miR-106 b在乳腺癌组织中的表达及其增强乳腺癌细胞顺铂化疗敏感性的机制研究

目的:探讨miR-106b在乳腺癌组织中的表达及其增强乳腺癌细胞顺铂化疗敏感性的机制。方法:随机选取2015年10月至2018年5月在本院进行手术切除的乳腺癌患者58例,取乳腺癌组织和癌旁组织提取细胞DNA,用荧光定量PCR的方法检测miR-106b的表达量。购买乳腺癌MCF-7细胞系,构建促进miR-106b表达的高表达组、抑制miR-106b表达的低表达组细胞系。用不同浓度的顺铂处理,48h后观察在体外和裸鼠皮下肿瘤的受抑制情况。荧光定量PCR法检测PTEN/PI3K/AKT信号通路相关基因的表达。结果:荧光定量PCR显示乳腺癌组织中miR-106b的相对表达量高于癌旁组织(P<0.05)。在20、30和40μmol/L浓度时,对照组和高表达组的相应浓度下的细胞抑制率均显著高于低表达组,对照组相应浓度下的细胞抑制率均显著高于低表达组(P<0.05)。在20、30和40μmol/L浓度时,对照组和高表达组的相应浓度下的荧光强度均低于低表达组,且高表达组均显著低于对照组(P<0.05)。低表达组PTEN的相对表达量显著低于对照组,而高表达组PTEN的相对表达量显著高于对照组(P<0.05)。低表达组的PI3K和AKT的相对表达量显著高于对照组,高表达组的PI3K和AKT的相对表达量显著低于对照组(P<0.05)。结论:miR-106b在乳腺癌中高表达,且表达量越高,乳腺癌细胞对顺铂的化疗敏感性越强。

彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的诊断价值

目的 探讨彩色多普勒超声检查联合血清微小RNA(miRNA)-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的早期诊断价值以及与卵巢癌周围血管侵袭的相关性。方法 回顾性选取2019年5月至2021年12月沧州市中心医院收治的102例卵巢肿瘤患者为研究对象,所有患者均行彩色多普勒超声检查,采用实时定量聚合酶链反应测定血清中miR-122-5p和miR-106b的表达水平。以病理诊断结果作为金标准,将研究对象分为卵巢癌组(n=51)和良性卵巢肿瘤组(n=51);卵巢癌组又分为侵袭组(n=32)和非侵袭组(n=19)。比较卵巢癌组与良性卵巢肿瘤组的临床资料(年龄、体重指数、生育和绝经)、彩色多普勒超声图像特征(实性包块、伴腹水、乳头状结构≥4、肿瘤最大直径>10 cm)、彩色多普勒超声血流参数[搏动指数(PI)和血流阻力指数(RI)]、血清miR-122-5p、miR-106b水平。应用多因素Logistic回归模型探究相关变量对卵巢癌的独立预测作用。应用受试者工作特征(ROC)曲线评估彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的诊断价值。并比较侵袭组与非侵袭组彩色多普勒超声血流参数及血清miR-122-5p、miR-106b水平,采用Pearson相关性分析对彩色多普勒超声血流参数、miR-122-5p、miR-106b与卵巢癌周围血管侵袭的相关性进行分析。结果 卵巢癌组实性包块、伴腹水、乳头状结构≥4以及肿瘤最大直径>10 cm所占比例分别为80.39%、76.47%、74.51%、78.43%,均高于良性卵巢肿瘤组(9.80%、11.76%、29.41%、45.10%),PI、RI、血清miR-122-5p表达水平分别为0.94±0.27、0.48±0.11、1.01±0.27,均低于良性卵巢肿瘤组(1.47±0.32、0.71±0.19、1.42±0.30),miR-106b表达水平为4.57±1.13,高于良性卵巢肿瘤组(2.86±0.65),差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归模型分析显示,PI、RI、miR-122-5p、miR-106b是卵巢癌的独立预测因子,OR值分别为1.080、1.116、1.689、1.301(P<0.05)。ROC曲线分析显示,PI、RI、miR-122-5p和miR-106b以及联合诊断卵巢癌的曲线下面积(AUC)分别为0.869、0.874、0.859、0.898、0.969,其联合诊断的价值高于单独应用。侵袭组PI、RI和血清miR-122-5p表达水平均低于非侵袭组,血清miR-106b表达水平高于非侵袭组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,彩色多普勒超声血流参数PI、RI及血清miR-122-5p水平与卵巢癌周围血管侵袭呈负相关(r=-0.743、-0.696、-0.822,P<0.05),血清miR-106b水平与卵巢癌周围血管侵袭呈正相关(r=0.863,P<0.05)。结论 彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平可以提高卵巢癌的早期诊断价值,并且可根据这些指标评估卵巢癌周围血管侵袭程度,值得应用推广。

