芒柄花素通过miR-1229/ZDHHC9分子轴对胶质瘤细胞增殖、活力及凋亡的影响

目的:探讨芒柄花素对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响及其分子作用机制。方法:构建皮下移植瘤小鼠模型,灌胃给予5.72、14.31、22.9、31.49 mg/kg剂量的芒柄花素,观察肿瘤重量、体积变化;免疫组织化学法检测肿瘤组织增殖细胞核抗原(PCNA)表达。用不同浓度(20、50、80、110μmol/L)的芒柄花素处理TJ905细胞,并将TJ905细胞分为空白对照组、110μmol/L芒柄花素组、110μmol/L芒柄花素+miR-1229组、110μmol/L芒柄花素+miR-1229+ZDHHC9组、miR-NC组、miR-1229 mimic组。用Edu实验、CCK-8实验检测细胞增殖能力,TUNEL实验检测细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)实验检测miR-1229、ZDHHC9 mRNA表达水平,在线网站及双荧光素酶报告基因法验证miR-1229与ZDHHC9靶向结合。结果:与空白对照组比较,不同剂量的芒柄花素处理组肿瘤体积、重量及PCNA蛋白表达均显著降低(均P<0.05)。与对照组比较,不同浓度(20、50、80、110μmol/L)的芒柄花素处理后,细胞增殖率显著降低,凋亡率显著升高(均P<0.05);与110μmol/L芒柄花素组比较,110μmol/L芒柄花素+miR-1229组细胞增殖率、细胞活力均显著降低,凋亡率显著增加(均P<0.05);与110μmol/L芒柄花素+miR-1229组比较,110μmol/L芒柄花素+miR-1229+ZDHHC9组细胞增殖率、细胞活力均显著增加,凋亡率显著下降(均P<0.05);双荧光素酶报告基因实验验证miR-1229与ZDHHC9靶向结合。结论:芒柄花素可能通过miR-1229/ZDHHC9分子轴抑制胶质瘤细胞增殖,并诱导其凋亡。

MMP3、THBS2、COL10A1和miR-1229对早期结直肠癌的诊断价值

目的探讨血清中MMP3、THBS2、COL10A1和miR-1229对早期结直肠癌的诊断价值。方法选取早期结直肠癌患者60例为早期组,中晚期结直肠癌患者60例为中晚组,结直肠良性疾病患者60例为良性组,同时选取健康体检者60例为对照组,检测4组受试者血清中MMP3、THBS2、COL10A1和miR-1229的表达量。用ROC曲线下面积分析MMP3、THBS2、COL10A1和miR-1229对早期结直肠癌的诊断价值。结果MMP3、THBS2、COL10A1和miR-1229在早期结直肠癌患者血清中的表达明显均高于结直肠良性疾病患者和健康体检者(P<0.05),但是均低于中晚期结直肠癌患者(P<0.05)。早期组与中晚组的MMP3、THBS2、COL10A1和miR-1229的诊断灵敏度分别为76%、53%、70%、93%,特异性分别为63%、90%、67%、80%。早期组与良性组的MMP3、THBS2、COL10A1和miR-1229的诊断灵敏度分别为90%、76%、83%、93%,特异性分别为87%、83%、83%、80%。早期组与对照组的MMP3、THBS2、COL10A1和miR-1229的诊断灵敏度分别为83%、83%、76%、76%,特异性分别为96%、90%、87%、93%。结论MMP3、THBS2、COL10A1和miR-1229可以作为早期结直肠癌诊断的潜在标志物。

