miR-122a对大鼠脊髓缺血/再灌注损伤后血-脊髓屏障的影响

目的探讨miR-122a对脊髓缺血/再灌注损伤后血-脊髓屏障的影响。方法 SD大鼠36只,随机分为3组:假手术组(S组)、对照组(C组)、miR-122a反义寡核苷酸(miR-122a antagomir)组(M组)。S组开胸游离主动脉弓,但不阻断;C组和M组开胸阻断主动脉弓14 min造成脊髓缺血/再灌注损伤。M组和C组脊髓缺血/再灌注损伤后,鞘内注射miR-122a antagomir或空白对照,每日1次,共3次。Real-time PCR测定损伤节段脊髓组织的miR-122a表达,Western blot测定脊髓组织中紧密连接蛋白occludin表达,伊文思蓝测定血-脊髓屏障通透性,Basso Beattie Bresnahan评分法评价神经运动功能。结果与S组比较,C组miR-122a表达增加,occludin表达减少,血-脊髓屏障通透性增加,神经运动功能评分降低(P<0.05)。与C组比较,M组miR-122a表达降低,occludin表达增加,血-脊髓屏障通透性降低,神经运动功能评分增加(P<0.05)。结论 miR-122a参与调控脊髓缺血/再灌注损伤后occludin表达,影响血-脊髓屏障通透性。

miR-122a抑制人喉癌细胞株Hep2细胞增殖的研究

目的:研究miR-122a对人喉癌细胞株Hep2细胞增殖、细胞周期以及相关蛋白表达量的影响。方法:人喉癌细胞株Hep2细胞分别转染miR-122a寡聚核苷酸(A组)和miR-122a inhibitor(阻遏物)(B组),同时设立阻遏物阴性对照(inhibitor negative control,miR-NC inhibitor)(C组)和空白对照(D组)。用RT-PCR、MTT法、流式细胞仪和Western blot技术评价各组细胞增殖和细胞周期的生物学特征。结果:转染miR-122a寡聚核苷酸后,Hep2细胞中miR-122a表达显著增加。同D组相比,A组细胞增殖水平明显受到抑制,miR-122a寡聚核苷酸能够有效诱导Hep-2细胞周期阻滞在G1/G0期,A组细胞分裂周期蛋白42表达水平明显下调,细胞周期调控因子蛋白CDK4及细胞周期素D1蛋白表达水平明显降低。结论:miR-122a寡聚核苷酸能够显著抑制喉癌细胞Hep2的增殖,miR-122a是潜在的人喉癌细胞基因治疗的候选靶点。

实时荧光定量RT-PCR检测肝癌组织中miR-122a及miR-224的表达

目的运用实时荧光定量RT-PCR方法分析miR-122与miR-224两种miRNAs在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达,探讨以miRNAs为靶点在早期肝癌中的临床诊断意义。方法采用基于2(-△△CT)的实时荧光定量RT-PCR法对35例肝癌组织及癌旁组织的miR-122a及miR-224进行了定量分析,结果经由Northernblot验证。结果与正常组织相比,在所有的被检肝癌组织中,均发现了miR-122a有不同程度的表达下调(P<0.01),而上述肝癌组织中的miR-224的定量结果显示该miRNA表达显著增加(P<0.001)。结论HCC组织中存在上述两种miRNAs表达水平的改变,实时荧光定量RT-PCR法为早期、准确的在临床上检测肝组织癌变提供了新的思路。

