、Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移者(P<0.05)。预后不良组中癌组织miR-125b-5p、miR-802表达低于预后良好组(P<0.05),癌组织miR-1207-3p表达高于预后良好组(P<0.05)。Cox回归分析可见,癌组织miR-125b-5p表达偏低(HR=1.091)、miR-1207-3p表达偏高(HR=1.099)、miR-802表达偏低(HR=1.135)与PCa患者不良预后有关(P<0.05)。ROC分析可见,癌组织miR-125b-5p、miR-1207-3p、miR-802联合检测预测PCa患者不良预后的AUC值为0.900,高于三者单一检测(AUC值分别为0.689、0.679、0.758,P<0.05)。结论PCa组织中miR-125b-5p、miR-802呈低表达,而miR-1207-3p呈高表达,三者与患者病理、预后有关,且三者联合检测预测PCa患者不良预后更具优势。

苓桂术甘汤联合艾灸疗法对慢性心力衰竭患者的疗效及miR-125b-5p、Th17/Treg的影响

目的:探究苓桂术甘汤联合艾灸疗法对慢性心力衰竭患者的疗效及miR-125b-5p、外周血辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T淋巴细胞(Treg)的影响。方法:选择2021年5月~2023年5月在本院治疗的186例慢性心力衰竭(CHF)患者作为研究对象,随机分为对照组( n =93)和联合组( n =93)。对照组给予常规西医干预+艾灸疗法,联合组给予常规西医干预+艾灸疗法+苓桂术甘汤,两组连续干预4w。统计分析两组临床疗效、治疗前、治疗4w后中医证候积分、心功能指标、6min步行距离变化、miR-125b-5p、Th17/Treg水平变化。结果:治疗后两组疗效等级有差异( P <0.05),且联合组有效率高于对照组[79.57% vs 66.66%]( P <0.05)。治疗前两组中医证候积分、心功能指标、6min步行距离变化、miR-125b-5p、Th17/Treg变化无差异( P >0.05);治疗后两组中医证候主症、次症积分、左室舒张末内径(LVED)、miR-125b-5p、Th17/Treg均下调,左室射血分数(LVEF)、6min步行距离均升高,且联合组更优( P <0.05)。结论:苓桂术甘汤联合艾灸疗法能有效治疗CHF,改善临床症状,且能降低miR-125b-5p、Th17/Treg水平,从而提升心功能。

黄芪甲苷经由miR-125a-5p/NLRP1轴减轻椎间盘突出髓核细胞损伤

目的在白介素-1β(IL-1β)诱导退变的人髓核细胞中,探究黄芪甲苷对miR-125a-5p及其靶基因介导的信号通路的作用,揭示黄芪甲苷(astragaloside IV,AS-IV)对髓核细胞增殖、凋亡以及炎症反应的影响。方法实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-125a-5p和核苷酸寡聚化结构域(NOD)样受体蛋白1(nucleotide oligomerization domain(NOD)-like receptor protein 1,NLRP1)在椎间盘突出患者髓核组织中的表达,用IL-1β诱导髓核细胞退变,在20、50和80μg·mL^(-1)黄芪甲苷干预浓度下检测miR-125a-5p和NLRP1的表达,在IL-1β和80μg·mL^(-1)黄芪甲苷处理的髓核细胞中单独或共同转染miR-125a-5p模拟物和NLRP1过表达质粒,然后分别检测细胞增殖、凋亡和炎症因子分泌情况,蛋白质免疫印迹(Western blot)检测细胞中信号通路相关蛋白p56和p38的磷酸化水平。结果椎间盘突出(lumbar disc herniation,LDH)患者的髓核组织中miR-125a-5p表达下调,NLRP1表达上调。黄芪甲苷促进IL-1β处理的髓核细胞中miR-125a-5p表达,减少NLRP1表达以及p56和p38蛋白的磷酸化水平。黄芪甲苷促进髓核细胞增殖,减少凋亡和炎症反应。结论黄芪甲苷通过上调miR-125a-5p表达,抑制NLRP1的表达和NF-κB/MAPK信号通路,减少IL-1β诱导的髓核细胞损伤。

miR-125b-5p靶向STAT3调控免疫因子IL-6/10的表达抑制子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭的机制研究