miR-1229-3p抑制结直肠癌疾病进展及作为潜在生物标志物的研究

目的:探讨微小RNA(microRNA, miRNA)在结直肠癌(colorectal cancer, CRC)疾病进展中的作用及临床应用价值。方法:基于TCGA数据库,筛选分析人类结肠癌及癌旁组织的转录组差异表达miRNA,以miRNA-1229-3p作为研究对象,在GEO数据库与Starbase数据库中验证其表达水平。采用生物信息学方法对miR-1229-3p的生物功能特征进行分析,构建miR-1229-3p过表达细胞系及miR-1229-3p敲降细胞系,通过CCK-8实验、克隆形成实验、EdU实验、Transwell实验、流式细胞术实验在体外探究miR-1229-3p对CRC细胞增殖、转移、凋亡的影响,并通过裸鼠移植瘤试验探究miR-1229-3p对CRC细胞体内增殖的影响。通过DIANA、TargetScan、miRDB数据库筛选miR-1229-3p的靶基因,并通过KEGG富集分析、GO分析靶基因的生物学功能。检测60例CRC患者及60例健康体检者血浆外泌体中的miR-1229-3p含量,采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic curve, ROC)分析其对CRC患者的诊断效能。结果:数据分析显示,miR-1229-3p在CRC细胞和组织中表达下调。生物信息学方法预测结果显示,miR-1229-3p与肿瘤的进展途径(如上皮间质转化、血管形成等)呈显著负相关(R<0,P<0.05)。体内、外研究表明,过表达miR-1229-3p后,CRC细胞的增殖、迁移和侵袭能力受到抑制,且其潜在靶基因SETD7在细胞中的表达下调;而敲低miR-1229-3p后可抑制CRC细胞的凋亡。CRC患者血浆外泌体中的miR-1229-3p含量较健康体检者降低,ROC曲线分析显示,miR-1229-3p诊断CRC的约登指数最大值为0.586 8,曲线下面积为0.863 2(P<0.01)。结论:miR-1229-3p在CRC中表达下调,SETD7是其潜在的靶基因,miR-1229-3p可抑制CRC细胞增殖、迁移与侵袭,促进CRC细胞凋亡,有望作为诊断CRC的潜在生物标志物。

miR-1229-5p对人结直肠癌细胞SW480增殖、迁移及侵袭的作用研究

目的:探讨miR-1229-5p对SW480细胞生物学功能的影响和作用机制。方法:采用瞬时转染在SW480细胞中过表达miR-1229-5p,进行细胞克隆、EdU实验、MTT、细胞划痕、Transwell小室迁移及侵袭实验,检测miR-1229-5p mimics组与对照组结直肠癌细胞SW480生物学功能变化。转染过表达miR-1229-5p慢病毒后进行裸鼠皮下成瘤实验,观察miR-1229-5p在体内对细胞增殖能力的影响。通过预测软件TargetScan筛选出X连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)作为miR-1229-5p的潜在下游靶基因,并检测miR-1229-5p对其蛋白表达的影响。在SW480细胞中转染XAF1过表达质粒,共转染miR-1229-5p后进行回复实验验证miR-1229-5p通过靶向XAF1促进SW480细胞增殖及侵袭。结果:miR-1229-5p mimics组较miR-NC组细胞的增殖、迁移及侵袭能力均提高(P<0.01);miR-1229-5p组瘤体体积高于miR-NC组(P<0.01);miR-1229-5p组对靶基因XAF1表达量低于miR-NC组(P<0.01),转染XAF1质粒后可逆转miR-1229-5p mimics对细胞增殖及侵袭的促进作用(P<0.01)。结论:miR-1229-5p可通过靶向XAF1促进结直肠癌细胞SW480的增殖和侵袭能力。

芪附龙葵汤联合FOLFOX4化疗方案对结直肠癌晚期患者miR-141-3p、miR-1229水平及免疫功能的影响

目的探讨芪附龙葵汤联合FOLFOX4化疗方案对结直肠癌晚期患者miR-141-3p、miR-1229水平及免疫功能的影响。方法以随机数字表法将90例结直肠癌晚期患者分为对照组与观察组,各45例。对照组采取FOLFOX4化疗方案,观察组在对照组基础上加服芪附龙葵汤。比较两组的治疗效果、miR-141-3p、miR-1229水平及免疫功能指标。结果观察组的治疗总有效率为84.44%,高于对照组的64.44%(P<0.05)。治疗后,两组的miR-141-3p、miR-1229水平均降低,CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均升高,且观察组优于对照组(P<0.05)。结论芪附龙葵汤联合FOLFOX4化疗方案治疗结直肠癌晚期患者的效果满意,可调节miR-141-3p、miR-1229水平,改善免疫功能。