miR-122a对肝癌细胞HepG2化疗药物敏感性的影响及其机制研究

目的:探究过表达miR-122a是否可提高肝癌细胞HepG2对化疗药物的敏感性,并阐明其提高化疗药物敏感性的部分机制。方法:构建过表达miR-122a的HepG2细胞系(miR-122a肿瘤细胞组),并与HepG2细胞(肿瘤细胞组)置于含不同浓度顺铂的培养液中,CKK-8法观察miR-122a上调对HepG2细胞存活率的影响,Annexin V-PE/7-AAD双染法观察miR-122a上调对HepG2细胞凋亡率的影响;Western blot检测miR-122a肿瘤细胞组和肿瘤细胞组中bcl-2和p53蛋白的表达水平。结果:低铂浓度顺铂条件下,miR-122a肿瘤细胞组细胞的存活率低于肿瘤细胞组细胞的存活率,miR-122a肿瘤细胞组24 h细胞的凋亡率高于肿瘤细胞组(P<0.05);Western blot法检测bcl-2和p53蛋白结果显示,在低浓度顺铂溶液中,miR-122a肿瘤细胞组bcl-2表达量低于肿瘤细胞组(P<0.05),miR-122a肿瘤细胞组p53表达量高于肿瘤细胞组(P<0.05)。结论:过表达miR-122a能上调p53蛋白表达、下调bcl-2蛋白表达,增加HepG2细胞对顺铂敏感性,为肝癌患者提供基因治疗和降低肿瘤细胞耐药提供了理论和实验基础。

miR-122-5p靶向调控人骨髓间充质干细胞诱导成骨分化的分子机制研究

目的:研究miR-122-5p对人骨髓间充质干细胞hBMSCs细胞成骨分化诱导的作用分子机制。方法:运用茜素红S、碱性磷酸酶活性ALP染色试剂盒检测hBMSCs成骨分化的钙结节与成骨活性;使用双荧光素酶报告基因实验验证miR-122-5p与BRCC3之间的靶向关系;运用qRT-PCR分别检测Runx2、Osterix、wnt3a、β-catenin、GSK3-β、miR-122-5以及BRCC3基因的表达情况;Western印迹检测β-catenin蛋白的表达量。结果:过表达miR-122-5p对人骨髓间充质干细胞hBMSCs细胞成骨分化诱导21天后的钙结节与干细胞成骨活性均有明显促进作用,对成骨分化中wnt/β-catenin信号通路主要转录因子Runx2、Os‐terix及wnt3a、β-catenin、GSK3-β主要基因均激活作用,过表达BRCC3对干细胞成骨分化中wnt/β-catenin信号通路主要转录因子Runx2、Osterix及wnt3a、β-catenin、GSK3-β主要基因有抑制作用;并且通过双荧光素酶报告基因与回复性实验确定miR122-5p与BRCC3之间的靶向关系,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:miR-122-5p靶向抑制BRCC3的表达诱导hBMSCs细胞通过wnt/β-catenin通路进行成骨分化诱导。

lncRNA SNHG7通过miR-122-5p/CCND1轴调节胃癌细胞的增殖、凋亡及肿瘤免疫逃逸

目的探讨长链非编码RNA小核仁RNA宿主基因(lncRNA SNHG)7通过miR-122-5p/细胞周期蛋白(CCN)D1轴对胃癌细胞的增殖、凋亡及肿瘤免疫逃逸的影响。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测体外培养的人胃癌细胞株NCI-N87、SNU-1、MKN-45和人胃癌组织源细胞、人胃黏膜上皮细胞中lncRNA SNHG7、miR-122-5p与CCND1表达。体外培养的人胃癌细胞MKN-45,随机分为对照组、lncRNA SNHG7 siRNA(si-lncRNA SNHG7)组、lncRNA SNHG7 siRNA阴性对照(si-NC)组、lncRNA SNHG7 siRNA(si-lncRNA SNHG7)+miR-122-5p inhibitor组,分组转染后,检测各组MKN-45细胞增殖、凋亡、活化CD8+T细胞杀伤率、miR-122-5p及CCND1、细胞增殖核抗原(PCNA)、凋亡蛋白〔B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(caspase)-3〕表达,并检测lncRNA SNHG7对MKN-45细胞miR-122-5p的靶向调节作用。结果与胃黏膜上皮细胞相比,胃癌组织源和MKN-45、SNU-1、NCI-N87细胞lncRNA SNHG7、CCND1 mRNA表达明显升高,miR-122-5p表达明显降低(P<0.05)。与对照组相比,si-lncRNA SNHG7组细胞活力、EdU阳性率、细胞CCND1、PCNA蛋白表达明显降低,凋亡率、活化CD8+T细胞对各组MKN-45细胞的杀伤率、miR-122-5p及Bax、caspase-3蛋白表达明显升高(均P<0.05);si-NC组细胞各指标均无显著差异(P>0.05);lncRNA SNHG7 siRNA和miR-122-5p inhibitor联合可逆转lncRNA SNHG7 siRNA对细胞各指标的作用。lncRNA SNHG7可靶向下调MKN-45细胞miR-122-5p表达。结论下调lncRNA SNHG7可通过上调miR-122-5p而降低CCND1表达,进而抑制胃癌细胞增殖,促进其凋亡,并减轻其免疫逃逸。

彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的诊断价值

目的 探讨彩色多普勒超声检查联合血清微小RNA(miRNA)-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的早期诊断价值以及与卵巢癌周围血管侵袭的相关性。方法 回顾性选取2019年5月至2021年12月沧州市中心医院收治的102例卵巢肿瘤患者为研究对象,所有患者均行彩色多普勒超声检查,采用实时定量聚合酶链反应测定血清中miR-122-5p和miR-106b的表达水平。以病理诊断结果作为金标准,将研究对象分为卵巢癌组(n=51)和良性卵巢肿瘤组(n=51);卵巢癌组又分为侵袭组(n=32)和非侵袭组(n=19)。比较卵巢癌组与良性卵巢肿瘤组的临床资料(年龄、体重指数、生育和绝经)、彩色多普勒超声图像特征(实性包块、伴腹水、乳头状结构≥4、肿瘤最大直径>10 cm)、彩色多普勒超声血流参数[搏动指数(PI)和血流阻力指数(RI)]、血清miR-122-5p、miR-106b水平。应用多因素Logistic回归模型探究相关变量对卵巢癌的独立预测作用。应用受试者工作特征(ROC)曲线评估彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平对卵巢癌的诊断价值。并比较侵袭组与非侵袭组彩色多普勒超声血流参数及血清miR-122-5p、miR-106b水平,采用Pearson相关性分析对彩色多普勒超声血流参数、miR-122-5p、miR-106b与卵巢癌周围血管侵袭的相关性进行分析。结果 卵巢癌组实性包块、伴腹水、乳头状结构≥4以及肿瘤最大直径>10 cm所占比例分别为80.39%、76.47%、74.51%、78.43%,均高于良性卵巢肿瘤组(9.80%、11.76%、29.41%、45.10%),PI、RI、血清miR-122-5p表达水平分别为0.94±0.27、0.48±0.11、1.01±0.27,均低于良性卵巢肿瘤组(1.47±0.32、0.71±0.19、1.42±0.30),miR-106b表达水平为4.57±1.13,高于良性卵巢肿瘤组(2.86±0.65),差异均有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归模型分析显示,PI、RI、miR-122-5p、miR-106b是卵巢癌的独立预测因子,OR值分别为1.080、1.116、1.689、1.301(P<0.05)。ROC曲线分析显示,PI、RI、miR-122-5p和miR-106b以及联合诊断卵巢癌的曲线下面积(AUC)分别为0.869、0.874、0.859、0.898、0.969,其联合诊断的价值高于单独应用。侵袭组PI、RI和血清miR-122-5p表达水平均低于非侵袭组,血清miR-106b表达水平高于非侵袭组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,彩色多普勒超声血流参数PI、RI及血清miR-122-5p水平与卵巢癌周围血管侵袭呈负相关(r=-0.743、-0.696、-0.822,P<0.05),血清miR-106b水平与卵巢癌周围血管侵袭呈正相关(r=0.863,P<0.05)。结论 彩色多普勒超声检查联合血清miR-122-5p、miR-106b水平可以提高卵巢癌的早期诊断价值,并且可根据这些指标评估卵巢癌周围血管侵袭程度,值得应用推广。

