MiR-1178在胰腺导管腺癌中的表达及其意义

目的探讨miR－1178在胰腺导管腺癌中的表达及其临床意义。方法收集2004年1月至2008年12月北京协和医院收治的经病理科确诊的胰腺导管腺癌及配对癌旁组织手术标本87例。利用原位杂交的方法检测石蜡标本中miR－1178的表达水平，分析miR－1178与胰腺导管腺癌患者临床病理资料及预后的关系。通过脂质体及慢病毒转染胰腺癌细胞株，观察miR－1178对胰腺癌细胞侵袭及增殖能力的影响。建立裸鼠皮下移植瘤模型，接种4周后切取肿瘤测量体积和重量。分别采用Student t检验、秩和检验、χ2检验等方法对组间数据进行统计学分析；采用Cox回归进行单因素及多因素分析。结果72例胰腺癌患者获得完整随访资料。胰腺癌组织中miR－1178高表达率为69.4%（50/72），配对癌旁组织中miR－1178高表达率为15.3%（11/72）（χ2＝43.26，P〈0.05）。miR－1178高表达组中淋巴结转移为58.0%（29/50），低表达组中淋巴结转移为31.8%（7/22）（χ2＝4.189，P＝0.041）。单因素及多因素分析结果发现，miR－1178是胰腺导管腺癌患者的独立预后因素（HR＝2.364，95%CI：1.114～5.019，P＝0.025）。Transwell实验结果显示，miR－1178过表达后AsPC－1侵袭细胞数目[（177.0±19.8）个]多于对照组[（119.7±15.9）个]（χ2＝8.21，P〈0.05）。裸鼠皮下移植瘤增殖实验结果表明，过表达miR－1178组肿瘤体积[（5 122.4±760.2）mm3]大于对照组[（1 976.8±601.8）mm3 ]（t＝2.413，P〈0.05）；过表达miR－1178组肿瘤重量[（1.55±0.21）g]大于对照组[（0.67±0.17）g]（t＝2.960，P〈0.05）。与对照组相比，miR－1178过表达组的FAK、MMP－9蛋白表达水平明显增加（P〈0.05）。结论miR－1178在胰腺导管腺癌组织中呈高表达，与胰腺癌患者预后相关。miR－1178能促进胰腺癌的增殖及侵袭，其分子机制可能与Stub1/FAK/MMP－9通路的异常活化有关。

Circ-101555经Wnt信号通路促进甲状腺癌的侵袭和迁移

目的探讨circ-101555经Wnt信号通路促进甲状腺癌细胞增殖、侵袭和迁移的机制。方法收集79例甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)组织及癌旁正常甲状腺组织,应用RNA原位杂交技术检测circ-101555表达情况,并分析其与PTC临床病理特征的关系。应用MTT法检测甲状腺癌细胞增殖活性;Transwell小室检测甲状腺癌细胞侵袭和迁移的能力变化;双荧光素酶报告实验验证miR-1178对下游靶基因Wnt1的调控;Western blot法分析circ-101555下游基因蛋白的表达。结果Circ-101555 RNA在PTC组织中主要为阳性,而在癌旁正常甲状腺组织主要为阴性,PTC组织中circ-101555的阳性比值为0.758±0.116,明显高于癌旁正常组织(0.072±0.012)(t=6.862,P<0.05)。Circ-101555表达与肿瘤局部浸润、淋巴结转移及合并其他良性甲状腺疾病均密切相关(P均<0.05),而与患者年龄、性别、发病部位、肿瘤大小、TNM分期和钙化均无相关性(P均>0.05)。MTT增殖活性检测表明:过表达circ-101555或敲低circ-101555对甲状腺癌细胞的增殖活性均无明显变化(P>0.05)。侵袭和迁移实验表明:与对照组[(58.6±6.46)个]相比,过表达circ-101555甲状腺癌细胞的侵袭数目增多[(93.6±9.28)个],而敲低circ-101555甲状腺癌细胞的侵袭数目明显减少[(26.82±5.44)个];与对照组相比[(50.95±7.21)个],过表达circ-101555后甲状腺癌细胞的迁移数目增多[(81.6±9.98)个],而敲低circ-101555甲状腺癌细胞的迁移数目明显减少[(23.86±6.42)个],两组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。生物信息学预测并通过qRT-PCR实验验证miR-1178是circ-101555的下游靶基因;通过双荧光素酶报告基因实验验证miR-1178与Wnt1的结合具有特异性,Wnt1是miR-1178的直接靶基因。Western blot和回复实验结果表明:无论circ-101555和miR-1178如何变化,Wnt1、β-catenin和MMP-9都受circ-101555的调控。结论甲状腺癌中circ-101555抑制了miR-1178表达,进而激活Wnt信号通路促进甲状腺癌的侵袭和迁移,可为circ-101555治疗转移性PTC提供理论依据。