miR-106b对鼻咽癌细胞凋亡的促进和对增殖的抑制作用

目的探讨miR-106b对鼻咽癌细胞凋亡和增殖的影响。方法应用miRNA芯片分析获得鼻咽癌组织和癌旁正常组织表达差异的miRNA,TaqMan miRNA检测试剂盒和实时荧光定量PCR分别检测miR-106和RhoC mRNA在鼻咽癌和癌旁组织中的表达,用miRnada预测miR-106b和靶基因的结合位点,采用双荧光素酶验证靶基因,Western blot检测miR-106b调控靶基因RhoC的表达水平。用Annexin V-PI和TUNEL检测miR-106b对鼻咽癌细胞凋亡的影响,用MTT检测miR-106b对鼻咽癌细胞增殖的影响。结果 miRNA芯片分析发现鼻咽癌组织中miR-106b的表达较癌旁正常组织低。RT-PCR结果显示miR-106b在鼻咽癌组织中表达减少(P<0.05),RhoC在鼻咽癌组织中表达增加(P<0.05),miR-106b和RhoC在鼻咽癌组织中表达呈负相关(r=―0.586 6,P<0.001)。荧光素酶报告基因实验结果显示miR-106b组荧光素酶活性低于空质粒组(P<0.05),Western blot结果显示miR-106b组鼻咽癌细胞中RhoC的表达较空质粒组降低(P<0.05)。Annexin V-PI和TUNEL结果显示,miR-106b组鼻咽癌细胞凋亡较空质粒组增加(P<0.05);MTT结果显示miR-106b组鼻咽癌细胞增殖能力较空质粒组降低(P<0.05)。结论 miR-106b可能通过下调RhoC的表达诱导鼻咽癌细胞凋亡并抑制鼻咽癌细胞增殖。

miR-106b在原发性肝癌中的表达及与预后的关系

目的探讨miR-106b在肝癌(HCC)组织中的表达及其临床意义。方法选择10对HCC组织及相应正常肝组织标本及82例有随访资料的HCC组织切片。qRT-PCR法及锁定核酸原位杂交检测miR-106b在HCC组织的表达,分析miR-106b表达与患者临床病理特征及预后的关系。结果 miR-106b在HCC组织中表达上调(P<0.05)。miR-106b表达与转移、组织分级、肝硬化及血清甲胎蛋白明显相关(P=0.046、0.019、0.004及0.043),而与年龄、性别、乙型肝炎、肿瘤大小及门脉癌栓无明显相关。HCC组织miR-106b高表达的患者5年生存率明显低于低表达患者(P<0.01),miR-106b高表达是影响HCC患者总体生存的独立风险因素(P<0.05)。结论 miR-106b在HCC组织中表达明显上调,可能参与了HCC的发展过程,有望成为一种新的HCC预后参考指标。