miR-122在PM_(2.5)诱导的肺损伤中的作用机制

目的探索PM_(2.5)引起的肺损伤的分子机制,以期为肺损伤的诊疗提供新的靶点。方法对PM_(2.5)诱导下肺损伤的多组学数据进行差异基因筛选及分子功能分析,确定肺损伤相关的分子靶标,构建PM_(2.5)诱导的SD大鼠肺损伤模型并进行初步验证。结果HE染色结果显示,暴露组的大鼠肺泡间隔增宽,肺泡腔增大,部分肺泡断裂、融合;Masson染色结果发现暴露组大鼠肺部呈现出少量纤维化。本次实验结果发现,在PM_(2.5)诱导条件下,miR-122表达显著上调,其靶基因胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1,IGF1R)表达显著下调。结论PM_(2.5)会导致大鼠的肺损伤,推测miR-122通过调控其靶基因IGF1R进而影响PI3K-AKT信号通路并引起细胞凋亡,加剧肺损伤。

特应性皮炎患儿外周血miR-122a和miR-146a水平与Th1/Th2/Th17免疫平衡的相关性分析

目的:探讨特应性皮炎(AD)患儿外周血微小核糖核酸(mi RNA)-122a和mi R-146a水平与辅助性T细胞(Th)1/Th2/Th17免疫平衡的相关性。方法:选取2020年5月~2023年5月石家庄市妇幼保健院皮肤科收治的AD患儿100例为AD组,根据特应性皮炎评分(SCORAD)分为轻度组31例、中度组41例、重度组28例,另选取同期100名体检健康儿童为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测外周血mi R-122a、mi R-146a水平,流式细胞术检测外周血Th1、Th2、Th17细胞比例,酶联免疫吸附法检测外周血Th1、Th2、Th17相关细胞因子[白细胞介素(IL)-2、干扰素-γ (IFN-γ)、IL-4、IL-13、IL-17、IL-22]水平,并计算Th1/Th2/Th17比值。采用Pearson/Spearman相关性分析AD患儿外周血mi R-122a、mi R-146a与Th1、Th2、Th17和相关细胞因子及Th1/Th2/Th17的相关性。结果:AD组外周血mi R-122a、mi R-146a、Th1、Th1/Th2/Th17、IL-2、IFN-γ水平低于对照组,Th2、Th17、IL-4、IL-13、IL-17、IL-22水平高于对照组(P均<0.05)。轻度组、中度组、重度组外周血mi R-122a、mi R-146a、Th1、Th1/Th2/Th17、IL-2、IFN-γ水平依次降低,Th2、Th17、IL-4、IL-13、IL-17、IL-22水平依次升高(P均<0.05)。Pearson/Spearman相关性分析显示,AD患儿外周血mi R-122a、mi R-146a与Th1、Th1/Th2/Th17、IL-2、IFN-γ水平呈正相关(r/rs分别为0.679、0.677、0.684、0.706、0.693、0.689、0.671、0.694,P均<0.001),与Th2、Th17、IL-4、IL-13、IL-17、IL-22呈负相关(r/rs分别为-0.690、-0.680、-0.681、-0.669、-0.675、-0.676、-0.676、-0.686、-0.682、-0.674、-0.680、-0.689,P均<0.001)。结论:AD患儿外周血mi R-122a、mi R-146a水平降低,与病情严重程度密切相关,可能通过调节Th1/Th2/Th17免疫平衡参与AD发生发展。

miR-122在脏器缺血再灌注损伤中作用机制的研究进展

心、脑、肝、肾等脏器缺血再灌注损伤(IRI)是常见的临床现象,IRI易导致脏器功能障碍,甚至导致患者死亡。miR-122是最早发现的miRNA之一,是非编码RNA,参与调控蛋白质编码基因的表达,广泛参与了多个脏器的IRI,在机体各器官IRI的发生、发展及预后中均发挥着重要作用。本文就miR-122在脏器IRI中的作用及其机制作一综述。

UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究

目的探讨尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)/miR-122-5p/pcDNA-胞质多聚腺苷酸元件结合蛋白1(CPEB1)轴促进肺腺癌的顺铂耐药发生机制研究。方法通过实时荧光反转录定量PCR(RT-qPCR)检测UCA1相关miRNA分子,并通过细胞转染获得miR-122-5p和CPEB1相关细胞株。通过双荧光素酶报告实验分别验证UCA1与miR-122-5p、CPEB1与miR-122-5p的结合。药物敏感性实验获得顺铂药物半抑制浓度(IC50);通过肿瘤基因组图谱(TCGA)数据库分析CPEB1在肺腺癌中的表达情况以及与免疫细胞功能的关系。结果miR-122-5p在肺腺癌细胞中的表达水平明显升高,并通过双荧光素酶报告实验以验证UCA1与miR-122-5p结合,构建miR-122-5p抑制物和模拟物转染肺腺癌细胞株,发现miR-122-5p抑制后,顺铂IC50浓度下降,而miR-122-5p过表达后,顺铂IC50浓度升高。CPEB1在肺腺癌细胞中的表达水平明显降低,双荧光素酶报告实验证实CPEB1是与miR-122-5p结合,CPEB1过表达后,顺铂IC50浓度减低;对TCGA数据库分析显示肺腺癌组织CPEB1 mRNA明显低于癌旁组织,ROC曲线分析显示CPEB1表达水平能较好地用于诊断肺腺癌(AUC=0.849),进一步分析显示CPEB1表达水平与肺腺癌患者的细胞功能如T细胞、B细胞、CD8+T细胞、自然杀伤细胞、巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞、肥大细胞存在密切关联。结论UCA1与miR-122-5p存在结合位点,后者可影响肺腺癌的顺铂耐药,并与靶基因CPEB1结合;肺腺癌中CPEB1呈低表达,降低肺腺癌顺铂药物的敏感性。UCA1/miR-122-5p/CPEB1轴有望为干预肺腺癌顺铂耐药的靶点。

血清HBV-DNA载量与老年慢性乙肝患者肝功能指标及血清miR-21、miR-122水平的关联性研究

目的:探究血清乙型肝炎病毒脱氧核糖酸(HBV-DNA)载量与老年慢性乙肝(CHB)患者肝功能指标及血清miR-21、miR-122的关联性。方法:选取某院2021年1月—2023年6月收治的120例老年CHB患者为研究对象,将其按照HBV-DNA载量分为低载量组(<105 copies/mL)(n=48)、中载量组(105~107 copies/mL)(n=42)及高载量组(>107 copies/mL)(n=30)。比较3组一般资料、血清肝功能指标[丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)]及血清miR-21、miR-122水平。采用Pearson相关分析法分析老年CHB患者血清HBV-DNA载量与肝功能指标及血清miR-21、miR-122水平的相关性。结果:3组间性别、年龄、BMI、病程、吸烟史、饮酒史、高血压病史、糖尿病病史、冠心病病史等一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。3组间血清ALT、AST、GGT、ALP及miR-21水平呈现低载量组﹤中载量组﹤高载量组,血清miR-122水平呈现低载量组>中载量组>高载量组,差异均有统计学意义(P<0.05)。相关分析显示,老年CHB患者血清HBV-DNA载量与血清ALT、AST、GGT、ALP及miR-21水平呈正相关,与血清miR-122水平呈负相关(P均<0.001)。结论:血清HBV-DNA载量与老年CHB患者血清ALT、AST、GGT、ALP及miR-21水平均呈正相关,与血清miR-122水平呈负相关,检测血清miR-21、miR-122水平可为老年CHB的诊断及病情评估提供参考依据。