目的探讨miR-125b-5p对子宫内膜癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其机制。方法采用荧光定量PCR检测子宫内膜癌组织中miR-125b-5p的表达,免疫组织化学染色法检测子宫内膜癌组织中STAT3、IL-6/10的表达;双荧光素酶报告基因检测和Western blot检测验证miR-125b-5p和STAT3的靶向调控关系;荧光定量PCR和Western blot检测miR-125b-5p过表达或干扰STAT3表达对子宫内膜癌HEC-1B细胞中IL-6/10 mRNA和蛋白表达的影响;CCK-8法、Transwell小室分别检测miR-125b-5p过表达或干扰STAT3表达对HEC-1B细胞的增殖、迁移和侵袭的影响。结果与癌旁正常组织相比,子宫内膜癌组织中miR-125b-5p表达明显降低,而STAT3、IL-6/10蛋白的表达水平明显升高(P<0.05)。子宫内膜癌中STAT3表达水平与肿瘤大小、淋巴结转移、组织学分级以及TNM分期呈显著正相关(P<0.05),而miR-125b-5p表达与肿瘤大小、淋巴结转移、组织学分级以及TNM分期呈显著负相关(P<0.05)。STAT3是miR-125b-5p的潜在靶基因,miR-125b-5p可负向调控STAT3表达。miR-125b-5p过表达后,HEC-1B细胞中IL-6/10 mRNA和蛋白表达水平以及细胞增殖、迁移、侵袭能力均明显降低;干扰STAT3表达后,HEC-1B细胞中IL-6/10表达及细胞增殖、迁移、侵袭能力与miR-125b-5p过表达的结果相一致。结论miR-125b-5p可通过靶向STAT3调控IL-6/10的表达抑制子宫内膜癌细胞的增殖、迁移和侵袭。

miR-221-3p、miR-125b-5p、miR-183-5p在甲状腺癌中的表达及其诊断价值分析

目的分析miR-221-3p、miR-125b-5p与miR-183-5p在甲状腺癌中的表达及其诊断价值。方法收集2016年4月-2018年12月青海大学附属医院肿瘤外科诊治甲状腺乳头状癌患者138例(病例组),选择同期医院诊治的甲状腺结节患者138例作为对照组,采用实时荧光逆转录法分析miR-221-3p、miR-125b-5p与miR-183-5p的表达水平,并用ROC曲线分析其诊断价值。结果与对照组比较,病例组miR-221-3p、miR-125b-5p、miR-183-5p水平明显升高(t=16.321、21.645、26.321,P均=0.000)。miR-221-3p、miR-125b-5p、miR-183-5p阳性率在肿瘤较大、复发、临床Ⅲ~Ⅳ期、血管间隙浸润、转移时明显升高(P<0.05)。miR-221-3p+miR-125b-5P+miR-183-5p联合筛查甲状腺癌的AUC、约登指数、敏感度、特异度、准确度分别为0.843、0.62、90.5%、71.1%、84.4%,均高于miR-221-3p、miR-125b-5p、miR-183-5p单独筛查方法(P<0.05)结论 miR-221-3p、miR-125b-5p与miR-183-5p在甲状腺癌中表达升高,且与甲状腺癌的进展密切相关,三者联合筛查甲状腺癌具有较高的敏感度、特异度、准确度,适合推广应用。