男性不育症患者精浆miR-106b水平变化及意义

目的检测男性不育症患者精浆全基因组微小核糖核酸（miRNAs）表达谱，筛选差异表达的miR-106b，探讨其作为男性不育症分子诊断指标的可行性。方法收集163例男性不育症患者及126例正常生育男性精浆，分别混合；用Solexa测序技术分别检测弱精症、非梗阻性无精症和正常生育男性的混合精浆中592种miRNAs的表达，用实时荧光定量PCR（qRT—PCR）对表达异常的miR．106b在单个样本中逐一进行验证。结果Solexa测序结果显示，19种miRNAs在不育症患者精浆中的表达量与健康男性相比变化〉2倍，miR．106b在弱精症和无精症患者中分别上调了6．89倍和2．6l倍。qRT-PCR结果表明，弱精症组miR．106b含量[中位数（四分位数）]为719．35（518．49，1183．39）fmol／L，与正常生育组的291．35（148．83，421．56）fmol／L比较，明显升高（U=91．00，P〈0．01）；无精症患者miR-106b的含量则明显降低，为60．07（18．38，292．52））fmol／L（U=195．00，P〈0．01）。ROC曲线分析显示，miR-106b诊断弱精症和无精症的曲线下面积（AUCROC）分别为0．844（95％CI，0．734～0．954）和0．720（95％CI，0．575～0．864）；鉴别弱精症和无精症的AUCROC为0．902（95％CI，0．822～0．982）。结论男性不育症患者精浆miR．106b表达水平与正常生育男性存在明显差异，有望成为男性不育症诊断和鉴别诊断的辅助指标。

miR-106b靶向调控TGF-β/Smad通路对结肠癌细胞侵袭和迁移的促进作用

目的:探讨miR-106b靶向转化生长因子β受体1(TGF-βR1)对结肠癌细胞侵袭和迁移的影响,阐明miR-106b与TGF-βR1基因的靶向关系及其可能作用机制。方法:选取30例结肠癌患者癌组织和癌旁正常结肠组织、结肠癌SW-480细胞及正常结肠上皮NCM460细胞为研究对象;采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各种组织和细胞中miR-106b表达水平及细胞中TGF-βR1 mRNA表达水平。将结肠癌SW-480细胞分为空质粒组(转染miR-NC空质粒)、miR-106b组(转染miR-106b-mimics)、pGL3-TGF-βR1组(转染pGL3-TGF-βR1)和miR-106b-mimics+pGL3-TGF-βR1组(同时转染miR-106b-mimics和pGL3-TGF-βR1);生物信息分析法预测miR-106b与TGF-βR1的靶向作用关系,荧光素酶报告实验检测各组SW-480细胞中荧光素酶活性。Transwell小室实验检测各组SW-480细胞侵袭能力,细胞划痕实验检测各组SW-480细胞划痕愈合率,Western blotting法检测各组SW-480细胞中TGF-βR1、磷酸化Smad同源物2(p-Smad2)和磷酸化Smad同源物3(p-Smad3)蛋白表达水平。结果:结肠癌组织中miR-106b表达水平高于正常结肠组织,结肠癌SW-480细胞中miR-106b表达水平高于正常结肠上皮NCM460细胞(P<0.01)。双荧光素酶报告基因检测结果提示TGF-βR1为miR-106b的靶基因。与空质粒组比较,miR-106b组SW-480细胞中TGF-βR1 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.01),侵袭细胞数和细胞划痕愈合率明显升高(P<0.01),细胞中p-Smad2和p-Smad3蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。与miR-106b组比较,miR-106b-mimics+pGL3-TGF-βR1组SW-480细胞中TGF-βR1 mRNA和蛋白表达表达水平明显升高(P<0.01),侵袭细胞数和细胞划痕愈合率明显降低(P<0.01),细胞中p-Smad2和p-Smad3蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:miR-106b过表达可能通过抑制TGF-β/Smad通路促进结肠癌细胞的侵袭和迁移。

