miR-1/133基因簇的进化及其调控网络

miR-1/133基因簇在心肌和骨骼肌中特异性表达,对心脏以及骨骼肌的发育及生理病理具有重要作用.该研究采用生物信息学方法,研究了miR-1/133基因簇的进化特征,预测了其靶基因及其调控的生物学过程.利用miRBase数据库对23种不同物种间miR-1/133基因簇的序列、组织方式进行了比较.采用最大似然法构建miR-1/133基因簇的系统进化树,显示该基因簇的进化与物种进化关系有一定差异.利用在线数据库对miR-1/133基因簇上游转录因子及下游靶基因进行预测,并对其进行综合分析,绘制出该基因簇的网络调控图,表明miR-1/133基因簇参与了骨骼肌与心肌发育、胰岛素受体信号通路、经典Wnt信号通路、p53信号通路等体内重要生理过程,为进一步阐明miR-1/133基因簇的生物学功能提供了理论依据.

雷帕霉素对S180肉瘤细胞及CD90、CD133、Notch1蛋白表达的影响

目的探讨雷帕霉素对小鼠S180肉瘤细胞生长及抗原分化簇90(CD90)、抗原分化簇133(CD133)、神经源性基因同源蛋白(Notch1)蛋白表达的影响。方法选取处于对数生长期的S180肉瘤细胞,雷帕霉素低、中、高剂量组加入20、50、100 nmol·L-1雷帕霉素,对照组加入等量培养液,采用CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术法检测细胞周期与凋亡。将KM雄性小鼠随机分为对照组以及雷帕霉素低、中和高剂量组,每组10只。按照人体临床用量的0.5、1.0、2.0倍换算小鼠雷帕霉素用量后灌胃,对照组以等量生理盐水灌胃,每日1次,共3周,构建小鼠S180肉瘤皮下荷瘤模型。末次灌胃后24 h,测定小鼠体质量,记录瘤质量并计算抑瘤率。分别采用免疫荧光染色和免疫组织化学染色检测小鼠肿瘤组织CD90、CD133和Notch1的蛋白表达。结果雷帕霉素作用S180肉瘤细胞后,细胞增殖抑制率显著升高(P<0.05),且与作用时间呈正相关;同一作用时间,细胞增殖抑制率随雷帕霉素浓度的增加而升高(P<0.05);不同浓度雷帕霉素作用S180肉瘤细胞48 h后,细胞阻滞于G0/G1期,细胞凋亡率显著升高(P<0.05);免疫荧光染色结果显示,与对照组比较,其他3组小鼠肿瘤组织CD90、CD133和Notch1表达水平显著降低,且随雷帕霉素浓度增加而降低(P<0.05);免疫组织化学染色结果显示,与对照组比较,其他3组小鼠肿瘤组织CD90、CD133和Notch1表达水平显著降低,且随雷帕霉素浓度增加而降低(P<0.05)。结论雷帕霉素能通过下调CD90、CD133和Notch1蛋白表达影响S180肉瘤细胞的增殖和凋亡,达到体内外抑瘤作用。