miR-125b-5p对人血管瘤内皮细胞HemES增殖和凋亡的影响及其机制

目的:研究miR-125b-5p对人血管瘤内皮细胞HemECs增殖、凋亡的影响。方法:RT-qPCR检测人血管瘤内皮细胞HemECs及其旁系组织细胞中miR-125b-5p与MCL-1 mRNA的表达;选取HemECs细胞分为对照组、miR-NC组、miR-125b-5p mimic组、miR-125b-5p inhibitor组、pc-MCL-1组、miR-125b-5p+pc-MCL-1组,每组设9复孔。将100 nmol•L-1的miR-NC、miR-125b-5p mimic、miR-125b-5p inhibitor、pc-MCL-1质粒分别或联合转染进入HemECs细胞。MTT法检测HemECs细胞增殖;流式细胞术检测HemECs细胞凋亡;双荧光素酶报告检测靶向关系;蛋白印迹法检测Ki67、PCNA、cleaved caspase-3、Bax、Bcl-2、p-p70s6k/p70s6k、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR蛋白相对表达水平。结果:通过比较miR-125b-5p在血管瘤组织和细胞中的表达水平,选择下调效果比较明显的HemECs细胞系进行后续实验。与对照组相比,miR-125b-5p mimic组HemECs细胞增殖及Ki67和PCNA表达明显减少(P<0.01),细胞凋亡率及cleaved Caspase-3、Bax表达明显升高、Bcl-2表达明显降低(P<0.01),p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K表达明显下调(P<0.01);miR-125b-5p inhibitor组HemECs细胞增殖及Ki67和PCNA表达明显增加(P<0.01),细胞凋亡率及cleaved Caspase-3、Bax表达明显降低、Bcl-2表达升高(P<0.05,P<0.01)。miR-125b-5p靶向下调MCL-1。与miR-125b-5p mimic组相比,miR-125b-5p+pc-MCL-1组HemECs细胞增殖及Ki67和PCNA表达明显增加(P<0.01),细胞凋亡率及cleaved Caspase-3、Bax表达明显降低、Bcl-2表达明显升高(P<0.01),p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR、p-p70S6K/p70S6K表达明显上调(P<0.01)。结论:miR-125b-5p抑制人血管瘤内皮细胞增殖、诱导细胞凋亡,其机制可能与靶向下调MCL-1表达,抑制AKT/mTOR通路激活等有关。

血清miR-125b-5p在急性缺血性脑卒中患者中的表达及其与Hcy、Hs-CRP及MMP-9的相关性

目的:探讨急性缺血性脑卒中(acute ischemic stroke,AIS)患者血清miR-125b-5p的表达与同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)、超敏C反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein,Hs-CRP)及基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)的相关性,为AIS的诊治提供依据。方法:选取2016年1月至2019年5月海南省第三人民医院收治的174例AIS,采用美国国立卫生研究院卒中量表(National Institutes of Health Stroke Scale,NIHSS)评分分为轻度组(n=51,NIHSS评分<5分)、中度组(n=79,5分≤NIHSS评分≤20分)和重度组(n=44,NIHSS评分>20分)。另选择65例健康体检正常者作为对照组。采用实时荧光定量PCR检测各组血清miR-125b-5p表达水平。应用ROC曲线分析血清miR-125b-5p、Hcy、Hs-CRP及MMP-9水平对AIS诊断的价值,Pearson相关分析AIS患者血清miR-125b-5表达水平与Hcy、Hs-CRP及MMP-9的相关性。结果:AIS组血清miR-125b-5p[(2.74±0.95)vs.(0.68±0.13)]、Hcy[(19.26±5.37)μmol/L vs.(5.84±1.20)μmol/L]、Hs-CRP[(6.85±1.73)mg/L vs.(1.04±0.28)mg/L]及MMP-9[(150.75±30.82)μg/L vs.(78.62±11.40)μg/L]水平明显高于对照组(t=14.217,P=0.000;t=13.475,P=0.000;t=10.624,P=0.000;t=9.806,P=0.000)。重度组血清miR-125b-5 [(4.10±1.18)vs.(2.62±0.84)、(1.70±0.53)]、Hcy[(28.35±6.80)μmol/L vs.(18.42±4.93)μmol/L、(11.50±3.27)μmol/L]、Hs-CRP[(11.92±3.25)mg/L vs.(6.14±1.57)mg/L、(2.76±0.63)mg/L)]及MMP-9[(225.80±47.63)μg/L vs.(142.52±26.80)μg/L、(86.50±12.62)μg/L)]水平均明显高于中度组和轻度组(F=10.845,P=0.000;F=8.716,P=0.000;F=5.184,P=0.003;F=4.972,P=0.010)。血清miR-125b-5p诊断AIS的AUC(95%CI)为0.846(0.787~0.903),明显高于Hcy[0.754(0.693~0.812)]、Hs-CRP[0.728(0.672~0.788)]及MMP-9[0.695(0.634~0.753)],其最佳临界值取2.10时,敏感度和特异度分别为88.0%和80.7%。相关分析显示,AIS患者血清miR-125b-5p表达水平与Hcy、Hs-CRP及MMP-9均呈正相关(r=0.836、0.745、0.702,P<0.01)。结论:血清miR-125b-5p表达水平在AIS患者中明显升高,且与Hcy、Hs-CRP及MMP-9水平相关,有望作为AIS诊断的生物标志物。