miR-106b在肝癌细胞中激活Wnt通路

目的:探讨肝癌细胞中miR-106b对Wnt/β-catenin信号传导通路的影响。方法:改变肝癌细胞中miR-106b表达,TOP/FOP荧光素酶试验检测Wnt/β-catenin信号通路活性的变化;Real-time PCR方法检测Wnt/β-catenin信号通路下游靶基因表达的改变;Western blotting方法检测细胞核内β-catenin表达改变。结果:过表达miR-106b,肝癌细胞中TOP/FOP荧光比值显著增加,其下游6个靶基因mRNA表达量也显著上调。而抑制miR-106b,则下调荧光比值和下游靶基因的表达。同时发现,miR-106b表达,促进QGY-7703细胞核内β-catenin表达增加,而抑制miR-106b,则核内β-catenin下调。结论:miR-106b在肝癌细胞中可激活Wnt/β-catenin信号通路。

MiR-106b对食管癌KYSE150细胞的生长及细胞上皮间质转化的影响

目的研究微小RNA106b(miR-106b)对食管癌KYSE150细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)的影响,为临床治疗食管癌提供新的理论依据。方法用miR-106b慢病毒转染KYSE150细胞,实验分为3组:control组(未转染miR-106b的KYSE150细胞)、miR-NC组(转染随机序列)和miR-106b组(转染miR-106b的KYSE150的细胞)。采用实时荧光定量聚合酶联反应(qRT-PCR)和免疫印迹(Western Blot)检测miR-106b和EMT的相关标记物E-钙黏蛋白(E-Cadherin)、神经型钙黏蛋白(N-Cadherin)的表达情况,四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞的增殖能力,划痕实验检测细胞的迁移能力,Transwell方法检测细胞的侵袭能力。结果慢病毒稳定转染miR-106b后,食管癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力均增强(P<0.05);qRT-PCR与Western blot检测显示miR-106b组E-Cadherin表达较miR-NC组、control组明显降低(P<0.05);N-Cadherin表达明显升高(P<0.05)。结论 miR-106b能够促进食管癌细胞的增殖、迁移和侵袭,同时能促进上皮间质的转化。

miR-106b在阿尔茨海默病中的作用机制

目的探讨miR-106b在阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）发病中的作用。方法取3月龄和6月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织,进行microRNA芯片的检测;利用real-time PCR检测3、6、9月龄APPswe/PSΔE9小鼠脑组织中miR-106b的表达,对芯片检测结果进行验证;通过构建miR-106b稳定转染细胞系和miR-106b knockdown研究miR-106b与TGFBR2表达之间的关系;构建TGFBR2 3’UTR-荧光素酶报告载体,验证miR-106b是否可以直接调控TGFBR2蛋白的表达;采用Western blot的方法检测APPswe/ΔPSΔE9小鼠和对照小鼠脑组织中TGFBR2蛋白的表达情况。结果 miR-106b在3月龄和6月龄AD模型小鼠脑组织中表达升高,在9月龄模型小鼠脑组织中表达降低;通过体外实验,我们发现miR-106b与TGFBR2蛋白的表达呈负相关;荧光素酶报告实验表明TGFBR2 3’UTR序列中包含miR-106b的结合位点;TGFBR2蛋白在3、6、9、12月龄AD模型小鼠脑组织中表达均降低。结论 miR-106b可能通过调控TGFBR2蛋白的表达影响TGF-β信号通路,从而参与AD的发病。