不同中医证型胃癌患者外周血miR-21、miR-122水平变化及临床意义

目的:观察探讨不同中医证型胃癌(GC)患者外周血miR-21、miR-122水平变化及临床意义。方法:选取2022年1月~2023年1月我院收治的100例GC患者为研究对象,根据其临床表现和体征进行中医证型分型,比较不同中医证型GC患者外周血miR-21、miR-122水平、毒副反应发生率及化疗半年后的存活情况。结果:100例GC患者中47例为脾胃湿热证,17例为脾胃虚寒证,15例为肝胃不和证,13例为瘀血内阻证,8例为痰浊凝滞证。不同中医证型GC患者外周血miR-21水平为脾胃湿热证>脾胃虚寒证>肝胃不和证>瘀血内阻证>痰浊凝滞证,miR-122水平为脾胃湿热证<脾胃虚寒证<肝胃不和证<瘀血内阻证<痰浊凝滞证,且两组间比较差异均有统计学意义(P<0.05)。脾胃湿热证患者胃肠道反应和骨髓抑制发生率明显高于痰浊凝滞证和瘀血内阻证(P<0.05),神经系统反应及肾损害发生率明显高于瘀血内阻证(P<0.05);脾胃虚寒证患者骨髓抑制发生率明显高于痰浊凝滞证和瘀血内阻证(P<0.05),神经系统反应发生率明显高于瘀血内阻证(P<0.05);肝胃不和证患者神经系统反应发生率明显高于瘀血内阻证(P<0.05)。不同中医证型GC患者化疗后随访6个月的生存率为脾胃湿热证<脾胃虚寒证<肝胃不和证<瘀血内阻证<痰浊凝滞证,但组间比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:不同中医证型GC患者外周血miR-21、miR-122表达存在差异,检测二者水平对评估患者病情进展及预后有一定价值。

miR-122-5p通过靶向Circ_MTM1在HBV相关肝纤维化中的分子机制研究

目的:研究微小核糖核酸microRNA-122-5p (miR-122-5p)对HBV感染相关肝纤维化的作用及分子机制。方法:分别用采用HBsAg、HBeAg酶联免疫吸附剂测定(ELISA)试剂盒和实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测HBV表面抗原(HBsAg)、抗原(HBeAg)水平以及HBV DNA、HBV共价闭合环状DNA (cccDNA)水平,并采用蛋白质印迹法(Western blot)检测相应蛋白水平。RT-qPCR检测人肝星状细胞(LX-2细胞)和HBV相关肝纤维化组织细胞中Circ_MTM1、miR-122-5p的表达情况。应用生物信息学软件StarBaseV3.0预测miR-122-5p的可能靶基因,并应用双荧光素酶检测方法判定miR-122-5p对其靶基因Circ_MTM1表达的调节作用。结果:miR-122-5p在HBV相关性肝纤维化组织和细胞中低表达,而Circ_MTM1在HBV相关性肝纤维化组织和细胞中高表达。miR-122-5p靶向下调Circ_MTM1的表达,通过下调Circ_MTM1可抑制HBV相关肝纤维化的进程。结论:miR-122-5p与Circ_MTM1在HBV相关肝纤维化中存在靶向关系,Circ_MTM1通过调控肝纤维化相关蛋白的水平在HBV相关肝纤维化进程中起到启动子作用。

miR-101、miR-122在妊娠期糖尿病患者血清和胎盘组织中表达及意义分析

分析妊娠期糖尿病血清、胎盘miR-101、miR-122表达特点与指导意义。方法:选取2022年10月~2023年09月孕产妇70例,其中妊娠期糖尿病35例设为A组,血糖正常孕妇35例设为B组,分析孕妇血清和胎盘miR-101与miR-122表达对孕妇血糖、胰岛素情况的影响。结果:A组血清、胎盘miR-101活性高于B组(P<0.05);A组血清、胎盘miR-122显著高表达(P<0.05);FBG与血清miR-101正相关,FIN、HOMA-IS与血清miR-101负相关(P<0.05);FBG、HOMA-IR与miR-122正相关,FIN与血清miR-101负相关(P<0.05)。结论:妊娠期糖尿病患者常见miR-101、miR-122激活,可能影响机体胰岛素分泌,根据miR-101、miR-122变化实施针对性管理,以促进疾病防控。