子痫前期患者血清及尿液中miR-125a/b-5p的表达及相关临床研究

目的了解miR-125a/b-5p在子痫前期患者外周血血清、尿液中的表达,探讨外周循环miR-125a/b-5p在子痫前期发病中的作用。方法收集子痫前期患者(n=20)及正常妊娠组(n=20)的外周血血清及尿液,miR-125a/b-5p的表达采用基于茎环的qRT-PCR检测,同时结合临床资料进行分析。结果血清miR-125b-5p在子痫前期组中的表达与正常妊娠组比较显著降低,差异有统计学意义(Z=-2.272,P=0.023);血清miR-125a-5p在两组间比较,差异无统计学意义(Z=-0.622,P=0.547);尿液miR-125a/b-5p在两组间比较,差异均无统计学意义(Z=-0.663,-0.189,P>0.05);在子痫前期患者中,舒张压与尿miR-125b-5p存在负相关(r=-0.513,P=0.021);正常妊娠者中,尿素氮与血清miR-125b-5p呈正相关(r=0.472,P=0.036);收缩压与尿液miR-125b-5p,尿液miR-125a-5p呈正相关(r=0.526,0.502,P=0.017,0.024)。结论血清miR-125b-5p的降低与子痫前期的发病相关。

miR-125b、miR-29a和miR-155-5p作为诊断结核性脑膜炎生物标志的研究

目的探讨结核性脑膜炎患者脑脊液及血浆中micro RNA(mi R)-125b、mi R-29a和mi R-155-5p的表达水平及其临床意义。方法收集20例结核性脑膜炎患者(结脑组)和20例原发性头痛患者(对照组)的脑脊液和血浆,分别提取总RNA,使用实时定量PCR方法分别检测脑脊液和血浆中mi R-125b、mi R-29a及mi R-155-5p的表达水平。结果与对照组相比,结脑组脑脊液、血浆中mi R-29a、mi R-125b表达水平明显上调,结脑组血浆中mi R-155-5p表达水平明显上调,差异均有统计学意义(均P<0.01),而2组脑脊液中mi R-155-5p表达水平比较差异无统计学意义。结论 mi R-125b、mi R-29a和mi R-155-5p可能参与了调节结核性脑膜炎的发生、发展过程,mi R-125b和mi R-29a有可能作为潜在的诊断结核性脑膜炎的生物学标志。

miR-125b-5p对创伤性脑损伤诱发大鼠认知功能障碍的干预作用及其机制

目的:研究miR-125b-5p对创伤性脑损伤(TBI)引起的大鼠认知功能障碍的影响及其分子机制。方法:将大鼠随机分为Control组、TBI组(模型组)、NC agomir组(假阴性组)、miR-125b-5p agomir组(高表达组),每组5只。假阴性组和高表达组分别脑室注射NC agomir和miR-125b-5p agomir,除Control组外各组均用改良Feeney法建立脑损伤模型。通过行为学实验对大鼠的运动协调、学习记忆、神经损伤程度等进行评估。通过ELISA和Western blot对各组大鼠海马组织中miR-125b-5p、炎性因子,以及神经相关因子的表达水平进行检测。最后使用生物信息学结合RT-PCR和Western blot对miR-125b-5p的下游靶基因进行预测和验证。结果:与对照组相比,模型组和假阴性组大鼠miR-125b-5p的表达水平显著下调、mNSS评分显著升高、运动协调能力及学习记忆能力显著下降、白介素(IL-1β、IL-6)及肿瘤坏死因子(TNF-α)表达水平显著升高、BDNF和NGF的表达水平显著下降、GFAP的表达水平显著升高(P<0.01);与模型组和假阴性组相比,高表达组大鼠的miR-125b-5p的表达水平显著升高、mNSS评分显著降低、运动协调能力及学习记忆能力明显增高、IL-1β、IL-6及TNF-α表达水平显著下降、BDNF及NGF的表达水平升高、GFAP的表达水平显著下降(P<0.01)。生信分析显示,MMP-15为miR-125b-5p的下游靶标基因,与对照组相比,模型组和假阴性组MMP-15表达显著升高(P<0.01);与模型组和假阴性组相比,高表达组MMP-15的表达显著降低(P<0.01)。结论:miR-125b-5p可改善TBI引起的大鼠认知功能障碍,这可能与其调控MMP-15的表达水平,进而抑制TBI后神经炎症反应,促进神经元再生相关。