MiR-106b在2型糖尿病db/db小鼠骨骼肌中的表达及生物信息学分析

目的微小RNA(microRNA,miRNA)是一类小分子单链非编码RNA,广泛参与各种生物学过程,与肿瘤、糖尿病、心血管疾病关系密切,miR-106b与胰岛素抵抗糖尿病密切相关。文中检测miR-106b在2型糖尿病db/db小鼠骨骼肌中的表达,并对其靶基因进行预测及相关生物信息学分析,为miR-106b靶基因的实验验证提供数据支持,并为深入研究miR-106b的生物学功能和调控机制提供理论指导。方法利用实时PCR技术检测miR-106b在糖尿病db/db小鼠骨骼肌中表达。利用miRBase、NCBI、UCSC Browser等在线工具分析miR-106b序列。把利用TargetScan和StarBase 2种计算方法预测的miR-106b靶基因的交集作为分析的基因集合,分别进行基因本体(gene ontology,GO)注释描述、GO富集分析和生物通路富集分析。结果①miR-106b在2型糖尿病db/db小鼠骨骼肌表达显著升高;②miR-106b在各物种之间具有高度保守性;③预测靶基因集合分别富集在代谢调节、生物合成、细胞增殖与凋亡等基本生物学过程和蛋白结合、转录调控等分子功能上(P<0.001)。经典miR-106b预测靶基因集合显著富集于KEGG通路数据库中的Wnt信号通路、mTOR信号通路、TGF-β信号通路和胰岛素信号通路等12个信号转导通路,以及前列腺癌、慢性髓细胞性白血病、黑素瘤等12个疾病通路中(P<0.05)。结论 MiR-106b在db/db小鼠骨骼肌表达升高。miR-106b与多种肿瘤的发生和细胞周期调节有关。miR-106b参与物质代谢等过程的调控,可能在胰岛素抵抗、2型糖尿病的发病中起重要作用。

miR-106b对HeLa细胞顺铂化疗敏感性的影响

目的:探讨miR-106b对宫颈癌HeLa细胞顺铂化疗敏感性的影响。方法:采用实时定量PCR检测转染miR-106b抑制剂和类似物后HeLa细胞中miR-106b的表达,MTT法及流式细胞仪检测转染后HeLa细胞对顺铂的敏感性和凋亡,Western blot检测细胞中Twist1、PTEN、p-AKT(Ser473)蛋白的表达。结果:miR-106b抑制剂可减少HeLa细胞中miR-106b的表达;而miR-106b类似物可增加HeLa细胞中miR-106b的表达。转染miR-106b抑制剂后,细胞对顺铂的敏感性增强、凋亡及PTEN蛋白表达增加,Twist1、p-AKT表达降低(P<0.05);转染miR-106b类似物后,细胞对顺铂的敏感性减弱,凋亡及PTEN蛋白表达降低,Twist1、p-AKT表达增加(P<0.05)。结论:miR-106b可能通过调节Twist1、PTEN和p-AKT的表达影响HeLa细胞对顺铂耐药。

miR-106b在胃癌中对BTG3蛋白表达的调控机制

目的探讨BTG3蛋白在胃癌发生、发展中的作用及其在胃癌中表达的调控机制。方法免疫组化检测胃癌、癌旁、癌前病变组织及对照组织石蜡标本中BTG3蛋白表达情况;qRT-PCR检测胃癌细胞BTG3和miR-106b表达,Western blotting检测转染miR-106b模拟剂和miR-106b抑制剂后胃癌细胞中BTG3蛋白表达水平,荧光素酶报告基因实验验证miR-106b在胃癌细胞中对BTG3的调控。结果免疫组化结果:BTG3蛋白在胃癌组表达率32.50%,明显低于其余各组,差异有统计学意义(P<0.05),且与胃癌肿瘤分期(P=0.041)及分化程度(P=0.021)有显著相关性,H.pylori阳性胃癌组BTG3蛋白表达率明显低于H.pylori阴性胃癌组(P=0.017);qRT-PCR结果提示,胃癌细胞中BTG3低表达,而miR-106b高表达;Westen blotting结果显示,转染miR-106b模拟剂或miR-106b抑制剂的胃癌细胞BTG3蛋白表达水平相应降低或升高,荧光素酶报告实验显示,转染miR-106b模拟剂后野生型BTG3-3′UTR报告质粒荧光素酶活性降低(P<0.001)。结论BTG3在胃癌低表达,与胃癌分期及分化程度相关,与H.pylori感染可能有关,miR-106b在胃癌中高表达,可能通过靶向调控BTG3发挥作用。