miR-122在前列腺癌中的表达水平与临床病理特征的相关性

目的探讨miR-122在前列腺癌中的表达水平与临床病理特征的相关性。方法检测168例进行前列腺检查的患者外周血miR-122与PCA3的表达水平,调查所有患者的一般资料、临床病理资料并进行相关性分析。结果病理诊断为前列腺癌68例(前列腺癌组,Ⅰ级38例、Ⅱ级22例、Ⅲ级8例),前列腺增生100例(前列腺增生组)。前列腺癌组的miR-122相对表达水平高于前列腺增生组(P<0.05),PCA3含量也高于前列腺增生组(P<0.05),且在不同病理分级患者中均有差异(P<0.05)。前列腺癌组的Pearson结果显示,临床分级、PCA3含量与miR-122相对表达水平存在正相关性(P<0.05);COX结果显示,临床分级、PCA3含量均为影响外周血miR-122相对表达水平的重要因素(P<0.05)。结论miR-122在前列腺癌中呈现高表达水平,与患者的病理分级、外周血PCA3含量存在相关性,可为前列腺癌的临床诊治提供较可靠的客观学依据。

miR-122靶向调控RhoA基因影响乙型肝炎病毒复制与表达的机制研究

目的探讨miR-122通过调控小G蛋白超家族成员RhoA基因对隐匿性乙型肝炎病毒(HBV)复制与表达的影响及其作用机制。方法实时荧光定量PCR测定HBV(+)与HBV(-)的肝癌患者组织、HepG2细胞与HepG2.2.15细胞中miR-122表达差异,实时荧光定量PCR和Western Blot检测HBV(+)与HBV(-)的肝癌患者组织、HepG2细胞与HepG2.2.15细胞中RhoA mRNA和RhoA蛋白的表达差异;按照实验分组将pEGFP-C1-miR-122与pcDNA3.0-V14RhoA转染至HepG2.2.15细胞,实时荧光定量PCR测定miR-122与RhoA mRNA表达,Western Blot检测RhoA蛋白表达;生物信息学方法预测miR-122与RhoA基因的靶向结合位点,构建野生型RhoA 3′非翻译区(3′UTR)和突变型RhoA 3′UTR双荧光素酶表达载体,检测细胞荧光素酶活性变化;酶联免疫吸附试验测定细胞培养上清液中乙型肝炎表面抗原(HBsAg)与乙型肝炎e抗原(HBeAg)水平,实时荧光定量PCR检测细胞培养上清液中HBV DNA水平,Western Blot检测细胞内Rho相关蛋白激酶(ROCK)-1与ROCK-2相对表达水平。结果相较于HBV(-)肝癌患者组织,HBV(+)肝癌患者组织中miR-122表达下调,RhoA mRNA和RhoA蛋白相对表达水平上调(P<0.05);与HepG2细胞比较,HepG2.2.15细胞中miR-122表达也下调,RhoA mRNA和RhoA蛋白相对表达水平上调(P<0.05)。经预测发现RhoA mRNA 3′UTR与miR-122在特定区域存在碱基互补现象,miR-122 mimic和RhoA 3′UTR WT重组质粒共转染的细胞中相对荧光素酶活性降低(P<0.05)。此外,过表达miR-122的HepG2.2.15细胞中RhoA mRNA和RhoA蛋白相对表达水平下调(P<0.05)。与空白组比较,miR-122组HepG2.2.15细胞培养上清液HBsAg与HBeAg水平均降低,HBV DNA表达降低,ROCK-1与ROCK-2表达均上调(P<0.05);而V14RhoA组HBsAg与HBeAg水平则高于空白组,HBV DNA表达升高,ROCK-1与ROCK-2表达均上调(P<0.05)。结论miRNA-122可通过下调RhoA基因表达抑制HBV的复制和表达,其机制可能与抑制Rho/ROCK信号通路激活有关。

白花香莲解毒颗粒治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的临床疗效及对血浆外泌体miR-122表达的影响