原花青素B2通过miR⁃499⁃5p促进骨骼肌慢肌纤维基因的表达

旨在探究原花青素B2(Proanthocyanidins B2,PB2)是否通过miR⁃499⁃5p调控骨骼肌慢肌纤维基因的表达.在小鼠C2C12细胞和猪骨骼肌卫星细胞诱导分化形成肌管后,分别向肌管中添加0μg/mL、2.5μg/mL、5μg/mL和10μg/mL的PB2,探究不同浓度PB2对慢肌纤维基因表达的影响.在机制研究试验中,分别向C2C12肌管和猪肌管中添加10μg/mL的PB2,同时转染200 nM的miR⁃499⁃5p inhibitor抑制miR⁃499⁃5p的表达.结果表明,不同添加剂量的PB2均可促进C2C12肌管MyHC I基因的表达(P<0.05);添加5μg/mL和10μg/mL的PB2显著增加猪肌管MyHC I基因的表达(P<0.05);添加5μg/mL和10μg/mL的PB2上调C2C12肌管和猪肌管miR⁃499⁃5p的表达水平(P<0.05).机制研究发现,抑制miR⁃499⁃5p解除了PB2对miR⁃499⁃5p、MyHC I mRNA和慢型MyHC蛋白表达的促进作用.以上研究表明,PB2可以通过miR⁃499⁃5p促进骨骼肌慢肌纤维基因的表达.

抗纤益心方通过调控miR-125b-5p抑制扩张型心肌病心肌纤维化的研究

目的探讨miR-125b-5p对AngⅡ诱导的的心肌成纤维细胞(CFs)转分化的影响及抗纤益心方抑制心肌纤维化的作用机制。方法 CFs取于出生48 h内乳鼠,体外培养并分为正常组,模型组,抗纤益心方组。利用腺病毒转染miR-125b-5p, q-PCR检测miR-125b-5p以及-SMA mRNA表达水平;Western blot检测Col-1、-SMA蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组miR-125b-5p以及-SMA mRNA表达水平明显增加(P<0.05)。与模型组比较,抗纤益心方组miR-125b-5p和-SMA mRNA表达水平均下降(P<0.05),Col-1、-SMA蛋白表达水平降低;转染组-SMA表达降低(P<0.05)。结论抗纤益心方可能通过下调miR-125b-5p表达抑制扩张型心肌病心肌纤维化。

miR-125b-5p靶向STAT3调控血管内皮细胞凋亡

目的:探讨miR-125b-5p靶向STAT3对血管内皮细胞凋亡影响。方法:过氧化氢诱导血管内皮细胞凋亡,qPCR法测定miR-125b-5p表达。血管内皮细胞中转染miR-125b-5p mimics,MTT法测定细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测细胞PCNA和C-caspase-3蛋白水平。靶基因预测软件预测STAT3与miR-125b-5p的靶向关系,荧光素酶报告系统鉴定靶向关系。血管内皮细胞共转染STAT3过表达载体及miR-125b-5p mimics,检测细胞活力、凋亡及PCNA、C-caspase-3蛋白表达。结果:过氧化氢处理后的血管内皮细胞中miR-125b-5p水平下降,细胞活力降低,细胞凋亡率升高,细胞PCNA蛋白表达降低,C-caspase-3蛋白表达提高。转染miR-125b-5p mimics可提高过氧化氢条件下血管内皮细胞活力,减少细胞凋亡,提高细胞PCNA蛋白水平,降低细胞C-caspase-3蛋白水平。miR-125b-5p靶向调控STAT3表达。STAT3过表达载体可逆转miR-125b-5p mimics对过氧化氢诱导的血管内皮细胞活力和凋亡的影响。结论:miR-125b-5p靶向STAT3抑制过氧化氢诱导的血管内皮细胞凋亡。