结肠癌患者血清中miR-30a、miR-106b的表达及其临床意义

目的:探讨结肠癌患者血清miR-30a、miR-106b的表达及其在结肠癌进展及预测患者预后中的价值。方法:选取2012年06月至2013年02月本院收治的接受结肠癌手术治疗的患者80例为研究对象,20例同期健康人群作为对照组。逆转录PCR法检测外周血血清中miR-30a、miR-106b的表达水平,分析患者血清miR-30a、miR-106b表达与结肠癌临床病理及预后的关系。Spearman分析miR-30a、miR-106b表达的相关性。采用多因素logistic回归模型对结肠癌患者的预后影响因素进行分析,采用Kaplan-Meier生存分析miR-30a低表达组、miR-30a高表达组,miR-106b低表达组、miR-106b高表达组患者中位生存时间。结果:结肠癌患者血清miR-30a表达水平(1.03±0.02)低于正常人群(5.15±0.06),差异具有统计学意义(t=16.38,P=0.01);结肠癌患者血清miR-106b表达水平(2.62±0.35)高于正常人群(1.15±0.06),差异具有统计学意义(t=10.17,P=0.03)。miR-30a、miR-106b表达与患者的组织分化类型、浆膜侵犯、淋巴结转移、远处转移、TNM分期有显著相关性(P<0.05)。多因素logistic回归模型对结肠癌患者预后影响因素进行分析,TNM分期(Ⅲ+Ⅳ)、miR-106b高表达及miR-30a低表达是结肠癌患者预后不良的危险因素。miR-30a低表达组患者总体生存时间(55.3±4.1)个月低于miR-30a高表达组(76.4±2.4)个月(P=0.000);miR-106b低表达组患者的总体生存时间(75.1±7.3)个月高于miR-106b高表达组(51.8±3.1)个月(P=0.000)。结论:miR-30a在结肠癌患者血清中低表达,miR-106b在结肠癌患者血清中高表达,二者的表达与肿瘤的进展、预后不良有关。

子宫内膜癌组织血管紧张素(1-7)、miR-106b表达与患者临床病理分期相关性研究

目的:探究子宫内膜癌患者子宫内膜组织中血管紧张素(1-7)、微小RNA-106b(miR-106b)表达情况及其与患者病理分期间的关系。方法:107例子宫内膜癌患者作为患病组,据其TNM病理分期分为Ⅰ-Ⅱ期组(n=69例),Ⅲ-Ⅳ期组(n=38例),另择20例同期健康子宫内膜组织为健康组,对比两组及不同病理分组患者子宫内膜组织血管紧张素(1-7)、miR-106b表达情况,Pearson检验分析血管紧张素(1-7)、miR-106b和病理分期间的相关性,并以有序多分类逻辑回归分析子宫内膜癌病理分期和血管紧张素(1-7)、miR-106b间的关系。结果:患病组患者血管紧张素(1-7)和miR-106b水平均高于健康组(均P<0.05),Ⅰ-Ⅱ期组血管紧张素(1-7)低于Ⅲ-Ⅳ期组,Ⅰ-Ⅱ期组miR-106b高于Ⅲ-Ⅳ期组(均P<0.05);Pearson检验表明子宫内膜癌患者血管紧张素(1-7)与病理分期呈正相关,miR-106b表达与病理分期呈负相关(均P<0.05);Logistic回归分析表明,子宫内膜癌患者子宫内膜血管紧张素(1-7)、miR-106b表达和其病理分期间关系密切(均P<0.05)。结论:子宫内膜癌患者存在子宫内膜组织血管紧张素(1-7)和miR-106b的异常升高,且其表达和TNM病理分期关系密切,血管紧张素(1-7)与病理分期呈正相关,miR-106b与其呈负相关,临床可将其作为不同病理分期患者的治疗靶点。

