梅毒患者外周血单个核细胞miR-1204的表达及其功能预测分析

目的探讨梅毒患者外周血单个核细胞miR-1204的表达及其潜在功能,为进一步研究miR-1204在梅毒螺旋体感染中生物学功能以及作用机制奠定基础。方法收集梅毒患者外周血83例、健康人12例,密度梯度离心法分离PBMCs,采用RT-qPCR检测miR-1204;采用Target Scan7.1和DIANA对miR-1204靶基因进行预测并取交集的基因集合,最后通过Consensus PathDB对基因集合进行GO功能及KEGG信号转导通路富集分析。结果一期梅毒患者PBMCs中miR-1204表达水平显著上调,高于二期梅毒患者(P<0.05)、血清治愈患者(P<0.05),差异具有统计学意义。miR-1204在现症梅毒组中表达水平高于血清学治愈组(P<0.05),差异具有统计学意义;GO功能富集分析显示miR-1204靶基因主要参与调节细胞发育、细胞分化、血管通透性、趋化性、抗原刺激的炎症反应等生物学过程。信号转导通路富集分析显示miR-1204 Top10信号转导通路为间隙连接、趋化因子信号通路、ErbB信号通路、GnRH信号通路、非洲锥虫病、松弛素信号通路、NK细胞介导的细胞毒作用、乙型肝炎、磷脂酶D信号通路、致病性大肠杆菌感染。结论 miR-1204可能成为一期梅毒/评估梅毒治疗效果潜在的分子标志物,参与早期梅毒感染的发生。

miR-1204表达对非小细胞肺癌细胞增殖凋亡、上皮间质转化和MAPKs信号通路的影响

目的:探究微小RNA-1204(mi R-1204)表达对非小细胞肺癌细胞增殖凋亡、上皮间质转化(EMT)和丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)信号通路的影响。方法:将人非小细胞肺癌细胞A549随机分为mi R-1204组(转染mi R-1204mimic质粒)、NC组(转染空载质粒)和对照组(仅加转染试剂)。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖情况,采用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞E-钙黏蛋白(E-cad)、N-钙黏蛋白(N-cad)和波形蛋白(Vim)m RNA的表达水平。采用RT-qPCR和蛋白免疫印迹(WB)法检测细胞p-P38、P38、p-ERK、ERK、p-JNK、JNK m RNA和蛋白的表达水平。结果:培养12、24、48 h,mi R-1204组细胞增殖抑制率均高于对照组和NC组同期(P<0.05),对照组与NC组同期的细胞增殖抑制率比较差异无统计学意义(P>0.05)。但三组细胞随着培养时间延长,细胞增殖抑制率均增加,两两时间点组内比较均有差异(P<0.05)。mi R-1204组细胞凋亡率高于对照组和NC组(P<0.05)。mi R-1204组E-cad m RNA的表达水平高于对照组和NC组(P<0.05),N-cad、Vim m RNA的表达水平低于对照组和NC组(P<0.05)。mi R-1204组p-P38、p-ERK、p-JNK m RNA和蛋白的表达水平均低于对照组和NC组(P<0.05)。结论:上调mi R-1204的表达可以抑制非小细胞肺癌细胞的增殖,促进其凋亡,还可以抑制其EMT,该作用可能是通过抑制MAPKs信号通路实现的。