miR-125b-5p、miR-122-3p的表达水平对乙型病毒性肝炎治疗效果的预测

目的研究miR-125b-5p、miR-122-3p的表达水平与乙型病毒性肝炎患者肝功能、免疫功能的关系及对治疗效果的预测价值。方法该研究采取前瞻性研究,选取2019年1月至2021年1月在该院进行治疗的乙型病毒性肝炎患者120例为病例组,另选取同期120例体检健康者作为对照组。根据治疗效果分为有效组和无效组,比较病例组与对照组、有效组和无效组的肝功能、免疫功能以及miR-125b-5p、miR-122-3p水平的差异,探讨miR-125b-5p、miR-122-3p与肝功能、免疫功能的相关性及对治疗效果的预测价值。结果病例组的miR-125b-5p、miR-122-3p、总胆红素(TBIL)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)水平显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);无效组的miR-125b-5p、miR-122-3p、HBV DNA、TBIL、ALT、AST水平显著高于有效组,差异有统计学意义(P<0.05),CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、IgA、IgM、IgG水平显著低于有效组,差异有统计学意义(P<0.05);通过相关性分析,miR-125b-5p、miR-122-3p与TBIL、ALT、AST、HBV DNA呈正相关,与CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、IgA、IgM、IgG呈负相关;miR-125b-5p、miR-122-3p两指标联合检测对于无效患者的预测值显著高于单独检测。miR-125b-5p、miR-122-3p检测用于评价乙型病毒性肝炎治疗效果的临界值分别为2.41,2.55(2^(-ΔΔCt))。结论miR-125b-5p、miR-122-3p的表达水平与乙型病毒性肝炎患者肝功能、免疫功能呈显著的相关性,miR-125b-5p、miR-122-3p对于乙型病毒性肝炎的治疗效果具有显著的预测价值。

弥漫大B细胞淋巴瘤中miR-125a-5p的表达及其意义

目的探讨弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中miR-125a-5p的表达水平及与临床病理特征、预后和NF-κB/p65、Bcl2、Caspase3、Ki-67蛋白表达的关系。方法收集84例DLBCL病例,以同期10例淋巴结反应性增生组织作为对照,采用SYBR Green real-time逆转录聚合酶链反应(real-time RT-PCR)检测其miR-125a-5p的表达水平,免疫组化检测NF-κB/p65、Bcl2、Caspase3、Ki-67蛋白表达,收集临床病理资料并随访,结合患者临床资料及预后进行统计学分析。结果在DLBCL样本中miR-125a-5p表达量上调,其表达量是淋巴结反应性增生的(4.99±8.22)倍(P=0.002);miR-125a-5p在DLBCL中的上调与Hans分型non-GCB亚型存在相关性(P=0.027);miR-125a-5p在DLBCL中的上调表达与NF-κB/p65、Bcl2、Caspase3蛋白表达存在显著相关性(P值分别为0.031、0.030、0.022);在DLBCL中Hans分型non-GCB亚型与NF-κB/p65蛋白具有显著相关性(P=0.002);Kaplan-Meier生存分析显示,miR-125a-5p的高表达与DLBCL患者预后有关(P=0.038);多因素Cox分析显示,miR-125a-5p的高表达可能是DLBCL患者预后的独立危险因素(P=0.013)。结论 miR-125a-5p可能对DLBCL具有潜在的诊断价值;在DLBCL中miR-125a-5p上调作用可能影响NF-κB/p65的活化,尤其在Hans分型non-GCB亚型作用明显;在DLBCL中miR-125a-5p的上调可能通过凋亡途径而影响肿瘤的发生发展;miR-125a-5p的高表达可能与DLBCL患者不良预后有关,可作为DLBCL患者预后的独立危险因素。