miR-106b对人肝癌细胞HepG2细胞迁移和侵袭能力的影响

目的探讨miR-106b对人肝癌细胞HepG2迁移和侵袭能力的影响。方法分别用阴性对照(NC组)、miR-106b模拟物(miR-106b组)和miR-106b抑制物(miR-106b-in组)转染HepG2细胞,实时PCR检测三组HepG2细胞miR-106b的表达,划痕实验、Transwell实验、3D培养实验检测三组HepG2细胞的迁移及侵袭能力的差异。结果实时PCR显示miR-106b组细胞miR-106b相对表达量为(17.83±1.66),miR-106b-in组为(0.32±0.07),差异有统计学意义(P<0.05);NC组细胞24 h及48 h划痕修复率分别为(47±3)%、(71±6)%,miR-106b组分别为(65±5)%、(99±1)%,miR-106b-in组分别为(38±3)%、(56±4)%,组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);Transwell侵袭实验显示,NC组的穿室细胞数为(58±10)个,miR-106b组为(116±19)个,miR-106b-in组为(38±6)个,组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);3D培养实验显示,20个200倍视野下,miR-106b组无伪足的球形细胞数为(3±1)个,明显少于NC组的(7±2)个及miR-106b-in组的(11±2)个,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 miR-106b能明显增强HepG2细胞的迁移和侵袭能力。

靶向抑制miR-106b对体外膀胱癌细胞增殖和凋亡影响

目的研究靶向抑制微小RNA-106b(miR-106b)对体外膀胱癌细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。方法通过细胞转染技术构建靶向抑制miR-106b的膀胱癌细胞克隆,利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测miR-106b的沉默效果。将细胞分为空白对照组(A组)、阴性对照组(B组)和miR-106b小分子抑制剂转染组(C组)3组,采用细胞增殖实验和克隆形成实验检测靶向抑制miR-106b对膀胱癌T24细胞生长的影响;采用Annexin V/PI检测靶向抑制miR-106b对细胞凋亡的影响;采用细胞迁移实验和侵袭实验检测靶向抑制miR106b对体外T24细胞侵袭的影响。结果 C组T24细胞内miR-106b表达水平、细胞存活率、细胞克隆形成数、细胞凋亡率及跨膜细胞数与A、B组比较,差异有显著性(F=37.24~87.89,q=9.57~16.53,P<0.05)。结论通过靶向抑制miR-106b可抑制体外膀胱癌细胞增殖、侵袭和凋亡,miR-106b是膀胱癌治疗的基因靶点。

MiR-106b通过靶向BTG3调控非小细胞肺癌的增殖与细胞凋亡

目的探讨MiR-106b通过靶向BTG3调控非小细胞肺癌的增殖与细胞凋亡行为及其作用机制。方法 qPCR检测非小细胞肺癌和癌旁正常组织、不同细胞株中miR-106b的表达情况;双荧光素酶报告基因检测miR-106b与BTG3的相互作用;MTT细胞增殖实验检测miR-106b对非小细胞肺癌细胞增殖能力的影响;流式细胞术实验检测miR-106b对非小细胞肺癌细胞凋亡行为的影响;Transwell侵袭实验检测抑制miR-106b后非小细胞肺癌细胞侵袭能力的变化;免疫组化检测裸鼠瘤体内BTG3的表达情况。结果与癌旁正常组织相比,非小细胞肺癌组织中miR-106b表达明显增高;非小细胞肺癌细胞A549中miR-106b的表达水平最高;miR-106b能与BTG3的3’UTR特异性结合,调控BTG3的表达活性;抑制miR-106b的表达后非小细胞肺癌细胞增殖侵袭的能力相对减弱;抑制miR-106b的表达后,荷瘤小鼠的肿瘤体积和重量都明显减小,且BTG3蛋白的表达相应降低。结论 miR-106b在非小细胞肺癌的发生发展过程中起重要作用,可以通过靶向调节BTG3的表达影响非小细胞肺癌细胞的增殖和凋亡。