目的:观察壮药白花香莲解毒颗粒治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎的临床疗效及对血浆外泌体miR-122表达的影响。方法:将120例HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者随机分为两组,对照组60例给予恩替卡韦治疗,观察组60例给予恩替卡韦联合白花香莲解毒颗粒治疗,两组均治疗48周,同时选取健康体检者30例作为健康组。观察治疗前后两组临床疗效、乙肝两对半定量、血浆外泌体miR-122、乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)的水平、肝功能及不良反应事件发生情况。结果:治疗48周,观察组总有效率[90%(54/60)]明显高于对照组[71.67%(43/60)](P<0.05)。治疗12、24、48周时,两组HBeAg滴度、血清丙氨酸氨基转移酶水平逐渐下降,且观察组显著低于对照组(P<0.05);观察组血浆中miR-122相对表达量高于治疗前(P<0.05),对照组血浆中miR-122相对表达量与治疗前比较,差异无统计学意义(P>0.05)。治疗12、24、48周时,两组血清HBV-DNA水平逐渐下降(P<0.05);观察组治疗12、24周时HBV-DNA水平低于对照组(P<0.05),但治疗48周后,两组HBV-DNA水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:白花香莲解毒颗粒能够抑制HBV-DNA的复制及HBeAg分泌,改善肝功能,其疗效机制可能与调节血浆外泌体miR-122的表达有关。

血清miR-122与STEMI患者动脉粥样硬化疾病负担和长期临床结局的关系

目的 探讨ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者血清微小RNA(miRNA)-122与动脉粥样硬化疾病负担及长期临床结局的相关性。方法 前瞻性纳入2014年9月至2016年5月104例在该院接受经皮冠状动脉介入治疗的STEMI患者,使用SYNTAX评分和Gensini评分评估STEMI患者动脉粥样硬化疾病负担。同期纳入100例无已知心血管疾病的健康志愿者作为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测血清miR-122表达水平。结果 STEMI组患者血清miR-122水平显著高于对照组(Z=-8.064,P<0.001)。血清miR-122水平≥2.25与多支血管疾病发生率升高有关(OR=2.04,95%CI:1.09~3.83,P=0.031)。STEMI患者血清miR-122水平与SYNTAX评分、Gensini评分呈正相关(r=0.447、0.402,均P<0.001)。多元线性回归分析显示,血清miR-122水平是影响SYNTAX评分(t=5.228,P<0.001)和Gensini评分(t=2.955,P=0.009)的独立临床因素。随访期间,有26例(25.0%)患者出现了新的临床事件,发生不良临床事件患者的血清miR-122水平高于未发生不良事件患者(Z=-2.837,P=0.005)。受试者工作特征(ROC)曲线分析显示,血清miR-122水平预测患者不良临床结局的曲线下面积为0.755(95%CI:0.664~0.845)。多因素Logistic回归分析显示,血清miR-122水平≥2.25是STEMI患者不良临床结局的独立危险因素(P<0.05)。结论 STEMI患者血清miR-122水平升高与更高的动脉粥样硬化疾病负担及不良临床结局有关。

miR-122-5p靶向KDM2A对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

目的探讨miR-122-5p靶向组蛋白去甲基化酶2A(histone demethylation protein 2A,KDM2A)对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响。方法体外培养人骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC),利用qRT-PCR和Western blot方法检测miR-122-5p和KDM2A对BMSC成骨相关指标(OPN、OCN和RUNX2)表达情况的影响;茜素红染色和碱性磷酸酶染色检测miR-122-5p和KDM2A对BMSC钙沉积和碱性磷酸酶活性的影响;双荧光素酶实验验证miR-122-5p和KDM2A之间的结合关系;miR-122-5p inhibitor和si-KDM2A共转染研究两者对BMSC成骨分化的影响。结果miR-122-5p mimic和si-KDM2A能够促进BMSC成骨相关基因的表达水平、钙结节沉积及碱性磷酸酶活性,miR-122-5p和KDM2A两者之间存在靶向结合关系,且miR-122-5p能够靶向抑制KDM2A表达,进而促进BMSC成骨相关基因的表达水平、钙结节沉积及碱性磷酸酶活性。结论miR-122-5p靶向抑制KDM2A表达,进而促进BMSC成骨分化。