微阵列芯片分析miR-125b-5p在胃癌中的表达及临床意义

目的:运用生物信息学技术分析胃癌中microRNA表达特征。方法:使用R语言软件包分析GEO芯片数据集的两个子集中的miRNA表达量的差异;采用qRT-PCR技术检测本院60例胃癌患者癌组织及20例胃癌手术患者癌旁组织中miR-125b-5p的表达量,统计分析其表达特征与分化程度、TNM分期、性别、年龄、家族史及肿瘤直径之间的关系。结果:miR-125b-5p在GSE93415和GSE99415中的表达均上调,且其在胃癌组织与癌旁胃组织表达量差异具有统计学意义(P<0.05)。使用qRT-PCR验证了miR-125b-5p在胃癌组织中的表达高于癌旁组织的趋势,miR-125b-5p表达量与TNM分期和浸润程度有关(P<0.05),与年龄、性别、家族史、肿瘤直径和分化程度均无关(P>0.05);高表达miR-125b-5p的胃癌患者生存期明显缩短。结论:胃癌组织miR-125b-5p高表达,且与胃癌TNM分期、浸润程度及总生存率有关。

miR-125b-5p通过负调控RAB3D基因表达抑制骨肉瘤细胞增殖与迁移

目的 探讨miR-125b-5p调控RAB3D在骨肉瘤增殖与迁移中的作用机制。方法 通过qRT-PCR检测正常骨细胞hFOB1.19、骨肉瘤细胞系(MG63、HOS)中miR-125b-5p的表达水平。骨肉瘤细胞系中通过脂质体转染升高或降低miR-125b-5p的表达,通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤细胞增殖和迁移的变化;通过生物信息学软件预测miR-125b-5p可能调控的靶基因为RAB3D;通过Western blot检测正常骨细胞h FOB1.19、骨肉瘤细胞系(MG63、HOS)中RAB3D的表达水平;骨肉瘤细胞系中通过脂质体转染升高或降低miR-125b-5p的表达,通过Western blot及qRT-PCR实验检测骨肉瘤细胞中RAB3D mRNA及蛋白表达水平;并在骨肉瘤细胞中通过脂质体转染升高或降低RAB3D的表达,通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤增殖和迁移的变化;随后在骨肉瘤细胞中通过脂质体转染同时升高miR-125b-5p和RAB3D的表达量,通过EDU和Transwell实验检测骨肉瘤细胞增殖和迁移的变化。结果 qRT-PCR结果表明在骨肉瘤细胞(MG63、HOS)中miR-125b-5p的表达明显下调(P<0.05)。3种生物信息学软件预测RAB3D是miR-125b-5p可能调控的靶基因。qRT-PCR、Western blot结果显示,miR-125b-5p表达量升高,骨肉瘤细胞(MG63、HOS)中RAB3D的蛋白表达量下降(P<0.05);miR-125b-5p表达量降低,骨肉瘤细胞(MG63、HOS)中RAB3D的蛋白表达量下降(P<0.05),而RAB3D的mRNA水平没有发生变化。细胞增殖及迁移实验结果显示,miR-125b-5p与RAB3D对细胞增殖及迁移的影响相反,而同时在骨肉瘤细胞内升高miR-125b-5p与RAB3D的表达量,RAB3D对骨肉瘤细胞增殖及迁移的影响在重新升高miR-125b-5p表达量时被阻断(P<0.05)。结论 miR-125b-5p在转录后水平通过调控RAB3D的表达抑制了骨肉瘤细胞的增殖和迁移。

血清miR-125b-5p、miR-146a-5p表达水平与乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭患者预后的相关性研究