循环miR-106a/b表达水平在肝细胞癌的诊断及预后中的作用

目的评估循环miR-106a/b表达水平在肝细胞癌(HCC)诊断及预后中的作用。方法纳入108例HCC患者和54例健康志愿者(HCs),采集受试者外周血,并采用实时荧光定量PCR进行miR-106a/b表达水平的检测。对HCC患者进行随访,并记录其总体生存期(OS)。结果 HCC患者中血浆miR-106a表达水平显著高于HCs(P<0.001)。血浆miR-106b在HCC患者中表达同样升高(P<0.001)。受试者工作特征曲线显示miR-106a/b的诊断效能较好,曲线下面积分别为0.670(95%CI:0.573~0.768)和0.684(95%CI:0.593~0.776)。HCC患者中循环miR-106a表达量与乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)(P=0.028)、病理分化(P=0.025)、肿瘤大小(P=0.002)、淋巴结转移(P=0.028)以及TNM分级(P=0.037)正相关;miR-106b表达量与HBsAg(P=0.003)、AFP(P=0.031)以及肿瘤大小(P=0.005)正相关。Kaplan-Meier曲线分析显示,血浆miR-106a高水平的HCC患者具有较差的OS(P=0.013)。多因素Cox回归模型分析显示,miR-106a高表达是HCC患者OS差的独立预测因素(P=0.038)。结论循环miR-106a/b表达水平可作为HCC患者的诊断标志物,且循环miR-106a高表达是HCC患者预后不良的独立预测因素。

基于ROC曲线分析血清miR-375、miR-106b和AFP在肝癌早期诊断中的价值

目的绘制ROC曲线探讨miR-375、miR-106b和AFP在肝癌早期诊断中的价值。方法将我院2017年1月至2019年7月间收治的80例肝癌患者作为观察组,80例肝硬化或其他肝病患者作为对照组;检测患者血中miR-375、miR-106b和AFP水平,并绘制ROC曲线分析血清miR-375、miR-106b和AFP在肝癌早期诊断的价值。结果观察组患者血中miR-375、miR-106b和AFP水平均明显高于对照组,且差异具有统计学意义(P<0.05);miR-375、miR-106b和AFP是影响AFP发生发展的独立性影响因素(P<0.05);miR-375、miR-106b和AFP联合鉴别诊断的灵敏度、特异性及AUC均明显高于各指标单独应用,且差异具有统计学意义(P<0.05)。结论采用miR-375、miR-106b和AFP联合应用对肝癌进行早期诊断的AUC大于0.9,具有较高的应用价值。

循环miR-106a/b在胰腺导管腺癌诊断及预后中的作用

目的评估循环miR-106a/b的表达水平在胰腺导管腺癌(PDAC)诊断及预后中的作用。方法纳入101例PDAC患者,同时纳入50例年龄、性别匹配的健康志愿者作为健康对照组(HCs)。采集受试者外周血样本,抽提血浆总RNA并采用实时荧光定量PCR进行miR-106a/b表达水平的检测。对PDAC患者进行随访,并记录其总体生存期(OS)。结果相对于健康对照组,血浆miR-106a在PDAC患者中的表达水平显著升高(P<0.001);同时,血浆miR-106b在PDAC患者中的表达水平同样升高(P<0.001)。ROC曲线分析显示,miR-106a/b的诊断效能较好,曲线下面积(AUC)分别为0.708,95%CI:0.612~0.803和0.728,95%CI:0.637~0.818。PDAC患者中循环miR-106a的表达量与病理分化(P=0.031)、肿瘤大小(P=0.045)以及淋巴结转移(P=0.007)呈正相关,与年龄、性别、神经侵犯、血管侵犯等无关;miR-106b表达量与肿瘤大小(P=0.028)呈正相关,与年龄、性别、病理分化、淋巴结转移、神经侵犯、血管侵犯等无关。通过Kaplan-Meier曲线分析,血浆miR-106a高水平的PDAC患者具有较差的OS(P=0.009),采用单元、多元Cox's风险比回归模型分析结果显示miR-106a高表达是PDAC患者OS差的独立预测因素(P=0.030)。结论循环miR-106a/b表达水平可作为PDAC患者的诊断标志物,并且循环miR-106a高表达是PDAC患者预后不良的独立风险因素。