目的探讨血清微小核糖核酸miR-125b-5p、miR-146a-5p表达水平与乙型肝炎相关慢加急性肝衰竭(HBV-ACLF)患者预后的关系。方法纳入青海省第四人民医院2016年7月至2019年7月收治的80例HBV-ACLF患者行前瞻性研究。收集患者临床资料,根据1年后的预后情况,分成生存组(59例)、死亡组(21例)。比较两组血清miR-125b-5p、miR-146a-5p表达水平及常规肝功能指标[总胆红素(TBil)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、清蛋白(ALB)]水平。采用Pearson相关分析HBV-ACLF患者血清miR-125b-5p、miR-146a-5p表达水平与肝功能指标的相关性。采用COX比例风险回归模型分析HBV-ACLF患者预后的影响因素。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析血清miR-125b-5p、miR-146a-5p对患者预后的评估价值。结果患者随访1年内的病死率为26.25%(21/80)。死亡组中性粒细胞绝对值(NE)、TBil、AST、ALT、miR-125b-5p表达水平明显高于生存组,而miR-146a-5p表达水平低于生存组(P<0.05)。死亡组消化道出血、肝性脑病占比分别为42.86%、38.10%,明显高于生存组的10.17%、6.78%(P<0.05)。Pearson相关分析显示,血清miR-125b-5p表达水平与TBil、AST、ALT呈正相关(P<0.05),血清miR-146a-5p表达水平与TBil、AST、ALT呈负相关(P<0.05)。血清miR-125b-5p、miR-146a-5p单独检测预测HBV-ACLF患者预后的曲线下面积(AUC)分别为0.733(95%CI 0.597~0.869)、0.741(95%CI 0.618~0.865),二者联合检测预测预后的AUC为0.845(95%CI 0.736~0.955)。COX比例风险回归模型分析显示,消化道出血、肝性脑病及血清miR-125b-5p、miR-146a-5p是HBV-ACLF患者预后的影响因素(P<0.05)。结论HBV-ACLF患者血清miR-125b-5p上调与miR-146a-5p下调可增加死亡风险,且二者与血清TBil、AST、ALT存在相关性,对HBV-ACLF预后有一定评估价值。

MiR-125b-5p抑制卵巢癌细胞的迁移和侵袭:基于靶向下调CD147的表达

目的探讨miR-125b-5p靶向调控细胞外基质金属蛋白诱导因子(CD147)表达对卵巢癌细胞生物学行为的影响及作用机制。方法应用荧光实时定量PCR技术(RT-qPCR)检测卵巢癌组织和癌细胞株中miR-125b-5p和CD147 mRNA的表达;构建过表达miR-125b-5p的SKOV3细胞或低表达miR-125b-5p的HO8910细胞。CCK-8实验、克隆形成实验、Transwell实验检测过表达或低表达miR-125b-5p对卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力的影响;使用Starbase(http://starbase.sysu.edu.cn/)生信软件预测miR-125b-5p与CD147之间的潜在互补结合位点并使用双荧光素酶报告基因实验进行验证其靶向关系;体外培养SKOV3细胞,分别转染mimic NC、miR-125b-5p mimic、miR-125b-5p mimic和pcDNA3.1、miR-125b-5p mimic和pcDNA3.1-CD147,转染后分为mimic NC组、miR-125b-5p mimic组、miR-125b-5p mimic组+pcDNA3.1组、miR-125b-5p mimic+pcDNA3.1-CD147组,应用RT-qPCR和Westemblot实验检测各组中miR-125b-5p水平,CD147蛋白和mRNA水平;应用CCK-8实验、Transwell实验检测各组卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果RT-qPCR技术证实miR-125b-5p在癌组织和卵巢癌细胞株中均低表达,而CD147在癌组织和卵巢癌细胞株中均高表达(P<0.05);选择SKOV3和HO8910细胞进行转染,过表达miR-125b-5p后的卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭的能力均被抑制(P<0.05);Starbase生信软件预测及双荧光素酶报告基因实验证实miR-125b-5p和CD147存在一个靶向调控关系;在SKOV3细胞中转染过表达质粒和对照质粒,转染成功后,过表达miR-125b-5p组中miR-125b-5p的表达升高,而CD147的mRNA和蛋白表达明显下降(P<0.05)。过表达miR-125b-5p后再转染pcDNA3.1-CD147,CD147的mRNA和蛋白表达明显升高(P<0.05)。Transwell实验显示过表达miR-125b-5p后卵巢癌细胞的增殖、侵袭和迁移受到明显抑制,而过表达miR-125b-5p后再过表达CD147,卵巢癌细胞的增殖、侵袭和迁移的能力得到增强。结论miR-125b-5p通过负向调控CD147的表达,从而抑制卵巢癌细胞的迁移与侵袭。